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Características estructurales del gen IRP30 en la avispa Vespa mandarinia.

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS.

Investigador Principal

NOMBRE 1 APELLIDO 2 APELLIDO


Título académico Identificación Correo electrónico Teléfono Institución Grupo de Programa
Investigación Academico

Biólogo 1.121.937.301 lina.sanchez- 3134632465 Universidad de --------- Biología.


1996@hotmail.com Pmaplona

VICERRECTORIA DE INVESTIGACIONES
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UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

PAMPLONA, 18 julio de (2020)

1. INFORMACIÓN GENERAL DEL PROYECTO

Línea de Investigación: Biología molecular

Lugar de ejecución del proyecto: Pamplona, Norte de Santander.

Duración del proyecto (en meses): 12 MESES

Línea estratégica:

Descriptores/Palabras claves: Vespa mandarinia, Apis miellifera, Gen, IRP30, cebadores, ADN.
2. RESUMEN.

Las invasiones biológicas constituyen una de las mayores amenazas para la biodiversidad, y
los polinizadores no están exentos de dicha amenaza. Curiosamente, los Himenópteros
poseen un conjunto limitado de genes inmunes en comparación con otros insectos. Los
genes inmunes no canónicos de la avispa Vespa mandarinia son de interés porque pueden
proporcionar una mayor comprensión de la naturaleza peculiar del sistema inmunitario de
este insecto social. Los análisis previos de la hemolinfa de abeja en el desafío bacteriano
identificaron una nueva proteína repetida rica en leucina denominada IRP30. Aquí
caracterizamos el gen y ADN genómico que codifica esta proteína. Aquí revisamos de
manera específica si dicho gen en V. mandarinia como especie invasora, tiene alguna
diferencia evolutiva que sugiera algún tipo de cambio o adaptación superior en comparación
los polinizadores específicamente la abeja Apis miellifera.

ABSTRACT.
Biological invasions constitute one of the greatest threats to biodiversity, and pollinators are
not exempt from this threat. Interestingly, Hymenoptera possess a limited set of immune
genes compared to other insects. The non-canonical immune genes of the Vespa mandarinia
wasp are of interest because they can provide a better understanding of the peculiar nature
of the immune system of this social insect. Previous analyzes of the bee hemolymph in the
bacterial challenge identified a new leucine-rich repeat protein called IRP30. Here we
characterize the gene and genomic DNA that encodes this protein. Here we specifically
review whether said gene in V. mandarinia, as an invasive species, has any evolutionary
difference that suggests any type of change or superior adaptation compared to pollinators,
specifically the bee Apis miellifera.
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3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACION

El gen IRP30 en un Himenóptero como Vespa mandarina japónica en comparación con Apis
miellifera del mismo orden, podría sugerir diferencias dentro del alineamiento de ambos
genes que pueda conllevar a mostrar molecularmente como especie invasora ampliamente
tiene mayor respuesta inmune demostrando mayor plasticidad.

JUSTIFICACIÓN.

El desplazamiento y la disminución o pérdida de biodiversidad de especies de avispas y


abejas endémicas y nativas de América, que puede provocar la V. mandarinia, se traduce en
daños cuantiosos y pérdidas económicas incalculables por la disminución de los servicios
ecosistémicos que estos insectos aportan al continente americano

Las especies invasoras se caracterizan por su capacidad adaptativa y resistencia a distintos


tipos de estrés ambiental. Una de las respuestas a Los estímulos estresantes es la
expresión de diversas proteínas como la 30 por ende se buscó caracterizar un gen que
regulara la capacidad inmune ya que es la defensa natural del cuerpo contra las infecciones,
como las bacterias y los virus o la resistencia a ciertos factores externos como los
ambientales , esto buscando comprender molecularmente las cualidades que hacen de esta
especie un colonizador efectivo que por ende al no perecer ante condiciones de estrés
ambientales demuestran mayor capacidad de adaptación y plasticidad genética que van
fuertemente ligadas.

Vespa mandarinia es una plaga importante de los colmenares en Japón. Apis mellifera es la
especie más común, la cual no ha desarrollado defensas contra V. mandarinia. Los ataques
a una colmena de A. mellifera por los avispones gigantes asiáticos causan daño a decenas
de miles de colmenas de A. mellifera cada año por V. mandarinia (Matsuura, 1988;
Yanagawa et al., 2007) al ser dos especies constantemente enfrentadas por medio de un
alineamiento de un gen especifico se busca comparar y evidenciar el grado de similaridad
que tiene ambas especies en relación al gen IRP30 encargado de la respuesta inmune de
estas especies.

