FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

INSTITUTO DE BIOLOGÍA

ROXY FERNANDA RODRÍGUEZ TORRES CC. 1032496547

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR II PRÁCTICA #2: Taller de histología animal y vegetal
(virtual)

Introducción La histología es el estudio de la anatomía microscópica de células y tejidos, ya sea en vegetales o en

animales. Se realiza, comúnmente, examinando células y tejidos bajo un microscopio, donde la muestra ha sido
seccionada (cortada en una sección delgada con un micrótomo), teñida y montada sobre una lámina portaobjetos para su
visualización bajo el microscopio. Los estudios histológicos pueden realizarse utilizando tejido aislado de organismos
vivos o en cultivos de tejidos, donde las células humanas o animales vivas, se aíslan y se mantienen en un entorno
artificial para diversos proyectos de investigación. (1)

Las células, si bien son la unidad básica de nuestro organismo, interaccionan entre sí para poder conformar estructuras
tan complejas como tejidos, que a su vez permiten la conformación de órganos y sistemas de órganos que posibilitan el
funcionamiento de un organismo. En el contexto celular, los animales y vegetales comparten algunas características
celulares, sin embargo, ambos han cambiado para poder adaptarse a las condiciones del ambiente y poder realizar
actividades biológicas específicas. La histología se convierte en una herramienta indispensable en el campo de la
biología para poder comprender cómo se conforman estructuralmente los organismos y cómo esta gran variedad de
formas e interacciones que se dan a nivel celular permiten la conformación de los tejidos esenciales para responder y
adaptarse al medio ambiente que los rodea.

Objetivos

- Identificar las características estructurales y celulares de los tejidos animales y vegetales.

- Establecer semejanzas y diferencias entre los tejidos básicos acorde a su estructura y función.
Metodología
● El estudiante realizará el análisis de imágenes de cortes histológicos disponibles en la web, identificando
componentes básicos que permiten identificar el tipo de tejidos en animales y vegetales.
● Se realizarán preguntas orientadoras que permitan reforzar algunos de los conceptos vistos en clase.

Actividad
Parte 1: Tejidos Animales

1. Ingrese al siguiente link http://www.histologyguide.com/index.html

2. De clic en “buscar” (Search) y escriba la palabra en inglés de un órgano que usted quiera explorar, por ejemplo, skin
(piel), heart (corazón), stomach (estómago). 3. Seleccione una de las imágenes disponibles y copie el ID de la imagen
(ejemplo: MH 111 Stomach Wall).

3. Observe la imagen y responda:

• ¿Cuál o cuáles tejidos se pueden observar en la imagen?

• ¿Cuáles células conforman ese tejido(s)?
• ¿Cuál es la función de ese tejido o tejidos en ese órgano?
• ¿Cuál corte histológico tiene la imagen? Por ejemplo, trasversal (Cross section)

4. Realice el mismo ejercicio con 10 órganos y reporte las observaciones (punto 4) de manera concisa. Puede realizar una
tabla para organizar las observaciones realizadas.

Tejidos o estructuras
ID del Órgano
Observadas
MHS 237 Skeletal Muscle Músculo esquelético
Tipo de
Células del tejido o Función del tejido o
corte y
estructura observada estructuras observadas
tinción
-Células musculares / Fibroblastos -Reacciona a estímulos para Sección
(Celulas alargadas y polinucleadas) elongarse o contraerse longitudinal
(movimiento).
-Desplazamiento
-Obtención de energía mecánica
-Mantenimiento de las
articulaciones en su sitio (postura).
-Protección
-Permiten saber en qué posición
está una parte del cuerpo
(propiocepción).
-Interocepción
-Termoregulación
-Irrigación sanguínea.

