INGENIERÍA

GENÉTICA
Y
BIOTECNOLOGÍA
 Historia
1919: Karl Ereky, ingeniero húngaro, utiliza por primera vez la palabra
biotecnología.
1965: El biólogo norteamericano R. W. Holley «leyó» por primera vez la
información total de un gen de la levadura compuesta por 77 bases, lo que
le valió el Premio Nobel.
1970: el científico estadounidense Har Khorana consiguió reconstruir en el
laboratorio todo un gen.
1973: Se desarrolla la tecnología de recombinación del ADN por Stanley
Cohen, y Herbert Boyer.
1976: Har Khorana sintetiza una molécula de ácido nucleico compuesta por
206 bases.
1976: Robert Swanson y Dr. Herbert Boyer crean Genentech, la primera
compañía de biotecnología.
1982: Se produce insulina para humanos, la primera droga derivada de la
biotecnología.
1983: Se aprueban los alimentos transgénicos producidos por Calgene. Es la
primera vez que se autorizan alimentos transgénicos en Estados Unidos.
2003: Cincuenta años después del descubrimiento de la estructura del ADN,
se completa la secuencia del genoma humano.
• La ingeniería genética puede definirse como
un conjunto de técnicas, nacidas de la Biología
molecular, que permiten manipular el genoma
de un ser vivo.
• Se realiza a través de las enzimas de
restricción que son capaces de "cortar" el ADN
en puntos concretos. Se denomina ADN
recombinante al que se ha formado al
intercalar un segmento de ADN extraño en un
ADN receptor. Por ejemplo, la integración de un
ADN vírico en un ADN celular.
Las enzimas de
restricción son
ENDONUCLEASAS
(tijeras moleculares).
Cortan el ADN:
– Cada enzima reconoce
una secuencia de
nucleótidos y corta en
ese punto cada cadena
de ADN.
– Los extremos libres son
pegajosos porque
pueden unirse a otros
fragmentos cortados por
las mismas enzimas de
restricción
 La ingeniería genética incluye un conjunto de
técnicas biotecnológicas, entre las que
destacan:
1. la tecnología del ADN recombinante: con la que es
posible aislar y manipular un fragmento de ADN de un
organismo para introducirlo en otro.
2. La secuenciación del ADN: Técnica que permite saber
el orden o secuencia de los nucleótidos que forman
parte de un gen.
3. la reacción en cadena de la polimerasa (PCR): con la
que se consigue aumentar el número de copias de un
fragmento determinado de ADN, por lo tanto, con una
mínima cantidad de muestra de ADN, se puede
conseguir toda la que se necesite para un determinado
estudio.
 TECNICAS DE INGENIERIA GENÉTICA
A) TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE:
RECOMBINANTE permite aislar un fragmento
de ADN de un organismo (transgén) e insertarlo en el ADN de otro
organismo que puede ser de otra especie.
• Esta técnica permite la obtención de transgénicos: organismos que portan
genes de otra especie Molécula A Molécula B

Digestión de ambas moléculas con la

misma enzima de restricción, BamHI

Extremos
cohesivos

Mezclar

Tratar con ADN-ligasa

ADN recombinante
La síntesis de insulina humana a partir de bacterias o
levaduras, para ello se incorpora a estos microorganismos el
gen humano que codifica la síntesis de esta proteína
B) REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA, TÉCNICA PCR
• Permite obtener grandes cantidades de ADN a partir de una muestra muy pequeña
Aplicaciones:
• Obtención de cantidad suficiente de ADN para su secuenciación (leer el orden de las
bases nitrogenadas) y poder determinar si existe alguna mutación o simplemente
conocer la disposición normal de las bases (se utiliza en el estudio de los genomas)
• Análisis de ADN fósil
• Estudios de parentesco evolutivo: el grado de similitud en el ADN permite establecer
relaciones de parentesco entre especies
• Identificación de especies
• Determinación de huellas genéticas, permite obtener suficiente cantidad de ADN a
partir de muestras pequeñas (gotas de sangre, semen, bulbo de cabello, restos de
piel) para poder realizar estudios comparativos (investigaciones policiales, medicina
forense, pruebas de paternidad)
UNIDAD
Así se realiza la técnica PCR
7 El fragmento de ADN que
se desea amplificar se
calienta para que las dos Calentamiento
hebras se separen.

