PRÁCTICA No: 5

INTEGRANTES: Cevallos Valeria, Guatapi Isabel, Masabanda Kevin, Sánchez

Miguel, Vaca Estefanía
TEMA: ANÁLISIS DE METALES Y EXTRACCIÓN SECUENCIAL

OBJETIVOS:
• Realizar el análisis de metales y extracción secuencial por medio de digestión con
microondas y absorción atómica.
• Comprender la importancia del análisis de metales con respecto al impacto que tienen los
metales pesados en el medio ambiente.
• Analizar el método de extracción secuencial BCR y su importancia en el análisis de metales
y extracción secuencial.
• Estudiar el funcionamiento de los equipo de digestión asistida por microondas y la
absorción atómica por electroscopia
• Identificar el fundamento de la absorción atómica en el análisis de metales pesados.
MARCO TEÓRICO:

Análisis de metales

El análisis de metales se realiza con el objetivo de poder identificar los metales pesados y la
concentración con la cual se encuentran presentes, debió a que, representan un gran peligro debido a
su toxicidad para el ambiente y sus repercusiones fisiológicas para los organismos que consuman agua
contaminada con estos elementos. Los metales pesados como por ejemplo el mercurio, cadmio,
arsénico, cromo, talio y plomo resultan tóxicos en bajas concentraciones y además de no ser
degradables estos compuestos se pueden acumular en los organismos que los ingieren ya sea de manera
directa o indirecta, este proceso es conocido como biomagnificación (Pérez et al., 2004).

Los metales pesados o metales traza se originan de manera natural en el ambiente y resultan tóxicos
cuando sobrepasan la concentración con la que se encuentran en la naturaleza, este cambio de
concentración puede ser provocado por la minería y mal manejo de residuos industriales, ejemplo de
ello es la contaminación por Plomo y Cadmio, los cuales afecta al sistema nervioso central y pueden
provocar enfermedades neuronales (Gaitan, 2004).

Análisis de metales por digestión ácida con microondas

Los métodos de digestión son utilizados para reducir las posibles interferencias provocadas por la
presencia de materia orgánica y los ácidos como el ácido nítrico, ácido sulfúrico y ácido clorhídrico
son utilizados con el objetivo de romper la matriz de la muestra y dejar los elementos de interés libres
en solución, el ácido a utilizar dependerá de la matriz de la muestra. Con el uso de microondas la
muestra junto con los ácidos es calentada en vasos cerrados de teflón a una temperatura de entre 200°C
– 240°C, puesto que, en este intervalo de temperatura es posible lograr la degradación parcial o
completa de la muestra, al resultado de la digestión se lo analiza en el espectrofotómetro con le fin de
encontrar la concentración de los elementos (Piñero, 2016).
Análisis de metales por espectrofotometría de absorción atómica

En el análisis de metales por espectrofotometría de absorción atómica las moléculas de la muestran son
disociadas en sus respectivos átomos utilizando radiación específica de cada elemento. La técnica de
absorción atómica en flama consta de la muestra líquida que es aspirada a través de un tubo capilar
para ser transportada a un nebulizador, en donde la muestra se desintegrará y posteriormente formará
pequeñas gotas de líquido, el cual, será conducido a una flama donde se formarán los átomos, los cuales
absorberán la radiación emitida por una lámpara específica para cada átomo, la radiación absorbida
estará en función de la concentración de cada elemento. La señal provista por la lámpara llega a un
monocromador que diferencia las señalas y posteriormente las lleva a un detector y amplificador para
poder leer los resultados (Remache, 2013).

Extracción secuencial de metales pesados

La extracción secuencial de metales consiste en la exposición de la muestra a diferentes soluciones

reactivas con características fisicoquímicas diferentes con el fin de determinar perfiles de especiación,
es decir, identificar los metales pesados presentas en diferentes fracciones de un sólido, existen
diferentes metodologías para la extracción secuencial, siendo una de ellas la propuesta por la Comisión
Europea mediante el Community Bureau of Reference (BRC) (Martínez & Rivero, 2005)

Método BRC

El método BRC permite obtener las fracciones intercambiables, fracciones reducibles, fracción
oxidable y la fracción residual, las cuales, poseen diferentes propiedades fisicoquímicas, estas
fracciones se obtienen de manera secuencial, por lo cual, el método consta de cuatro etapas (González
et al., 2011).