4. MARCO TEORICO Y ESTADO DEL ARTE

Los himenópteros con aguijón (Aculeata o Vespomorpha) conforman una agrupación


monofilética dentro de Hymenoptera, Aculeata a su vez se divide en tres superfamilias
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monofiléticas: Chrysidoidea, Apoidea y Vespoidea teniendo las dos últimas familias,


especies solitarias y eusociales.

Dentro de Vespoidea se data que Vespa mandarinia es la única especie de avispa eusocial
que realiza ataques grupales contra colmenas y otros nidos de avispas eusociales causando
en la actualidad un gran furor no solo por su papel como especie invasora y a futuro los
daños que esta ocasionaría a nivel ecológico, si no en si como competencia directa de Apis
miellifera y otras abejas de gran valor ecológico.

Vespa mandarinia

Tamaño: 1.5 - 2 pulgadas de largo (3.5 cm a 5 cm). Reina: puede superar los 5 cm, con una
envergadura que puede superar los 7,6 cm. Obreras y machos: más pequeños que las
reinas (3.5 a 3.9 cm de longitud corporal). Las reinas y las obreras solo difieren en tamaño.
Morfología: reinas y obreras tienen anatomía reproductiva,
aunque las obreras no se reproducen. Los machos de esta
especie son morfológicamente similares a las hembras,
pero carecen del aguijón. La coloración es la misma entre
sexos.

Figura 1. Morfología Vespa mandarinia.

Abdomen con bandas de color café oscuro y negro, que se


alternan con bandas que tienen un tono naranja-amarillo
similar al de la cabeza. El sexto segmento es
completamente amarillo.

Vespa mandarinia es la única especie de avispa eusocial


que ataca a las colmenas y otros nidos de avispas eusociales. Las colonias de Apis
mellifera, Apis cerana y todas las especies sociales de Vespa y Vespula, son blanco de V.
mandarinia para ataques grupales. La presa de abeja o avispa recolectada en estos ataques
se mastica en una bola, que se lleva al nido de V. mandarinia y se alimenta a las larvas.
Después de un ataque exitoso de una colmena u otro nido, las pupas de las especies
atacadas se retiran de sus capullos. Los cuerpos de larvas y pupas en la colmena o nido
atacados se mastican en bolas y se alimentan a las larvas de V. mandarinia. Se prefieren las
pupas más maduras y las larvas se toman solo cuando no quedan pupas. Algunas de las
víctimas adultas y atacantes muertos también sirven de alimento a las larvas de V.
mandarinia. Las obreras recuperarán comida de un nido ocupado por un período de varios
días a dos semanas. Los ataques en masa solo se observan en el otoño, cuando cientos de
nuevas reinas y machos avispones se crían en el nido. Estos nuevos avispones requieren
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grandes cantidades de proteínas, y la necesidad de alimentarlos puede provocar que los


nidos de V. mandarinia ataquen las colmenas.

Al ser la Vespa mandarinia originaria de otro continente, se considera una especie exótica,
la cual por su comportamiento dominante y depredador se convertiría, muy posiblemente, en
una especie invasora, ya que afectaría el ecosistema en el continente americano, trayendo
como consecuencia el desplazamiento o extinción de especies nativas o endémicas de
abejas y avispas de la región, en caso que llegue a establecerse.

IRP30.

La proteína inmune sensible 30 (IRP30) es una glucoproteína que se encuentra en una amplia gama
de especies de himenópteros sociales, incluidas las abejas melíferas, abejorros, avispas y hormigas
( Randolt et al. 2008 , Fujiyuki et al. 2009 , Albert et al. 2011 ) . El IRP30 (también conocido como
HP30, proteína de hemolinfa 30) se identificó por primera vez a partir de la hemolinfa de las abejas
inmuno-desafiadas y recibió su nombre por su peso molecular de proteína, 30 kDa ( Randolt et al.
2008 ). Los motivos clásicos de la cremallera de leucina en IRP30 sugieren que juega un papel
importante en las funciones inmunes del organismo. Además, el nivel de expresión más alto de IRP30
ocurre bajo desafío bacteriano, lo que demuestra que IRP30 tiene una inducción fuerte y simultánea
en respuesta a infecciones microbianas (Randolt y col. 2008 ). Hasta la fecha, se ha encontrado que el
gen IRP30 está asociado con respuestas inmunes en especies de himenópteros sociales; sin embargo,
su función precisa no ha sido verificada ( Albert et al. 2011 ). Por lo tanto, la función de la proteína
IRP30 requiere una mayor exploración.

