El Centro Internacional de Investigaciones para el Desarrollo es una

corporaci6n publica creada en 1970 por el Parlamento de Canada con el

objeto de apoyar la investigaci6n destinada a adaptar la ciencia y la tecnologia a
las necesidades de los paises en desarrollo. Su actividad se concentra en cinco
sectores: ciencias agricolas, alimentos y nutrici6n; ciencias de la salud;
ciencias de la informaci6n; ciencias sociales, y comunicaciones. El Centro es
financiado exclusivamente por el Parlamento de Canada; sin embargo, sus
politicas son trazadas por un Consejo de Gobernadores de caracter
internacional. La sede de! Centro esta en Ottawa, Canada, y sus oficinas
regionales en America Latina, Africa, Asia y el Medio Oriente.

© 1980 Centro Internacional de Investigaciones para el Desarrollo

Direcci6n postal: Box 8500, Ottawa, Canada KIG 3H9
Sede: 60 Queen Street, Ottawa
Oficina Regional para America Latina y el Caribe Apartado
Aereo 53016,
Bogota, Colombia ·

Harvey, B.J.
Hoar, W.S.
IDRC-TS2ls
Teoria y practica de la reproducci6n inducida en los peces. Ottawa,
Ont., CIID, 1980. 48p. : ii.

/P~blicaci6n CIID/, /piscicultura/, /mejoramiento genetico de peces/,

/zona tr4>pical/ - /reproducci6n/, /fecundaci6n/, /hormonas/, /inseminaci6n
artificial/, /teoria/, /metodologia/, /articulo bibliografico/.

CDU: 639.3.034.2 ISBN: 0-88936-253-X

Se dispone de edici6n microficha

This publication is also available in English (IDRC-TS2le).

II existe egalement une edition fran9aise de cette publication (IDRC-TS2 l f).
 IDRC-TS21s

TEORIA Y PRACTICA
DE LA REPRODUCCION INDUCIDA
EN LOS PECES

BRIAN J. HARVEY1 Y WILLIAM S. HOAR2

1
Divisi6n de Ciencias Biol6gicas, Consejo Nacional de Investigaci6n de
Canada, Ottawa, Canada.
2
Departamento de Zoologia, Universidad de Columbia Britanica, Van-
couver, Canada.
IND ICE

PROLOGO 5

1. INTRODUCCION 7

2. ENDOCRINOLOGIA DE LA REPRODUCCION EN LOS TELEOSTEOS 9

HIPOFISIS E HIPOTALAMO 9
LAS GONADOTROPINAS EN LOS TELEOSTEOS 10
MADURACION DE LA GONADA EN RESPUESTA A LA GONADOTROPINA 12

3. REPRODUCCION INDUCIDA: TEORIA 15

ADMINISTRACION DE GONADOTROPINAS EXOGENAS 15
HORMONAS LIBERADORAS DE GONADOTROPINA 17
ADMINISTRACION DE ESTEROIDES SEXUALES 18
NUEV AS POSIBILIDADES 20

4. PRACTICA DE LA REPRODUCCION INDUCIDA 21

CARPA COMUN Y CARPAS DE LA CHINA Y DE LA INDIA 21
LISA 29
SABALO 33
BAGRE 34

5. METODOS DE BIOPSIA OVARICA 36

6. PRESERVACION DE GAMETOS 38
PRESERVACION DE LA ESPERMA 38
CRIOPRESERVACION DE LOS HUEVOS 42
CRITERIOS DE EXITO 42

REFERENCIAS 43

PROVEEDORES DE MATERIAL DE DESOVE 48

3
 AGRADECIMIENTOS

Deseamos expresar nuestro agradecimiento a E.M. Donaldson por leer el

manuscrito y por sus constructivas sugerencias. Agradecemos tambien a las
siguientes personas por habemos asistido con sus comentarios sobre las
secciones pertinentes a sus areas de interes ode investigaci6n: W.H.L. Allsopp,
T.J. Lam, B. Morley, N.E. Stacey, W.E. Vanstone y F.C. Withler. El cotejo de
la literatura disponible fue posible gracias a D. Turnbull. Las ilustraciones fueron
preparadas por F. Zittin con excepcion de la Fig. 6 que fue preparada por B.
Bysouth. Los logotipos de carpas que introducen y concluyen cada capitulo
fueron tambien diseflados por B. Bysouth.

4
 PRO LOGO
A pesar de su larga historia, el cultivo comercial de peces con aletas solo se
establecio hace relativamente poco en Europa y Norteamerica. En la actualidad,
la produccion industrial de salmon del Pacifico depende en gran medida de la
proliferacion en los criaderos del Pacifico noroccidental.
La acuocultura o cultivo sistematico de seres vivos en el agua, esta dirigida
principalmente hacia el cultivo de peces que en muchos paises ha adquirido gran
importancia; entre los peces de aleta, la atencion se ha centrado principalmente
en las diversas especies de carpa y de tilapia.
Las preferencias y aceptacion del pescado, como de cualquier otro alimento,
estan condicionadas en gran parte por el medio ambiente y por las experiencias
anteriores del consumidor. Seria ideal por lo tanto, buscar, propagar y cultivar
especies nativas que sean conocidas y aceptadas por los habitantes de cada
localidad. Desafortunadamente, muchas especies de peces no se reproducen
facilmente - las hembras gravidas no liberan sus huevos en cautiverio. Toda
empresa de piscicultura debe contar con una provision adecuada de huevos
fecundados a fin de generar alevinos y juveniles.
En 1934 en el Brasil, von Ihering et al. descubrieron que la reproduccion de
las hembras renuentes en cautiverio, podia inducirse mediante inyecciones de
extracto de hipofisis de pez, organo que contiene gonadotropina. La reproduccion
inducida con gonadotropina se esta actualmente investigando y se ha utilizado en
la reproduccion de la carpa en la China yen la India yen la reproduccion de otras
especies en diversos lugares. La Oficina de Investigaciones Pesqueras de Canada
perfecciono la tecnica de extraccion de la hormona y cientificos de Filipinas,
auspiciados por el CIID, aplicaron la tecnica al sabalo (Chanos chanos),
induciendo su reproduccion mediante inyecciones de extracto de hipofisis de
salmon de! Pacifico. El perfeccionamiento y la mayor adaptacion de la
reproduccion inducida tanto a especies nativas como a especies exoticas
deseables jun to con mejores sistemas de manejo de la industria, podrian ayudar a
desarrollar el potencial de cultivo de muchas especies troicales en muchos de los
grandes rios de los paises en desarrollo, tales como el Amazonas, el Brahmaputra,
el Congo, el lndo, el Mekong, el Niger y el Nilo.
Al igual que en la cria de ganado, sera necesario reproducir y seleccionar
especies y cepas superiores, de acuerdo a sus habitos alimenticios, potencial de
crecimiento, resistencia a las enfermedades y aceptacion. Ademas del desove
inducido con hormonas, la preservacion criogenica de los huevos y de la esperma
en nitrogeno liquido ofrece grandes oportunidades para la reproduccion selectiva
y la hibridacion. Se requiere mas investigacion en el campo de las tecnicas de
incubacion, cria de larvas y requerimientos nutricionales de los peces juveniles y
adultos, asi como de la eficiencia de la conversion alimenticia en todas las etapas
del crecimiento.
En el CIID creemos que en el campo de la reproduccion inducida se
necesita de manera apremiante una recopilacion concisa del estado de los

5
conocimientos te6ricos y practicos y que los doctores Harvey y Hoar esta.n
eminentemente calificados para hacerla. Confio en que esta publicaci6n, basadla
en un estudio literario concluido el 30 de julio de 1979, sea de gran valor para
todos aquellos comprometidos o interesados en la ciencia y en la practica de la
acuocultura.

