Determinación de Hierro por Espectroscopia de absorción atómica

Michel Mijares
Laboratorio de Análisis Instrumental. Departamento de Química.
Facultad Experimental de Ciencias y Tecnología. Universidad de Carabobo.
Naguanagua-Carabobo, Venezuela.
Revisado por: Prof. Lic. Roswal Arenas

RESUMEN
Se realizó la práctica espectroscopia de emisión atómica para cuantificar calcio presente en
una muestra problema (leche líquida descremada zulli milk), este proceso se llevó a cabo
preparando patrones de calcio con diferentes concentraciones, a estos y la muestra
problema se les midió su señal de emisión con el espectrofotómetro ice 3000 series atomic
absorption spectrometers. Dos métodos fueron aplicados, calibración externa y adición
estándar. Para el primero se obtuvo como resultado (143,73±0,15) ppm, mientras que para
el segundo la concentración de calcio fue (722,29±0,16) ppm, a estos resultados se les
realizo una prueba estadística t student comparado con un valor conocido de 1230 ppm
arrojo que con un 95% de confianza los resultados determinados por ambos método son
significativamente diferente del valor conocido.

INTRODUCCIÓN de los diferentes electrones, excluyéndose

La espectrometría de emisión atómica por las emisiones que podrían proceder por
llama se fundamenta por la excitación cambios en la energía vibracional o
sufrida por los electrones de un átomo al rotacional moleculares [1].
serles aplicada una fuente de energía
La energía emitida en forma de radiación
térmica procedente de la combustión de
presenta una longitud de onda específica
una llama. retornar al estado fundamental,
para cada transición diferente en un
los átomos emiten una cierta cantidad de
átomo en concreto, y una potencia
energía en forma cuantificada susceptible
radiante directamente proporcional a la
de ser medida, los múltiples espectros
cantidad de sustancia del átomo que
posibles, en espectrometría de emisión
absorbe y emite energía, es decir,
atómica a la llama se utiliza la región
directamente proporcional a la
espectral debida a transiciones
concentración del analito [1].
electrónicas. Dicha región se sitúa en la
zona visible y en la ultravioleta [1]. La ley de beer establece lo siguiente

La energía radiante por llama hace que I1 =

los iones o moléculas de la sustancia a A=a*b*c
medir se transformen en átomos libres, la Y= mx + b (1)
ventaja de ello estriba en que el conjunto O también:
de radiaciones emitidas se debe T = Transmitancia = (3)
únicamente a cambios en nivel energético
Por lo tanto: Se inició la práctica con la preparación de
A = Absorbancia = − Ln T (4) una solución madre de calcio pesando
(0,0508±0,0001) g y se aforo en un balón
Dónde:
de (250,00± 0,08) mL, una vez preparada
I1 = Intensidad de la luz que deja la dicha solución se tomaron diferentes
solución luego de la absorción alícuotas para preparar los patrones Tabla
I0 = Intensidad de la luz llega a la
solución antes de la absorción. Tabla 1: diluciones para la preparación
a = Coeficiente de absortividad de patrones a partir de la solución madre
b = Distancia recorrida por el haz de luz a de calcio.
través de la muestra
c = Concentración de la solución Seguidamente se preparó la muestra
problema partiendo de un litro de leche,
El calcio es un macromineral tomando una alícuota de (20,00 ±0,03)
indispensable para la formación de mL, se aforo en un balón de
huesos, dientes, contracción muscular y el (100,00±0,08) mL, a partir de allí se tomó
funcionamiento del sistema nervioso; (5,00 ±0,01) mL llevándose a un volumen
también interviene en la coagulación de final de (100,00±0,08) mL, de esta se
sangre y la actividad de algunas enzimas. realizó el análisis para la calibración
Sin embargo, la mayoría del calcio en el externa y adición de estándar obteniendo
organismo se encuentra en los huesos y los resultados de la tabla 4.
en los dientes. Una manera de prevenir la
deficiencia de calcio es por medio de una N° de Alícuota de concentración Volumen
dieta rica en alimentos que lo contengan, patrón solución de solución dilución
madre (±0,14) ppm (±0,10)mL
por ejemplo, productos lácteos (leche, (±Δ) mL
quesos, yogurt), espinacas, mostaza, 1 2,000±0,006 1,63 100,00
rábano, brócoli, frijoles y ajonjolí, sin 2 2,000±0,006 3,25 50,00
embargo consumir más calcio del que
3 3,000±0,010 4,88 50,00
necesita el cuerpo puede causar efectos
adversos, como cálculos renales micción 4 4,000±0,010 6,51 50,00

