Inhibición enzimática

Inhibidor
Efector que hace disminuir la actividad enzimática, a través de
interacciones con el centro activo u otros centros específicos
(alostéricos).

Esta definición excluye todos aquellos agentes que inactivan a

la enzima a través de desnaturalización de la molécula enzimática

De esta forma, habrá dos tipos de inhibidores:

I. Isostéricos: ejercen su acción sobre el centro activo

II. Alostéricos: ejercen su acción sobre otra parte de la
molécula, causando un cambio conformacional con
repercusión negativa en la actividad enzimática.
Los inhibidores isostéricos pueden ser de dos tipos:

1. Inhibidor reversible: establece un equilibrio con la enzima libre,

con el complejo enzima-substrato o con ambos:

E+I EI

ES + I ESI

2. Inhibidor irreversible: modifica químicamente a la enzima:

E+I E’
Inhibición reversible

(a) El inhibidor se fija al centro activo de la enzima libre,

impidiendo la fijación del substrato: Inhibición Competitiva

(b) El inhibidor se fija a la enzima independientemente de que lo

haga o no el substrato; el inhibidor, por tanto, no impide la
fijación del substrato a la enzima, pero sí impide la acción
catalítica: Inhibición No Competitiva

(c) El inhibidor se fija únicamente al complejo enzima-substrato

una vez formado, impidiendo la acción catalítica; este tipo
se conoce como Inhibición Anticompetitiva
 Inhibición Competitiva
Características:
- Las fijaciones de substrato e inhibidor son mutuamente exclusivas
- A muy altas concentraciones de substrato desaparece la inhibición
- Por lo general, el inhibidor competitivo es un análogo químico del
substrato.
- El inhibidor es tan específico como el substrato

S
E ES E+P
I
Se define una constante de
equilibrio de disociación del [E] [I]
inhibidor: Ki =
EI [EI]
Inhibición competitiva
 Representación directa
Inhibición competitiva

120
v
100

80

60 Vmáx [S]
vo =
40
Km + [S]

20

s
0
0 20 40 60 80 100 120
 Representación directa
Inhibición competitiva

120
v
100

80

60

40

20

s
0
0 20 40 60 80 100 120

Vmáx [S] = 1+ [I]

vo = Ki
Km + [S]

[E] [I]
KI =
[EI]
Inhibición competitiva - Representación recíproca doble

0.07
1/v
0.06

0.05

1/Vmax
0.04

0.03

-1/Km
0.02

0.01

1/s
0.00
-0.3 -0.2 -0.1 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

-1/(Km(1 + i/Ki))
Inhibición competitiva. Cálculo de parámetros
cinéticos mediante la representación de dobles
inversos.
Por tanto, en la inhibición competitiva,

1. El efecto cinético del inhibidor es el aumento aparente de la

Km, que aparece multiplicada por el factor (1 + i/Ki)

2. La Vmax no aparece modificada; para concentraciones muy

altas del substrato, v = Vmax, igual que en ausencia de inhibidor

3. Cuanto más pequeño sea el valor de Ki mayor será la potencia

del inhibidor competitivo.
 Succinato deshidrogenasa
Inhibidores
COO- FAD FADH2 COO- competitivos
CH2 CH COO-
CH2 SDH CH CH2
COO- E
COO- COO-
Succinato Fumarato
Malonato
NH

+
H 3N
C
NH COO-
COO -
CH 2
CH 2
CH C O
COO -
+
H 3N
CH2
CH COO-
Oxalacetato
 COO-
CH2 Inhibidores competitivos
como ánalogos estructurales
CH2 del substrato
COO-

Succinato

COO-
C O
CH2
COO-
Oxalacetato
 O O
H 2N C H2N S NH2
O- O

4-aminobenceno
4-aminobenzoato
sulfonamida
 H2N N N
H
N N
N CO OH
OH CH2
CH2 Ác. Fólico
C NH C H
O COO-
n
H2N N N
CH3
N N
N CO OH
CH2
CH2 Methotrexate
C NH C H
O COO-
n
It is used in treatment of cancer, autoimmune diseases, ectopic pregnancy, and for the induction
of medical abortions. It acts by inhibiting the metabolism of folic acid
 O
Análogos de base
CH3
HN

O NH Timina

O
Br
HN
5-Bromouracilo
O NH
 Atenolol (Tenormín)

Este inhibidor bloquea las acciones de las catecolaminas (son

neurotransmisores que se vierten al torrente sanguíneo). Se usa en el
tratamiento de enfermedades cardiovasculares como hipertensión,
enfermedad coronaria, arritmia, e infarto de miocardio después del
evento agudo
 Sildenafilo

El sildenafilo es un potente y selectivo inhibidor específico de la fosfodiesterasa tipo 5 (PDE5)

que es responsable de la degradación del cGMP en el cuerpo cavernoso. La estructura
molecular del sildenafilo es similar a la del cGMP compitiendo por la unión de éste a PDE5.