Joseph H. Hulse
DIRECTOR
CIENCIAS AGRiCOLAS,
ALIMENTOS Y NUTRICION
CIID

6

1. INTRODUCCION
Para que el cultivo a gran escala de cualquier
organismo para el consumo humano sea eficiente,
el recurso debe ser facilmente renovable. Por
ejemplo, despues de recoger una cosecha agricola
se hace una nueva siembra y la reproducci6n de!
ganado se asegura por medios naturales o por
inseminaci6n artificial. Es obviamente inconve-
niente cultivar un organismo cuando no puede
haber una reposici6n adecuada yes precisamente
ese problema el que ha afectado la historia de la
acuocultura. De las numerosas especies de peces
que se cultivan en el mundo entero, muy pocas -
entre ellas las Tilapias- se reproducen en cauti-
verio (Jhingran y Gopalakrishnan 197 4 ). En las
especies que si se reproducen, por ejemplo la
carpa comun Cyprinus carpio, la epoca de!
desove no es totalmente predecible y la super-
vivencia de Jos alevinos en condiciones normales
puede ser inaceptablemente baja. Hay dos solu-
ciones a este problema: la primera es de tipo
puramente practico y ha sido la soluci6n hist6rica;
consiste en recoger alevinos de fuentes naturales.
No obstante, son muchas las dificultades inhe-
rentes a este metodo, pues es largo, requiere
especial habilidad y experiencia, y se basa por
completo en la productividad de! terreno de
desove natural. La segunda soluci6n es mas
directa: aprender a inducir la reproducci6n de Jos
peces en cautiverio. Esta ultima ha recibido la
mayor atenci6n de Jos ultimos aflos y ha tenido
resultados muy satisfactorios.
Los procesos de reproducci6n no se afectan
totalmente en cautiverio, persistiendo el desa-
rrollo progresivo de las g6nadas en general hasta
las etapas finales de la maduraci6n de! gameto y
deteniendose la secuencia solamente cuando el
gameto es liberado. Tanto la maduraci6n gonadal
como el desove se han considerado desde hace
mucho tiempo como respuestas a estimulos am-
7
bientales -temperatura, horas de luz en el dia
(fotoperiodo) y pluviosidad entre otros factores-
y el piscicultor puede sentirse afortunado al tener
la posibilidad de intervenir eficazmente en donde
faltan Jos estimulos ambientales y llevar artifi-
cialmente a termino el proceso. Esto se ha Jogrado
mediante la tecnica de reproducci6n inducida a
traves de! manejo hormonal, cuya aplicaci6n
practica es el tema principal de este trabajo.
Aunque no debe olvidarse la primacia de Jos
estimulos ambientales en la reproducci6n de Jos
tele6steos y aunque se realizan serios esfuerzos
investigativos para comprender mejor esas in-
fluencias, la inducci6n hormonal representa una
soluci6n practica que tiende a imponerse. Por Jo
tanto, no consideraremos aqui el control de la
reproducci6n basado unicamente en el manejo de
las condiciones ambientales ni la endocrinologia
de! comportamiento sexual, pues esto tambien
pierde importancia cuando se desea un control
total de la liberaci6n de gametos y de la fecunda-
ci6n. En esta resefla, suponemos que, desde el
punto de vista de! piscicultor, el objetivo deseado
en un programa de reproducci6n inducida es la
producci6n de gametos vi ables, que puedan luego
dar Jugar a la fecundaci6n bajo condiciones
controladas. La fecundaci6n natural s6Jo se logra
al manifestarse totalmente el desove; esto toma
tiempo, requiere un espacio considerable y hay
perdida de alevinos. El sistema, por Jo tan to, nose
considera practico.
Comprendemos que el pu biico para es ta resefla
incluira a lectores de la mas diversa indole.
Despues de todo, el interes por la crianza de peces
puede ser compartido por el bi6logo de un pro-
grama universitario de piscicultura y por el culti-
vador rural de peces en la India, aunque sus
problem as probablemente sean diferentes.
El objetivo de esta resefla es pues, primero,
sintetizar y analizar Jos avances recientes en el
campo de la fisiologia reproductora de Jos peces,
que influyan nuestra capacidad para criar especies
en cautiverio, y, segundo, extraer de la literatura
Jos detalles practicos de Jos metodos de reproduc-
ci6n inducida utilizados actualmente y presen-
tarlos haciendo enfasis en sus puntos comunes.
lgualmente se ha intentado diferenciar el material
te6rico de! practico; Jos Jectores orientados hacia
el campo practico, cuyo interes principal sea la
reproducci6n de sus propios peces, pueden pasar
directamente al capitulo 4, un estudio sobre las
ultimas publicaciones referentes a Jos intentos de
inducir la reproducci6n en las siguientes especies:
carpa ( comun, china e india), bagre (variedades
asiaticas), lisa y sabalo. La informaci6n sobre la
carpa y el bagre se ha presentado en forma de
cuadros que pueden utilizarse como referencia
para los cultivadores que deseen beneficiarse de talamicas, hormonas de origen mamifero, este-
la experiencia de otros en su mismo campo. Por roides y sustancias 'extrabiol6gicas' como el
otra parte, Ios capitulos 2 y 3 presentan las bases antiestr6geno clomifeno. Existen numerosas re-
te6ricas de Ios metodos practicos y seran de gran sefias recientes (ver por ejemplo Chaudhuri 1976;
interes para los lectores que posean s6Iidos Fontaine 1976; Shehadeh 1972 y 1976) sobre
conocimientos de biologia basica. El capitulo 2 temas como la preparaci6n y almacenamiento de
presenta un breve recuento de la endocrinologia extractos de pituitaria, especificidad filogfmetica
reproductiva de Ios tele6steos mientras que el de las hormonas administradas, selecci6n de
capitulo 3 trata de Ios avances recientes en el reproductores y evaluaci6n del estado de desarrollo
manejo hormonal de la reproducci6n. Los capitulos gonadal, estandarizaci6n de las dosis y preser-
5 (Metodos de Biopsia Ovarica) y 6 (Preserva- vaci6n de Ios productos sexuales. La presente
ci6n de Gametos) seran de interes tanto para resefia hace enfasis en los peces cultivados en
investigadores como para cultivadores y para los paises tropicales y sub-tropicales, aunque se
proveedores de materiales de inducci6n como mencionan avances importantes de las regiones
hormonas y glandulas pituitarias completas. del norte, tales como el reciente uso de hormonas
La inyecci6n de extracto de pituitaria de pez liberadoras para desovar carpas en la China.
para inducir Ia ovulaci6n, procedimiento referido
como "hipofisaci6n ", fue aplicada con exito por
primera vez en 19 34, por von Ihering y sus
colegas en el Brasil (von Ihering 1937). Dicha
tecnica, aunque todavia constituye el pilar de
muchas operaciones de reproducci6n inducida, a
lo largo de los af10s ha generado soluciones cada
vez mas sofisticadas al problema de la inhibici6n
de la reproducci6n, hasta el punto de haber
utilizado, con diversos grados de exito, gonado-
tropinas purificadas, horrilonas liberadoras hipo-

8

2. ENDOCRINOLOGIA DE LA
REPRODUCCION EN LOS
TELEOSTEOS
Los sistemas nervioso y endocrino de los
vertebrados actuan concertadamente para co-
ordinar los eventos reproductivos. Las etapas prin-
cipales en la cadena de eventos a partir de la
percepcion de estimulos ambientales hasta la
liberacion de gametos, estan descritas en el
diagrama de la Figura 1, en donde se puede
observar que los eventos neurales predominan en
las primeras etapas, mientras que las etapas
posteriores son de naturaleza hormonal.
La percepcion de estimulos ambientales como
la duracion de! dia (fotoperiodo ), la temperatura y
la pluviosidad, esta regida por el sistema nervioso
e incluye el paso de la informacion desde los
receptores sensoriales hasta el cerebro. Al llegar
al hipotalamo, la informacion neural determina la
actividad de la hipofisis por medio de mensajeros
quimicos denominados hormonas liberadoras.
Estas a su vez estimulan la hipofisis para liberar a
la circulacion general una hormona llamada gona-
dotropina, cuyo destino es la gonada; su efecto es
estimular la produccion de esteroides sexuales en
la gonada, esteroides que posteriormente seran
responsables de la maduracion de los gametos. La
transicion de la informacion neural al control
hormonal se efectua entre el hipotalamo y la
hipofisis y es en ese punto que empieza nuestro
analisis detallado de la endocrinologia de la
reproduccion en el pez.
HIPOFISIS E HIPOTALAMO
El origen embrionario de la hipofisis en los
vertebrados tiene dos aspectos. Un componente
epitelial derivado de la cavidad bucal embrionaria,
llamado adenohipofisis. Ademas de la hormona
9
gonadotropica que tanto nos interesa, produce la
somatotrofina (hormona de! crecimiento ), la cor-
ticotropina, la prolactina, la hormona tirotropica
y la hormona estimulante de los melanocitos. La
adenohip6fisis puede subdividirse anatomicamente
en pars distalis rostral, pars distalis proximal y
pars intermedia (Figura 2). El componente deri-
vado de! aspecto neural, la neurohipofisis, conecta
la adenohipofisis a la base de! cerebro y esta
compuesta en gran parte por las fibras axonicas de
neuronas cuyos cuerpos celulares estan locali-
zados en el hipotalamo. Este tejido nervioso
presenta amplia interdigitacion con la adenohi-
pofisis, en particular en el pars intermedia, y la
presencia de este "nucleo" nervioso ha dado
origen al concepto de la hipofisis como organo
"doble".
Las neuronas hipotallimicas cuyos axones forman
la neurohip6fisis, son de! tipo denominado celulas
neurosecretoras. Estas responden a una seflal
electrica procedente de! cerebro, liberando un
mensajero quimico en el terminal de! axon,
uniendo asi la brecha entre la informacion ner-
viosa y la hormonal. Sus cuerpos celulares forman
varios grupos independientes o "nucleos" dentro
de! hipotalamo que pueden diferenciarse tanto
anatomicamente como en base a sus propiedades
de coloracion. En la glandula pituitaria o hipofisis
de los teleosteos, los dos nucleos que mas nos
interesan son el nucleus preopticus (NPO) y el
nucleus lateralis tuberis (NLT). Las hormonas
producidas por las neuronas de! NPO son libera-
das en su mayoria a un canal sanguineo entre la
neurohipofisis y la adenohipofisis; algunas pueden
inervar directamente las celulas de! pars inter-
media (Ball y Baker 1969). Empero, nuestro
principal interes radica en las neuronas de! NLT
cuya organizacion es unica en los teleosteos. Las
celulas endocrinas de la adenohipofisis aparecen
aqui inervadas directamente por los ax ones neuro-
secretores (para fines de simplificacion la figura
solo muestra las celulas gonadotropicas) y el
mensajero quimico liberado en esta union se
denomina hormona liberadora (HL). El efecto de
la hormona liberadora es estimular la produccion
de gonadotropina y su posterior liberacion al
sistema vascular de la adenohipofisis. La gonado-
tropina es luego transportada por la circulacion
sistematica hasta el organo receptor, la gonada,
en donde a su vez inicia la produccion de esteroides
sexuales. Esas hormonas -androgenos, estro-
genos y progestogenos- son los mediadores
directos de! desarrollo gonadal.
El control hipotalamico en la liberacion de
gonadotropina de la hipofisis de los teleosteos, se
ha demostrado en experimentos en los cuales las
lesiones electroliticas de! NLT de la carpa dorada