• Etapa 1 (Fracción intercambiable): En esta esta se encuentra la fracción con mayor

biodisponibilidad, en la cual, están presentes metales absorbidos en la superficie sólida del
suelo que se encuentran retenidos por una interacción electroestática débil, por lo cual, los
metales pueden ser separados por intercambio iónico.
• Etapa 2 (Fracción reducible): En esta etapa se extraen los metales asociados a óxidos e
hidróxidos de hierro y manganeso ya sea por coprecipitación, adsorción, formación de
complejos de superficie, intercambio iónico o la penetración en la estructura cristalina
• Etapa 3 (Fracción oxidable): En esta etapa se encuentran melates asociado a la materia orgánica
del suelo y para poder liberar las formas solubles de los metales, se aplican condiciones
oxidantes agresivas.
• Etapa 4 (Fracción residual): En esta fracción se encuentran los metales que no se lograron
extraer en las etapas anteriores, debido a que, pueden estar recluidos en la estructura cristalina
de minerales primarios.
 PARTE EXPERIMENTAL:

MATERIALES, REACTIVOS EQUIPOS INFORMÁTICOS ETC.

Digestión asistida con microondas Absorción atómica por electroscopía
Materiales y equipos: Materiales y equipos:
• Tubo de teflón de alta resistencia • Espectrofotómetro
• Tubo para análisis • Horno de grafito o la llama
• Balanza • Lámpara de cátodo hueco
• Espátula • Lámpara de deuterio
• Campana de extracción • Agua destilada
• Chaqueta de polieteracetona
• Soporte
• Llave calibrada
• Rotor
• Sistema de digestión Ethos up
• Agua extrapura

Reactivos: Reactivo:
• Ácidos fuertes correspondiente • Acetileno
Muestra: Muestra:
• Agua, alimentos, entre otros • Agua residual
• Agua pura

PROCEDIMIENTO

Observación: Para el desarrollo de la práctica cada grupo debe una muestra de agua residual
que contenga sólidos visibles y una muestra de suelos. Ingrese al laboratorio con mandil, guantes
y gafas. Antes de iniciar su trabajo experimental debe verificar cuidadosamente que todo su
material de vidrio está limpio y seco. De lo contrario, proceda a lavarlo con agua y jabón y secarlo
en la estufa. Identifique los químicos con los que va a trabajar, riesgos, condiciones de
manipulación y normas de seguridad. Obedezca las recomendaciones dadas por el docente. Use
volúmenes pequeños de reactivos puros, identifique todos los recipientes que contienen los
reactivos