El resultado es que el cGMP permanece más tiempo en el interior del pene, produciéndose
erecciones más potentes y mantenidas
 Inhibición No Competitiva
El inhibidor se fija indistintamente a la enzima libre E y al complejo
enzima-substrato ES; ni el complejo EI ni el complejo ESI son
productivos.

S
E ES E+P
I I
S
EI ESI
 Inhibición no competitiva. Cálculo de
parámetros cinéticos mediante la representación
de dobles inversos.
Inhibici ón no competitiva

1/V Con I

1/V ’max Sin I

1/ V max

- 1/Km 0 1/[S ]

In the special case where α = α’, noncompetitive inhibition occurs, in which case V{max} is
reduced but Km is unaffected. This is very unusual in practice
 Vmáx [S] [E] [I]
vo = KI =
 Km + `[S] [EI]

= 1+ [I] ` = 1+ [I] [ES] [I]

K`I =
KI K`I [ESI]
Inhibición Mixta
 Inhibición Anticompetitiva

El inhibidor sólo puede fijarse al complejo ES;

el complejo ESI no es productivo

S
E ES E+P
I

ESI
Inhibición acompetitiva. Cálculo de parámetros
cinéticos mediante la representación de dobles
inversos.

Vmáx [S]
vo =
Km + [S]

` = 1+ [I]
Ki

[ES] [I]
K`I =
[ESI]
Un paso más allá en el desarrollo de inhibidores potentes
es el concepto de Análogo de Estado de Transición (AET)

- El inhibidor no es estrictamente análogo del substrato,

sino del Estado de Transición de la reacción.

- La afinidad de las enzimas por los AET es enorme, del

orden nM o pM, con lo que la fijación es tan fuerte que
puede considerarse irreversible
 O H3C
C N+ CH3 Susbtrato
O2N O O
CH3

-
O O- H3C
C N+ CH3 Estado de transición
O2N O O
CH3

O H3C
O2N OH + C N+ CH3
HO O Productos
CH3

-
O O- H3C
P N+ CH3
O2N O O Análogo de
CH3 estado de transición
 Aspartato
COO- transcarbamilasa
H2C NH2
NH O-
-
OOC
O Estado de
O P O- transición
O-

COO-
H2C O
NH
-
OOC CH2 Análogo de
O P O- estado de transición:
O- N-fosfonoacetil L-aspartato
(PALA)
 Angiotensinógeno

Hipotensión,
hipovolemia, Renina
ortostatismo

Angiotensina I
DRVYIHPFHL

Enzima convertidora
HL
de Angiotensina, ECA

Angiotensina II
DRVYIHPF

Aumento de la presión arterial

 Análogos de Estado de Transición: Captopril
R
CH COO-
HN
C O + CH COO-
N
R' C H C O +
NH H 3C C H
HO C H C
-
O C H
-
S
Zn2+
Zn2+
Estado de transición Captopril
de la ECA

El captopril es un inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina (ECA) que actúa

bloqueando la proteína peptidasa del centro activo de la misma
 Inhibición Irreversible
- Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo
químico de la enzima, modificándola covalentemente

- Su acción no se describe por una constante de equilibrio Ki,

sino por una constante de velocidad ki:

E+I E’

- A diferencia de la inhibición reversible, el efecto de los

inhibidores irreversibles depende del tiempo de actuación
del inhibidor.