La expresión de IRP30 depende no solo de diferentes infecciones sino también de


condiciones fisiológicas y de desarrollo. Entre las diferentes divisiones del trabajo en las
abejas melíferas, los recolectores tuvieron niveles de expresión IRP30 más altos que las
enfermeras y las abejas de invierno ( Seehuus et al. 2013 ). En diferentes entornos, IRP30
varía con la temporada, y en comparación con las abejas de verano, las abejas de invierno
tenían niveles de expresión más altos ( Albert et al. 2011 ). Los niveles de expresión de
IRP30 variaron en diferentes tejidos. En la abeja melífera, el cuerpo gordo era el tejido
principal para la expresión de IRP30, especialmente en las abejas de invierno ( Albert et al.
2011) En resumen, aunque estudios anteriores han demostrado que la expresión de IRP30
en insectos himenópteros se ve afectada por la estimulación microbiana y los factores
ambientales, las características y la función biológica de IRP30 siguen siendo
desconcertantes.

5. OBJETIVO GENERAL

En este estudio, informamos la estructura del gen IRP30 de Vespa mandarinia. Se


exploraron los niveles de expresión de IRP30. Finalmente, se alinearon las secuencias de
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dos especies avispas ( Vespa mandarinia ) y abejas melíferas ( Apis mellifera L.) para
buscar si presentaban similaridad hay pertenecer a un mismo orden ambas especies.

5.1. OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Identificar y caracterizar el gen IRP30 EN Vespa mandarinia

 Evidenciar la similaridad usando técnicas de alineamiento de Vespa mandarinia y


Apis miellifera.

 Analizar el gen IRP30 en relación con el sistema inmune de dos especies


actualmente enfrentadas pudiendo ser esta evidencia de mayor plasticidad y
adaptación en V. mandarinia.

6. METODOLOGÍA

COLECCIÓN DE MUESTRAS.

Se obtuvieron seis colonias de Vespa mandarinia del Instituto de Investigación Apícola,


Academia China de Ciencias Agrícolas, Beijing, China. Se criaron bajo oscuridad constante
en una habitación con una temperatura de 29 ± 0.5 ° C y una humedad relativa de 60 ± 5%.

EXTRACCIÓN ACIDOS NUCLEICOS

Los protocolos de extracción de ADN convencionales (Jobes et al., 1995; Cheng et al., 2003)
requieren grandes cantidades de tejido (en gramos) para ser molido (con un mortero y una
maja), y los kits son generalmente caros o no están disponibles, especialmente para
investigadores en países en desarrollo y subdesarrollados en todo el mundo (Kotchoni y
Gachomo, 2009). Se utilizó el protocolo de extracción de acidos nucleicos planteado por T.
Y. Wang, L. Wang, J. H. Zhang y W. H. Dong.

REACTIVOS Y QUIMICOS

Tampón de extracción:

1. Se añadió 24 g de GuSCN (tiocianato de guanidinio) y 20 ml de Tris-HCl 0,1 M, pH 6,4, a


un tubo Falcon de 50 ml.

2. Se calentó a 60 ° C para disolver el GuSCN.

3. Se añadió 4,4 ml de EDTA 0,2 M, pH 8,0.


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4. Se agregó 0.5 mL de Triton X-100. Mezclar invirtiendo

Búfer de unión

1. Se combinó 24 g de GuSCN y 20 ml de Tris-HCl 0.1 M, pH 6.4, en un tubo Falcon de 50


ml.

2. Se calentó a 60 ° C para disolver el GuSCN.

3. Se añadió 4,4 ml de EDTA 0,2 M, pH 8,0. Mezcla invirtiendo.

Tampón de lavado: EtOH al 70% complementado con tampón NaCl TE 10 mM: tampón Tris-
HCl 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM, pH 8,0, reactivos de PCR: Taq ADN polimerasa, dNTP
(TaKaRa).

