ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE (ESPECTROS DE ABSORCIÓN)

LABORATORIO N° 6

BAÑOS FIGUEROA JOSÉ ARMANDO

CASTAÑO RIBON GHISSELLE DE JESÚS
CASTRO BLANCHAR JUAN DAVID
DAZA CASTAÑEDA YADIRA JUDITH
GARCÍA POLO LUCELIS
GONZALEZ RAMIREZ IVAN DAVID
GUERRA MARTINEZ DANIEL ANDRES

DOCENTE:

ING. EINER GUTIERREZ

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

FACULTAD DE INGENIERIAS Y TECNOLOGICAS

DEPARTAMENTO INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

VALLEDUPAR – CESAR

2019

INTRODUCCION
La espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más usadas para la
detección de moléculas. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a
distintas moléculas. También es usada con moléculas disueltas en un solvente
transparente. La absorbancia de un soluto depende de la concentración y por
consiguiente la espectrofotometría es ideal para hacer mediciones cuantitativas. La
longitud y la fuerza de absorbancia de una molécula no sólo dependen de la naturaleza
química, si no del ambiente molecular en donde se encuentra el conjunto de átomos de
una molécula responsable de su color. Es esta práctica de laboratorio se determinó la
longitud de onda y la absorbancia en distintas soluciones como lo fueron gaseosa sabor
uva diluida con agua, gaseosa sabor Kola diluida con agua y la mezcla de la gaseosa
sabor uva más la gaseosa de sabor Kola.

OBJETIVOS
 Examinar las curvas espectrales de absorción de algunas especies
cromóforas.
 Obtener la longitud de onda de máxima absorción de cada especie.
 Comprobar la propiedad de la sumatoria de las absorbancias
individuales de los componentes de una solución.

MARCO TEÓRICO
Cuando las moléculas interactúan con la energía radiante en la región visible y
ultravioleta, algunos fotones con ciertas frecuencias de radiación pueden eliminarse por
la transferencia de energía electromagnética a las mismas, ocurriendo una excitación de
los electrones enlazantes. Para que se produzca la absorción, la energía de los fotones
excitadores debe coincidir exactamente con la diferencia de energía entre el estado
fundamental y uno de los estados excitados de las especies absorbentes. Al representar
gráficamente la absorbancia de una especie en función de la longitud de onda o de la
frecuencia de la radiación, se puede visualizar su espectro de absorción, el cual se puede
correlacionar con los tipos de enlace que existen en la especie de estudio. Por este
motivo el espectro de absorción es una propiedad altamente específica de la estructura
molecular del material absorbente. Desafortunadamente, ciertos factores influyen en los
espectros obtenidos: Solvente, pH, etc. Cuando hay más de una especie absorbente en la
solución, cada especie absorbe en forma independiente y, la absorbancia total es la suma
de las absorbancias individuales:
Atotal = A1 + A2 = 1bC1 + 2bC2 Donde:
A= Absorbancia = Absortividad Molar
b = Trayectoria de la radiación
C = molaridad de las especies.
espectrofotómetro: Es un instrumento utilizado en análisis químico que sirve para
medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma
magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o
reacciones químicas que se miden en una muestra. También se utiliza en laboratorios de
química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, que son de absorción atómica, de absorción
molecular (que comúnmente se conoce como espectrofotómetro UV-VIS), y no debe ser
confundido con un espectrómetro de masa

MATERIALES Y REACTIVOS
v Colorímetro o espectrofotómetro de absorción molecular
v Gaseosa sabor uva
v Gaseosa sabor kola
v Cinta de enmascarar
v Beaker (2)
v Pipeta (1)
v Tubos de ensayo (4)
v H2O
 PROCEDIMIENTO

Ajuste de las condiciones de trabajo:

Conectamos el instrumento a 115 voltios y lo encendimos. Dejamos calentar el
instrumento durante 10 minutos aproximadamente. Con el portacelda vacío, giramos el
botón de ajuste al 0 % T hasta que la escala señalo ese valor. Colocamos en el
portacelda una celda con el tubo de ensayo que contenía el agua utilizado como el
blanco
Preparación de soluciones:
Agregamos en un tubo de ensayo 1ml de gaseosa sabor uva, mas 4ml de agua; en otro
ensayo 1ml de gaseosa sabor kola más 4ml de agua, y por ultimo 1ml da gaseosa sabor
uva más 1ml de gaseosa sabor kola más 3ml de agua. Cada muestra se tituló con una
flecha hacia abajo para así no tener interferencias en los datos (Se tuvo en cuenta las
medidas de los tubos de ensayo)
Toma de valores:
Colocamos la prueba en blanco en el portacelda y la longitud de ondas la colocamos
380nm y configuramos el blanco ajustando al 0%, después colocamos las otras
soluciones en el portacelda una por una y tomando nota de los valores, esto se hizo
aumentando la longitud de 10 en 10 nm hasta llegar a 73nm. Cabe señalar que cada vez
que se aumentaba en el rango de 10 en 10 se tenía que volver a tener en cuenta la prueba
blanco
 TABLA DE DATOS

