Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores

Cuautitlan, Campo 1

CARRERA
QUÍMICA INDUSTRIAL

LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA IV

REPORTE PRACTICA #9:

PRETRATAMIENTO DE MUESTRAS EXTRACCIÓN DE PARABENOS EN UNA
MUESTRA DE AGUA CONTAMINADA MEDIANTE EXTRACCIÓN EN FASE
SÓLIDA Y ANÁLISIS POR HPLC.

PROFESORES:
MA. GUADALUPE PEREZ CABALLERO
JOSE DE JESUS OLMOS ESPEJEL

EQUIPO #2:
HERNANDEZ SUAREZ JOSUE
TORRES RAFAEL GIOVANNI

GRUPO: 2601 C-D

PERIODO: 2019-II

Fecha de Entrega: 02/Mayo/2019.

OBJETIVOS.
 ● Conocer el uso de la técnica de Extracción en Fase Sólida (EFS) como
método de preparación de muestras.
● Identificar y cuantificar los parabenos presentes en una muestra de agua
contaminada mediante análisis por HPLC.
● Calcular el factor de concentración de los analitos en el extracto de EFS
analizado.

INTRODUCCIÓN.

La ejecución de un método analítico, incluye una secuencia de procedimientos que

se inicia con la recolección de la muestra, pasos intermedios y culmina con el
reporte final de los resultados. Los pasos intermedios pueden involucrar el
almacenamiento de la muestra, acondicionamiento o preparación, aislamiento de los
analitos, identificación y cuantificación. Sin embargo la preparación es usualmente el
paso más laborioso y tedioso, ya que aproximadamente más del 60% del tiempo de
un análisis, es empleado en la preparación de la muestra.

La extracción en fase sólida (EFS) es una técnica preparativa que el analista utiliza
para “limpiar” la muestra previa a la cuantificación y para futura concentración del
analito que está presente en la muestra. El término “extracción en fase sólida” es
debido a que el material de soporte utilizado es un sólido, a través del cual pasa un
líquido o un gas. Los analitos son absorbidos en el soporte y luego eluidos de
acuerdo a sus diferentes afinidades entre el material absorbente y la fase móvil
utilizada.

Ventajas en la utilización de la extracción en fase sólida:

● Tamaño de muestra puede ser grande o pequeño.

● El volumen de elución es pequeño.
● Pocas limitaciones en la utilización de disolventes.
● Poco consumo de disolventes y pocas posibilidades de contaminación.
● Muchas publicaciones técnicas.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
RESULTADOS.

Tabla 1. Resultados obtenidos para la curva de calibración y el análisis de la muestra

de agua contaminada.
Sistema Concentración Analito tr tr tr’ Área Wb W1/2 N Rs
(ppm) (min) (s) (s) (s) (s)

MP 3.008 180.48 32.16 199620 10.2 6.0 159.16 6.5006

1 5 PP 4.196 251.76 103.44 180261 11.73 6.9 1245.05 5.6157

BP 5.453 327.18 178.86 171950 15.13 8.9 2237.46 -------

MP 3.029 181.74 33.42 476322 10.71 6.3 155.89 6.1490

2 10 PP 4.205 252.30 103.98 457181 12.24 7.2 1155.43 5.5271

BP 5.450 327.00 178.68 404671 14.79 8.7 2336.80 -------

MP 3.000 180.00 31.68 678361 9.35 5.5 183.80 6.6666

3 15 PP 4.190 251.40 103.08 650774 12.07 7.1 1167.72 5.5475

BP 5.416 324.96 176.64 595250 14.45 8.5 2392.48 -------

MP 3.020 181.20 32.88 928713 10.37 6.1 160.95 6.1843

4 20 PP 4.194 252.64 103.32 861360 12.41 7.3 1109.76 5.2679

BP 5.403 324.18 175.86 785575 15.13 8.9 2163.03 -------

MP 2.995 179.70 31.38 1241938 10.2 6.0 151.53 6.1856

5 25 PP 4.178 250.68 102.36 1137549 12.75 7.5 1031.92 5.1990

BP 5.408 324.48 176.16 1041635 15.64 9.2 2031.18 -------

MP 3.023 181.38 33.06 1460701 11.39 6.7 134.88 5.5144

6 30 PP 4.187 251.22 102.9 1362317 13.94 8.2 872.39 4.8121

BP 5.380 322.80 174.48 1192928 15.81 9.3 1950.00 -------

Tabla 2. Resultados obtenidos de las muestras de agua contaminada.

Muestra Analito tr tr tr’ Área Wb W1/2 N Rs
(min) (s) (s) (s) (s)
 MP 3.023 181.38 33.06 15837 12.75 7.5 107.64 --------

M1 PP -------- -------- -------- -------- -------- -------- -------- --------

BP -------- -------- -------- -------- -------- -------- -------- --------

Tabla 3. Resultados obtenidos de la muestra de agua contaminada original.

Muestra Analito tr tr tr’ Área Wb W1/2 N Rs
(min) (s) (s) (s) (s)

MP 3.021 181.26 32.94 885939 10.03 5.9 172.68 6.3088

M2 PP 4.165 249.9 101.58 464310 11.73 6.9 1200.68 5.3979

BP 5.335 320.1 171.78 161403 14.28 8.4 2316.84 --------

Tiempo Muerto = t0 = 2.472 min

Gráfico 1.- Curva de calibración Metilparabeno

Gráfico 2.- Curva de calibración Propilparabeno

 Gráfico 3.- Curva de calibración Butilparabeno

ANÁLISIS DE RESULTADOS.