- Los inhibidores irreversibles son, por lo general, altamente

tóxicos.
 Ácido Acetilsalicílico

Este inhibidor interfiere con la síntesis de las prostaglandinas inhibiendo

de forma irreversible la ciclooxigenasa
Algunos tipos de inhibidores irreversibles

1. Reactivos de grupos -SH

2. Organofosfóricos

3. Metales pesados
Reactivos de grupos -SH, 1

(a) Agentes alquilantes

Yodoacetato ICH2 COO- IH

E SH E S CH2 COO-

(b) Compuestos insaturados O

E S
E SH N CH2 CH3
O
O
N CH2 CH3
N-Etil maleimida (NEM)
O
Reactivos de grupos -SH, 2
(c) Formadores de mercáptidos

HOHg COO- p-Hidroximercuribenzoato

E SH E S Hg COO-

(d) Oxidantes

Promueven la oxidación de dos tioles a un disulfuro

 Organofosfóricos

H3C CH3
Ser CH CH2 OH CH
Ser CH CH2 O P O
H3C CH3 CH
CH H3C CH3
F P O
CH
DFP:
H3C CH3
diisopropil - Actúan sobre enzimas serínicas
fluorofosfato - Únicamente sobre la Ser activa
- Insecticidas: Parathion, Malathion
- Inhibidores de la Acetilcolinesterasa
- Neurogases
Ligandos de coordinación de metales

Es el caso del ion cianuro, CN-

Se fija con gran afinidad a la sexta posición de coordinación

del Fe hemínico, impidiendo toda modificación posterior.

Por ello actúa sobre sistemas de Fe hemínico con la sexta

posición de coordinación libre, como la citocromo oxidasa,
de lo que deriva su elevadísima toxicidad
 Orlistat también conocido como tetrahidrolipstatin
(1-(3-hexil-4-oxo-oxetano-2-yl)tridecan-2-yl 2-formilamino -4-metil-pentanoato)

potente inhibidor irreversible de la lipasa pancreática.

Según el ISP el orlistat se considera un medicamento con un perfil de seguridad
favorable. Incluso, está indicado para ser usado en forma prolongada, por uno o dos
años.

En junio de 2010, el ISP emitió una alerta de seguridad, luego que la FDA reportara 13
casos de personas con daños severos en el hígado, de un total de 40 millones de
pacientes. Aunque la cifra no es alarmante, el ISP de todos modos decidió advertirlo en
los folletos del fármaco.

Lo más delicado, finalmente, es que el uso prolongado del orlistat sin supervisión
médica acarrea problemas nutricionales a largo plazo. En primer lugar, el orlistat no
discrimina: barre con todas las grasas por igual. Es decir, junto con las nefastas
poliinsaturadas, también vuelan las beneficiosas monoinsaturadas (omega 3, omega 6).

Pero el principal riesgo tiene que ver con que se puede generar un déficit de vitaminas
liposolubles, como la E, K y D, que el organismo absorbe a través de las grasas que
comemos. “Con el orlistat, al eliminarse parte de la grasa que ingerimos, también se
pierden vitaminas. Un déficit de vitamina E, hace que las células se oxiden; sin
vitamina D, se corre el riesgo de osteoporosis y sin la K, se interrumpe el proceso de
coagulación sanguínea.
 Substratos suicidas
(Inhibidores activados enzimáticamente)

- Se trata de moléculas que se unen al centro activo de manera

específica, igual que el substrato o los inhibidores
competitivos

- Una vez unidos al centro activo, la enzima transforma la

molécula en una especie química muy reactiva que modifica
covalentemente a la enzima, inactivándola

- Tienen por tanto (a) la especificidad del inhibidor

competitivo
y (b) la potencia de los inhibidores irreversibles
Modo de acción de los inhibidores suicidas

1 2 3
E+I EI EI* E’ + I*

1. El inhibidor se fija a la enzima igual que el substrato o un

inhibidor competitivo convencional

2. La acción catalítica de la enzima convierte al inhibidor I

en una especie altamente reactiva I*

3. I* modifica covalentemente a la enzima, inactivándola

de forma definitiva al igual que un inhibidor irreversible.
 Ejemplos de inhibidores suicidas

- Sistema de la -lactamasa bacteriana

La utilización masiva de antibióticos -lactámicos (penicilinas, sus

derivados semisintéticos y cefalosporinas) ha conducido a la
aparición de resistencias a los mismos.