Estfmulos
~bie{ta/
Ce re bro
Conexiones
neural es
Hipotalamo
Hormona
liberadora
Hip6fisis
Hormona(s)
gonadotr6pica
G6nada
Hormonas
sexual es
Maduraci6n y
liberaci6n de gametos
Fig. I. Etapas pn'ncipales de la cadena de eventas
fisialogicas, desde la percepcion de las estimulas
ambientales hasta la liberacion de las gametas maduras.
Carassius auratus produjeron una disminuci6n
de! indice gonadosomatico, bloquearon la recru-
descencia ovarica e indujeron la atresia folicular
(Peter y Crim 1978). El concepto de un centro de
HLG (hormona liberadora de gonadotropina) en
el hipotalamo esta confirmado por la presencia de
actividad de HLG en extractos de esta region en
divers as especies de tele6steos (Crim et al. 1976).
La naturaleza quimica de! factor Iiberador en Ios
tele6steos sigue siendo una incognita. La activi-
dad de la HLG en el extracto hipotaliunico de la
carpa esta relacionada con una sustancia cuyo
peso molecular es inferior a 5000; Ios neurotrans-
misores epinefrina, norepinefrina, serotonina y
dopamina no presentan actividad de HLG en
hip6fisis de carpa in vitro (Breton et al. I 975b ).
Es importante el hecho de que las hormonas
IO
Iiberadoras sean moleculas relativamente pequeflas.
Ello sugiere la factibilidad de sintetizar la hor-
mona o un analogo igualmente activo qut: pueda
estimular la maduraci6n gonadal, mediante el
aumento en la producci6n de la hormona gonado-
tr6pica. En efecto, en base a este concepto se han
obtenido resultados preliminares promisorios
(capitulo 2).
LAS GONADOTROPINAS EN LOS
TELEOSTEOS
Se han aislado en forma relativamente pura las
gonadotropinas de varios tele6steos incluyendo la
carpa Cyprinus carpio (Fontaine y Gerard 1963;
Burzawa-Gerard 1971 ), el salmon 'chinook' On-
corhynchus tshawytscha (Donaldson et al. 1972)
y Tilapia mossambica (Farmer y Papkoff 1977).
Hay considerable evidencia de que Ios peces
elaboran dos tipos diferentes de hormona gonado-
tr6pica. La acci6n ovulatoria se adscribe t'mica-
mente a una de ellas, cuyo contenido de gluco-
proteina es alto (Donaldson 1973; Farmer y
Papkoff 1977). La otra gonadotropina tiene bajo
contenido de glucoproteina y se cree que solamente
controla la vitelogenesis (Idler et al. 1975; Ng e
Idler 1978). La evidencia citol6gica e histoquimica
confirma la presencia de dos gonadotropinas
quimicamente diferenciables (Burlakov etal.1976;
Schreibman et al. 1973) y se han reportado
diferencias sexuales en gonadotropinas aisladas
(Breton et al. 1978). Este confuso panorama se
aclarara con una investigaci6n sistematica de la
actividad gonadotr6pica en las diferentes etapas
de la maduraci6n gonadal (Fontaine 1976).
Dada la naturaleza proteinica de las hormonas
gonadotr6picas, no es sorprendente que la especi-
ficidad filogenetica se haya demostrado repetida-
mente. Aunque ciertas grandes similitudes pueden
extenderse aun entre filos -la gonadotropina de
Tilapia por ejemplo, presenta identidad cromato-
grafica con una variedad de hormonas luteinizantes
de mamiferos y no mamiferos (Farmer y Papkoff
1977)- existen especificidades zool6gicas par-
ciales en las gonadotropinas de Ios tele6steos.
Fontaine et al. ( 1972) demostraron que Ia activi-
dad de Ia gonadotropina de la carpa es 36 veces
superior a la de! Oncorhynchus al analizarla en
terminos de la actividad de la adenilciclasa en la
carpa dorada y es lugar comun de la tecnica de
hipofisaci6n el que la efectividad de un extracto
hipofisiario homoplastico (de un pez de Ia misma
especie) pueda perfectamente exceder Ia de un
donante heteroplastico. Desde luego hay excep-
ciones: Ia carpa comun, por ejemplo, se emplea
mucho como donante para la carpa china y para la
 tercer ventrfculo

nucleo lateral
hipotalamo

- saccus vasculosus

plexo long1tud1nal primario

- - vena hipofisaria

Adenohip6fisis
Subdivision _l __ -
Pars Distalis Rostral Pars Distalis Proximal Pars lntermedia
--------1- t------~

Hormona Corticotropina Tirotropina J-lormona estimulante

producida Prolact1na Somatotropina de los
melanocitos
Gonadotropina

Fig. 2.El diagrama ilustra la organizaci6n de laglandula pituitan·a de las tele6steos, incluyendo el riego sanguineo. Por la izquierda, la sangre penetra a laglandula
por la arteria hipofisaria, pasa al plexo longitudinal priman·o entre la neurohip6jisis y la adenohip6jisis y de ahi a la adenohip6jisis a traves de! plexo secundario. Se
recoge luego en una red venosa secundaria (en negro) y sale a traves de la vena hipofisaria. Lasflechas indican la direcci6n deljlujo sanguineo. Un grupo de celulas
gonadotr6picas aparece en la adenohip6jisis; estas liberan gonadotropina al plexo secundario, al ser estimuladas por las hormonas liberadoras provenientes de los
axones de las celulas nerviosas de! nucleo lateral tuberal. Las lineas punteadas representan la ho rm on a liberadora. Modificado de Bally Baker(l 969) y Perks (1969).
 Estfmulos
ambientales
~
Hipotalamo

Hormona liberadora
t
Hip6fisis

Gonadotropina(s)

i
Tejido
ovarico
esteroideo

Hormona tiroidea? Estr6genos

1?a---20/lPg

Precursores del
Vitelogenesis
vitelo

Huevo maduro
Higado
L.-----Prostaglandinas?
Catecolaminas?

jHuevo ovuladol

Fig. 3 En/aces endocrinos de la cadena entre la recepci6n de los estimulos ambientales y la ovulaci6n. Los
numeros rodeados de un circulo seiialan las etapas en las que la intervenci6n artificial ha sido por lo menos
parcialmente efectiva para inducir la ovulaci6n de peces cautivos.

gran carpa de la India, pero el problema es
verdaderamente importante para el criador que
practique la hipofisaci6n y sera de nuevo men-
cionado en el curso de esta resefla.
MADURACION DE LA GONADA EN
RESPUESTA A LA GONADOTROPINA
Actualmente se cree que la maduraci6n de las
g6nadas en el pez se efectua coma resultado
indirecto de un aumento lento y constante en la
secreci6n de gonadotropina y que la ovulaci6n y el
espermatismo estan precedidos por un aumento
mas marcado. Esta hip6tesis naci6 de la evidencia
en los salm6nidos (Breton et al. 1975c; Crim et al.
1975) yen los ciprinidos (Breton et al. 1972;
Stacey et al. 1979). El efecto de la gonadotropina
en la regulaci6n de la gametogenesis es bastante
indirecto, a traves de hormonas sexuales y este
eslab6n final de la cadena proporciona indicios
importantes de las posibles causas de la interrup-
ci6n de la maduraci6n en cautiverio.
Es importante apreciar el hecho de que la
maduraci6n gonadal en los machos puede con
mucha frecuencia no interrumpirse en cautiverio

12
y queen general no es dificil obtener la espermade
peces criados en estanque. La hipofisaci6n de los
machos, si es que se lleva a cabo, es a menudo
cuesti6n de conveniencia para asegurar la coordi-
naci6n perfecta de la liberaci6n de gametos y sirve
tambien para iniciar un adelgazamiento seminal
que hace la esperma mas apropiada para la
fecundaci6n artificial. Por esta raz6n, el analisis
siguiente se limita al desarrollo gonadal en la
hembra: proliferaci6n oogonial, vitelogenesis,
maduraci6n de oocitos y ovulaci6n (Figura 3).
Debe destacarse la diferencia entre el proceso de
desove u oviposici6n y la ovulaci6n, que pueden
no estar sujetos a los mismos control es honnonales.
PROLIFERACION OOGONIAL
Los oogonios surgen de las celulas sexuales
primordiales en el epitelio germinal del ovario y
en su etapa precoz son rodeados por una capa de
celulas epiteliales que forman el foliculo ovarico.
En los peces, el desarrollo inicial del foliculo
ovarico parece no depender de la hipofisis. Las
celulas del epitelio folicular se diferencian para
formar una granulosa glandular, separada del
6vulo por una zona pellucida no celular y se
desarrolla una teca a partir de los tejidos conec-
tivos circundantes. Dichas estructuras -granulosa,
zona pellucida y teca- pueden denominarse
envoltura folicular (Figura 4 ).
Fig. 4. Representacion diagramatica de/ 6vulo en desarrol/o. La es1eroidoge11esis estimulada par la gonado-
1ropi11a pituitaria se efec1ua en las celulas teca/es especiales de la e11vo/111ra folicular. Tomado de Hoary
Nagahama (1978).
13
VITELOGENESIS
La vitelogenesis comprende la incorporaci6n
def vitelo en los oocitos en desarrollo y, como ya
se mencion6, se cree que este proceso esta
controlado por una gonadotropina baja en gluco-
protelnas (Ng e Idler 1978). Las celulas receptoras
de la gonadotropina hipofisiaria parecen ser las
celulas tecales especiales de la envoltura folicular
(Hoary Nagahama 1978), y los esteroides sexuales
producidos aquijuegan un papel muy importante
en la regulaci6n de este complejo proceso.
El vitelo se deposita en dos form as: vesiculas de
vitelo y granulos de vitelo, siendo su deposici6n
normalmente secuencial. La formaci6n de vesiculas
de vitelo, que ocurre primero, recientemente ha
demostrado ser inducida por estr6genos en la
carpa dorada (Khoo 1979); se cree que los
granulos se forman bajo la influencia de la
pregnenolona. La sintesis de los precursores del
vitelo se efectua en el higado y ha probado ser
estimulada por los estr6genos (Ho y Vanstone
1961; Campbell e Idler 1976).
Las hormonas de la tiroides tambien participan
en la vitelogenesis. Baj as dos is de tiroxina estimu-
lan la vitelogenesis en la carpa dorada inmadura
(Hurlburt l 977a) y se ha sugerido que las honno-
nas de la tiroides actuan sinergisticamente con la
gonadotropina para influir en el desarrollo ovarico,
posiblemente a traves de un aumento de la
celula tee a I especial
zona pellucida
membrana base
 / ' • .t·.
L'. \. , '• ' '

Aplicacion dorsal de una inyeccion intramuscular de extracto pituitario a una hembra gravida.
(Foto H Chaudhuri).

sensibilidad ovarica ante el estimulo de la gonado- de los oocitos en el bagre (Sundararaj y Vasa)
tropina. 1976; Jalabert 1976).

0VULACI6N
MADURACION DE LOS OOCITOS
La ruptura folicular y la expulsion del oocito
Las etapas finales del desarrollo de los oocitos desnudo parece ser independiente del control
y foliculos pueden disociarse experimentalmente hipofisiario. Tanto las prostaglandinas como las
de la ovulaci6n (expulsion del oocito desnudo, catecolaminas se han propuesto como mediadoras
fuera del foliculo y hacia la cavidad ovarica o (Jalabert 1976); Stacey y Pandey ( 1975) han
peritoneal). El esteroide l 7a-hidroxi-20,6-dihi- proporcionado evidencia in vivo que confirma la
droprogesterona ( 1 7a-20,6 Pg) producido por la intervenci6n de las prostaglandinas en la ovula-
envoltura folicular en respuesta a la gonadotropina ci6n de la carpa dorada.
pituitaria, se ha propuesto como el mas probable
mediador de la maduraci6n de los oocitos en la
trucha arco iris (Sa/mo gairdneri), en el lucio del
norte (Esox /ucius) yen la carpa dorada (Caras -
sius aural/ls) (Jalabert 1976). Los corticoesteroides
pueden desempeflar un papel indirecto, posible-
mente a traves de la sensibilizaci6n de los oocitos
a la acci6n del l 7a-20/; Pg; esas hormonas asumen
una funci6n aun mils importante en la maduraci6n