Las hebras separadas se

enfrían y se tratan con ADN
polimerasa y nucleótidos para ADN polimerasa Nucleótidos Enfriamiento
formar las cadenas
complementarias de cada
hebra de ADN.
Calentamiento
Se inicia un nuevo
ciclo en el que los
fragmentos de partida
son los dos
fragmentos de ADN
formados en el ciclo.
ADN polimerasa Nucleótidos Enfriamiento

Se forman las
cadenas
complementarias de
ADN de las hebras
separadas. Después de 20 ciclos de este proceso, se logra
disponer de más de un millón de copias de la
molécula.
C) SECUENCIACIÓN
• Consiste en poder determinar la secuencia de nucleótidos (de bases
nitrogenadas) de un fragmento de ADN
• Permite identificar posibles mutaciones diagnosticar enfermedades
asociadas a estas mutaciones: DIAGNÓSTICO MOLECULAR
• El diagnóstico molecular permite diagnosticar la enfermedad antes de que
se manifieste clínicamente lo cual puede permitir un mejor control de la
misma.
• Se utiliza en el diagnóstico prenatal, en el consejo genético y en la
selección de embriones para evitar enfermedades hereditarias
• En investigación forense, por ejemplo, identificación de individuos o en
pruebas de paternidad.
• En medio ambiente, por ejemplo, para la identificación de especies
animales y vegetales, la conservación de recursos genéticos animales, la
identificación de organismos genéticamente modificados, la identificación de
especies bacterianas
 Secuenciación de ADN: método Sanger

1. Este método utiliza didesoxirribonucleótidos, cuya

incorporación a la secuencia de ADN provoca la
terminación de la cadena, ya que no se puede añadir
ningún ribonucleótido más al extremo en el que se
incorporan.
2. Como primer requisito se necesita un gran cantidad
de la muestra, por lo que es necesario clonar el
fragmento de ADN seleccionado. A continuación, se
desnaturaliza el ADN y se obtienen cadenas simples
que se incuban en un tubo de ensayo junto con el resto
del material.
3. Se inicia la síntesis de nuevas cadenas de ADN que utilizan como molde
el ADN que se quiere secuenciar. Las cadenas incorporan un
desoxirribonucleótido por azar e interrumpen su síntesis. Al realizar miles de
copias se obtienen múltiples cadenas de longitud variable, que se
diferencian en un nucleótido.

Al identificar los
desoxirribonucleótidos
terminales de las
cadenas se puede “leer”
la secuencia de
nucleótidos del fragmento
de ADN analizado.
 Clonación reproductiva: Dolly
El equipo de Ian Wilmut, del Instituto Roslin de Edimburgo
comunicó en 1997 que habían logrado una oveja por
clonación a partir de una célula diferenciada de un adulto.
Esencialmente el método (que aún presenta una alta tasa de
fracasos) consiste en obtener un óvulo de oveja, eliminarle
su núcleo, sustituirlo por un núcleo de célula de oveja adulta
(en este caso, de las mamas), e implantarlo en una tercera
oveja que sirve como “madre de alquiler” para llevar el
embarazo. Así pues, Dolly carece de padre y es el producto
de tres "madres": la donadora del óvulo contribuye con el
citoplasma (que contiene, además mitocondrias que llevan
un poco de material genético), la donadora del núcleo (que
es la que aporta la inmensa mayoría del ADN), y la que
parió, que genéticamente no aporta nada.
Clonación de animales

Oveja adulta A Oveja adulta donante

célula de ubre de la óvulo no fecundado de

oveja A la oveja donante

eliminación del núcleo ( ADN)

del óvulo
fusión entre la célula de la
oveja A y el óvulo no
fecundado sin núcleo

desarrollo del embrión (in vitro)

Oveja adulta receptora

implante del embrión

en el útero de una Dolly (clon de A)
oveja receptora
1. Los investigadores cogieron
células de la glándula mamaria
de una oveja adulta.
2. Cogieron óvulos no fertilizados
de otra oveja y les extrajeron en
núcleo.
3. Insertaron 277 núcleos de la
células adultas en otros tantos
óvulos. Sólo 29 sobrevivieron.
4. Los 29 óvulos se implantaron en
el útero de 13 ovejas nodrizas.
Sólo una quedo preñada y parió
a Dolly
Dolly (1997-2003), la primera
oveja obtenida por clonación a
partir de células adultas
Un laboratorio de Texas clona al primer animal doméstico

"Copycat" es el primer gatito nacido mediante clonación "

El experimento abre las puertas de la clonación
masiva de animales domésticos, un fin sin
explorar cuya sola posibilidad había
desencadenado ya el almacenamiento de células
de mascotas por parte de sus ricos propietarios
En España se clona al primer toro de lidia
UNIDAD

7
4
Obtención de medicamentos por ingeniería genética

El gen del factor

Plásmido VIII, procedente Vaca receptora
Células Tras elVaca transgénica
desarrollo Vacanacerá
del embrión, transgénica
de gen
con células humanas, se inserta
embrionarias
una vaca transgénica que portará el
insertado
en un plásmido. gen del factor VIII en sus células.
El plásmido se Los embriones se Cuando la cría
inserta en células implantan en una crezca, de su leche
embrionarias de vaca receptora. se podrá obtener el
una vaca. factor VIII.
 Mansa (nació en 2002)
Primera ternera clonada y transgénica. Produce
la hormona de crecimiento humana en la leche
Clonan terneros en EE UU para producir anticuerpos humanos