Los microorganismos resistentes a estos antibióticos lo son por

producir una enzima, la -lactamasa, que inactiva a los antibió-
ticos -lactámicos.
 Penicilina (activa)

S
R CO NH CH3
N CH3
O
COO-

-Lactamasa

S
R CO NH CH3
O C HN CH3
O-
COO-
Ác.peniciloico (inactivo)
 Muy a menudo los preparados de penicilinas o penicilinas
semisintéticas se formulan añadiendo un inhibidor suicida
de la -lactamasa, el ácido clavulánico

O CH2OH O
 -Lactamasa O CH2OH
C C
N H C
O- HN H
O
-
COO
Ác.clavulánico COO-

Esta molécula
reacciona con la
O
O CH2OH serina activa de la
C
C -lactamasa,
CH CH2 O HN produciendo su
H
Ser inactivación
COO-
 Ejemplos de inhibidores suicidas
Sistema de la monoamino oxidasa (MAO) cerebral

Los estados depresivos, en general, están relacionados con un

descenso en la concentración de neurotransmisores adrenérgicos
(dopamina, noradrenalina, etc.) en determinadas regiones del
cerebro.

Una de las enzimas encargadas de la degradación de estos

neurotransmisores es la monoamino oxidasa (EC 1.4.3.4).

Por tanto, la inhibición de la monoamino oxidasa se emplea como

terapéutica de los estados depresivos. Se han desarrollado muchos
inhibidores suicidas de la MAO
 Noradrenalina
HO

HO CHOH CH2 NH2

O2 + H2O
Monoamino
oxidasa

NH3 + H2O2 La MAO es una flavoproteína:

tiene un grupo prostético
HO flavínico (FAD) fundamental
para la catálisis. Los inhibidores
HO CHOH CHO suicidas de la MAO inactivan
al cofactor FAD.
Dihidroxifenilglicol
 O
N,N’ dimetil
H3C N propargilamina
NH (pargilina)

E S H2C N N O
R
CH3
+
Flavina HC C CH N
CH3

H3C
Inhibición suicida de la N+ CH CH
MAO mediante Pargilina H3C CH O
H3C N
NH

E S H2C N NH O
R
Flavina modificada
Regulación de la actividad enzimática
Regulación alostérica
Procesos a nivel celular; regulación de ajuste fino
de la actividad enzimática, a través de efectos de
retroalimentación (negativa o positiva)

Regulación por modificación covalente

Procesos a nivel supracelular (orgánico); regulación
a gran escala de actividades enzimáticas, a través de
modificación covalente de enzimas, provocadas por
señales (transducción de señales)
Las hormonas adrenalina y glucagón activan las proteínas quinasas que fosforilan ambas enzimas, provocando activación de
la glucógeno fosforilasa, estimulando la degradación del glucógeno; mientras que la glucógeno sintetasa disminuye su
actividad, lo que inhibe la síntesis de glucógeno.
La hormona insulina provoca la desfosforilación de las enzimas, en consecuencia la glucógeno fosforilasa se hace menos
activa, y la glucógeno sintetasa se activa, lo que favorece la síntesis de glucógeno
 Retroalimentación negativa en vías metabólicas

Síntesis de Isoleucina

Thr -cetobutirato Ile

Treonina
desaminasa

El producto final de la ruta, Isoleucina, inhibe a la primera

enzima de la misma, Treonina desaminasa
 Retroalimentación negativa en vías metabólicas

Síntesis de pirimidinas

ATP

+
Asp + CP CTP
ATCasa Carbamil aspartato

El producto final de la vía, CTP (citidin trifosfato) inhibe a la

primera enzima de la ruta metabólica, Aspartato transcarbamilasa

Al mismo tiempo, dicha enzima puede ser activada por ATP

Rutas metabólicas controladas por retroalimentación

Ruta Enzima Inhibidor

Glicolisis Fosfofructokinasa ATP
Neoglucogénesis FBP fosfatasa AMP
Bios. Ács. Grasos AcetilCoA carboxilasa AcilCoA
Bios. Colesterol HMGCoA reductasa Colesterol
Bios. Purinas PRPP sintetasa AMP,GMP,IMP
Otra característica importante de las enzimas alostéricas
es que presentan cinéticas anómalas, normalmente
cinéticas sigmoides:

v
La presencia de una sigmoide
implicala existencia de
Cooperatividad positiva
en la fijación del substrato

s
La presencia de una sigmoide implicala la
existencia de Cooperatividad positiva en la
fijación del ligando

L
La enzimas alostéricas la concentración de sustrato que produce la mitad de Vmáx se
llama K0.5
En el estudio de las enzimas controladas por retroalimentación
negativa, se comprobaron una serie de regularidades en las mismas:

1. Primer paso de una ruta metabólica o punto de ramificación

2. Enzimas de naturaleza compleja, son oligoméricas:
subunidades
3. la enzima puede desensibilizarse a sus inhibidores por diversos
métodos( físicos y/o químicos) , perdiendo su propiedad
regulatoria y conservando su capacidad catalítica.
4. Los inhibidores se comportan como competitivos (elevan el valor
de la Km aparente, pero sin embargo no son análogos estructurales
del substrato

Estas últimas características lleva al concepto de alosterismo:

Una acción sobre la actividad enzimática que se desarrolla
fuera del Centro Activo (Jacob y Monod, 1960)
 Activador alostérico

Sin efector

Inhibidor alostérico

La relación entre la velocidad inicial, Vo, y la concentración de sustrato

[S], es sigmoídea en vez de hiperbólica; esto se llama efecto homotrópico.
Superpuesta a esta reacción se encuentra la capacidad de los efectores
alostéricos para modificar el grado de cooperatividad, lo que se denomina
efecto heterotrópico
 Centro Centro Centro
Centro
activo alostérico activo
alostérico

s i s

Cuando el inhibidor ocupa

En ausencia de inhibidor, el centro alostérico, tiene
el substrato se fija normal- lugar un cambio conformacional
mente al centro activo en el centro activo que impide la
fijación del substrato

Inhibición alostérica
La cooperatividad (positiva) consiste en que la fijación de una
molécula de substrato favorece la fijación del siguiente, y así
hasta ocuparse toda la molécula

s + s s + s s + s s
1 2 s 3 s s

En términos de Km veríamos que Km1 > Km2 > Km3

Existe también cooperatividad negativa, cuando la fijación de

una molécula de substrato dificulta la fijación del siguiente.
El comportamiento cooperativo implica:

1. Que hay más de un sitio de fijación de substrato

por molécula de enzima (estr.cuaternaria)

2. Que hay interacciones entre los sitios de fijación

 Un sistema alostérico clásico es la Hemoglobina:

1. La fijación de su “substrato”, O2, es de tipo sigmoide

2. La fijación del “substrato” puede inhibirse por efectores

(H+, CO2, 2,3-BPG) que no actúan sobre el “Centro Ac-
tivo” (grupo hemo)

3. Las subunidades, por separado, presentan cinética

michaeliana en la fijación de O2
 Cinéticas michaeliana y sigmoide:
Mioglobina y Hemoglobina

1.0

Y
0.8 Mioglobina

0.6

0.4

Hemoglobina
0.2

0.0
0 2 4 6 8 10 12

s
 Efecto del pH sobre la saturación de la hemoglobina
(Efecto Bohr)
100

80 pH 7.0
Saturación de O2, %

pH 7.4
60

pH 6.6
40

20

0
0 20 40 60 80 100

PO2, mmHg
 Efecto del 2,3-bisfosfoglicerato (2,3-BPG)
sobre la saturación de la hemoglobina

100

80
Saturación de O2, %

0
60 0.1 mM
1 mM
40

20

0
0 20 40 60 80 100

PO2, mmHg
 Los efectores alostéricos operan sobre el grado de
cooperatividad del sistema:

- Los inhibidores alostéricos aumentan el grado de

cooperatividad

- Los activadores alostéricos disminuyen el grado de

cooperatividad; a concentraciones elevadas de activador,
la cinética pasa a ser michaeliana, y deja de ser sigmoide.
 Modelo de Monod, Wyman y Changeaux MWC

Modelo concertado: Todo R o Todo T

Forma R (forma relajada)

s s s s s s s
s s s
L
Forma T (forma tensa o contraída)
i i i
i i i i i i i
La características distintivas de este modelo es que las conformaciones de todas las
subunidades cambian al mismo tiempo. La razón de equiliubrio de las formas T/R se denomina
L
 Modelo de Monod, Wyman y Changeaux MWC

Cuando esta presente un activador, la unión cooperativa de A

desplaza el equilibrio entre las formas T y R, favoreciendo la
forma R. El resultado es que hay menos necesidad de sustrato
para desplazar el equilibrio a favor de R y se observa menos
cooperatividad de la unión de S.

Cuando esta presente un Inhibidor desplaza a favor de la forma T.