Tiocianato de guanidina: es un agente caotrópico usado en la extracción de ADN y de ARN,


son moléculas pequeñas, de bajo peso molecular y altamente polares con grupos amino y
carboxilo, que generan un tipo de caos o desorden mediante interacción electrostática en los
puentes de hidrogeno, ¿Cómo lo logra? Interacciona con el ácido nucleico, con las partes
que tengan carga P- (grupos fosfatos saturados), esta saturación de cargas eléctricas
genera que las hebras terminen desnaturalizándose, gracias a la alta polaridad de los
agentes caotrópicos.

Figura 2. Tiocionato de guanidinio molécula altamente polar.

Triton X-100 tiene propiedad hemolítica, Triton ™ X-100 es un surfactante y emulsionante no


iónico común que a menudo se usa en aplicaciones bioquímicas para solubilizar
proteínas. Se considera un detergente comparativamente suave, no desnaturalizante, y se
informa en numerosas referencias como un reactivo agregado rutinariamente. Se utiliza para
lisar las células para extraer proteínas y orgánulos celulares. También puede permeabilizar
la membrana celular viva para la transfección (Transfección = entrada de ADN a través de
un fago a una célula).

PROTOCOLO DE EXTRACCIÓN DE ADN

1. Lisis / homogeneización: Se añadió 0,6 ml de tampón de extracción a 70 mg de tejido


(animal, cabeza y torax)
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A. Tejidos: se maceró el tejido hasta obtener un polvo bajo nitrógeno líquido o en un baño de
hielo, se debe trabajar a temperaturas bajas para evitar que las enzimas que degradan del
material genético se encuentren activas. Se transfirieron hasta 50 mg de tejido a un tubo de
microcentrífuga de 1.5 o 2.0 ml. Se agregó el tampón de extracción y se guardó durante 5-
10 minutos a temperatura ambiente.

Para minimizar el cizallamiento de las moléculas de ADN, se mezclaron las soluciones de


ADN por inversión; evitando sacudidas vigorosas o vórtices.

2. Se centrifugó por 10 minutos a 13000 g a 20°C.

3. Después de la centrifugación, se transfirió el sobrenadante a una columna de purificación


(spin) y se centrifugó a 12000 g por 30 seg. Desechar sobrenadante manteniendo el pili o
precipitado.

4. Se añadió 500 µL del tampón de unión a la columna spin, y se centrifugó a 12000 g x 30


seg. Desechar sobrenadante.

5. Se añadió 600 µL del tampón de lavado a la columna spin. Se centrifugó a 12000 g x 1


min. Este paso se repitió tres veces. Tras terminar la tercera y última repetición, la columna
de purificación se transfirió a un tubo de micro centrifuga de 1.5 ml.

6. Se añadió 100 µL de tampón de TE y se dejó a temperatura ambiente durante 1 min.

7. Se centrifugó a 12000 g x 1 min. El buffer (tampón) en el tubo de la micro centrifuga


contiene el ADN.

8. Las concentraciones de ADN se midieron haciendo alícuotas en gel de agarosa al 0,8% y


leyendo la absorbancia a 260 nm con un espectrofotómetro, nanodrop.

9. Las muestras de ADN se almacenaron a -20 ° C hasta su uso posterior.

DISEÑO DE CEBADORES.

Antes de explicar cómo se hace el diseño de cebadores, creo que es importante introducir
primero que son y para que se usan.

Un cebador, oligonucleótido o primer es un fragmento corto de nucleótidos necesarios para


que la enzima polimerasa comience a sintetizar copias del ADN, precisamente este es su
uso, hace de origen de replicación del ADN.

Los cebadores fueron diseñados manualmente software tales como Textpand el cual
permitió pasar las secuencias del gen IRP30 de las dos especies a alinear a formato FASTA,
cabe resaltar que se llevó a cabo un alineamiento global, se basa en alinear y mostrar dónde
calzan en forma perfecta o casi perfecta las secuencias (Needleman y Wunsch, 1970). Una
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vez ya alineada cada muestra con su forward y reverse, se ejecuta en todas las secuencias
editadas siendo necesario ejecutar estas con el algoritmo ClustalW Multiple Alignment.

Lo anterior era necesario para que posteriormente se pudiese visualizar dicho alineamiento
en Bioedit que es un editor de alineamiento de secuencias (Hall, 1999) el cual permitió crear
una secuencia consenso que pudiese ser leída por Oligoexplorer (Kuulasmaa Javed and
Muthusammy, 2004) el cual que permiten valorar las propiedades de los oligonucleótidos
seleccionados, en la selección de parejas de cebadores se trató que cumpliesen con los
siguientes criterios:

 Temperatura de meelting 55 – 60 C

 Porcentaje de GC mayor a 50

AMPLIFICACIÓN POR PCR Y ELECTROFORESIS EN GEL.