MH 058a Heart Tejido muscular: -Células musculares cardiacas -Soporte Tinción de

-Endocardio -Contracción fibras de
-Fibras de Purkinje: conducen Purkinje con
impulsos eléctricos que permiten la ácido
contracción coordinada del músculo peryódico-
cardíaco. Schiff (PAS)
-Corte
-Fibras de Purkinje histológico
longitudinal,
pero no estoy
Tejido esquelético cardiaco segura, aún es
confuso
identificarlo en
esas
-Condrocitos imágenes.
 -Cardiomiocitos

MHS 241 Umbilical Cord -Tejido conectivo embrionario
mucoso
(gelatina de Wharton)
-Contiene algunas células
mesenquimales fusiformes
-Fibroblastos estrellados o
fusiformes
-Algunas veces se puede encontrar
linfocitos o macrófagos
-Típico de la época embrionaria. Corte
-Proporciona un medio adecuado histológico
para el intercambio entre células y transversal
tejidos, es decir, la comunicación
celular por medio de distintos
mecanismos moleculares.
-Contribuyen a la defensa y
protección del cuerpo.

MHS 235 Thick Skin -Epitelio escamoso estratificado -Células epiteliales -Protección -Corte
queratinizado -Absorción histológico
-Secreción transversal

Epidermis:

-Estrato basal
 -Estrato espinoso

-Estrato granuloso

-Estrato lúcido

-Estrato córneo

Dermis:
 -Capa papilar
-Papilas dérmicas

-Capa reticular
-Glándulas sudoríparas
ecrinas

MH 136 Trachea -Tejido cartilaginoso (Hialino)
-Pericondrio (tejido conectivo
irregular denso que rodea el
cartílago):
-Células calciformes -El cartílago hialino proporciona -Sección
soporte estructural en el sistema longitudinal
respiratorio -Sección
-La tráquea en sí, es un tubo que transversal
conecta la laringe con los (Tinción HYE)
pulmones, permitiendo el paso del
aire.
-Las Glándulas sero-mucosas
-Condrocitos agregan humedad al aire y ayudan
a atrapar contaminantes.
-Músculo traqueal / músculo liso:
Controla el diámetro de la tráquea.
 -Capa fibrosa externa
-Fibroblastos
-Condroblastos

-Capa condrogénica interna

-Epitelio

-Epitelio columnar
pseudoestratificado (epitelio
respiratorio)

-Membrana basal
 -Glándulas cero-mucosas

-Cartílago traqueal

-Músculo traqueal / músculo liso:

MHS 262 Skeletal Muscle Tejido conectivo: Se distinguen dos tipos de fibras: -Endomisio: Capa delgada del Sección
-Endomisio -Tipo I: Pequeñas células tejido conectivo que rodea cada transversal
-Perimisio musculares, especializadas en célula muscular.
-Epimisio contracciones largas y lentas.
-Tipo II: Células musculares de
Receptor sensorial: Huso mayor tamaño, especializadas en
muscular contracciones rápidas (la mayoría
observadas).

Gran cantidad del suministro de

sangre viaja a través del endomisio
(capilares).

-Perimisio: Tejido conectivo que

rodea un grupo de células
musculares, formando un fascículo.

-Epimisio: Tejido conectivo denso

que rodea todo el músculo.

-Husos musculares: Detectan

principalmente cambios en la
longitud del músculo.
MH 111a Stomach Wall Cuatro capas características del -Células musculares -Protección -Corte
tracto gastrointestinal. -Células estratificadas -Secreción longitudinal
-Mucosa: -Posiblemente algunos macrófagos -Absorción
-Fosas gástricas -Filtración
(invaginaciones del epitelio La pared actúa como barrera
superficial) mecánica, biológica y funcional
-Glándulas gástricas entre el contenido de la luz del
(glándulas tubulares que se intestino y nuestro medio interno.
extienden desde la base de
las fosas gástricas hasta la
muscularis mucosa).
-Lámina propia (pequeñas
cantidades de tejido conectivo
que se encuentran entre las
fosas gástricas y las
glándulas).
-Submucosa: Tejido conectivo
irregular denso.
- Muscularis Externa: (tres capas
de células musculares)
- Capa oblicua interna
- Capa circular media
-Capa longitudinal exterior
-Adventicia (tejido conectivo
irregular laxo)