Terneros clonados y manipulados genéticamente (fábrica de anticuerpos humanos)

Clonan cerdos destinados a trasplantar sus órganos a humanos

La empresa escocesa PPL Therapeutics

logra retirar de los cerditos el gen que
provoca el rechazo en transplantes a
humanos "alfa 1,3 galactosil transferasa"
 LA BIOTECNOLOGÍA Y LAS ENFERMEDADES GENÉTICAS

Cromosómicas: Se producen por un cambio que

afecta a cromosomas completos o a fragmentos

Enfermedades
genéticas Monogénicas: Los cambios están en un único
hereditarias gen que se hereda como cualquier característica

Síndrome de Down (trisomía 21)

Fibrosis quística: Alelo mutante
Pueden
recesivoser
en heredadas
el cromosomao causadas
7 por problemas en la
formación de gametos
Las enfermedades genéticas debidas a un solo gen defectuoso
ascienden a más de 4000, de las cuales 345 afectan al
cromosoma X, por lo que serán transmitidas a los niños
varones, si su madre posee uno de esos defectos genéticos.
La terapia génica está siendo considerada la cuarta revolución
de la medicina (después de las medidas de salud pública, la
anestesia, y las vacunas y antibióticos). Para su aplicación se
siguen dos estrategias:
a) Insertar una copia sana de un gen en las células del
paciente con una enfermedad genética, para compensar el
efecto del gen defectuoso ( esto se consiguió con una niña que
tenía una inmunodeficiencia grave).
b) Introducir un gen especialmente diseñado para que
proporcione una nueva característica a las células (por
ejemplo, introducir en linfocitos un gen que produzca un
inhibidor del virus del sida en pacientes afectados por el VIH).
UNIDAD

7 Las terapias génicas

Transferencia del gen normal in vivo Transferencia del gen normal ex vivo

Se extraen Vector (virus)

células del Se prepara un
paciente. vector que portará
el gen deseado.
Se cultiva un El gen se introduce
vector, directamente a través
Células del paciente El gen se
que portará el gen de un vector. introduce en
deseado. las células del
paciente a través
del vector.

Las células con el gen

se introducen de nuevo
en el paciente.
Células del paciente
Vector (virus) con el gen deseado
Clonación terapéutica: se podría utilizar para curar a
una persona que necesite el trasplante de células,
tejidos y órganos. El embrión se utiliza como fuente de
células madre embrionarias (pluripotentes)
La huella genética
Bebe B Bebe C Bebe A
 Animales transgénicos
Salmón: Crece entre 6 y 8 veces más que un salmón
normal. Se le han incorporado dos genes.

Otro gen del propio salmón modificado

Un gen de un pez plano del Ártico que no interrumpe la producción del
que no interrumpe su crecimiento hormona del crecimiento cuando el pez
en invierno llega a la madurez

frankenfish
Aplicaciones de la ingeniería genética
Obtención de fármacos
Mejora en la producción • Insulina
agrícola y animal. • Proteínas de
coagulación del
Carpas y salmones portadores del
gen de la hormona del suero sanguíneo.
crecimiento • Vacunas

Tratamiento de Terapia génica

enfermedades humanas:
• Diabetes
• Hemofilia
• Parkinson

Maíz resistente al frío

 Producción de
sustancias
terapéuticas

Insulina

Producción de energía

Eliminación de
metales pesados

Biorremediación

Producción
de alimentos
 Biorremediación
La naturaleza tiene una cierta capacidad de limpieza de los elementos
contaminantes. Microorganismos como levaduras, hongos o bacterias degradan
una gran cantidad de sustancias tóxicas, reduciendo su carácter nocivo o incluso
volviéndolas inocuas para el medio ambiente y la salud humana.