La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según su movilidad en un


campo eléctrico a través de una matriz porosa, la cual finalmente las separa por tamaños
moleculares y carga eléctrica, según la técnica que se use. La electroforesis en gel en
general se utiliza con propósitos analíticos, pero puede ser una técnica preparativa para
purificar parcialmente moléculas antes de aplicar espectrometría de masas, reacción en
cadena de la polimerasa (PCR), clonación o secuenciación de ADN (para mayores detalles,
consultar el capítulo relacionado).

La PCR se llevó a cabo en una mezcla de reacción de 50 μl, que contenía 50 ng de ADN
molde (ADN genómico CHO extraído como se describe anteriormente), 0. 25 U Taq ADN
polimerasa, dNTP 2.0 mM, 1X Taq ADN polimerasa tampón (Mg+2 plus) y 20 Μm de
cebadores. Las secuencias de los cebadores diseñados fueron las siguientes:

Secuencia (5′ – 3 ′)

TTGGCTACGTGTTTCGCAGC

TATTTCGTTCAACCCCTCGC

Tabla 1. Cebadores utilizados para la clonación del gen IRP30.

La amplificación de ADN se realizó en las siguientes condiciones: 95 ° C durante 5 min,


seguido de 30 ciclos de 94 ° C durante 30 s, 50 ° C durante 45 sy 72 ° C durante 1,0 min,
con una extensión final a 72 ° C por 3 min. Los productos de PCR se fraccionaron en un gel
de agarosa al 1,0% usando 1X de tampón TBE que contenía 10 mg / ml de bromuro de
etidio y se visualizaron bajo luz UV, y los geles se fotografiaron usando un sistema de
documentación de gel UV.

SECUENCIACIÓN.
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El análisis y comparación de secuencias genómicas de forma individual o a nivel de la


población permiten el estudio de la variación genética, la identificación de marcadores
genéticos y la identificación de genes responsables de ciertas características fenotípicas de
interés en este caso la relación entre el gen IRP30 en relación con una mayor respuesta
inmune que haría de una especie invasora como Vespa mandarinia más competente y con
mayor capacidad de adaptación.

Estrategia general de secuenciación de ADN:

Los métodos de secuenciación se basan en la síntesis de ADN, en cuatro reacciones en


paralelo, una para cada nucleótido, a fin de producir el paro de la reacción cuando un ddNTP
se añada a la reacción. Los ddNTP pueden marcarse diferencialmente con fluorocromos de
diferente color. Se obtendrá la secuencia de la cadena complementaria a la cadena molde
por autorradiografía o fluorescencia, leyendo de abajo hacia arriba (5’ → 3’).

Existen procedimientos de secuenciación como los de Sanger (Método de secuenciación


“didesoxi” de Sanger. La reacción requiere la hebra molde de ADN de cadena sencilla
marcada radiactivamente, un iniciador, ADN polimerasa y cuatro dNTP. La reacción es
dividida en cuatro alícuotas, uno para cada base, cada tubo contendrá uno solo de los
ddNTP marcados y los otros tres dNTP y se continúa con la polimerización incorporando los
nucleótidos en sentido 5’ → 3’. Cuando se marcan con flurocromos la reacción total se
puede hacer en un solo tubo, ya que el color emitido servirá para diferenciar las cadenas.),
el de Maxam y Gilbert (también llamada secuenciación química donde la última base que se
va agregando a la lectura de la secuencia de cada fragmento generado indica la base que
fue químicamente modificada y después eliminada del fragmento durante la reacción de
rotura mediada por la piperidina, es decir, la base que se indica es la que en realidad falta),
que son relativamente sencillos y su interpretación es fácil, pero su capacidad de resolución
de los procedimientos utilizados es limitada.

El método de Maxam y Gilbert fue muy popular en sus inicios; sin embargo, con la
descripción del método enzimático didesoxi, o de terminación de cadena, esta técnica quedó
en desuso, ya que involucra el uso de sustancias químicas peligrosas y cantidades elevadas
de ADN marcado radiactivamente, además de ser técnicamente más complejo. Por ello, en
la actualidad los procedimientos de secuenciación automatizada están basados en el
método enzimático de Sanger, que suple el marcaje radiactivo con métodos
quimioluminiscentes con el uso de fluorocromos.