MH 091bhr Thick Skin Epidermis: -Células germinales -La capa córnea protege en la -Corte
-Queratinocitos / Células muertas fricción y otras perturbaciones histológico
-Melanocitos / Células Langerhans físicas y, gracias a sus propiedades transversal
(células dendríticas) impermeables, evita la pérdida de
agua.
-La capa granulosa participa en la
-Estrato Basal cornificación y la queratinización de
la piel, sirven como una especie de
cemento molecular de unión a las
células del estrato córneo. Tiene
enzimas con funciones de
degradación.
-Estrato Espinoso -Capa Espinosa: relacionada con la
 respuesta inmune. Determina en
gran medida las propiedades
mecánicas de la piel, como la
resistencia a daños mecánicos y a
-Estrato Granuloso la vez la flexibilidad.
-Capa basal: Generación de células
que reemplazarán a las células
muertas en capas más
superficiales.
-El tejido conectivo irregular denso
-Estrato Córneo (Dermis), sostiene la epidermis.
-Las Papilas dérmicas aumentan la
adhesión entre la epidermis y la
dermis.
Fuente: Mikael -Los Capilares Papilares aportan
Häggström, based on Dermis: nutrientes a la epidermis.
work by Wbensmith [CC -Capa Papilar Funciones generales:
BY-SA 3.0 -Protección
(https://creativecommo -Papilas dérmicas -Fotoprotección
Termoregulación
ns.org/licenses/by-
-Percepción
sa/3.0)]
-Intercambio de sustancias
-Síntesis de vitamina D
-Autoreparación de heridas
-Capilares Papilares

-Capa Reticular

MH 038-039 Epiglottis - Superficie anterior (lingual) -Células caliciformes -Las Glándulas sero-mucosas -Corte
agregan humedad al aire y ayudan histológico
a atrapar los contaminantes. longitudinal
 -Una serie de cartílagos elásticos
proporcionan un soporte
semirrígido a la epiglotis.

-Epitelio escamoso estratificado

no queratinizado

- epitelio pseudoestratificado
respiratorio.

-Zona de transición: transición

abrupta del epitelio escamoso
estratificado no queratinizante al
epitelio pseudoestratificado.

-Tejido conectivo irregular denso

(Lámina Propria).
 -Glándulas sero-mucosas
-Epitelio columnar estratificado
(conductos).
-Cartílago elástico
MH 047 Spinal Cord -Músculo esquelético
-Epitelio simple cuboidal a
columnar
-Nervios espinales
-Células nerviosas
-Neuronas motoras
-Neuronas periféricas
-Células gliales de soporte
-Células ependimarias
-Células ganglionares
- El Ganglio simpático transmite -Corte
información al cuerpo sobre el histológico
estrés y el peligro inminente, y es transversal
responsable de la respuesta de -Tinción HYE
lucha o huida.
-Los nervios espinales son
responsables de la inervación del
tronco.
 -Ganglios simpáticos

2. Tejidos vegetales
1. Ingrese a este link http://cupac.bh.cornell.edu/ 2. Donde dice “buscar” ingrese el género de una planta que usted
quiera explorar. 3. Seleccione y observe un corte histológico para la hoja, el tallo, la flor (si tiene), el fruto (si tiene),
la madera (si aplica) y la raíz. Copie el ID de cada imagen que observe y conteste:

• ¿Cuál o cuáles tejidos se pueden observar en la imagen?