14

3. REPRODUCCION
INDUCIDA:; TEO RIA
El mayor interes de! acuocultor que este desa-
rrollando un programa de reproduccion inducida
es estimular la ovulacion. La oviposicion (desove)
no necesariamente ocurre de manera espontanea;
los huevos pueden extraerse manualmente de! pez
yen efecto este procedimiento es aconsejable si se
ha de lograr un control total de la fecundacion. Sin
embargo, para ello hay que asegurar ante todo una
madurez completa, normalmente mediada por la
gonadotropina pituitaria. i,En que etapa o etapas
de! ciclo de reproduccion se pue'de intervenir
eficazmente? La Figura 3 indica las etapas de la
maduracion femenina en las cuales hasta el
momento ha sido posible intervenir para esti-
mular la ovulacion en cautiverio.
Tai como se ha sefialado, la manipulacion de
parametros ambientales (etapa I de! diagrama) a
pesar de haber sido objeto de extensas investi-
gaciones en especies de climas templados, esta
fuera de! alcance de este anitlisis. Es preciso
anotar tambien que la actual intervencion con
quimicos esta dirigida solamente hacia Ia parte de
la secuencia que conduce a la maduracion final
de! oocito. La ovulacion en si, aunque es el
objetivo final de cualquier esfuerzo de estimula-
cion, parece ocurrir como resultado de estimulos
endogenos despues de .la maduracion final de!
oocito, si bien hay factores ambientales que
tambien pueden contribuir. En terminos de la
efectividad practica, nos quedan las etapas 2, 3 y
4 enumeradas en orden de importancia relativa.
La administracion de gonadotropina exogena es
definitivamente el procedimiento de mayor impor-
tancia; la intervencion en la interfase hipotalamica-
pituitaria con administracion de hormonas libera-
doras (etapa 3) es procedimiento promisorio y
recientemente ha tenido resultados practicos; la
intervencion a nivel de esteroides sexuales (etapa
15
4 ), ya sea mediante la simple administracion o
control retroinformativo, es actualmente objeto
de investigaciones experimentales.
ADMINISTRACION DE GONADOTROPINAS
EXOGENAS (ETAPA 2, FIGURA 3)
La hipofisacion consiste en la inyeccion intra-
muscular o intraperitoneal, de extractos crudos de
hip6fisis de pez. La tecnica basica ha existido
desde hace algun tiempo -Houssay efectuo
experimentos preliminares en I 9 31- y se ha
refinado considerablemente a lo largo de los afios.
Sigue siendo la ilnica altemativa realista para el
cultivador rural de peces, tanto por razones
economicas como tecnicas. Para obtener infor-
macion sobre Ios metodos de recoleccion, prepa-
racion y almacenamiento de hipofisis, referimos
al lector a las recientes resefias de Chaudhuri
(1976), Shehadeh (1972) y Yamazaki (1976).
Los inconvenientes de la tecnica de hipofisa-
cion pueden agruparse como problemas de dosifi-
cacion y de provision. El problema de la dosifica-
cion es en gran parte el resultado de la crudeza de
la tecnica: la actividad de un extracto depende de
la edad, sexo y estado de madurez de! donante, asi
como de! metodo de extraccion y tecnica utilizada
para preservar Ia glandula (Jalabert et al. 1977).
Ademas, el extracto contiene numerosas hor-
monas pituitarias no relacionadas con la repro-
duccion, de modo que solo se pueden hacer
conjeturas en cu anto a su actividad especifica. La
distancia filogenetica entre donante y receptor es
otro factor que hace bastante empirico el calculo
de la dosis. La practica comun es aumentar la
dosis para extractos pituitarios heteroplasticos;
por ejemplo, se han administrado extractos pitui-
tarios de bagre inmaduro quintuplicando la dosis
homoplastica, para inducir la ovulacion en la
carpa de la India (Varghese et al. 1975 ). Aunque
la dosis administrada era alta, el costo de extrac-
cion y preparacion de los hip6fisis de bagre era la
quinta parte de! costo con donantes homoplitsticos;
ya que los bagres se abren y se secan al sol antes
de sacarlos al mercado, la extraccion de la
glandula -procedimiento que mutila la cabeza-
no afecta su comercializacion.
Esta observacion sirve para introducir el problema
de! suministro de hipofisis. La extraccion de la
glandula implica el sacrificio de un reproductor
potencial (aunque puede extraerse de peces deso-
vados ), o, en el caso de! pescado que va al
mercado, en muchas partes de! mundo implica
una grave devaluacion de! producto. Aunque se
puede encontrar un substituto adecuado, la de-
manda de hip6fisis siempre excede a la oferta y la
extraccion es procedimiento que toma mucho
tiempo. Sin embargo, por fortuna, es posible
deshidratar, envasar en ampolletas y almacenar
casi indefinidamente las hipofisis, y durante los
ultimas aflos hemos visto el establecimiento de
bancos de hipofisis, en especial por el Instituto de
lnvestigaciones de Pesca Castera de la India y el
Programa de Coordinacion y Desarrollo de la
Acuocultura FAO/PNUD (Anonimo l 977d).
La estandarizacion de la dosis, empero, no se
puede efectuar sin previo conocimiento de la
actividad gonadotropica de los extractos, por lo
cual es muy importante llevar a cabo el analisis
apropiado. Las gonadotropinas de los teleosteos
son inactivas en la mayor parte de los bio-ensayos
(Burzawa-Gerard y Fontaine 1972); Burlakov et
al. ( 1976) y Shehadeh ( 1972) analizaron los
intentos de diseflo de un procedimiento apropiado.
Donaldson y sus colegas han usado durante
varios aflos un analisis basado en la asimilacion
de fosfato radioactivo en el tejido testicular de
pollitos de un dia de nacidos, que ha demostrado
ser sensible y preciso (Donaldson 1973).
Los esfuerzos siguen dirigidos hacia la busqueda
de una gonadotropina purificada cuya actividad
pueda estandarizarse y cuya provision pueda
asegurarse en reemplazo de los extractos pitui-
tarios crudos. Se ha empleado gonadotropina de
salmon 'chinook' Oncorhynchus tshawytscha
parcialmente purificada (Donaldson et al. 1972)
para inducir la ovulacion de varias especies
cultivadas, entre ellas el bagre (Sundararaj et al.
1972) y la lisa (Kuo y Nash 1975). El costo
promedio (120 dolares canadienses) es sin em-
bargo muy elevado. En Malasia, los intentos de
inducir la ovulacion de la carpa cabezonaAn'stich-
thys nobilis con gonadotropina de salmon parcial-
mente purificada (SG-G I 00) produjeron unica-
mente exitos ocasionales y solo con dosis
(14 mg/kg) comparables a la dosis efectiva de
hipofisis de carpa comun secada con acetona; los
efectos combinados de la especificidad de las
especies y el costo resultaron prohibitivos (Tajud-
din 1978 sin publicar).
El costo es menos importante en el caso de
varias gonadotropinas de origen mamifero. Estas
hormonas son producidas por la placenta y dos de
ellas pueden conseguirse en forma purificada: la
gonadotropina corionica humana (GCH) extraida
de la orina de la mujer encinta y la extraida del
suero de yegua preflada. La primera ha asumido
una importancia mucho mayor en la piscicultura.
Su accion fisiologica se asemeja a la de la
hormona luteinizante de los mamiferos, aunque
las dos hormonas no son estructuralmente iden-
ticas y existe gran variacion entre las especies en
respuesta al factor placental. El efecto de las
16
hormonas de mamiferos, en terminos generales es
mas incierto que el de las gonadotropinas de pez
(Fontaine 1976), reflejando quiz as la gran distancia
filogenetica entre los dos grupos. Su empleo es
atractivo ya que las dosis efectivas pueden resultar
mas economicas que los extractos pituitarios de
pez (Carreon et al. 1976). La gonadotropina
corionica humana (GCH) se ha utilizado amplia-
mente en el desove de peces cultivados (Pickford
y Atz 1957; Yamazaki 1965) y SU exito por lo
general se ha atribuido a la actividad semejante a
la HL (Chaudhuri 1976). Ya sea sola o combi-
nada con extracto pituitario de mamifero (una
preparacion comunmente utilizada es el Syna-
horin), la GCH ha demostrado ser efectiva y
economica para inducir el desove en la gran carpa
de la India (Chaudhuri 1976; Bhowmick 1979),
en el Mugil cephalus (Liao 1975) y en la carpa
china An'stichthys nobilis e Hypophthalmichthys
molitrix (Tajuddin 1978 sin publicar), cuando se
administra conjuntamente con un extracto pitui-
tario homo o heteroplastico. Hay pocos casos de
exito usandola sola, aunque Chen et al. ( 1969) y
Carreon et al. ( 1976) reportaron ovulacion, bajo
condiciones experimentales, de las principales
carpas chinas y del bagre Clan'as macrocephalus
respectivamente. Kuo et al. (l 973b) reportan
desove natural de la lisa, en respuesta a una dosis
preparatoriade 20 Ul/g seguida 24 horas despues
por una inyeccion de 40 Ul/g.
Pocas investigaciones se han dirigido hacia la
evaluacion de la influencia de la temperatura
sobre la efectividad de la gonadotropina adminis-
trada. Sin embargo, los piscicultores saben bien
que un aumento en la temperatura de! agua reduce
el tiempo entre la inyeccion y la ovulacion
(capitulo 4). Stacey y sus colaboradores ( 1979)
han demostrado que la carpa dorada inducida a
ovular mediante inyeccion de GCH o gonado-
tropina de salmon (SG-G I 00), tiene un periodo
de latencia entre la inyeccion y la ovulacion
sensible al cambio de temperatura y que cada
aumento de 4 a 5 °C, reduce significativamente el
tiempo de la liberacion de los huevos.
La tecnica de hipofisacion, a pesar de su
aparente sofisticacion, sigue siendo un arte. No es
probable que sea desplazada de su posicion de
metodo de preferencia para el piscicultor rural y
en efecto, puede emplearse sin equipos de refrige-
racion, centrifuga·o balaceo electrico (Bhowmick
y Kowtal 1973). Mientras no se conozca y se
generalice una sustancia que cumpla con los
requisitos de bajo costo, actividad conocida y que
sea facil de almacenar, el exito del piscicultor
aumentara mas desarrollando un metodo confiable
de verificar el estado de desarrollo gonadal, que
manipulando quimicos ad hoc. Hay sin embargo
Corte de la cabeza de un salmon comzln en donde se aprecia la ubicacion de la hip6jisis. El
mesencefalo se dobla hacia atras para extraerla.
(Foto B. C. Research).

signos alentadores de que pronto se encontrara el zante) ha hecho posible la intervenci6n en la

agente apropiado. Syndel Laboratories Ltd. de
Vancouver ya esta produciendo para el comercio
el polvo de hip6fisis de salmon secada con
acetona, preparaci6n que tiene las ventajas del
bajo costo y actividad conocida y podra asumir
gran importancia en los futuros programas de cria
en el Sudeste Asiatico.
HORMONAS LIBERADORAS DE
GONADOTROPINA (ETAPA 3, FIGURA 3)
La introducci6n del decapeptido sintetico LH-
RH (hormona liberadora de la hormona luteini-
cadena endocrinol6gica, un paso antes de la
aplicaci6n de la gonadotropina misma: es decir,
en la intetfase hipotalamica-pituitaria. Las investi-
gaciones en este campo son comparativamente
recientes y los resultados obtenidos son en gran
parte experimentales. Sin embargo, el campo es
promisorio y los futuros avances problablemente
beneficiaran al cultivador.
La administraci6n de LH-RH sintetica aumenta
el nivel de la hormona gonadotropina en el plasma
de la carpa comtin Cyprinus carpio (Breton y
Weill 1973) y de la trucha marr6n macho Sa/mo
trotta (Crim y Cluett 1974); en esta tiltima, el
efecto se ha notado unicamente en peces maduros.

