TÉCNICAS

DE
BIOLOGÍA
MOLECULAR
EN
MEDICINA
FORENSE (1)
 Genética forense

Se puede definir como la parte de la

genética y de la medicina legal y forense
que analiza la variabilidad genética
humana para resolver problemas de
identificación.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 2

 Genética forense
• Problemas que pretende resolver la
genética forense se refieren a:

o Estudios de paternidad.
o Identificación de restos cadavéricos.
o Investigaciones criminalísticas a partir de todo
tipo de muestras biológicas humanas (sangre,
pelo, piel, semen, saliva, etc.).

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 3

 Genética forense
• Se estudia la variación genética
interindividual:
o Las regiones polimórficas del ADN:
• Son aquellas regiones que presentan
variabilidad entre los distintos individuos
• Se necesita de la ayuda de la
bioinformática
Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 4
 Organización del ADN
humano
• El genoma humano está formado ≈ por 3,2 ∙ 109
pb.
• < 4% es ADN codificante (síntesis proteínas).
• El resto es ADN no codificante:
o ≈ el 25% del ADN total lo constituyen secuencias
relacionadas con genes: intrones y secuencias
reguladoras
• La mayoría del ADN humano (≈ el 70%) es ADN
extragénico, sin función conocida.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 5

 Organización del ADN humano:
CRITERIO DE REPETITIVIDAD

• ADN de secuencia única, tanto codificante

como no codificante ( ≈ el 50% del ADN
humano).

• ADN repetitivo.
o Constituye el otro 50% del ADN humano.
o Lo integran secuencias que se repiten en
número variable, desde unas pocas hasta
miles de repeticiones.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 6

 Organización del ADN humano:
CRITERIO DE REPETITIVIDAD
• En el ADN repetitivo, encontramos:
o ADN repetitivo codificante.
• Supone una parte pequeña del ADN repetitivo.
• Engloba unos pocos genes que se repiten en
tándem (como los genes que codifican el ARN
ribosómico) y a algunas familias multigénicas
(agrupadas o dispersas).
o ADN repetitivo no codificante.
• Supone la mayor parte del ADN repetitivo.
• Hay dos tipos de secuencias de ADN repetitivo
no codificante: ADN repetido en tándem y ADN
repetido disperso por todo el genoma.
Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 7
 Familias multigénicas
• Son aquellas donde las secuencias de los ADN de
sus miembros comparten homología y sus
productos están funcionalmente relacionados.
• En algunos casos se encuentran juntas en el
cromosoma, en otras se encuentran dispersas en
varios cromosomas.
• Las familias de genes de las globinas, responsables
de codificar para diferentes péptidos que forman
parte de las moléculas de hemoglobina, es un
ejemplo de familia multigénica dispersa o no
agrupada (los genes alfa están el cromosoma 11 y
los de la beta en el 16) .
• Dentro de la misma familia alfa o beta, los genes
están agrupados (en un mismo cromosoma).
Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 8
 Organización

del ADN humano:

criterio de

repetitividad

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 9

 ADN repetido en tándem

• Corresponde a secuencias que se repiten

una copia a continuación de otra.
• Tienen una localización cromosómica
concreta (locus específico).
• Categorías:
o ADN satélite
o ADN minisatélite
o ADN microsatélite

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 10

 ADN repetido en tándem

• ADN satélite:
o Una misma secuencia de ADN se repite miles
de veces en tándem, originando fragmentos
que van de 100 kb a varios Mb.
o El genoma humano contiene un total de 250
Mb de ADN satélite.
o El más importante es el llamado Satélite Alfa,
que forma parte del ADN centromérico y en el
que se repite una secuencia de 171
nucleótidos.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 11

 ADN repetido en tándem

• ADN minisatélite:
o Lo integran secuencias de 6 a 25 nucleótidos
que se repiten en tándem, dando lugar a
fragmentos que van de 100 nucleótidos a 20
Kb.
• ADN microsatélite.
o Está formado por secuencias cortas de entre 2
y 6 nucleótidos que se repiten en tándem un
número relativamente pequeño de veces para
originar fragmentos inferiores a 500 nucleótidos

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 12

 ADN repetido disperso

• Está formado por secuencias de tamaño variable

que se repiten miles o cientos de miles de veces
dispersas a lo largo de todo el genoma.
• Este ADN repetido constituye alrededor del 45%
del genoma humano.
• Se distinguen dos categorías según el tamaño de
la secuencia que se repite:
o Elementos nucleares dispersos cortos
o Elementos nucleares dispersos largos

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 13

 ADN repetido disperso
• Elementos nucleares dispersos cortos:
o SINE (short interspersed nuclear elements)
o Son secuencias de cientos de nucleótidos
o Se repiten cientos de miles de veces en el
genoma.
o El más conocido es la familia de secuencias Alu:
• Un tamaño de 250-280 nucleótidos
• Se repiten 1,5 x 106 veces
• Específica de los primates
• Constituyen el 10% del genoma humano.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 14

 ADN repetido disperso

• Elementos nucleares dispersos largos:

o LINE (long interspersed nuclear elements).
o Son secuencias de varios Kb repetidas de
manera dispersa por el genoma cientos de
miles de veces.
o Estas secuencias constituyen el 20% del
genoma humano.
o ¿Actúan modulando la expresión génica?