• ¿Cuál es la función de ese tejido o tejidos en esa estructura (ejemplo: tallo, raíz, flor)?
• Realice este ejercicio con tres plantas de géneros diferentes. Igualmente puede realizar una tabla para reportar las
observaciones.
ID Planta Corte histológico Tejidos Función
NO ENTENDÍ ESA PÁGINA :v
 3. Ingrese al siguiente link: https://www.youtube.com/watch?v=1eGq3aZDlhU mire el
video y conteste las siguientes preguntas:

• Mencione una razón por la cual se deben fijar los tejidos y un factor que puede afectar negativamente la correcta
fijación de este.
R.
Las etapas de la técnica histológica son:
- Recogida de material
- Fijación
- Tallado
- Descalcificación
- Procesamiento
- Inclusión
- Microtomía o sección
- Tinción
- Sellado
- Observación microscópica
Luego de tener recogido el material o muestra que se va a analizar, la primera etapa del proceso es la fijación.
Tras la muerte, o después de retirar tejidos del organismo; las muestras biológicas se deterioran naturalmente, debido a
la acción de enzimas autolíticas presentes en las células además de la acción de microorganismos responsables de su
descomposición, este proceso desestabiliza las estructuras de las moléculas presentes en los tejidos, modificando su
morfología y alterando su localización.

La fijación de los tejidos tiene como objetivos:

- Evitar la autolisis y la proliferación bacteriana
- Detener el metabolismo celular, manteniendo el contenido bioquímico y preservando antígenos
- Preservar los tejidos para futuras tinciones
 - Mantener las relaciones topológicas y morfológicas de las biomacromoléculas, de la manera más aproximada a su
situación “In Vivo”.
- Mejorar la diferenciación óptica de las células preservando su identidad
La fijación es la etapa principal de las técnicas histológicas, todos los procedimientos que la siguen, dependen de
que el material esté bien preservado.

Existen varias maneras de fijar una muestra, sin embargo, se pueden clasificar los métodos de fijación en dos grandes
grupos:
- Fijación física: Promueve la conservación de la muestra por calentamiento o enfriamiento. El calentamiento
coagula las proteínas, incluyendo enzimas autolíticas y disuelve los lípidos. También es utilizado para facilitar la
difusión de fijadores químicos, algo poco recomendado. Los métodos de fijación en frío actúan retardando o
interrumpiendo los procesos de necrosis y autolisis. Está el enfriamiento de los fijadores químicos, que retarda el
proceso de autolisis, haciendo la fijación más lenta y efectiva y, el método de congelación, donde la muestra es
sumergida en una solución crio-protectora y congelada, interrumpiendo de forma inmediata la autolisis.
- Fijación química: Es el proceso de estabilización de biomoléculas, por la acción de agentes químicos. Los
principales grupos de fijadores son: agentes oxidantes, agentes desnaturalizantes, fijadores de mecanismo
desconocido, fijadores aldehídos y sus combinaciones.

En la rutina de laboratorio, no se utiliza un fijador, sino mezclas fijadoras, que combinan mecanismos de acción,
intentando minimizar los efectos químicos y físicos indeseables provocados durante el proceso.
La clase de fijadores más utilizada en histotecnología son los fijadores aldehídos, por su empleo sencillo, bajo
costo, resultados uniformes y calidad satisfactoria.
El volumen del fijador debe ser 20 veces mayor que el tamaño del fragmento de tejido, dado que las moléculas de
los fijadores se unen químicamente al tejido. Volúmenes inadecuados resultan en el agotamiento de dichas moléculas
antes de cumplir con su función, lo anterior es un error muy frecuente e irreparable. Los fijadores son eficientes en un
rango de concentración que no debe ser alterado (pH de la solución fijadora, osmolaridad, grosor de la muestra).
Además, cuando la muestra es muy gruesa, la difusión del fijador al interior de los tejidos es lenta, pudiendo
acarrear la autólisis de la parte interna de los tejidos que se quieren fijar.
Por otro lado, la exposición prolongada de la muestra a ciertos fijadores, puede causar el endurecimiento y la
retracción de la muestra, generando un daño irreparable.

