RESULTADOS.

- Curva de actividad
Práctica 2. Determinación de ALT enzimática.
Curva de actividad enzimática
t (seg) C1 Abs Absorbancia
C2 Abs vs tiempo (seg)
Muestra
18 Febrero 2020
0 0.799
0.81 0.7995 0.7797
5 0.7987 0.7983 0.7762
10 0.8
0.7981 0.7978 0.7759
f(x) = − 0 x + 0.8
15 0.7978 0.99 0.7972
R² = 0.98 0.7752
0.79
20 0.7969 0.7966 0.7746
25 0.7963 0.7959 0.7739
Absorbancias

0.78
30 0.7955 0.7952 0.7732
f(x) = − 0 x + 0.78
35 0.7949
0.77 R² = 1 0.7947 0.7726
40 0.794 0.7941 0.7721
45 0.76
0.7936 0.7933 0.7717
50 0.7927 0.7926 0.7708
0.75
55 0.7922 0.7916 0.7701
60 0.7915
0.74
0.7908 0.7689
70 0
0.7902 50
0.7897 100
0.7678 150 200 250
80 0.7884 0.7891 tiempo0.7668
(segundos)
90 0.7868 0.7883 0.7655
100 0.7852 0.7871 0.7643
110 0.7834 0.7865 0.7631
120 0.7814 0.7857 0.7618
130 0.7798 0.7843 0.7606
140 0.7792 0.7825 0.7593
150 0.7785 0.7812 0.7583
160 0.7778 0.7801 0.757
170 0.7771 0.7792 0.7559
180 0.7764 0.7785 0.7547
190 0.7755 0.7781 0.7533
200 0.7746 0.7774 0.7522
210 0.7739 0.7765 0.7511
220 0.773 0.7753 0.7497
230 0.7723 0.7749 0.7486
240 0.7716 0.7741 0.7486

Datos de la ecuación de la recta m b r2

Control 1 -0.0001 0.7986 0.9823
Control 2 -0.0001 0.7982 0.9921
Muestra -0.0001 0.7771 0.996
 - Corrección de la curva enzimática

t (seg) C1 Abs C2 Abs Muestra C1 correg C2 correg M correg

0 0.799 0.7995 0.7797 0.7986 0.7982 0.7771
5 0.7987 0.7983 0.7762 0.7981 0.7977 0.7766
10 0.7981 0.7978 0.7759 0.7976 0.7972 0.7761
15 0.7978 0.7972 0.7752 0.7971 0.7967 0.7756
20 0.7969 0.7966 0.7746 0.7986 0.7962 0.7751
25 0.7963 0.7959 0.7739 0.7961 0.7957 0.7746
30 0.7955 0.7952 0.7732 0.7956 0.7952 0.7741
35 0.7949 0.7947 0.7726 0.7951 0.7947 0.7736
40 0.794 0.7941 0.7721 0.7946 0.7942 0.7731
45 0.7936 0.7933 0.7717 0.7941 0.7937 0.7726
50 0.7927 0.7926 0.7708 0.7931 0.7932 0.7721
55 0.7922 0.7916 0.7701 0.7926 0.7927 0.7716
60 0.7915 0.7908 0.7689 0.7926 0.7922 0.7711
70 0.7902 0.7897 0.7678 0.7916 0.7912 0.7701
80 0.7884 0.7891 0.7668 0.7906 0.7902 0.7691
90 0.7868 0.7883 0.7655 0.7896 0.7892 0.7681
100 0.7852 0.7871 0.7643 0.7886 0.7882 0.7671
110 0.7834 0.7865 0.7631 0.7876 0.7872 0.7661
120 0.7814 0.7857 0.7618 0.7866 0.7862 0.7651
130 0.7798 0.7843 0.7606 0.7856 0.7852 0.7641
140 0.7792 0.7825 0.7593 0.7846 0.7842 0.7631
150 0.7785 0.7812 0.7583 0.7836 0.7832 0.7621
160 0.7778 0.7801 0.757 0.7826 0.7822 0.7611
170 0.7771 0.7792 0.7559 0.7816 0.7812 0.7601
180 0.7764 0.7785 0.7547 0.7806 0.7802 0.7591
190 0.7755 0.7781 0.7533 0.7796 0.7792 0.7581
200 0.7746 0.7774 0.7522 0.7786 0.7782 0.7571
210 0.7739 0.7765 0.7511 0.7776 0.7772 0.7561
220 0.773 0.7753 0.7497 0.7766 0.7762 0.7551
230 0.7723 0.7749 0.7486 0.7756 0.7752 0.7541
240 0.7716 0.7741 0.7486 0.7746 0.7742 0.7531

Datos de la ecuación de la recta m b r2

Control 1 corregido -0.0001 0.7987 0.9975
Control 2 corregido -0.0001 0.7982 1
Muestra corregida -0.0001 0.7771 1
 Práctica 2. Determinación de ALT
Curva de actividad enzimática corregida
Absorbancia corregida vs tiempo (seg)
18 Febrero 2020
0.81
0.8
f(x) = − 0 x + 0.8
0.79 R² = 1
Abs corregidas

0.78
0.77 f(x) = − 0 x + 0.78
R² = 1
0.76
0.75
0.74
0.73
0 50 100 150 200 250 300

Tiempo (segundos)

C1 correg Linear (C1 correg) C2 correg

Linear (C2 correg) M correg Linear (M correg)

- Cálculo de deltas de la actividad enzimática

Δ C1 Abs C2 Abs Muestra

0 a 60 0.0075 0.0087 0.0108
60 a 120 0.0101 0.0051 0.0071
120 a 180 0.005 0.0072 0.0071
180 a 240 0.0048 0.0044 0.0061
Promedio 0.00685 0.00635 0.007775

- Cálculo de deltas de la actividad enzimática corregida

Δ C1 Abs C2 Abs Muestra

0 a 60 0.006 0.006 0.006
60 a 120 0.006 0.006 0.006
120 a 180 0.006 0.006 0.006
180 a 240 0.006 0.006 0.006
Promedio 0.006 0.006 0.006

- Cálculo del factor a diferentes absortividades.

