UNIVERSIDAD DE CORDOBA

ASIGNATURA: BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

TEMA: MÉTODOS DE TINCIÓN PARA LA OBSERVACIÓN DE CÉLULAS
PROFESORA: MARTA CELINA VERGARA MARTÍNEZ

1. ¿Describa tres procesos de tinciones diferentes a las explicadas en clase?

Respuesta:
Tinción negativa: es el proceso por el cual las moléculas de un colorante se absorben en una superficie, el uso de
colorante permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la observación en el
microscopio. El proceso es el siguiente.
1) se vierte una gota del tinte en los extremos del lado limpio del porta objetos.
2) calentar el asa y colocar la bacteria recogida con el asa en la gota de tinte y mezcla.
3) con el otro borde del porta objetos se inclina 45 grados y se coloca delante de la suspensión bacteriana y se empuja la
mezcla para formar una capa delgada.
4) secar al iré.
5) examinar en el microscopio.

Tinción de cápsula: tiene la particularidad de resaltar la estructura polisacáridos que influyen en ciertas bacterias y
levaduras denominadas cápsulas, se observa que el fondo de este se tiñe oscuro y la cápsula queda incolora
evidenciando así la estructura buscada. Su proceso es:
1) añadir con el asa parte de la bacteria al tinte
2) esparcir de manera uniforme hasta quedar una capa fina y se deja secar 5 min.
3) dejar secar al aire.
4) lavar con sulfato de cobre al 20%.
5) examinar en el microscopio bajo objetivo de inmersión.

Tinción Acido resistente: sirve principalmente para clasificar micro bacterias y actinomicetos, que tienen un alto
contenido en lipídico y en ácidos micólicos y que no pueden ser clasificadas por la tinción de Gram. En esta tinción las
bacterias ácido resistentes conservan el colorante primario color rosa o rojo, los demás microorganismos son
decolorados por el ácido y toman el color azul. Su proceso es:
1) Sumergir el frotis fijado por el calor fucsina – fenol
2) Decolorar con decolorante orgánico
3) Contra teñir con azul metileno
4) Observar en el microscopio

2. ¿Qué desventajas ofrecen los procesos de tinción de muestras, frente a un proceso de montaje en fresco?

 La observación que ofrecen las tinciones en la superficie pueden perjudicar el estado de las muestras que
son usualmente utilizadas en el montaje fresco, ya que esta por lo regular se encuentran en ambientes
líquidos.
 Cuando se hace el proceso de tinción en fresco comúnmente las células terminan muriendo.
 El proceso de tinción no permite observar las muestras en estado natural el cual es uno de los principales
objetivos que tienen las muestras en fresco.
 3. ¿Explique: que errores se comenten con frecuencia cuando se realiza un frotis?
El frotis es muy importante para presentar muchos tipos de resultado tanto bacteriano, de sangre y muchos y
suele tener muchos errores al momento de realizarse, entre los más comunes podemos ver:
1) Porta objetos sucio
2) Usar materiales de elaboración defectuosos
3) Dejar pasar de calor la muestra cuando es sometida a la llama
4) Usar cantidades incorrectas en su elaboración.
Todo esto a continuación nos dará como resultado un mal uso del frotis y por ende un resultado incorrecto

4. ¿Qué ventajas tiene la tinción negativa frente a la tinción simple?

 A nivel económico y productivo es una técnica más fácil de usar, la tinción simple requiere de un proceso
más complejo y demás reactivos.
 A diferencia de la tinción simple que necesita que el frotis sea sometido a altas temperaturas, la tinción
negativa no necesita de este, por consecuente se puede obtener una mejor observación de muestras.
 se pueden hacer procesos con muestras en fresco, no necesita que esta sea secada.

5. ¿Qué proceso de tinción se utiliza para la observación de flagelos? explique.

Respuesta:
Tinción de Leifson: los flagelos son tan delgados que resultan invisibles al microscopio óptico, por esto se realiza una
técnica especial para su tinción. El proceso de tinción de Leifson es:

1. Se fija químicamente la suspensión bacteriana, mediante formol, y se hace la extensión en un portaobjetos.

2. Se deja secar al aire, sin calentamiento alguno.
3. Se cubre la preparación con una mezcla de ácido tánico y el colorante rosanilina, de preparación extemporánea. El
ácido tánico engruesa los flagelos y la rosanilina los tiñe.
4. Se retira el exceso de colorante con agua.
5. Por último, se deja secar al aire, antes de su observación al microscopio.