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 15

 POLIMORFISMOS

Se pueden definir como

variaciones en la secuencia de un
locus específico, con una
incidencia en la población superior
al 1%.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 16

 POLIMORFISMOS
• Cada una de las secuencias alternativas
del mismo locus se denomina alelo.
• El conjunto de todos los alelos que porta
un individuo constituye su genotipo.
• Los polimorfismos en loci codificantes se
traducen en diferentes fenotipos.
• Los polimorfismos en loci no codificantes
no tienen reflejo en el fenotipo del
individuo

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 17

 POLIMORFISMOS
• Los polimorfismos en loci no codificantes
contribuyen a la variabilidad genética
interindividual, por lo que tienen una gran
utilidad en genética forense.
• Los polimorfismos pueden ser de dos
tipos:
o De longitud
o o de secuencia.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 18

 Polimorfismos de longitud

Son variaciones en la longitud de

la secuencia de un locus debido a
deleciones o inserciones de uno o
más nucleótidos.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 19

 Polimorfismos de longitud

• En genética forense tienen gran

importancia los polimorfismos de longitud
de ciertos minisatélites y microsatélites.
o Estas regiones de ADN repetido en tándem
son hipervariables y muy polimórficas
o Su polimorfismo consiste en el número de
veces que se repite la secuencia básica.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 20

 Polimorfismos de longitud
• El polimorfismo de minisatélites y microsatélites
permite diferenciar un individuo de otro:
o Son MARCADORES GENÉTICOS.
• Se nombran según el número de veces que se
repite la secuencia en cuestión:
o Cada alelo se denomina con el nombre del marcador
seguido del número de repeticiones de la secuencia
básica.
o Por ejemplo, TH01-7 corresponde al alelo del marcador
TH01 que contiene 7 copias de la secuencia básica.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 21

 Polimorfismos de longitud

• Los marcadores genéticos son muy

útiles en genética forense, además de
por su gran variabilidad, porque su
herencia es mendeliana simple.
• Así, cada individuo tiene dos alelos
para cada marcador, uno procedente
del padre y el otro procedente de la
madre, lo que permite su uso en
estudios de paternidad.
Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 22
 Polimorfismos de longitud
• Hay dos tipos principales de
marcadores genéticos de longitud,
según su tamaño:
o Repeticiones en tándem de número
variable, VNTR (variable number tandem
repeats).
o Repeticiones en tándem cortas, STR (short
tandem repeats)

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 23

 Polimorfismos de longitud
• Las repeticiones en tándem de número
variable, VNTR:
o Son minisatélites polimórficos hipervariables con un
tamaño relativamente grande, entre 500 y 10 000
nucleótidos.
o Ejemplo: el VNTR D1S80 tiene una secuencia básica
de 16 nucleótidos (AGGACCACCAGGAAGG) y se
han descrito 27 alelos, el menor con 15
repeticiones de la secuencia básica y el mayor
con 41 repeticiones (alelos D1S80-15 a D1S80-41).

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 24

 Polimorfismos de longitud
• Las repeticiones en tándem cortas, STR
o Son microsatélites polimórficos, con una
secuencia básica de 4-6 nucleótidos que se
repite un número de veces diferente en cada
alelo, normalmente no superior a 50.
o El tamaño final del alelo más largo es inferior a
500 nucleótidos.
o Ejemplo: la secuencia básica del STR D18S5, la
componen cuatro nucleótidos (AGAA) y se
han descrito alelos desde D18S51-8 hasta
D18S51-27.
Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 25
 Polimorfismos de secuencia

Consisten en variaciones de uno

o más nucleótidos en la
secuencia de un locus.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 26

 Polimorfismos de secuencia
• Los más interesantes para la genética
forense son los polimorfismos de
nucleótido simple o único, SNP, (single
nucleotide polymorphism)
• Consisten en variaciones puntuales de
un único nucleótido.
• Habitualmente son polimorfismos
dialélicos
• Su frecuencia en el genoma humano
es ≈ 1 por cada 1000 nucleótidos.

Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 27

Electroferogramas correspondientes a la secuencia de un mismo gen de tres individuos diferentes en los
que se observa un polimorfismo de nucleótido simple (SNP) en la posición 474 (flecha). El individuo A es
homocigoto para el alelo G; el individuo B es heterocigoto, portando ambos alelos G y T; el individuo C es
homocigoto para el alelo T.
Lola Conesa. APC.BMC 23/04/2017 28