frecuentes entre otros [2]. 5 5,000±0,010 8,14 50,00

A continuación se determinara el calcio

presente en una muestra de leche
Al realizar la curva de calibración entre
descremada zulli milk utilizando la
la señal de emisión y concentración de
técnica de emisión atómica a la llama,
calcio presente en los patrones (tabla 2),
aplicando dos métodos de calibración
se encontró una dependencia lineal con
(externa y adición de estándar), con el
pendiente positiva, demostrado por la
equipo espectrófometro ice 3000 series
figura 1, también se muestra un valor de
atomic absorption spectrometers
de 0,9581, indicando que el valor es
muy cercano a 1 y la relación lineal se
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
cumple para la serie de datos estudiados Este método también fue considerado
en la tabla 1. Además, la señal de emisión para determinar la concentración inicial
se incrementa con la concentración de desconocida de calcio en una muestra de
calcio, lo cual se corresponde con la leche descremada, este consistió en añadir
pendiente positiva encontrada en la una cantidad conocida de analito a la
regresión. Con estos datos se realizó el muestra problema, aumentando así la
cálculo de la concentración de calcio en la concentración del analito en un cantidad
muestra problema utilizando la ecuación conocida Tabla 2, las adiciones de patrón
1. se usan frecuentemente para calibrar la
respuesta de un procedimiento analítico
Tabla 2. Resultados obtenidos de emisión cuando los efectos de matriz son
atómica para la realización de la curva de importantes. Un efecto matriz es un
calibración externa. cambio de la señal analítica causado por
Nº Patrón Concentración Emisión cualquier componente que pueda haber en
(±0,14)ppm (±0,001)u. a la muestra distinta del analito.
1 1,63 0,286
2 3,25 0,615 Tabla 3. Resultados obtenidos de emisión
3 4,88 0,823
4 6,51 0,984 atómica para la realización de la curva de
5 8,14 1,095 calibración de adición estándar.

Nº Concentración Emisión
Figura 1: Curva de calibración externa Patrón (±0,14)ppm (±0,001)u.
a
experimental obtenida a partir de los 1 1,63 0,652
datos arrojados por el espectrómetro de 2 3,25 0,798
absorción Atómica a la llama ice 3000. 3 4,88 0,862
4 6,51 1,026
5 8,14 1,140

Figura 2: curva de calibración por

adición estándar experimental obtenida a
partir de los datos arrojados por el
Espectrómetro de absorción atómica a la
llama ice 3000.

