Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica

UNIVERSIDAD DE LA GUAJIRA
FACULTAD DE INGENIERIA
PROGRAMA: INGENIERIA MEDIO AMBIENTE
PROFESOR: FERNANDO LUIS CASTRO ECHAVEZ
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PRÁCTICA 2

IDENTIFICACIÓN DE COMPUESTOS FUNDAMENTALES EN LA CÉLULA.

1.1. INTRODUCCIÓN.

El protoplasma como componente fundamental de la materia viva no presenta

una composición química absolutamente constante debido a que las
características fundamentales de la materia viva es la continua variación, más
ésta variación no es profunda, refiriéndose prácticamente a la cantidad o
concentración de los componentes, por lo que se puede concluir que la
composición química del protoplasma es relativamente constante. Las sustancias
química del protoplasma se pueden dividir así:

-Sustancias inorgánicas representadas por el agua y las diversas sales disueltas

en ella.

-Sustancias orgánicas: carbohidratos, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos,

enzima, etc.

Estos componentes con algunos reactivos químicos presentan comportamientos

que pueden considerarse como patrones, permitiendo así su identificación.

1.2. OBJETIVOS

-Identificar los principales biocompuestos con base en algunas reacciones

características.

-Diferenciar por la reacción con algunos reactivos, los diferentes tipos de

compuestos.

1.3- MATERIALES.

Hojas Verdes Pinzas

Fruta Pulposa (uva)
Huevo Cocido (clara)
Riñón, hígado, carne
Pipetas, mechero, balanza
4 Tubos de ensayos
Servilletas
Reactivo de benedict ó Fehling
Ácido nítrico concentrado
Agua Oxigenada
Solución de hidróxido de Sodio o
Amoniaco

Compilado por Fernando Luis Castro Echavez MSc. Ciencias Ambientales

Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica

1.4. PROCEDIMIENTO

1.4.1. IDENTIFICACIÓN DE AGUA EN TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES.

Corte en pequeños trocitos de hojas de un mismo vegetal, lo mismo que de tejido

animal y deposítelo sin pensarlo en un tubo de ensayo previamente “pesado”,
después de introducir los tejidos, “pese” determine la diferencia entre el estado
inicial y final.

-¿A qué compuesto corresponde la diferencia de peso?

-¿En qué proporción se encuentra el agua de los tejidos anteriores?
-¿Cuáles son las funciones de los seres vivos?
-¿Qué papel desempeña el agua en el origen de la vida?
-¿Cómo está distribuida el agua en nuestro organismo?

1.4.2 IDENTIFICACIÓN DE ENZIMAS (CATALASA)

Corte por separado pequeños trozos de tejido renal, hepático y muscular evitando
tocarlos directamente con las manos para que no se contamine con las
sustancias presentes en la piel del experimentador. Agrúpelos por tejidos.

Deposítelos en sendos vasos de precipitados marcados. Llévelos a la estufa y

déjelos hervir por unos 10 min.

En los tubos de ensayos vierta 3 mL de peróxido de hidrógeno (H 2O2) al 3% y en

su puesto de trabajo deposite en uno de ellos una porción de tejidos sin hervir y
en el otro tubo una porción del mismo tejido previamente hervida.

Realice el mismo procedimiento con cada tipo de tejido. Observe y anote.

-¿Qué observó?
-¿Qué acción ejerce la catalasa sobre el agua oxigenada?
-¿Qué tipo de reacción es?. Descríbala
-¿Cuál es la diferencia entre el tejido crudo y el hervido?
-¿Qué consecuencia produjo la hervida?. ¿Por qué?
-¿Qué clase de sustancias es la catalasa? ¿En dónde se encuentra?
-¿Cuál es la función de la catalasa en los tejidos?
-Clasifique los tejidos en orden decreciente según la actividad de la catalasa
-Consulte: Definición, Composición química, mecanismo de acción enzima-
sustrato, importancia biológica, desnaturalización.

1.4.3 IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Compilado por Fernando Luis Castro Echavez MSc. Ciencias Ambientales

Manual de prácticas de Laboratorio de Bioquímica

En un tubo de ensayo agregue el jugo obtenido de exprimir una uva; adicione

reactivo de Benedict o Fehling en un volumen equivalente a la mitad de la
muestra. Caliente en el mechero por 30-60 s.

-Observe y explique lo sucedido.

-¿Qué componentes tiene el jugo de uvas que pueden reaccionar con el reactivo
utilizado? ¿Por qué?. Explique la reacción.
-Consulte la composición química del reactivo utilizado; estado natural,
propiedades químicas y biológicas de la glucosa.

1.4.4 IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS (REACCIÓN XANTOPROTEICA).

En un tubo de ensayo deposite 2 trocitos de clara de huevo cocidas y de carne 1

cm aproximadamente. Agregue ácido nítrico en un volumen que cubra la
muestra. Observe el cambio de color. Agite suavemente y caliente al mechero
evitando que se disuelva la muestra.
-¿Qué sucedió?. Anote lo observado
Vierta el ácido y agregue hidróxido de sodio en la misma proporción.
Observe el color de la muestra, la coloración se debe a la reacción del grupo
fenólico de la tirosina.
-¿Qué componentes del tejido reacciona con el HNO3?
-¿Qué nombre recibe esta reacción?
-¿Qué aminoácidos presentes en la proteína reaccionan de igual forma?
-De las proteínas consulte: Definición, composición química, propiedades
químicas, proporción que se encuentra en los seres vivos en relación con los
demás biocompuestos, funciones que cumple.
-¿Qué otra prueba sirve para identificar proteínas en el laboratorio?

BIBLIOGRAFIA

MONTERO, O et al. Manual de laboratorio de biología general. Universidad del

Atlántico. Departamento de biología. 1986. 47 pp.

Compilado por Fernando Luis Castro Echavez MSc. Ciencias Ambientales