En esta práctica se realizó una determinación de parabenos presentes en una muestra de

agua, utilizando la técnica de Extracción por Fase Sólida, ya que de esta forma se van
separando las demás sustancias o impurezas presentes en la muestra de agua al inicio del
tratamiento, lo cual la determinación será más fácil y rápida, por otra parte esta técnica
presenta ventajas como el pequeño volumen de elución, el tamaño de la muestra puede ser
grande o pequeña y pocas posibilidades de contaminación.
En las tablas 1, 2 y 3 se observan los resultados arrojados por el cromatograma, con los
cuales pudimos calcular el número de platos teóricos, así como la resolución que existe entre
los picos y el ancho de la base de cada uno de los picos registrados en cada cromatograma.
En nuestra práctica solo se tiene observan dos interacciones una entre el
metilparabeno/propilparabeno yla segunda entre el propilparabeno/butilparabeno.
El orden de aparición de los parabenos en el cromatograma tiene que ver con su estructura
molecular y el número de carbonos presentes en ella, también su tiempo de retención es
menor como se observa en las tablas de resultados.

1.- 2.- 3.-

Metilparabeno Propilparabeno Butilparabeno

A partir de las tres diferentes curvas de calibración para cada uno de los analitos es posible
calcular el error típico y de igual manera determinar la concentración en el extracto conocido
como M2 por lo tanto:

Tabla 4. Resultados obtenidos de los errores típicos de cada analito

Analito Errores típicos Sy/x

MP 27952.6619

PP 24053.7083

BP 23480.0398

● Para Metilparabeno:

y = 50586.31428571x - 54318.00

Sustituimos en y por el valor del área obtenida de MP en la muestra de M2 y asi despejamos

el valor de x para saber la concentración real.
 885939+54318
x= =18.5872 ppm
50586.31428571

● Para Propilparabeno:

y = 46639.82857143x - 41290.00

Sustituimos en y por el valor del área obtenida de PP en la muestra de M2 y asi despejamos

el valor de x para saber la concentración real.

464310+ 41290
x= =10.8405 ppm
46639.82857143

● Para Butilparabeno:

y = 41177.75428571x - 21942.5333

Sustituimos en y por el valor del área obtenida de BP en la muestra de M2 y asi despejamos

el valor de x para saber la concentración real.

161403+21942.5333
x= =4.4525 ppm
41177.75428571

Con los resultados del error típico que se obtuvieron de cada analito y con los datos de la
ecuación de la línea recta, podemos calcular los límites de detección (LOD) y límites de
cuantificación (LOQ) mediante sus respectivas fórmulas:

Para LOD:
-Primero se calcula yLOD= b+3[Sy/x] donde “b” es la ordenada de la línea recta de cada analito.
LOD=(yLOD -b)/m

En donde “m” y “b” es la pendiente y ordenada al origen de la línea recta de cada analito.

Para LOQ:
-Primero se calcula yLOQ= b+10[Sy/x] donde “b” es la ordenada de la línea recta de cada
analito.
LOQ=(yLOQ -b)/m

En donde “m” y “b” es la pendiente y ordenada al origen de la línea recta de cada analito.

Tabla 5. Limites de detección (LOD) y límites de cuantificación (LOQ)

Analito b m Sy/x yLOD LOD yLOQ LOQ

MP -54318.00 50586.31428571 27952.6619 29539.9857 1.6577 225208.619 5.5257

PP -41290.00 46639.82857143 24053.7083 30871.1249 1.5472 199247.083 5.1573

BP -21942.5333 41177.75428571 23480.0398 48497.5861 1.7106 212857.8647 5.7021

Tomando en cuenta que se tomaron 25mL de la muestra original, de la cual se recolectó 1mL
para introducirlo en el HPLC, se determino la concentración de los diferentes Parabenos en la
muestra original M1, asi como también calculamos el Factor de Concentración (FC) a partir
de las siguientes ecuaciones:

[Co en ppm][25 mL ]
[ M 1]=
[1 mL]

[ Analito en M 2 ]
FC =
[ Analito en M 1 ]

Tabla 6. Resultados de FC y concentraciones obtenidas de los Parabenos

Analito Concentración [M1] Concentración [M2] (ppm) Factor de
(ppm) Concentración

MP 464.68 18.5872 0.04

PP 271.0125 10.8405 0.04

BP 111.3125 4.4525 0.04

CONCLUSIONES.

A partir de la técnica de extracción en fase sólida se adaptó la muestra de agua contaminada

como método de preparación de muestras.
Mediante el análisis de cromatografía líquida de alta eficiencia, se identificó la presencia de
parabenos en una muestra de agua contaminada, así como su cuantificación de cada parabeno
identificado en la muestra.
Se calculó el factor de concentración de los analitos.
BIBLIOGRAFÍA.

❏ Ringbom A., Formación de complejos en química analítica, Alhambram Madrid,

1979.
❏ John A. Dean., Lange manual de química. Tomo II, 13a Ed. Mac graw Hill.
❏ Harris D. (2007) “Análisis químico cuantitativo”, 3ed. Barcelona:
Editorial Reverté