https://www.youtube.com/watch?v=MS9v8DxbAlw
Para preparar una muestra para digestión, se coloca la muestra en los tubos de teflón de alta resistencia.
Se coloca el vaso dentro de la campana, se añade el ácido correspondiente y se coloca el vaso dentro
de la chaqueta de poli éter para hacer el cerrado con una llave de torque. Se coloca la muestra en el
soporte del rotor y se cierra la puerta del equipo. Se observa el color blanco antes de iniciar, rojo cuando
se inicia la corrida, color azul en el enfriamiento y verde cuando la muestra está lista. Se puede
visualizar la temperatura, la gráfica de la digestión y la potencia aplicada; las ventilaciones y si existe
una deformación en el rotor. Además, se observan métodos precargados para muestras cosméticas,
ambientales, alimenticias, entre otros. Dependiendo del método escogido, se tienen recomendaciones
de cómo preparar la muestra, el tipo de ácido a utilizar. Se acepta el método y se retira el segmento del
rotor, se abre lentamente, se destapa el dial y se coloca la muestra en el tubo con agua ultrapura hasta
aforar a un volumen determinado. Con la muestra aforada se puede proceder a la parte analítica.
https://www.youtube.com/watch?v=t_a8Y7bLWZg
La radiación electromagnética, son ondas eléctricas y magnéticas en forma de 90° reconocidas por
longitudes de onda y frecuencias en un espectro electromagnético. Hace años, el científico Bohr hizo
un postulado donde el átomo tenía una similitud con el sistema planetario con un núcleo donde se
encuentran los protones y los electrones girando alrededor. Para que un átomo se encuentre en su estado
excitado el electrón debe absorber la energía en un proceso llamado absorción atómico. Cuando el
átomo regresa de su estado excitado al esto vital, se libera energía en forma de luz. Existen otras
opciones donde el átomo hace un salto más alejado donde se aplica la ecuación ΔE=hv, donde h es la
constante de plank y v es la frecuencia. La fórmula utilizada para la absorción atómica es ΔE=hC/λ,
donde λ es la longitud de onda característica del elemento.
En el análisis cuantitativo de la absorción atómico, la transmitancia se define como la razón entre la
intensidad final y la intensidad inicial; aunque en la práctica se utiliza la fórmula A=log(Io/I). La ley
de Lambert y Beer establece que hay una relación lineal entre la absorbancia y la concentración, es
decir si se aumenta la concentración se aumenta la absorbancia. Existe una desviación en el tiempo si
se aumenta la concentración de forma que ya no es lineal. En el equipo se mide la transmitancia o
absorbancia, es importante preparar el blanco sin la presencia de contaminantes para evitar que la curva
inicie desde un punto diferente a cero.
Los equipos que se utilizan pueden ser manuales o automáticos con diferentes rangos de lámparas para
colocar como fuentes de luz. Los componentes básicos de un espectrofotómetro son: fuente de luz,
sistema de atomización y la medida de luz específica. Existen diferentes tipos de lámparas como la
lámpara de cátodo hueco, lámpara de descarga sin electrodo, entre otras. Las fuentes de atomización
pueden ser de estilo cámara spray – end cap, de llama o quemadores. El sistema óptico puede ser ya
sea el slit de entrada o el slit de salida y se encarga de convertir la respuesta en una señal detectada por
un estado sólido.
https://www.youtube.com/watch?v=W3G5_HsLpoo
Para la determinación de cobre en aguas residuales; en el caso de ser una muestra de suelo se debe
realizar una digestión previa en microondas. Siempre para este ensayo se utilizan muestras líquidas con
una llama o un horno de grafito. Para el cobre se tiene una llama de aire, se espera a que se estabilice
la señal. Cuando ya se tiene estabilizada la lámpara, se encera el equipo y se procede al muestreo. Se
coloca la muestra en la llama y se observa la señal en el equipo; dependiendo de cuanto cobre contenga
se observará mayor o menor señal. Entre cada muestra se hace un lavado con agua destilada de
laboratorio para lavar todo el circuito, cuyos niveles de cobre son prácticamente 0. Mide la muestra 3
veces y se tiene con una media menor al 10. Hasta obtener una recta de calibrado con dos patrones en
una gráfica concentración frente a absorbancia. Para aguas potables se debe medir en partes por billón
en un horno de grafito, debido a la legislación.
CÁLCULOS.

RESULTADOS

CONCLUSIONES
• El análisis de metales se realiza para detectar aquéllos elementos químicos que causan
efectos negativos en el medioambiente aún en concentraciones bajas, incluyendo elementos
como el cromo, cobalto, níquel, cobre, zinc, etc.
• Es necesario realizar análisis de metales ya que la contaminación por éstos puede derivar en
diversos efectos a la salud y al ambiente, dependiendo del elemento en particular. Su
toxicidad depende de la naturaleza, cantidad, forma química y de su capacidad de
acumulación en el organismo de los seres vivos.
 •
El método de extracción secuencial BCR nos ayuda a obtener información con
características integrales sobre el comportamiento de los metales pesados, lo cual permite
evaluar el riesgo potencial de los residuos, suelos o sedimentos una vez expuestos a la
intemperie, por lo que tiene una importancia directa para el bienestar de la sociedad.
• Los equipos de digestión asistida por microondas y la absorción atómica por electrocopia
son de gran importancia para el análisis de suelos, alimentos y demás elementos a ser
analizados con la finalidad de comprobar que estos sean seguros para los seres vivos y el
medioambiente en general.
• Actualmente la detección de los metales pesados en el agua se realiza mediante
espectrofotometría de absorción atómica, hay que tener en cuenta que la metodología a
seguir se basara en el tipo de muestra que se tenga, es decir, si esta se encuentra en estado
líquido o sólido.
RECOMENDACIONES
• Seguir las normas de seguridad dentro del laboratorio para evitar posibles accidentes.
• Revisar y comprobar que los equipos se encuentren calibrados.
• Utilizar siempre la campana de extracción ya que después de la digestión existen vapores.
• Realizar varios muestreos para poder comparar los resultados obtenidos.
• Revisar las curvas obtenidas en los dispositivos de absorción atómica periódicamente.
REFERENCIAS