El método de adición estándar consiste en

añadir cantidades conocidas de analito al
problema, cuyo contenido en analito se
quiere determinar. A partir del aumento
de señal se deduce cuanto analito había en
la muestra problema. En este método se
obtuvo una respuesta lineal frente al
analito figura 2.
Tabla 4. Contenido de calcio en la
muestra problema de leche descremada
zulli milk.
Método Emisión(±0,001)u. a Concentración
(±Δ) ppm
Calibración O,340 143,73±0,15
externa
Adición 0,340 722,29±0,16
estándar
Tabla 5. Comparación de medias
utilizando la t de student con un valor
conocido, para la calibración externa y
calibración por adición estándar
Valor teórico: 1230ppm
Tabla 6. Comparación de medidas
replicadas utilizando la t de student
En la tabla 4 se puede observar los
resultado obtenidos por ambos métodos
de calibración, a estos se les realizo una
prueba estadística comparándolos con un
valor conocido (1230ppm), utilizando la t
student, a un nivel de confianza del 95%,
se puede visualizar en la tabla 5, que la t
calculada es mayor que la t tabulada por
lo tanto son diferente del valor conocido,
la probabilidad de que sean iguales es
inferior al 5%, también se aplicó la
comparación de medidas replicadas tabla
6, se obtuvo que a un 95% de confianza y
T calculada es mayor que la T tabulada
por lo tanto los resultados de ambos
métodos difieren significativamente.
Estas interferencias, pueden surgir
debido a las diferencias en composición
de la muestra analizada, de los estándares
externos utilizados para la calibración, y
factores externos, los componentes de la
matriz pueden producir una señal no
compensada independiente de la
concentración de analitos. Causadas por
la formación de enlaces con aniones, en
este caso la leche posee fosfatos, este
puede unirse al calcio en fase acuosa y
formar una especie poco volátil, que hace
decrecer la concentración en la fase de
vapor de los átomos de calcio generando
una disminución en la señal. Por lo tanto,
se escogen otros enfoques para minimizar
las interferencias de la matriz tales como
el método de adición de estándar. Este se
Método T calculada T tabulada
Calibración
externa
Calibración
adición estándar
T calculada T tabulada
usa frecuentemente para calibrar la
respuesta de un procedimiento analítico
cuando los efectos de matriz son
importantes. Un efecto matriz es un
cambio de la señal analítica causado por
cualquier componente que pueda haber en
la muestra distinta del analito. Por este
motivo se puede visualizar en la tabla 4
que el resultado que más se acerca al
valor teórico es la calibración por adición
estándar ya que este método incluye los
componentes de la matriz y puede replicar
mejor el comportamiento de la muestra.
También se pueden encontrar dentro de
las interferencias, la inestabilidad de la
temperatura ya que afecta el grado en que
un átomo dado se encuentra en su estado
fundamental, excitado o ionizado cada
uno de estos efectos modifica la magnitud
de la señal observada.
Fuente de luz: una selección correcta de
la lámpara ayuda. Ya que unas más que
otras suministran rayas espectrales lo
suficientemente ancha para el análisis de
una muestra.
La llama u horno: ya que se pueden
presentar interferencias espectrales
cuando la señal del analito se solapa con
señales debida a otros elementos o
moléculas presentes en la muestra.
Combustible y oxidante: determina la
temperatura de llama e influye en el grado
de interferencias espectrales, químicas o
de ionización.
Relación de flujos de combustible y
oxidante. Es importante según interese
trabajar con llama oxidante o reductora.
Otras son las variaciones en la velocidad
de aspiración de la muestra, cambios en el
tamaño de la gota, variaciones en la
viscosidad y tensión superficial
fluctuaciones en la presión de los gases de
la llama
CONCLUSIONES
 El contenido de calcio en la muestra
de leche descremada Zulli Milk por el
método de calibración externa fue
(143,73±0,15) ppm.
 La cantidad de calcio obtenida por el
método de calibración por adición
estándar fue (722,29±0,16) ppm
 Se obtuvo un = 0,9581 el cual
corrobora que el método de regresión
indica los acercamiento de los valores
positivos en función al método y
técnica que se está empleando para el
análisis.
 Se realizó una prueba estadística
comparando los resultados obtenidos
por ambos métodos con un valor
conocido a un 95% de confianza
ambos varían significativamente del
valor de referencia.
 Se aplicó una prueba estadística de
medidas replicada a los resultados
obtenidos por ambos método con un
95% de confianza, ambos difieren
significativamente.
BIBLIOGRAFIA
[1].Skoog, D.; Holles, J. y Nieman, T
(2001). Principios de Análisis
Instrumental. Madrid. Editorial McGraw
Hill, quinta edición. Pag. 65-75
[2].Harris, D. (2007). Análisis Químico
cuantitativo. Madrid. Editorial Reverté.
Tercera Edición. pag. 490-499
[3].R. A. Day, Jr. A.L. Underwood.
(1989) Química Analítica Cualitativa.
Hispanoamericana. Editorial Prentice
Hall.458-463.
[4] M.J. Castiñeiras, J.M. lacambra; J.M.
Querello compaño (1998) Bioquímica
clínica y patología molecular. Castiñeiras
editorial Reverte, segunda edición Pag
217-219