Espectro Absorbancia
visible
Longitud Blanco Muestra Muestra Muestra
de onda λ (agua) 1= 2= 3=
(nm) “Gaseosa “Gaseosa “Mezcla”
uva” cola”
380 0.000 0,078 0,158 0,174
390 0.001 0,088 0,169 0,172
400 0.002 0,102 0,168 0,182
410 0.003 0,113 0,159 0,173
420 0.004 0,114 0,159 0,181
430 0.005 0,102 0,184 0,157
440 0.006 0,108 0,161 0,164
450 0.007 0,142 0,17 0,23
460 0.008 0,176 0,186 0,24
470 0.009 0,191 0,219 0,313
480 0.010 0,248 0,246 0,36
490 0.011 0,291 0,278 0,432
500 0.012 0,287 0,295 0,474
510 0.000 0,314 0,323 0,526
520 0.000 0,319 0,276 0,524
530 0.000 0,316 0,248 0,51
540 0.000 0,239 0,293 0,47
550 0.000 0,279 0,231 0,422
560 0.000 0,242 0,186 0,359
570 0.000 0,217 0,157 0,288
580 0.000 0,142 0,104 0,174
590 0.000 0,109 0,073 0,087
600 0.000 0,101 0,029 0,058
610 0.000 0,103 0,051 0,063
620 0.000 0,157 0,034 0,083
630 0.000 0,209 0,046 0,111
640 0.000 0,177 0,031 0,093
650 0.000 0,157 0,029 0,062
660 0.000 0,131 0,025 0,035
670 0.000 0,11 0,02 0,002
680 0.000 0,108 0,028 0,006
690 0.000 0,126 0,044 0,015
700 0.000 0,088 0,023 0,016
710 0.000 0,1 0,014 0,02
720 0.000 0,116 0,047 0,005
730 0.000 0,098 0,001 0,016
SUMATORIA 5,998 4,865 7,197
 CÁLCULOS Y RESULTADOS

1. Sumar las absorbancias individuales de las dos especies en todas las longitudes de
ondas leídas.
Mezcla teórica= suma de las absorbancias de la gaseosa uva + suma de las absorbancias de
la gaseosa kola
Absorbancia = 5,998 + 4,865 = 10,863

2.
DIAMETRO DE LOS TUBOS:
Diámetro tubo de muestra blanco: 1.030 cm
Diámetro tubo de la mezcla: 1,075 cm
Diámetro tubo de la gaseosa kola diluida: 1,030 cm
Diámetro tubo de la gaseosa uva diluida: 1,025 cm

absorbancia
mezcla practica corregida= ∗diametro tubo de muestra blanco
diametro tubo de la mezcla

GASEOSA SABOR UVA

0.25

0.2

0.15
ABSORBANCIA

0.1

0.05

0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72

LONGITUD DE ONDA (nm)

 GASEOSA SABOR KOLA
0.6
0.5
0.4
ABSORBANCIA

0.3
0.2
0.1
0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72

LONGITUD DE ONDA (nm)

MEZCLA TEORICA
0.6
0.5
0.4
ABSORBANCIA

0.3
0.2
0.1
0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72

LONGITUD DE ONDA (nm)

LONGITUD DE ONDA MEZCLA PRACTICA MEZCLA PRACTICA

CORREGIDA
380 0,174 0,166
390 0,172 0,164
400 0,182 0,174
410 0,173 0,165
420 0,181 0,173
430 0,157 0,150
440 0,164 0,157
450 0,230 0,220
460 0,240 0,229
470 0,313 0,299
480 0,360 0,344
490 0,432 0,413
500 0,474 0,454
510 0,526 0,503
520 0,524 0,502
530 0,510 0,488
540 0,470 0,450
550 0,422 0,404
560 0,359 0,343
570 0,288 0,275
580 0,174 0,166
590 0,087 0,083
600 0,058 0,055
610 0,063 0,060
620 0,083 0,079
630 0,111 0,106
640 0,093 0,089
650 0,062 0,059
660 0,035 0,033
670 0,002 0,001
680 0,006 0,005
690 0,015 0,014
700 0,016 0,015
710 0,020 0,019
720 0,005 0,004
730 0,016 0,015

MEZCLA PRACTICA CORREGIDA

0.6

0.5

0.4
ABSORBANCIA

0.3

0.2

0.1

0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72

LONGITUD DE ONDA (nm)