• Gaitan, M. S. (2004). Determinación de metales pesados totales con digestión ácida y solubles
lectura directa por espectrofotometría de absorción atómica. 02, 16.
• González, E., Tornero, M. A., Sandoval, E., Pérez, A., & Gordillo, A. J. (2011).
Biodisponibilidad Y Fraccionamiento De Metales Pesados En Suelos Agrícolas Enmendados
Con Biosólidos De Origen Municipal. Revista Internacional de Contaminación Ambiental,
27(4), 291-301.
• Martínez, Y., & Rivero, C. (2005). Evaluación de diferentes métodos para determinar las
fracciones de metales pesados presentes en el suelo. 8.
• Pérez, J. B. C., Mendoza, C. L., & Gómez, A. (2004). Determinación de metales pesados en
aguas y sedimentos del Río Haina. Ciencia y Sociedad, 29(1), 38-71.
• Piñero, J. (2016). Optimización de un método de extracción de metales en alimentos (nueces
de Brasil) mediante hidrólisis enzimática asistida por energía de microondas (EHMAE). 51.
• Remache, M. (2013). Validación de métodos para el análisis de metales en diferentes
matrices por espectrofotometría de absorción atómica. Universidad Central del Ecuador.

FINALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA
Terminado el trabajo practico en el laboratorio, etiquetar las soluciones y almacenar en la
refrigeradora para próximas prácticas. Entregar al docente todo el material y salir en silencio y
orden.
CUESTIONARIO
• Resumen del articulo

Los elementos tóxicos llegan a entornos costeros a través del agua de los ríos, la escorrentía o el vertido
directo. Se cree que las zonas intermareales actúan como sumideros de elementos generados por las
actividades humanas. La toxicidad de los metales traza depende de su capacidad de ser captados por los
seres vivos y de su capacidad para interferir en los mecanismos bioquímicos. Por lo tanto, el contenido total
de un elemento no siempre es un buen indicador del riesgo medioambiental, y la distribución del elemento
en las fracciones más lábiles o inestables. Las explotaciones mineras representan una de las actividades
humanas con impactos más fuertes sobre el medio ambiente natural. Dichos impactos incluyen el aumento
de la biodisponibilidad y la movilización de elementos tóxicos y la consiguiente contaminación de las aguas
superficiales.

La Ría de Ortigueira, situada en el NO de la Península Ibérica es una zona ambientalmente bien conservada;
sin embargo, los sedimentos muestran altas concentraciones de elementos tóxicos. Para establecer la
influencia de la actividad minera en los sedimentos de la Ría de Ortigueira, se realizó un muestreo intensivo.
En total, se recogieron 117 muestras de sedimentos superficiales (0-20 cm) en toda la ría. Las muestras se
almacenaron a baja temperatura hasta su transporte al laboratorio, donde se midieron el pH y el potencial
redox en un plazo de 24 horas, utilizando electrodos específicos. Las muestras de sedimento se secaron y se
tamizaron para la determinación del tamaño de las partículas por el método de la pipeta Robinson. El
contenido de carbono total (CT) se determinó en la muestra molida en el analizador LecoTruSpec CHN. El
CaCO3 se determinó por el método volumétrico (prueba del calcímetro Bernard), y el carbono orgánico
total (COT) se determinó como la diferencia entre el contenido de carbono total y CaCO3.

El contenido total de metales se determinó por espectrometría de adsorción atómica. Y la digestión de 0,5 g
de muestras secas molidas en ácido en un horno de microondas durante 25 minutos. Además, se utilizaron
estándares de suelo certificados para validar el método de extracción de metales traza con una tasa de
recuperación media > 90%. Los resultados dieron a conocer que en algunas zonas, las concentraciones de
Ni (60-1080 mg kg 1) y Cr (9-567 mg kg 1) eran de 10 a 20 veces mayores, y la concentración de Co era
dos veces mayor que los valores medios de referencia sugeridos para los sedimentos marinos y que los
valores observados en sedimentos marinos de otras zonas de Galicia, mientras que las concentraciones de
otros elementos tóxicos estaban dentro de los rangos normales.