Absortividad molar= 6.3x103

 1
∗1
L
a (
mol∗cm )
µmol
Factor=
1cm
∗106∗
mol
∗VT ( )
VS
1
∗1
3 L
6.3 x 10 ( )
mol∗cm
Factor=
1 cm
∗106∗( µmol
mol )
∗1050
=3333.33
50
Absortividad molar= 6.22x103

1
∗1
L
a (
mol∗cm )
µmol
Factor=
1cm
∗106∗
mol
∗VT ( )
VS
1
∗1
L
6.2 x 103 ( )
mol∗cm
Factor=
1 cm ( µmol
∗10 6∗
mol )
∗1050
=3376.20
50
- Cálculo de concentración a partir de los deltas de las absorbancias sin corregir.
U
=Factor∗Promedio=3333.33∗0.00685=22.833U / L
L
Δ C1 Abs C2 Abs Muestra
Promedio 0.00685 0.00635 0.007775
[U/L] (Factor 3333.33) 22.833 21.167 25.917
[U/L] (Factor 3376.20) 23.127 21.439 26.250

- Cálculo de concentración a partir de los deltas de las absorbancias corregidas

U
=Factor∗Promedio=3376∗0.006=20.257 U / L
L

Δ C1 Abs C2 Abs Muestra

Promedio 0.006 0.006 0.006
[U/L] (Factor 3333.33) 20.000 20.000 20.000
[U/L] (Factor 3376.20) 20.257 20.257 20.257
 Aseguramiento de la calidad

( 22.833+21.167 ) U / L U x́= 22 U/L

x́= =22
2 L SD= 1.18 U/L
%CV = 5.36 %
Sin 1.18 U / L Factor Corre
Factor Factor Factor
%CV = ∗100=5.36 % (% EA) = 10.72%
corre 22 U / L 3376.20 gidos 3333.33 3376.20
3333.33
gir %ES = 35.29 %
%EA=%CV∗2=10.72
x́ 22 U/L %
22.3 x́ 20 U/L 20.26 %ET= 46.01 %
U U/L U/L
22 −34 U / L
DE L U/L
1.18 1.19 DE 0 U/L 0 U/L
%ES= ∗100=35.29 %
U/L
34 U /L
%CV 5.36 % 5.33 % %CV 0% 0%
%ET=
%EA %ES + %EA= 10.72
10.72 % 10.66 % %EA % + 35.29 %=0% 46.01 %0 % Requisito de la calidad analítica: CLIA (%Eta= 20%).
%ES 35.29 % 34.40 % %ES 41.17 % 40.41 %
%ET 46.01 % 45.06 % %ET 41.17 % 40.41 %

Confiabilidad de los resultados

Error Requisito de Error Aprueba Interpretación estadística

admisible la Calidad obtenido
El valor obtenido es menor de los
% EA = 10 0% Si permitido, por lo cuál se deduce que hay
precisión en los resultados obtenidos.
El valor obtenido en el error sistemático
es mayor de lo permitido, lo cual puede
deberse a algún defecto del equipo en el
que se realizó la medición. Puede
% ES = 10 CLIA 40.41 % No
deberse también a que el método es
enzimático, por lo que una preparación
inadecuada de los controles puede
afectar los resultados. No hay exactitud.
El valor obtenido es mucho mayor de lo
% ET = 20 40.41 % No permisible, por lo que los resultados no
pueden considerarse como confiables.

Interpretación fisiopatológica.

La determinación de ALT no es una prueba específica para determinar la función hepática, sin
embargo, puede ayudar a diagnosticar alguna patología cuando se realiza a la par de otras pruebas
complementarias.
El valor de ALT obtenido de la muestra es de 20.257 U/L, que, al compararlo con valores de
referencia, se encuentra dentro del intervalo ya designado para las concentraciones de esta
enzima, por lo que se puede determinar que el paciente no muestra patología alguna.

Sin embargo, es importante mencionar que lo ideal es que la concentración de esta enzima se
encuentre en menor cantidad, además, al detectar un aumento de esta enzima, es necesario
observar el valor que se obtiene, ya que, el daño hepático puede ser por agentes externos, como
virus, por alcohol, o por afecciones internas, como obstrucciones de conductos, entre otros, pues
de acuerdo al aumento de la transaminasa, será el daño que esta sufriendo el hígado, y de esta
manera, se puede realizar un diagnóstico, remarcando lo ya antes mencionado, las pruebas
complementarias son las que, en conjunto con la determinación de la enzima ALT, permitirán
llegar a un diagnóstico adecuado para cada paciente.

Referencias.

M., D. J. (2020). Manual de Prácticas. Laboratorio de Química Clínica II. SLP: FCQ, UASLP.

V.F. Moreira. (2015). Pruebas de función hepática: B, AST, ALT, FA y GGT. 28/02/2020, de Rev Esp
Enferm Dig Sitio web: http://scielo.isciii.es/pdf/diges/v107n10/infopaciente.pdf