• ¿Por qué se debe realizar la descalcificación en algunos tejidos y cuál es el rol del EDTA en este proceso?
R.
El tejido óseo presenta un matríz extracelular con componentes minerales y orgánicos de consistencia pétrea que no
permiten una apropiada visualización bajo el microscopio óptico, por lo tanto, para la correcta visualización, se debe
realizar la descalcificación, ya sea mediante el uso de descalcificadores a base de ácidos, histoquímicos, soluciones
descalcificadoras comerciales, resinas de intercambio iónico o descalcificadores electrolíticos.
Los descalcificadores más empleados son a base de ácido, que solubilizan el calcio, pero actúan sobre los
constituyentes del tejido, causando daños morfológicos irreparables. Aunque, además de los descalcificadores a base de
ácidos, se pueden emplear los métodos histoquímicos, que prácticamente no provocan daños en los tejidos, por ejemplo,
el EDTA, que se une al calcio presente en los cristales de hidroxiapatita de la matriz mineral de los tejidos, quelando
dicho componente.

• ¿En qué consiste el proceso de deshidratación de la muestra y por qué debe realizarse?
R.
El agua presente en los tejidos, no se mezcla con la parafina necesaria en el proceso de imbibición, por eso es necesaria
la retirada completa del agua. La deshidratación consiste en retirar el agua de los fluidos tisulares y fijadores acuosos,
mediante la difusión de agentes deshidratantes.
Existen varios agentes deshidratantes, el Etanol es el más común, lo que se hace es cambiar el agua por una
solución más sólida que le brinde mayor dureza y resistencia al tejido para ser cortado.
 • Si durante la microtomía del tejido (corte) se presentan problemas con la muestra, ¿cuáles pueden ser las
posibles causas de ello?
R.
Cada laboratorio debe utilizar sus protocolos de procesamiento, teniendo en cuenta factores como:
- Tamaño de la muestra
- Tipos de reactivos utilizados
- Especie animal
- Propiedades de los tejidos
- Presencia de vacío
- Temperatura durante el procesamiento

La muestra debe pasar por diferentes baños a diferentes concentraciones, es necesario respetar el tiempo de
exposición a cada baño durante el procesamiento, para evitar problemas que puedan interferir en la calidad de los cortes
durante la microtomía. Tras el procesamiento, es necesario que el tejido sea incluido en un molde con parafina
(inclusión), que una vez solidificada, permitirá la microtomía.

Durante la inclusión, se deben seguir algunas recomendaciones importantes:

- La temperatura de la parafina no debe exceder 5°c por encima de su punto de fusión, puede causar daños al
tejido.
- Las pinzas deben estar siempre calientes, de lo contrario, pueden dañar el tejido.
- Solo incluir tejidos muy bien procesados, los mal procesados pueden verse técnicamente dificultosas las
secciones histológicas.
- La inclusión deber realizarse una vez finalizada la imbibición, pues los tejidos no deben permanecer mucho tiempo
en la parafina caliente.
- El tejido debe estar uniformemente apoyado en el fondo del molde, lo que permite que la cuchilla alcance todas las
áreas al ser cortado.
- Precauciones en la acomodación espacial y de orientación del tejido en el molde, facilitarán la microtomía y al
 mismo tiempo, permitirán un análisis correcto de la muestra.

Luego de la inclusión, los bloques están listos para ser seccionados en finas lonchas, a fin de permitir su
visualización, tanto de sus células, como del compartimiento extracelular, a través de microscopía óptica (microtomía).