17
La accion de la LH-RH tambien se ha demostrado
mediante la inyeccion intracerebral en la carpa
dorada (Crim et al. 1976). La administracion
intracelular de la droga con una dosis de I ,ug/kg
estimulo la maduracion ovarica de la carpa
comun (Sokolowska et al. 1978) y en efecto,
grandes dosis de LH-RH sintetica han inducido la
ovulacion en la carpa dorada (Lam et al. 1975;
1976) yen el ayu Plecoglossus altivelus (Hirose e
Ishida 197 4 ). Lamy sus colaboradores ( 1978 sin
publicar) notaron un cambio estacional en la
eficacia de la LH-RH para inducir la ovulacion.
La variacion en la manera de administrar el
liberador -intraperitoneal, intracerebral e intra-
muscular- dificulta la comparacion de los resul-
tados y seria util un estudio sistematico de ese
factor.
Se ha sugerido que la magnitud de la dosis
requerida para inducir la ovulacion en el pez,
relativamente alta segun estandares mamiferos,
refleja una especificidad filogenetica de la hor-
mona liberadora. Pero actualmente existen diversos
analogos estructurales sinteticos de la LH-RH,
algunos de los cuales poseen una vida media mas
larga y son mas potentes en los mamiferos que el
decapeptido LH-RH (Arimura et al. 197 4; Monahan
et al. 1973). Los informes recientes sobre su
aplicacion en peces son indicacion de su futura
importancia en el control de la reproduccion de
los peces. Lam y sus colaboradores ( 1978 sin
publicar) han encontrado que el analogo nonapep-
tido de la LH-RH (D-Ala6 -des-Gly-NH2 10 )-LH-
RH-etilamida (Ayerst 25205) es parcialmente
efectivo en inducir la ovulacion en la carp a dorada
con unadosis ( 10 ng/g) ineficaz para la LH-RH, y
Donaldson et al. ( 1978) encontraron que el
mismo analogo es mas potente que la LH-RH
para inducir la maduracion final y la ovulacion de!
salmon "coho" Oncorhynchus gorbuscha.
El analogo de la LH-RH D-Ser-(But) 6 -des
Gly10 -LH-RH etilamida (Hoechst 7 66) ha demos-
trado tener todavia mas potencia; dosis tan bajas
como 0,011 mg/kg resultaron efectivas para
inducir la ovulacion de! salmon "coho", prece-
didas por una inyeccion preliminar de gonado-
tropina de salmon (Donaldson et al. 1979). La
investigacion sobre los analogos de LH-RH se ha
llevado a cabo especialmente en la China, en
donde desde 1974 se ha venido investigando
extensivamente la propiedad de! Ayerst 25 205
para inducir el desove en la carpa plateada
Hypophthalmichthys molitrix, en la carpa cabe-
zona An'stichthys nobilis, en la carpa hervibora
Ctenopharyngodon idellus y en la carpa negra
Mylopharyngodonpiceus (Anonimo 1977, a,b).
El compuesto (llamado LRH-A) se administra ya
sea intramuscular o intraperitonealmente, encon-
18
trandose que la dosis eficaz minima es de I ,ug/kg
y 0,002 ,ug/kg respectivamente. En el caso de la
carpa hervibora, que ha demostrado ser refractaria
a la GCH sola, una inyeccion unica de 5-
10 ,ug/kg de LRH-A produjo un porcentaje de
ovulacion de! 86%, comparada con resultados
obtenidos con extracto pituitario. Para las carpas
plateada y cabezona, las dosis minimas fueron de
3 ,ug/kg y I, 4 ,ug/kg administradas en dos inyec-
ciones; para la carpa negra la dosis de 5-200 ,ug/kg
seguida de 0,5-2 mg de extracto pituitario, pro-
dujo una tasa de desove de! 74,6%. Nose sabe
con claridad si el desove fue espontaneo o si se
extrajeron los huevos. El LRH-A tambien resulto
efectivo para inducir el espermatismo en los
machos maduros. Un beneficio inesperado de!
LRH-A fue el efecto sobre la mortalidad general
de los reproductores; en 1974, empleando GCH
y/o extracto pituitario de carpa, la mortalidad
posterior al desove era de! 57%, mientras queen
1975 y 1976, cuando se introdujo el LRH-A, la
mortalidad bajo al 11,8% y 3,5% respectivamente.
Se requiere mas experimentacion antes de atribuir
esta disminucion de la mortalidad totalmente al
cambio de hormona.
ADMINISTRACION DE ESTEROIDES
SEXUALES (ETAPA 4, FIGURA 3)
La gonadotropina, sea endogena o exogena, se
consider a estimulante de la biosintesis de! esteroide
l 7a-20~Pg en la envoltura folicular; dicho es-
teroide induce luego la maduracion final de los
ovulos. Los estrogenos, a pesar de tener una
importante funcion en las etapas iniciales de!
desarrollo de! oocito, en especial en la vitelo-
genesis, no parecen participar en las etapas
posteriores de la maduracion -interes principal
de! piscicultor. La intervencion con quimicos a
nivel de! oocito mismo, tiene algun atractivo
intuitivo; parece representar una solucion mas
sencilla que elimina intermediarios hormonales
como la gonadotropina y la hormona liberadora.
Sin embargo, existen muy pocos informes sobre el
uso eficaz de los esteroides sexuales para inducir
la ovulacion.
Khoo ( 197 4) se ha adjudicado el logro de la
induccion de la ovulacion en la carpa dorada,
despues de administrar progesterona; los estro-
genos, androgenos y pregnonelona resultaron
ineficaces. Se ha logrado mas exito con el l 7a-
20~ Pg; Jalabert demostro (197 6) que era un
potente inductor de la maduracion in vitro de
oocitos de la carp a dorada, trucha arco iris y lucio
de! norte. A pesar de que Lam y sus colabora-
dores ( 1978) no lograron inducir la ovulacion en
 Hip6fisis/Hipotalamo - - Gonadotropina----1- Esteroides gonadales

0 0 0

A L Via de retroalimentaci6n negativa - - - - -

Hip6fisis/Hipotalamo _ ___,.,_ Gonadotropina Esteroides gonadales

I
0 @ 0 I
c c c I
I
I
I I
I I
I I
I
B \I _________ - - Via ineficaz ____________ )

Fig.5. Control de/ nivel de esteroides gonadales: (A) el sistema opera normalmente y la produccion de
gonadotropina se regula como resultado de la interaccion de /os esteroides sexuales en puntos de union en la
hipofisis y en el hipotalamo (circu/os abiertos). (B) Los centros de union estan ocupados por moleculas de
c/omifeno, por lo cual se descontrola la liberacion de gonadotropina y el nivel de /os esteroides gonadales sigue
aumentando.

la carpa dorada con es ta sustancia, J alabert et al.
( 1977) la encontraron eficaz en Cyprinus carpio
despues de una pequefta dosis preliminar de
extracto pituitario. Parece que la inyecci6n de
l 7a:-20fJ Pg es eficaz unicamente durante las
ultimas etapas de la maduraci6n de los oocitos.
Esto impone el requisito de administrarlo en el
momento preciso, lo cual parece limitar su posible
aplicaci6n practica en especial careciendo de un
metodo confiable para evaluar el estado de madu-
raci6n gonadal en las hembras (biopsia ovarica).
Un segundo medio, menos directo, es a traves
del control retroinformativo de la secreci6n de
gonadotropina. Se cree que la liberaci6n de
gonadotropina es ta regida por un sistema negativo
de retroinformaci6n en el cual los centros en la
hip6fisis y en el hipotalamo responden al nivel de
esteroides gonadal es en circulaci6n (Peter y Crim
1979). La elevaci6ndel nivel de esteroides sexuales,
por ejemplo, induce una disminuci6n en la secre-
ci6n de gonadotropina ante lo cual la liberaci6n de
esteroides baja de nuevo al nivel apropiado; la
baja en el nivel de esteroides tiene el efecto
contrario (Figura SA). Billard et al. ( 1977) pre-
sentan evidencia de este ti po de sistema de control
e informan sobre un aumento en los niveles de
gonadotropina del plasma sanguineo despues de
castrar a la trucha arco iris; se ha apreciado en el
pez piano Xiphophurus maculatus y en la carpa
dorada una sensibilidad de la hip6fisis y del
hipotalamo a los esteroides gonadales al asimi-
larlos esas areas (Kim et al. 1978). Esos centros
pueden considerarse como fijadores de esteroides
y recientemente se han dirigido esfuerzos investi-
gativos para aprovechar su sensibilidad a los
esteroides gonadales como medio de estimular
artificialmente la liberaci6n de gonadotropina.
Lo que se requiere es un compuesto que
compita con los esteroides gonadales end6genos
para fijar sitios en la hip6fisis y en el hipotalamo
de modo que se libere gonadotropina indepen-
dientemente del nivel hormonal. El sistema negativo
de retroinformaci6n se torna entonces positivo y
tiene como resultado un aumento artificial del
nivel de esteroides gonadales (Figura SB). Se cree
que el antiestr6geno citrato de clomifeno posee
esta propiedad (Pandey y Stacey l 97S). Al
implantar clomifeno en la hip6fisis de carpa
dorada, se han elevado los niveles de gonado-
tropina en el plasma (Billard y Peter 1977),
elevaci6n que podria acarrear la inducci6n de la
ovulaci6n que sesabe produce la droga(Pandeyy
Hoar 1972).
La determinaci6n de la dosis del clomifeno
suficiente para inducir la ovulaci6n sigue siendo
un problema; Breton et al (l 97Sa) afirman que,
para la carpa comun, una dosis de alrededor de
I mg/kg provoca liberaci6n de gonadotropina,
mientras que dosis muy superiores a I 0 mg/kg
tienen el efecto contrario. La respuesta a la droga