Se requiere más sustrato para desplazar el equilibrio a R, se observa
un mayor grado de cooperatividad de la unión de S.
Modelo de Koshland, Nemethy y Filmes
Modelo secuencial: existen oligómeros híbridos

S S S

S S S S

S S S

Modelo K N F
Regulación de la actividad enzimática 2
 Isoenzimas
• Muchas enzimas se presentan bajo formas múltiples, en un
mismo organismo o inclusive en la misma célula. Estas
formas múltiples no son interconvertibles, generalmente
presentan igual PM pero se diferencian en su carga, lo
que permite separarlas por electroforesis

• Las isoenzimas son distintas formas moleculares, su

composición de aminoácidos esta codificada por distintos
genes.

• Diferentes isoenzimas pueden caracterizar a diferentes

órganos y tejidos de un animal o una planta, o a diferentes
compartimentos de una célula, por ejemplo una forma
mitocondrial y una citosólica.

• Muchas isoenzimas alostéricas se presentan bajo dos o

más formas con distinta regulación, que participan en
diferentes vías metabólicas y están muchas vece s en
diferentes compartimentos de la célula eucariótica.
 Isoenzimas
• Un ejemplo es la láctico-
láctico-deshidrogenasa que cataliza la reducción reversible
del piruvato a lactato en presencia de NADH + H+ que se oxida a NAD+

• Los tejidos de rata y otros mamíferos contienen 5 isoenzimas (de P.M.

134.000 y diferentes movilidades electroforéticas), formada de 4
subunidades de P.M. 33.500. Las 5 formas resultan de combinaciones
posibles de dos subunidades diferentes M y H. M está en el músculo
esquelético donde predomina como MMMM (M4). H es de corazón (heart)
predomina en el miocardio como HHHH (H4) las restantes son: MMMH
(M3H); MMHH (M2H2) y MHHH (MH3).

• Las diferentes isoenzimas tiene propiedades cinéticas distintas:

• M4 tiene una Km relativamente baja para piruvato y Vmáx alta
• (por lo tanto va de piruvato a lactato)
• H4 tiene una Km relativamente alta para piruvato y Vmáx baja
• (por tanto va de lactato a piruvato)
• Las otras izoenzimas tiene propiedades cinéticas intermedias entre
• M4 y H4
Suele haber fenómenos de modificación covalente de
enzimas en la respuesta celular a señales químicas:

1. Neurotransmisores
2. Hormonas
3. Factores de crecimiento
4. Estímulos morfogenéticos y de diferenciación
5. Muerte celular programada (apoptosis)
6. Estímulos antigénicos
7. Luz y otros agentes físico-químicos
Formas de modificación covalente, 1

Fosforilación: Protein kinasas

R CH R CH
ATP ADP
N H N H
O C O C O
Ser H C CH2OH Ser HC CH2O P O-
H N H N O-
C O C O
R' CH R' C H
N H N H

Sobre residuos de Ser, Thr y Tyr

 Formas de modificación covalente, 2
Defosforilación: Protein fosfatasas

R CH Pi R CH
H2O
N H N H
O C O O C
Ser HC CH2O P O- Ser H C CH2OH
H N O- H N
C O C O
R' C H R' CH
N H N H

Sobre residuos previamente fosforilados: Ser-P, Thr-P, Tyr-P

 Formas de modificación covalente, 5
Un zimógeno o proenzima es un precursor enzimático inactivo, es decir, no cataliza ninguna
reacción como hacen las enzimas. Para activarse, necesita de un cambio bioquímico en su
estructura que le lleve a conformar un centro activo donde pueda realizar la catálisis

Rotura proteolítica:
N C Zimógeno (Ttripsinógno))

Proteinasa
específica

N C + N C (Tripsina)

Enzima activada
A continuación se indican algunos de los zimógenos
más conocidos:

Angiotensinógeno.
Tripsinógeno.
Quimotripsinógeno.
Pepsinógeno.
La mayor parte de las proteínas del sistema de coagulación.
Algunas de las proteínas del sistema del complemento.
Procaspasas.
Proelastasa.
Prolipasa.
Procarboxipolipeptidasas.
Concepto de Segundo Mensajero

La mayoría de las señales químicas operan sobre un

receptor situado en la parte externa de la membrana.

Al operar sobre este receptor determinan la aparición en el

interior celular de un segundo mensajero, que desencadena
la respuesta celular a la señal.