La microtomía es un delicado procedimiento que garanticen cortes de alta calidad, entre ellos se destaca:
- Tipo de microtomo
- Cuchillas
- Procedimiento de lavado e identificación de los portas
- La utilización de sustancias adhesivas
- La ejecución de la microtomía
- Problemas técnicos más comunes
En la rotulación de los portas no se recomienda el uso de lápiz de grafito, ya que puede dejar sobre la muestra residuos
negros indeseables.
En conclusión, la falla procedimental en cualquiera de las etapas, pueden generar un problema en la microtomía, e
incluso en el momento mismo de la microtomía, puede verse afectada la calidad del corte, debido ya sea a la
implementación de cuchillas sin el filo apropiado, con la angulación incorrecta o, incluso la inadecuada fijación de los
bloques al microtomo pueden afectar el proceso.

• Consulte una tinción diferente a la hematoxilina-eosina, ¿cuál es su principio químico? ¿qué estructuras del tejido
permite identificar?
R.
La tinción es el teñido de las células que posibilita su observación. Como ellas no poseen una coloración propia, de dicha
forma se pueden distinguir la visualización de distintas estructuras y sustancias en los tejidos.

Entre los tipos de tinción utilizados está:

- Azul de toluidina: Es un colorante catiónico (básico) metacromático de color azul que, en suspensión presenta un
color azul, mientras que, cuando se expone a estructuras ricas en grupos aniónicos (heparina, condroitín sulfatos,
 etc.) las moléculas de esta sustancia se ordenan formando agrupaciones que alteran la longitud de onda
absorbida, virando del color azul al color rojo. Este efecto se denomina metacromasia.
Este colorante tiñe estructuras basófilas, tales como la cromatina. Se puede comportar como colorante
ortocromático (tiñe de color azul) o metacromático (tiñe de color violeta-rojo), dependiendo del pH y de la naturaleza
química de la sustancia teñida.
Se usa frecuentemente como colorante ortocromático para teñir tejido nervioso, donde tiñe la heterocromatina y
los gránulos de Nissl (acúmulos de cisternas de retículo endoplásmico rugoso) de los somas neuronales, así como las
fibras nerviosas amielínicas y células glíales.
Se usa frecuentemente como colorante metacromático en las estructuras ricas en proteoglucanos sulfatados,
como el heparán sulfato, presente, por ejemplo, en el cartílago joven (condroblastos y matriz inmadura) y en los gránulos
de las células cebadas.

Sección de una espina de un tojo. Nótese el color verde brillante en

la cutícula y el azul claro de las fibras de esclerénquima, mientras
que las paredes de las células parenquimáticas aparecen de color
púrpura-violeta.

4. Realice un cuadro comparativo que incluya grandes diferencias en los tejidos que conforman a los animales y los
vegetales.
 TEJIDO ANIMAL
Nutrición heterótrofa, debe incorporar al organismo
sustancias nutritivas de tipo orgánico.
Gran variedad de formas en las células
Gran variedad de células especializadas
Crecimiento limitado
Carece de celulosa y, por lo tanto, carece de pared
celular.
Sistema nervioso incorporado en la mayoría
Gran desarrollo de motilidad en la mayoría
Reservas nutritivas constituidas fundamentalmente por
glucógeno.
Productos de desecho: Fundamentalmente CO2 y
desechos nitrogenados, de ahí la necesidad de órganos
de excreción, ej: Riñones.
Avascular
Bibliografía
1. ROSS MH y col. “Histología. Texto y atlas color con Biología Celular y Molecular “6a edición, Ed. Panamericana, 2011.
TEJIDO VEGETAL
Nutrición autótrofa, mediante el proceso de la fotosíntesis.
Células generalmente de forma rectangular
Variedad de células más limitadas
Crecimiento ilimitado
Presencia de pared celular de celulosa: cadena larga de
glucosas, rígida e inerte.
Carece de sistema nervioso
Salvo por movimientos autóctonos, no tienen motilidad
Reservas nutritivas constituidas fundamentalmente por
almidón.
Productos de desecho: Oxígeno en la fotosíntesis y CO2
en el metabolismo. Ya que no tiene desechos
nitrogenados, no es necesario órganos de excreción.
Vascular