En la lectura de la secuencia se utilizan sistemas ópticos que detectan los diversos


fluorocromos empleados, con lo que se logra un método más directo, fácil, rápido y seguro.
Esta variante es conocida como dye-primer sequencing (secuenciación mediante colorantes
acoplados al iniciador). En la actualidad un robot industrial puede automatizar las reacciones
de secuenciación del método didesoxi. Este sistema utiliza microrreacciones a temperatura
controlada; en un ciclo de reacción (alrededor de 50 minutos) se procesan arriba de 48
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moldes. Con este robot se resuelven más de 450 bases en secuenciación automática de
ADN, protocolo que es aplicable tanto a marcaje radiactivo como fluorescente. En estos
sistemas automatizados el fragmento de ADN fluorescente pasa por el punto de tensión del
secuenciador automático, y estas señales se envían a una computadora con un programa
especial. Así, un golpe de láser excita la tinción fluorescente, la señal de fluorescencia
emitida se digitaliza y es captada por detectores que una computadora analiza y descifra, y
pueden observarse los resultados obtenidos en tiempo real. En minutos, este programa
procesa la imagen del gel capilar. Para cada muestra secuenciada se crean curvas de
cuatro colores, uno por cada nucleótido, y debajo de cada pico de la secuencia se identifica
la secuencia de nucleótidos correspondientes al fragmento analizado. La secuenciación por
terminación fluorescente es un método para el análisis de la secuencia del ADN mediante
automatización parcial. Es una variante modificada en la cual el marcaje se realiza con un
fluoróforo unido de forma covalente en el oligonucleótido iniciador utilizado. En esta opción
se utiliza un color diferente para cada fluoróforo de cada reacción específica para
nucleótidos A, C, G o T, marcándolos como terminadores reversibles mediante la unión del
fluoróforo a la base en el grupo 3’-OH, de tal forma que la ADN polimerasa aún la puede
reconocer como sustrato. Después, las mezclas de reacción se combinan en una
electroforesis en un mismo gel, y la información de la secuencia se lee directamente
mediante una computadora. Cuando el fluoróforo se agrega en la terminación de la cadena,
se tiene la ventaja de que este último método puede llevarse a cabo en una sola reacción en
lugar de en cuatro, como en el método en que se marca el iniciador. En esta reacción los
ddNTP se marcan con fuorocromos de diferente color para cada base, con lo cual la
terminación de cada cadena determinará el color y, por ende, el NTP respectivo.

7. RESULTADOS/PRODUCTOS ESPERADOS

A pesar de los estudios previos centrados en los cambios en IRP30 de diferentes insectos
sociales en diversos entornos, se dispone de muy poca información sobre el patrón de
expresión preciso y la función biológica de esta proteína. En este estudio, aclaramos las
características estructurales y los del gen IRP30 en la avispa Vespa mandarinia y su
participación en la respuesta inmune IRP30.

La proteína de respuesta inmune 30 es una proteína que contiene LRR. Una sección
representativa de LRR está presente en IRP30 de las avispas; se ha demostrado que los
LRR proporcionan un marco estructural para la formación de interacciones proteína-proteína
( Gay et al. 1991 , Enkhbayar et al. 2004 ) y que las funciones principales de los miembros
de la familia de proteínas LRR están en la respuesta inmune ( Zhu et al. 2010) y
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transducción de señales ( Takemura et al. 2020 ).Lo anterior se evidencio en la secuencia de


ADN genomico para irp30 en Vespa mandarinia.

En el alineamiento fue notable que ambas especies no tenían una similaridad alta (Identity:
566/1694 (33.4%), Similarity: 566/1694 (33.4%) para pertenecer a un mismo orden, lo cual
al tener los resultados de la secuencias podría confirmar algún tipo de cambio en las
proteínas producidas por el mismo que quizás sugieran mayor respuesta inmune en Vespa
mandarinia esto la hace una especie más competente y reforzaría su capacidad de
adaptarse como especie invasora, como se ve en la actualidad, de igual manera si se
analiza mejor el gen en Apis miellifera quizás muestre algún tipo de desventaja que la hace
más vulnerable a factores ambientales y menos competente al exponerse a condiciones de
estrés tales como la depredación, enfermedades entre otros.

Finalmente, queda la pregunta si este gen IRP30 ha desarrollado un papel y función clave
en la vida social de este tipo dentro del Orden himenóptera no solo en función del sistema
inmune.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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