Determinación de Staphilococcus aureus

Preparación de diluciones 10-1,10-2,10-3 y 10-4

Pipetear, por duplicado, 0.1 ml del homogeneizado y las diluciones

sobre la superficie de Agar Baird Parker previamente secadas

Incubar las placas en posición invertida a 37°C durante 30 y 48 horas

Seleccionar las placas que tengan entre 20 y 200 colonias

Contar todas las colonias negras y brillantes con borde blanco angosto rodeadas de zonas
claras que contrastan con el medio opaco, Estas colonias corresponden a S. aureus.

Marcar la posición de estas colonias e incubar las placas durante 18 horas

Al final del período de incubación contar las colonias descritas

anteriormente y además aquellas colonias negras brillantes.

Someter un número no menor de 5 a la prueba de la coagulasa para distinguir los

cultivos de S. aureus (coagulasa positivo) de S. epidermis (coagulasa negativo). A

Calcular el total de colonias características, la proporción de colonias positivas

a la prueba de la coagulasa teniendo en cuenta la dilución empleada y expresar
el número de estafilococos positivo por gramo o ml de muestra.
 A

PRUEBA DE COAGULASA

Sembrar las colonias seleccionadas en Caldo Infusión Cerebro Corazón

e incubar los tubos a 35 – 37 °C durante 20 a 24 horas.

Adicionar 0.1 ml del cultivo a tubos de 75 x 10 mm que contengan 0.3 ml

de plasma de conejo a incubar a 35 -37 °C.

Examinar después de 4 horas de incubación

POSITIVO NEGATIVO

Si el plasma ha perdido su Incubar los tubos a temperatura

fluidez o se encuentra un de laboratorio y reexaminar
coágulo más o menos grande. después de 24 horas.