El análisis de componentes principales de los datos reveló los factores más importantes en relación con la
composición de los sedimentos en la ría. El PCA reveló que el enriquecimiento metálico se debía al vertido
de lodos residuales de una mina de peridotita. El estudio de las corrientes marinas mostró que la salida de
los residuos contaminados hacia la zona exterior está restringida por la baja energía de las corrientes
residuales, por lo que los lodos quedan atrapados en las zonas internas. De acuerdo con las condiciones
redox, la fracción más importante fue la fracción F3 (es decir, oxihidróxidos de Fe), con la que se asoció
entre el 50 y el 95% de la fracción más lábil de cada metal asociado. Esta situación supone claramente un
riesgo ecológico potencial moderado asociado con la disolución reductora de los oxihidróxidos de Fe antes
de que el sedimento para todas las zonas de la ría, alcanzando valores elevados cerca de la desembocadura
del río Landoi.

Por último el fraccionamiento geoquímico mostró que la mayoría de los metales están asociados a
oxihidróxidos de Fe que pueden volverse inestable y liberar metales adsorbidos o coprecipitados,
especialmente Ni. Además de que Las formas más fácilmente reducibles del Fe son las formas amorfas o
 poco cristalinas (es decir, la ferrihidrita y la lepidocrocita), que representan entre el 30 y el 60% de todos
los oxihidróxidos de Fe, en los sedimentos de la Ría de Ortigueira y con los que se asocian entre 30 y 60%
de los metales están asociados.

2.- Analizar la extracción secuencial utilizada y comparara con la BCR que ventajas y desventajas
presentan.

Extracción secuencial utilizada Bureau Commun de Recherche (BCR)

• La extracción secuencial de las fracciones se
realizó en campo húmedo
• Se considera los metales intercambiables,
asociados a carbonatos, asociados a intercambiable (metales en disolución unidos a
oxihidróxidos de hierro y asociados a pirita para
el estudio
• Las muestras para la fracción pirítica fueron
tratados para eliminar el Fe asociado con los
silicatos, y el Fe unido a la materia orgánica
• Se utilizo como reactivos como: MgCl, HNO3,
citrato de sodio, así como procedimientos como
los de agitación y centrifugación para tratar las
muestras.
• El fraccionamiento geoquímico, se evidencio
mayor cantidad de metales
• Se muestra una técnica relativamente compleja
pero que muestra unos resultados muy detallados
para las fracciones analizadas en las muestras
• El método requiere mucho tiempo para ser
realizado.
• Divide el contenido total del metal en estudio,
presente en una muestra, en tres fracciones
• Se toma en consideración la fracción
carbonatos e intercambiables), fracción
reducible (metales ligados a oxihidróxidos de
hierro y manganeso), fracción oxidable (metales
unidos a materia orgánica y sulfuros) y la
fracción residual (metales unidos a minerales
primarios como los silicatos)
• Las tres fracciones, denominadas fracción
soluble en ácido, fracción reducible y fracción
oxidable, se liberan por extracción secuencial en
condiciones operativas bien definidas utilizando
sucesivamente ácido acético, clorhidrato de
hidroxilamina y peróxido de hidrógeno.
• Aunque el protocolo de este método no
contempla la fracción residual en virtud de que
esta es extremadamente estable y que no
representa peligro de movilización de metales
pesados, se recomienda determinarla a efecto de
hacer una revisión interna del método

3.- Que influencia tiene la presencia de la mina en la zona de estudio y en la distribución de los metales
totales

El enriquecimiento de metales en la Ría de Ortigueira es el resultado del vertido de lodos residuales de

una mina de peridotita, ya que se evidencia en los sedimentos altas concentraciones de elementos tóxicos,
como son Ni (60-1080 mg kg-1) y Cr (9-567 mg kg-1). Provocando de este modo una alta toxicidad y un
aumento del riesgo ecológico en las zonas aledañas.

4.- Cuales son las fracciones dominantes de la extracción secuencial en las tres zonas

De acuerdo con las condiciones redox, la fracción más importante fue la fracción F3 (es decir, oxihidróxidos de
Fe), con la que se asoció entre el 50 y el 95% de la fracción más lábil de cada metal asociado con la disolución
reductora de los oxihidróxidos de Fe.

5.- A que formas geoquímicas se asocia la fracción dominante de la extracción secuencial

El fraccionamiento geoquímico mostró que la mayoría de los metales están asociados a oxihidróxidos de Fe que
pueden volverse inestable y liberar metales adsorbidos o coprecipitados, especialmente Ni. Además de que Las
formas más fácilmente reducibles del Fe son las formas amorfas o poco cristalinas (es decir, la ferrihidrita y la
lepidocrocita), que representan entre el 30 y el 60% de todos los oxihidróxidos de Fe, en los sedimentos de la
Ría de Ortigueira.