Algunos segundos mensajeros:

- Nucleótidos cíclicos: cAMP, cGMP

- Ca++
- Diacilglicerol
- Inositolfosfatos
- Óxido nítrico, etc.
Las hormonas adrenalina y glucagón activan las proteínas quinasas que fosforilan ambas enzimas, provocando
activación de la glucógeno fosforilasa, estimulando la degradación del glucógeno; mientras que la glucógeno
sintetasa disminuye su actividad, lo que inhibe la síntesis de glucógeno.
La hormona insulina provoca la desfosforilación de las enzimas, en consecuencia la glucógeno fosforilasa se
hace menos activa, y la glucógeno sintetasa se activa, lo que favorece la síntesis de glucógeno
 Enzimas en Medicina
Biotecnología enzimática
Alteraciones de la concentración enzimática en suero, 1

1. Aumentos de la actividad enzimática

(a). Incremento patológico de la permeabilidad de membrana

(b). Muerte y destrucción celular

(c). Inducción enzimática

(d). Proliferación celular

Alteraciones de la concentración enzimática en suero, 2

2. Disminuciones de la actividad enzimática

(a). Intoxicaciones

(b). Enfermedades crónicas

(c). Alteraciones del estado nutritivo

Algunas enzimas con interés diagnóstico

1. Aminotransferasas
2. Creatin kinasa
3. Fosfatasa alcalina
4. -Amilasa
5. Fosfatasa ácida
6. Lactato deshidrogenasa
7. -Glutamil transferasa
8. Seudocolinesterasa
 Aminotransferasas (Transaminasas)

Catalizan la interconversión reversible de aminoácidos

y cetoácidos. Utilizan piridoxal fosfato como cofactor

COOH COOH COOH COOH

H2N CH + C O C O + H2N CH
R1 R2 R1 R2

Su papel es importantísimo en el metabolismo de

aminoácidos. En clínica se determinan las siguientes:

EC 2.6.1.1, Aspartato aminotransferasa (AST, GOT)

EC 2.6.1.2, Alanina aminotransferasa (ALT, GPT)
 Creatin kinasa, EC 2.7.3.2 (CK, CPK)

CH3 CH3 O
ATP ADP
N CH2 COOH N CH2 CO O P O-
HN C HN C
NH2 O-
NH2

Creatina Creatin fosfato

Creatin fosfato es una forma de almacenamiento de enlaces

ricos en energía en el tejido muscular. Es el prototipo de los
compuestos conocidos como fosfágenos.
 + La Creatin Kinasa se presenta en forma de tres isoenzimas
específicas de tejido:
MM
- Forma MM (músculo esquelético)
- Forma MB (músculo miocárdico)
MB - Forma BB (cerebro)

La isoenzima MB es un marcador precoz de

BB infarto de miocardio. Un nivel muy elevado es
mal pronóstico

Las isoenzimas se distinguen electroforéticamente

- o por métodos inmunológicos
 Fosfatasa alcalina, EC 3.1.3.1

O O
R O P O- + H2O R OH + HO P O-
O- O-

Hidroliza con baja especificidad fosfomonoésteres, a un pH

alto (de ahí el nombre). No se conoce con certeza cuál es
su función metabólica. Aparece en gran cantidad de tejidos.
(Deficiencia de vitamina C)

(Trastorno del crecimiento óseo)

 Fosfatasa ácida, EC 3.1.3.2

O O
R O P O- + H2O R OH + HO P O-
O- O-

Hidroliza fosfomonoésteres con baja especificidad. Presenta

varias isoenzimas, una de las cuales (Fosfatasa ácida prostática)
es un marcador muy fiable del cáncer de próstata y que se emplea
en el diagnóstico precoz del mismo.
 (Acumulo de esfingolípido; problemas óseos)

acumulación de esfingomielina y colesterol en los

lisosomas en células de hígado y Bazo.

es un trastorno que involucra destrucción y regeneración

anormal del hueso.
 -Glutamil transferasa, EC 2.3.2.2 (GGT)

GSH + aa -Glu-aa + Cys-Gly

Tiene un importante papel en el transporte de aminoácidos

a través de membranas. Aparece, como la fosfatasa alcalina,
en obstrucciones biliares asociada a fracciones de alto peso
molecular.

Es una enzima inducible, y su concentración en suero aumenta

con xenobióticos (alcohol, drogas, etc.)
 -Amilasa, EC 3.2.1.1

Es una enzima producida por las glándulas salivales y el

páncreas.

Es un marcador muy importante de afecciones pancreáticas

agudas (pancreatitis). Puede incluso aparecer en la orina, debido
a su bajo peso molecular (amilasuria)
Creatin kinasa
Transaminasa glutámico oxaloacética
Deshidrogenasa láctica