Manejo del microscopio óptico

Las normas esenciales del uso del microscopio óptico son las que se ajustan a cualquier aparato de
precisión. En este orden de ideas, se debe tener conocimiento de que las partes más delicadas son las
lentes y los componentes mecánicos. En efecto, está totalmente prohibido manipular las lentes con
las manos y para su limpieza deben utilizarse productos especiales destinados a la limpieza de
elementos ópticos o de fotografía. Asimismo, los componentes mecánicos del microscopio deben ser
tratados con cuidado, sin forzarlos, puesto que se pueden dañar los engranajes de precisión que lo
componen. Otro aspecto importante es la postura a adoptar para la utilización del microscopio. En tal
sentido, debemos estar sentados frente al microscopio con los ojos a la altura de los oculares. Cabe
considerar por otra parte, que en los microscopios con dos oculares se debe ajustar la distancia entre
estos a la propia separación ocular del observador. Hay que hacer notar que, los oculares suelen llevar
unos anillos dióptricos que se pueden modificar para corregir las posibles diferencias de enfoque.
Agregado a esto, la iluminación debe ser adecuada en todo momento, así pues debe regularse en
función de la muestra que se esté observando, así como de la combinación de lentes que tengamos. Se
debe tener en cuenta que una iluminación insuficiente hará difícil la visualización del tejido; mientras
que una iluminación excesiva provocará fatiga en el sistema visual. Por ende, es conveniente
mantener siempre una mano sobre el tornillo de enfoque mientras se observa la preparación por el
ocular. A continuación se detallan los pasos a seguir en el uso del microscopio óptico:

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y descender la platina

completamente. La primera indicación, permite la observación de una panorámica del
preparado, así como la ubicación de áreas de interés para su análisis posterior.
2. Subir el condensador haciendo uso del tornillo correspondiente.
3. Introduzca la preparación sobre la platina con el cubreobjetos hacia arriba y sujetándola con
pinzas metálicas.
4. Se deben seguir una serie de pasos para realizar el enfoque con precisión:

● Se recomienda iniciar la observación con el objetivo de 4x o 10x

● Tomar el diafragma y dejarlo casi cerrado (con limitada iluminación).
● Ascender la muestra problema (espécimen) que se encuentra en la platina haciendo uso
del tornillo micrométrico y aproxime al máximo del lente del objetivo. Esto debe hacerse
mirando directamente y no a través del ocular, puesto que existe la posibilidad de incrustar
el objetivo en la preparación.
● Separar lentamente el objetivo de la preparación con el tornillo macrométrico mientras se
va mirando a través del lente ocular. Cuando observe nitidez en la muestra, gire el tornillo
micrométrico hasta lograr obtener un enfoque fino (la muestra problema está enfocada).
● Al pasar al siguiente objetivo (sea 10x o 40x, depende donde inició su observación), la
imagen ya debe estar enfocada y solo basta con mover un poco el tornillo micrométrico,
para obtener de esta manera una visión más fina. Si al cambiar de lente objetivo se
desenfoca la imagen, es recomendado volver al objetivo anterior y repetir de nuevo el paso
previo.
● A medida que se va aumentando el poder de magnificación, la cantidad de luz que entra
debe regularse con el diafragma. Si se utiliza un objetivo de baja magnificación como 4x o
10x el diafragma debe ir casi cerrado, en cambio si se usa el objetivo de 40x debe ir en la
mitad y si se usa máxima magnificación(100x) debe ir totalmente abierto (máximo de luz).
Por otra parte, para enfocar en 100x, es necesario el uso del aceite de inmersión, y se debe colocar de
la siguiente manera:

● Enfocar la muestra problema en 40x.

● Ascender totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la
zona que se va a visualizar y donde habrá que colocar el aceite.
● Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión (100x) dejándolo a medio camino entre éste y
el de 40x.
● Colocar una gota de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.
● Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión (100x).
Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente, haciendo uso del tornillo
micrométrico hasta que la lente haga contacto con la gota de aceite. En ese momento, se
evidencia como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
● Enfocar cuidadosamente con el tornillo micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo
de inmersión y la preparación es mínima.
● Una vez colocado el aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el
objetivo 40x sobre esa zona, puesto que este se mancharía de aceite.
● Al finalizar la observación de la muestra problema se baja la platina y se coloca el objetivo de
menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la
platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en posición de observación.
Además, se debe dejar completamente limpio la lente objetivo. De modo accesorio, cubrir el
microscopio con la funda protectora.

Mantenimiento de los microscopios:

Expulsión de polvo o excedentes de materia:

Existen diversos instrumentos destinados a la eliminación de restos pueden ser en ocasiones

corrosivos.

● Pequeño aspirador.
● Cepillo suave.
● Soplando con una pera.
● Mediante el uso de un spray de aire comprimido, el cual no debe expulsar aceite de ningún
tipo.
● Realizar un contacto suave mediante un papel húmedo.

Eliminación de restos adheridos:

Pueden ser líquidos o sólidos, con capacidad de contaminar la muestra a observar.

● Disolver y limpiar los restos sólidos con agua destilada.

● Absorber los líquidos haciendo uso de papel.
● Secar correctamente sin dejar restos en la lente o en las partes mecánicas.

Eliminación del aceite de inmersión:

Este aceite posee una gran utilidad en lo que respecta aumentar la resolución de la muestra a
analizar cuando usamos una ampliación muy grande (100X).
 ● Se debe eliminar el aceite de inmersión al cambiar de muestra.
● No se debe colocar una gota tras otra en el objetivo al realizar un cambio de muestra.
● En los periodos de cambio de muestra, se elimina con un papel óptico (sin disolvente).
● Al finalizar la sesión: Se añade una gota de etanol al proceso previo y por último secar bien.

Limpieza de las partes mecánicas:

● Puede utilizarse un limpiador de cristales comercial y adicionarle 10% de etanol.

● Las toallas humedecidas para limpieza de gafas también pueden ser usadas.
● Limpiar los oculares por los alrededores (sin tocar los lentes), con el objetivo de prevenir
conjuntivitis.
● Retirar el polvo de las ranuras de ventilación.
● Dejar enfriar la lámpara antes de ser limpiada.
● Usar etanol para remover el polvo y amoniaco en caso de suciedad carbonizada.
● Se debe respetar la duración máxima de las lámparas, asimismo se debe limpiar cada vez
que es sustituida.
● Siempre secar luego de pasar el paño húmedo.