La biorremediación consiste en acelerar este proceso natural para mitigar la

contaminación ambiental.
Los expertos en ingeniería genética creen
que la utilización de organismos modificados
genéticamente traerá un mayor desarrollo de
la biorremediación.
Los ejemplos son muy variados:
•La introducción de un gen en el organismo
específico para el vertido.
•El desarrollo de cepas biosensoras
luminiscentes, que permitirían monitorizar el
proceso de degradación.
•La creación de plantas transgénicas para
limpiar suelos contaminados.
Los alimentos transgénicos

Transgen

Organismo
transgénico
 Los alimentos transgénicos
Soja resistente a
herbicidas Café más
aromático y con
menos cafeína

Maíz resistente
a insectos
Mejora de la
Resistencia a calidad
herbicidas e insectos

Arroz que produce Patatas que inmunizan

provitamina A contra enfermedades

Tomate Flavr Svr

Producción de
Retraso en la sustancias
maduración
Algunos tipos de plantas transgénicas

El a
cul banic
t
am ivos o de e
plio es m sto
uy s
Tom
los ates
pro aránd mora
pie a d
dad nos, os, c
Pla es que on
a ntic l e el
min ntas t anc s apo gen d
as ra eríg rta e
ant nsgé ena
ip e nic s
rso as
na con
tra

Tomates
azules,
con
vacunas
Golden rice con vitamina A
 LOS ALIMENTOS TRANSGÉNICOS

Riesgos de la biotecnología

Pérdida de Pérdida de diversidad cultivada, invasión

diversidad genética de ecosistemas naturales

Paso de genes Maleza resistente a herbicidas o

transferidos a bacterias resistentes a antibióticos
especies silvestres o
tradicionales

Efectos perjudiciales Se han descrito problemas alérgicos.

sobre la salud Hay gran desconocimiento

Aumento de la
dependencia de
países en desarrollo
Domingo, 14 de abril de 2002 - 22:58

Mapa del genoma humano en

GMT
Con este mapa los científicos
2003 podrían trabajar en el
descubrimiento de qué genes
son responsables de
enfermedades como el cáncer,
la diabetes y la hipertensión

                                    
Un notable logro de la Ciencia
               Descubrimiento del ADN cumple 50
años
El Libro de la vida
Proyecto Genoma Humano
El País. Madrid, 26 de Marzo de 2001. 
Las multinacionales retiran los alimentos transgénicos del Estado español. 
Joaquina Prades, Madrid. 

La Dignidad del Hombre en Juego

Manipulación genética y controversia

ética.
 Proyecto genoma humano
• El proyecto genoma humano fue un proyecto
que tenía como objetivo la secuenciación de
todo el ADN de un ser humano.
• Secuenciar un genoma significa determinar el
orden en que se disponen los cuatro nucleótidos
que forman el ADN a lo largo de todas las
moléculas que contiene cada célula.
• El ADN humano contiene 3.000 millones de
nucleótidos lo cual significaba una dura tarea.
• 1988. El doctor Watson es nombrado director de la Oficina de
Investigación del Genoma Humano, organismo dependiente
de los Institutos Nacionales de la Salud (NIH) de EEUU.
Afirma que el genoma podrá estar descodificado para el año
2005 y que le costará al Gobierno alrededor de 3.000
millones de dólares.
• 1990. El doctor Craig Venter, un investigador de los NIH,
desarrolla un método más corto para encontrar fragmentos
del genoma humano. Demuestra que, a partir de estos
fragmentos, se puede identificar a los genes completos.
• Mayo 1998. Venter se 'pasa' a una nueva compañía que
pretende secuenciar el genoma humano en tres años, es
decir, dos años antes de la fecha prevista por el proyecto
estatal. La compañía se llamará Celera.
• Junio 2000. En un día que el presidente Clinton califica de
histórico, Venter y Collins aparcan sus diferencias y anuncian
que se ha logrado el primer borrador del genoma humano
secuenciado
• 12 de Febrero de 2001. La empresa Celera publica la
secuenciación del genoma en la revista 'Science'. El
consorcio público hace lo mismo en 'Nature'
 El proyecto genoma humano ha permitido
conocer muchas cosas:
• Cuantos genes tenemos (30.000)
• Como son de grandes, unos 3.000 nucleótidos
de media.
• Qué proporción de nuestro ADN da lugar a
proteínas (2 %)
• Como se organizan los genes en nuestro ADN
• En que se diferencia nuestro ADN del de otras
especies.
• Que diferencias hay entre los distintos humanos,
el 0’1 %.
• Gracias al conocimiento del genoma
humano será posible en el futuro
conocer mejor algunas enfermedades
y:
1.- Diagnosticar mejor
2.- Aplicar un tratamiento adecuado
3.- Prevenir la aparición de estas
enfermedades.
El genoma humano es 10 veces mas pequeño que el genoma
de la salamandra Bolitoglossa subpalmata y 200 veces menor
que el de la Ameba
Entre una persona y otra el ADN solo difiere en 0.2%
60% idéntico

De 289 genes
20% idéntico
humanos
implicados en
enfermedades,
70% idéntico hay 177
cercanamente
similares a los
genes de
98% idéntico
Drosophila.

Humanos Chimpancé Ratón A. thaliana C. elegans D. melanogaster

30,000 30,000 30,000 25,000 19,000 13,000
genes genes genes genes genes genes