19
es ademas dependiente de! estado de maduracion
gonadal. Por razones como esta, se requiere mas
investigacion antes de usar en la practica el
clomifeno y otros antiestrogenos como el tamoxi-
fen (Donaldson et al. 197 8). No obstante, se han
sugerido algunas aplicaciones especificas: Abra-
ham (1975) sefiala que las celulas secretoras de
gonadotropina en la lisaMugil cephalus criada en
agua dulce, presentan menor actividad sintetica
comparadas con las de peces de agua salada y
sugiere que la suspension correspondiente de!
desarrollo ovarico podria superarse mediante la
administracion de clomifeno. En una de las pocas
pruebas de campo reportadas hasta la fecha, los
ensayos de inducir la ovulacion en la carpa de la
India Labeo rohita fueron infructuosos (Bhow-
mick et al. 1979).
NUEVAS POSIBILIDADES
Debido a la complejidad de las interrelaciones
endocrinas, es dificil afirmar con certeza que el
efecto observado al administrar una hormona es
directo, o si por el contrario, co mo en el caso de la
gonadotropina, esta regulado por conexiones hor-
monales secundarias. La situacion se complica aun
mas cuando la sustancia administrada es en si una
mezcla de hormonas, como el extracto pituitario
crudo utilizado para la hipofisacion. La presencia
de tirotropina, por ejemplo, puede contribuir
significativamente al efecto sobre el desarrollo
gonadal generalmente (y vagamente) atribuido a
la gonadotropina. Hurlburt (l 977a,b) ha demos-
trado que la hormona tiroidea puede tener una
importante funcion en la maduracion ovarica
( capitulo 2) y se ha notado que ciclos de la
actividad tiroidea coinciden con la maduracion
20
gonadal en algunos teleosteos (Sage 1973). Ya
hemos sefialado la funcion de! higado en la
vitelogenesis y se ha observado que la hormona
tiroidea tiene un efecto regulador sobre el higado
en el pez (Takashima et al. 1972). Las futuras
investigaciones sobre el funcionamiento de la
glandula tiroides en los teleosteos, pueden entonces
indicar con precision el papel de la hormona
tiroidea en el control practico de la reproduccion
de! pez.
No debe ignorarse la posible importancia de las
hormonas estimulantes de! crecimiento. El ovario
de los teleosteos puede aumentar desde el I%
hasta el 20% de! peso corporal durante la madura-
cion y sus requerimientos de energia son abun-
dantes. Los diversos factores de estimulo de!
crecimiento podran por lo tanto tener un papel
importante en el desarrollo gonadal y la posible
importancia de dichas sustancias debe reflejarse
en futuros programas de investigacion. Tanto la
prolactina como la hormona de! crecimiento son
producidas por la hipofisis de los teleosteos;
aquella se ha relacionado con la reproduccion y el
crecimiento somatico en diversos vertebrados
(Hoar 1975). Donaldson el al. (1978) reciente-
mente revisaron los efectos de la administracion
de la hormona de! crecimiento en los peces.

4. PRACTICA DE LA
REPRODUCCION INDUCIDA
CARPA COMUN Y CARPAS DE LA CHINA Y
DE LA INDIA
La literatura referente a Ia induccion artificial
de Ia ovulacion en Ia carpa presenta ciertos
problemas para el critico. Segun el criterio cienti-
fico internacional, es en su mayoria de baja
calidad. Es comun, por ejemplo, que no se
identifiquen las especies. Un procedimiento de
hipofisacion puede describirse unicamente para
"carpa china", siendo de poca utilidad para el
Jector que este tratando de hacer desovar Ia carp a
hervibora y que ya sepa que en general el desove
es mas dificil de Jograr en esta especie que en Ia
carpa plateada o en Ia cabezona. EI origen del
extracto pituitario inyectado no siempre se conoce
con exactitud y un informe puede no mencionar si
las glandulas son de pez macho o hembra, maduro
o inmaduro. Rara vez se especifica si el peso es
"humedo" o "seco" al describir el calculo de Ia
dosis, a pesar de ser un dato importante para el
criador que desee adoptar un nuevo metodo. Los
informes sobre induccion 'exitosa' del desove,
rara vez son el resultado de experimentos contro-
Jados y Jos criterios empleados para describir el
grado de exito alcanzado son a menudo inade-
cuados. Se encuentra con frecuencia el termino
"respuesta positiva", pero no se aclara si se
refiere a ovulacion, desove, fecundacion o incuba-
cion. Una variable importante, que dificulta Ia
comparacion de Jos resultados, es el metodo de
incubacion empleado; es un determinante esencial
para Ia supervivencia de las crias y sin embargo no
se especifica en muchos casos.
Esta critica no trata de ser despectiva, pues hay
causas subyacentes que dificultan Ia interpreta-
cion de Ia literatura. Para comenzar, Ia mayoria
21
de las investigaciones son efectuadas por cria-
dores practicos que no han recibido capacitacion
cientifica formal. Las instalaciones disponibles
para Ia experimentacion son en general las de un
centro de cria de peces a menudo en una region del
mundo en desarrollo con dificultades para conse-
guir el equipo cientifico. Una tercera y menos
tangible razon es que Ia practica de Ia hipofisacion
puede haber asumido caracteristicas de arte y por
consiguiente Jos informes publicados tienen un
saborclaramente regional; es como si cada tecnica
representara una adicion al repertorio local, pres-
tando poca atencion a las razones biologicas del
exito 0 del fracaso.
Sin embargo, es imposible escapar a las Jeyes
biologicas basicas y el problema de inducir Ia
ovulacion sigue siendo de naturaleza cientifica.
Por ello se aborda mejor con experimentos bien
diseiiados, efectuados bajo condiciones contro-
Jadas. No hay razon por Ia cual este tipo de
investigacion no pueda coexistir con informes
menos rigurosos de estaciones en el campo; Jo
importante es iniciarla. La investigacion sobre Ia
induccion de Ia ovulacion en Ia Iisa y el sabalo
confirma el hecho de que este tipo de programa
puede tener resultados importantes en un tiempo
comparativamente corto. Los trabajos con estas
especies, aunque recientes, se han efectuado en su
mayoria en instalaciones bien equipadas en Hawai,
Taiwan y Filipinas, y el disefto experimental
surgido de esos Jaboratorios ha producido resul-
tados mas significativos.
Las mismas especies de peces pueden cultivarse
en diferentes partes del mundo, variando su
ritmo de crecimiento y desarrollo reproductivo
segun Ia zona climatica. La carpa china por
ejemplo, es especie "exotica" en Ia India y puede
alcanzar Ia madurez sexual en Ia mitad del tiempo
requerido en su region de origen. Por esta y otras
razones, es dificil presentar un metodo estandar
de induccion de Ia ovulacion para todas las carpas
chinas y de Ia India. EI criterio adoptado aqui ha
sido, pues, el de reunir un cuadro comparativo de
Jos metodos publicados que hayan demostrado
tener algun grado de exito (Cuadro 1). La Iista es
selectiva y, esperamos, no arbitraria. Los datos
provienen, en Ia mayC'ria de Jos casos, de Jos
resultados public ados sobre experimentos de cria,
aunque Jos procedimientos recomendados en di-
versos manuales de piscicultura se han incluido
en donde son apropiados. La carpas comun, china
y de Ia India se han agrupado por especies y para
fines comparativos se anota el pais en donde se
han criado. Dado el estado actual de Ia experi-
mentacion en este campo, el Jector puede consi-
derar el cuadro mas como fuente de ideas que
como Iista de metodos definitivos.
 Cuadro I. Tecnicas de Reproduccion lnducida - Carpas comun, chinas y de la India.

Edad
de! Temp.
Inyecci6n
Epoca repro- Numero de! Evaluaci6n
del ductor de agua del estado
Especie (pais) ai\o (a) hem bras ( "C) gonadal Sustancia (via) Disolvente I a. dosis 2a. dosis
Cypn'nus carpio 25-28 H: vientre Hyp6fisis de NaCl: H: I hip6fisis por
(Nepal) dis ten dido, Cyprinus carpio glicerina kg. de peso
blando; cloaca secada con 7:3 0,6%. M: Total I
hinchada, acetona (IM) hip6fisis
rojiza.
M: sale
esperma bajo
presi6n suave.
Cypn'nus carpio 13 24-27 H: vintre Hip6fisis de NaCio H: 6 mg/kg de H: 6 mg/kg
(Singapur) distendido; Puntius agua peso htimedo M: 12 mg/kg
cloaca gonionotus destilada
rosaduzca. (IM) al 0,6%
M: sale
esperma bajo
presi6n suave.
Todas las grandes Mayo- 2-4 24-31 H: abdomen Hip6fisis NaCl al H: 2-3 mg/kg H: 5-8 mg/kg
carpas de la India Julio blando, homoplasticas 0,3% M: 2-3 mg/kg
(India) (Mon- protuberante; (IM)
son) poro
hinchado,
ros·ado.
M: sale
esperma bajo
presi6n sauve.
Labeo rohita Julio- 32 Hip6fisis Agua H: 0,5 de H: I glimdula en
(India) Agosto homoplasticas destilada glimdula en 0,75 ml de agua
de donante 0,5 ml de agua M: 0,25 de
semejante (IM) glandula en 0,5 ml
de agua
Labeo rohita, Julio 2-4 II 25-27 Hip6fisis de la H Total
Cirrhinus mn'gala especie 30 mg/kg
(India) Tachysurus M: Total
bagre man'no 20 mg/kg
(JM)

Hypophthal- 2-4 60 H: abdomen Hip6fisis de NaCl al

michthys molitn'x grande, Cypn'nus carpio 0,75%
(Israel) blando. (IM)
M: esperma
bajo presi6n
sauve.
Hypophthal- 2 12 27-28 H: vientre Hip6fisis de NaCl H: 5-6 mg/kg H: 5-6 mg/kg
michthys molitn'x Ueno, blando; Cyprinus carpio 0,6% de peso h time do M: 5 mg/kg
(Malasia) cloaca oPuntius
hinchada gonionotus M o
rosada F (IM) o (IP)
M: esperma
bajo presi6n.
Ctenopharyngo- 2 IO 27-28 Hip6fisis de NaCl H: 5-6 mg/kg H: 5-6 mg/kg
don idellus Cypn'nus carpio 0,6% de peso htimedo M: 5 mg/kg
(Malasia) o Puntius
gonionotus M o
F (IM) o (IP)
Ctenopharyngo- 25 20-28 LRH-Ab Base H: 5-10 µg/kg
don idellus de agua M: 2,5-5 µg/kg
(China)

22
Cuadro I.

Demora de
ii.Ta la ovulaci6n Metodo de Metodo de
(h) (h) fecundaci6n incubaci6n Resultados Comentarios Referencias
8-10 Desove 'Hapa' o embudo Manual de A menor temp. del agua mayor Woynarovich (1975)
artificial; incubador forrado Instrucciones; no se demora de la ovulaci6n. Contiene
en seco. en tela; 5-10 I de dieron resultados. datos sobre hipofisaci6n de carpas
agua/min. chinas, pero son confusos los detalles
de la inyecci6n; abundante
inforrnaci6n sobre tecnicas de
fecundaci6n e incubaci6n.

6-7 Desove Todos desovados; No se ha determinado todavia la Tay (1973)

natural. se obtuvieron 65 .000 cantidad exacta de extracto pituitario
alevinos. requerido.

6 3-6 Desove 'Hapa' doble Manual de Instruc- Este "metodo estandar" para carpas Chaudhun· ( 1972)
natural estancado; se sa- ciones; se cita un exito de la India se ha modificado poco
en 'hapa' de can los huevos del del 60-100%. desde 1963. Los mejores resultados
cria 'hapa' de reprod. se obtienen en dias frios, ventosos y
6-8 h. post-fecund. lluviosos.

6 Fecunda- Resultados positivos: Version simplificada del metodo Bhowmick y Kowtal

ci6n 72%; se produjeron anterior, destinada al piscicultor (1973)
natural. 1.650.000 huevos. rural. El extracto se prepara justo
antes de usarse; no se centrifuga.

Respuesta positiva en lneficaces las dosis de 20 mg/kg (h) y Varghese et al.

7 de las 11 hembras. 15 mg/kg (m). Se usaron dosis altas (1975)
debido a la distancia filogenetica
entre donante y receptor. Cuesta 1/3
de! costo de las hip6fisis
homoplasticas.
Desove Incubadoras con Se criaron 3 millones de La inyecci6n sa aplic6 con los peces Pruginin y Cirlin
artificial; agua corriente. larvas; supervivencia dentro del agua para evitar traumas. ( 1976)
en seco. del 50% hasta un
tamafto de 0,25 g.

5-6 Desove En vivero; Crias del 30% de las La adici6n del Synahorin al extracto Chen et al. ( 1969)
artificial; bandejas de agua hembras inyectadas, en tiene pocos efectos.
en seco. corriente en excelentes condiciones.
estanques; 'hapas'
estancadas.

5-6 Desove En vivero; Crias del 40% de las El estado de madurez de la hembra Chen et al. ( 1969)
artificial; bandejas de agua hembras inyectadas en nose puede evaluar por la forma
en seco. corriente en excelentes condiciones. intestinal debido a la presencia de
estanques; 'hapa' tejido adiposo mesente rico.
estancada.
15-20 Freza del 88% Se tra t6 un total de I 3 9 peces con An6nimo
LRH-A con diferentes regimenes de (1977a,b)
aplicaci6n de las inyecciones,
resultando un porcentaje general de
desove del 86, 3%.

23
 Cuadro I. (fin)

Ed ad
del Temp.
Epoca re pro- Numero del Evaluaci6n Inyecci6n
del ductor de agua del estado
Especie (pais) ailO (a) hem bras ('C) gonadal Sustancia (via) Disolvente la. dosis 2a. dosis
Ctenopharyngo- Julio- 11 28-31 Hip6fisis H: 3-5 mg/kg H: 7-10 mg/kg
don idellus (India) Agosto homoplasticas y M: 2-3 mg/kg
heteroplasticas
(IM)
Ctenopharyngo- Julio- l-2 8 27-33 Hip6fisis de NaCl Hy M: 0,23 al H: l-3,4
don idel/us Octubre Cyprinus carpio 0,6% hip6fisis hip6fisis mas
(Tailandia) y Synahorin o agua 20 unidades
(IM) destilada "rabbit" de
Synahorin
Ctenopharyngo- Mayo- 9 23-25 H: Distension Hip6fisis H: 45 UI/kg H: 383 UI/kg
don idel/us Junio abdominal. homoplasticas deGCH GCH seguidas
(Arkansas) M: espenna secadas con por 0,45 mg/kg de
bajo presi6n. acetona (IP) hip6fisis en 24 h
mas GCH (IM) (3 iny)
Ctenopharyngo- Mayo- 4 12 20-28 H: poro Hip6fisis H: 0,5-3 mg/kg H: 2,5-3,5 mg/kg
don idellus Junio rosaduzco homoplasticas de peso seco
(Nepal) M: espenna
bajo
pressi6n.
Hypophthal- 25-27 GCHmas H: 200 UI H: 4 mg/kg
michthys molitnx hip6fisis de GCH/kg de hip6fisis de
(Malasia) Cypn"nus carpio Cypn"nus carpio
Hypophthal- 198 20-28 LRH-Ab Base H: 10 µg/kg
michthys molitnx de agua M: 5 µg/kg
(China)
Hypophthal- Julio- 40 28--34 Hip6fisis H: 4 mg/kg H: 8-10 mg/kg
michthys molitnx Agosto homoplasticas y M: 2-3 mg/kg
(India) heteroplasticas
(IM)

Hypophthal- Mayo- l-2 JO 27-33 Hip6fisis de NaCl Hy M: 0,23-l H: l-3,4

michthys molitnx Agosto Cypn·nus carpio 0,6% hip6fisis hip6fisis mas
(Tailandia) mas Synahorin o agua 20 unidades
(IM) destilada "rabbit" de
Synahorin
Anstichthys nobi/1s 2 18 27-28 H: vientre Hip6fisis de NaCl H: 5--0 mg/kg H: 5--0 mg/kg
(Malasia) Ueno, blando; Cypn"nus carpio 0,6% peso hiunedo M: 5 mg/kg
cloaca oPuntius
hinchada, gonionotus M o
rosada. H (IM) o (IP)
M: espenna
bajo presi6n.
An"stichthys 25-27 GCH mas H: 200 UI H: 4 mg/kg
nobilis hip6fisis de de GCH/kg de hip6fisis de
(Malasia) Cyprinus carpio Cypn·nus carpio
An"stichthys 108 20-28 LRH-Ab Base de H: l-2 µg/kg H: 8-9 µg/kg
nobilis (China) agua M: 0,5-l µg/kg M: 4--4,5 µg/kg
Anstichthys Agosto l-2 27-33 Hip6fisis de NaCl Hy M: 0,23-1 H: l-3,4
nobilis -Sept. Cypn"nus 0,6% hip6fisis hip6fisis mas
(Tailandia) carpio mas o agua 20 unidades
Synahorin destilada "rabbit" de
Synahorin
a T = Lapso entre la primera y segunda inyecci6n.
b LRH-A = [D-Ala'-Des-Gly-NHi 10 ]-LH-RH-etilamida.

24
=
Demora de
11. Ta la ovulaci6n Metodo de Metodo de
(h) (h) fecundaci6n incubaci6n Resultados Comentarios Referencias
5--0 Desove 'Hapas' Fecundaci6n del Result6 ineficaz la combinaci6n de Singh et al. ( 1970)
artificial; estancadas. 15-80%; se produjeron Synahorin (25 UI) con extracto
en seco. 550.000 alevinos. pituitario.

~ 4--0 Desove 'Hapas en agua Ovulaci6n del 47% Boonbrahm et al.

artificial; corriente. (1968)
en seco.

24 10-16 Desove En vivero: frascos 66% ovulaci6n; Para la inyecci6n y el desove se Bailey y Boyd
artificial; de agua corriente. 20-98% eclosi6n. anestesiaron los peces con 7-10 ppm (1970)
en seco. de Quinaldina

6 12-14 Desove Embudos de cria I I de 12 hembras No se inyectaron los machos pues la Shrestha ( 197 3)
artificial; (capacidad ovularon; se produjeron espenna fluia libremente.
en seco. 20-30 I) en agua 400.000 crias
corriente
(0,5-0,8 I/min)
6 6-7 80% de ovulaci6n Infonne preliminar sobre los Tajuddin (1978 -
exitosa. trabajos, CIID. sin publicar)

22-24 84% de ovulaci6n An6nimo (1977 a, b)

inducida.

4-5 Desove 'Hapa' estancada. Fecundaci6n 5-80%; Efectiva la adici6n en las dos Singh et al. (I 970)
artificial; se obtuvieron 907 .000 inyecciones para las hembras, de
en seco. alevinos 25-50 UI de Syanhorin. La maxima
producci6n de alevinos se asoci6 con
el clima frio y lluvioso. Temperatura
optima del agua 27-30 'C
6-8 4--0 Desove 'Hapas' en agua Ovulaci6n del 67,7% Boonbrahm et al.
artificial; corriente. (1968)
en seco.

5--0 Desove En vivero; Crias del 66% de Poco eficaz la adici6n de Synahorin Chen et al. ( 1969)
artificial; bandejas de agua las hembras al extracto pituitario.
en seco. corriente; en inyectadas, en
estanques; 'hapas' buenas
estancados. condiciones.

6 6-7 80% ovulaci6n Wonne preliminar sobre los Tajuddin ( 1978

exitosa. trabajos, CIID. sin publicar)

12 82% ovulaci6n An6nimo

inducida. (1977 a, b)
6-8 4--0 Desove 'Hapas' en agua 91 % ovulaci6n. Boonbrahm et al.
artificial; corriente. (1968)
en seco.

25
EPOCA DEL ANO; EDAD DE LOS
REPRODUCTORES
Desde hace mucho se sabe que las especies de
climas templados crecen mas rapido y alcanzan
antes la madurez sexual en clima tropical. La
carpa china es un ejemplo notable y se ha
cultivado con exito en regiones tan distantes como
Rusi a y Malasia. En Moscti, por ejemplo, la carp a
china llega a la madurez sexual a los I 0 af10s
mien tr as que en Malasia lo hace a los dos aflos. La
mayor temperatura de! agua y el mayor fotoperiodo
pueden considerarse como los factores respon-
sables de la maduracion acelerada en los climas
mas calidos, aunque nose debe ignorar la influen-
cia de la dieta; Bienarz y sus colegas ( 1977)
demostraron una maduracion ovarica acelerada
en ejemplares de Cyprinus carpio alimentados
con una dieta rica en proteinas; la alimentacion
complementaria tambien ha demostrado producir
el mismo efecto en la carpa de la India Labeo
rohita (Bhowmick et al. 197 7).
Despues de alcanzar la madurez sexual, los
ovarios de las carpas de China y de la India en un
momento dado contienen oocitos en varias etapas
de desarrollo. Por ello, es posible que bajo las
condiciones de temperatura y dieta adecuadas,
puedan producir ovulos maduros mas de una vez
al aflo, especialmente en paises tropicales en
donde las temperaturas estables de! agua propor-
cionan excelentes condiciones para el crecimiento
de los peces. Chen et al. ( 1969) informan que las
carpas chinas criadas en Malasia pueden pre-
sentar dos o tres ciclos de desove al aflo y sugieren
que, vigilando la dieta, se podria disponer y
controlar los ciclos. Resultados en Malaca indi-
can que esto es posible; Tajuddin ( 1978 sin
publicar) afirma que actualmente es posible deso-
var la carpa plateada y la carpa cabezona casi
mensualmente.
En paises como la India, con estaciones mar-
cadamente secas o lluviosas (Monson), el ntimero
de desoves que se puede lograr en el aflo no es tan
alto como en el tropico, aunque Bhowmick et al.
( 1977) han logradorecientemente criar los mismos
especimenes de las grandes carpas de la India
Labeo rohita y Cat/a cat/a dos veces en la misma
estacion. Las carpas de la India en su medio
natural desovan una vez al aflo durante la estaci6n
de! monson; se cree que la mayor pluviosidad y la
menor temperatura de! agua son los factores que
contribuyen a producir la maduracion gonadal
final. Como se puede apreciar en el Cuadro I, la
reproduccion inducida tambien se practica bajo
esas condiciones.
26
EVALUACION DEL ESTADO GONADAL
El exito de la hipofisacion depende de la
correcta evaluaci6n de! estado de madurez gonadal
de la hembra. Por lo general es foci! reconocer a
los machos maduros, por la expulsion de liquido
espermatico al ejercer una suave presion en el
abdomen y, como se ha dicho, la hipofisacion de
los machos a menudo es innecesaria. Estudios
publicados sobre la cria de la carpa se han basado
en caracteristicas externas como "vientre inflado"
o "poro rosaduzco" para determinar el estado de
madurez gonadal de las hembras; empero, este
metodo se basa en la interpretacion subjetiva de
colores y forrnas por lo cual es a menudo
impreciso. El vientre lleno puede, por ejemplo,
reflejar una distension intestinal y el poro genital
hinchado y rosaduzco se observa corrientemente
en peces cuyos ovarios ya han empezado a
retroceder (Chen et al. 1969). El metodo es
especialmente dificil de aplicar a la carpa hervibora
y es probablemente por eso que, entre las carpas
chinas, esta especie es la mas dificil de desovar
por hipofisacion. El exito en la reproduccion
inducida de cualquier especie aumentara drama-
ticamente cuando se desarrollen metodos de
biopsia ovarica seguros y confiables, campo en el
cual hay urgente necesidad de investigacion. El
capitulo 5, Metodos de Biopsia Ovarica, tratara
mas a fondo ese tema, al sintetizar las tecnicas
existentes para la carpa, la lisa, el sabalo y el
bagre.
INYECCION
Sustancia: La mayoria de los metodos de! Cuadro
I incluyen la inyeccion de extracto pituitario
crudo de pez. Cuando se emplean hip6fisis hetero-
plasticas, la distancia filogenetica entre donante y
receptor no es grande; por ejemplo, a menudo se
usa la carpa com tin como donante para las carpas
chinas o de la India. Es preciso mencionar el uso
de hipofisis de bagre inmaduro para desovar
carpas de la India, en particular por la gran
economia financiera que implica (Varghese et al.
1975). Ya se ha analizado el empleo de la
horrnona sintetica LRH-A para desovar carpas
chinas y posteriores investigaciones podran de-
mostrar el importante lugar de este compuesto en
el campo de la piscicultura de! mundo entero.
Los extractos pituitarios crudos de pez pueden
extraerse de glandulas recien disecadas o de
glandulas conservadas en acetona o en alcohol
absoluto. Los informes disponibles no siempre
especifican la procedencia de la glandula, ni
tampoco su "peso seco" o "peso humedo" lo cual
hace dificil repetir los experimentos reportados.
De igual manera, tampoco se especifica a veces
el solvente utilizado, aunque NaCl al 0,6%
parece dar resultados consistentes. No se deben
inyectar mas de 0,5ml y hay que extraer cualquier
particula insoluble que quede despues de macerar
la glandula, ya sea por centrifugacion o sedimen-
tacion.
Detenninaci6n de la dosis: La ovulacion es
generalmente inducida por la aplicacion de extracto
pituitario o gonadotropina en dos dosis. La primera
se denomina dosis "estimulante" y la segunda
dosis "definitiva"; a los machos casi siempre se
!es inyectajunto con la segunda inyeccion de las
hembras. La division de la dosis total parece algo
arbitraria y el lapso entre las dos inyecciones se ha
determinado experimentando. El metodo de ca!-
culo de la dosis depende de! equipo que tenga el
criador; se obtendriln mejores resultados cuando
se puedan pesar con precision la sustancia inyec-
tada y el pez receptor, y se pueda calcular la dosis
en base al peso/peso. No obstante, tambien
pueden obtenerse resultados aceptables sin ba-
lanza; Bhowmick y Kowtal ( 1973) describen una
tecnica simplificada consistente en extraer glan-
dulas de donantes de tamaii.o comparable al de los
receptores. El peso de! donante y el de! receptor
pueden determinarse en base a un nomograma
que relacione el peso con la longitud y el contorno
(Makeyeva y Verigin 1970).
Via y metodo de inyecci6n: La inyeccion intra-
muscular de hormonas y extractos es definitiva-
mente la tecnica mas utilizada, aunque a veces se
practica la administracion intraperitoneal. Esta
ultima tiene el riesgo de daiiar los organos
internos asi como de una posible perdida de
extracto al inyectarlo inadvertidamente en el
intestino, y, en cambio, parece ofrecer pocas
ventajas. La inyeccion intramuscular puede apli-
carse entre la base de la aleta dorsal y la linea
lateral. La colocacion de la aguja no es critica,
pero el criador debera levantar cuidadosamente
las escamas y frotar suavemente el area despues
de retirar la aguja para ayudar en la distribucion
de! extracto y evitar el flujo retrogrado. Otro
medio de prevenir el flujo retrogrado es aumen-
tando la viscosidad de la solucion con glicerina,
en una proporcion de 3 a 7 (Woynarovich 1975).
Manejo de las reproductores: Si durante la
manipulacion de! pez se limpia la capa mucosa, la
pie! sera susceptible a infecciones bacterianas al
igual que sucede con lesiones mas graves como
abrasiones o perdida de escamas. La captura,
27
inyeccion y desove son todos procedimientos
delicados y hay que tener gran cuidado para
reducir al minimo el maltrato. Un pez ma!
manipulado puede no sobrevivir lo suficiente
como para ovular, mientras que un pez bien
tratado puede reproducirse satisfactoriamente
durante varios aiios.
El criador debe envolver el pez en una toalla
humeda despues de capturarlo con la red y sacarlo
de! tanque y nunca debe arrojarlo de vuelta al
agua. El baiio de acriflavina (0,0 I%) ha demos-
trado ser util para prevenir la llamada red scale
injury (escama roja) que ocurre comunmente
cuando se desovan las carpas en cautiverio (Bhow-
mick et al. 1977) y debe aplicarse despues de
desovarlas. En pocos casos se emplea anestesia,
aunque su uso podria aumentar considerablemente
la supervivencia. Para la carpa, se han encontrado
efectivas la MS 222 (Woynarovich 1975) y la
Quinaldina en concentraciones de 50-100 ppm
(Chen et al. 1969). La MS 222 puede agregarse al
agua en dosis de 50-100 mg/ I, o puede insertarse
en la boca de! pez un tapon de genero relleno de
algodon impregnado de solucion 0,04M. La MS
222 ( 1,6 ppm) se ha usado con exito en el trans-
porte a grandes distancias de carpa hervibora y
carpa plateada (Gupta y Sharma 1974). Bell
( 1967) y Anonimo ( 1978) proporcionan informa-
cion sobre las anestesias generales utilizadas co-
munmente para peces.
La inyeccion puede aun aplicarse dentro de!
agua, procedimiento que elimina el riesgo de
lesiones internas ocasionadas cuando los organos
intemos ya no son sostenidos por el agua circun-
dante y puede aplicarse con anestesia o con el pez
atrapado en una red.
PLAZO PARA LA OVULACION
Despues de la inyeccion final los reproductores
vuelven al tanque y a menos que se desee la
fecundacion natural, deben observarse atentamente
las indicaciones de que los huevos y la esperma
estan listos para ser extraidos. La mas confiable
indicacion es el cortejo o galanteo, aunque se
puede capturar a la hembra en una red y masajearla
suavemente para verificar si los huevos han
empezado a fluir libremente. La perdida de
huevos puede prevenirse suturando el orificio
genital en el momento de la inyeccion; esto debe
hacerse bajo anestesia suave. Hay poco margen
de error en la deteccion de una hembra lista para
ser desovada. Los huevos extraidos una hora
antes pueden resultar infecundos y, especial-
mente con las carpas chinas, no se puede confiar
en el desove natural pues los huevos que no se
extraigan manualmente se degenerarany reabsor-
beran. Esto puede ocurrir incluso 30 minutos
despues de que los huevos esten totalmente
maduros (Chen et al. 1969).
El lapso entre la inyeccion y la ovulacion varia
con el numero de inyecciones y con la tempera-
tura de! agua; el conocimiento de tales factores
permite al criador organizar el programa de
inyecciones para que el desove pueda efectuarse a
una hora conveniente de! dia. El lapso despues de
la ultima inyeccion se acorta considerablemente
cuando se aplica mas de una inyeccion y por lo
tanto el momento de la ovulacion es mas facil de
predecir. Tambien puede tenerse mas control en
los lugares en donde se puede alterar la tempera-
tura de! agua; en el caso de la carpa comun, por
ejemplo, la ovulacion ocurre aproximadamente 8
horas despues de la inyeccion bajo una tempera-
tura de 28° C, mientras que bajo 15 °C se requiere
el triple de! tiempo (Woynarovich 1975).
METODO DE FECUNDACION
La fecundacion puede efectuarse mediante el
desove manual, mezclando los huevos con la
esperma o por medios naturales en un estanque de
desove. La fecundacion artificial se practica
comunmente con el metodo "seco" que consiste
en secar a los dos reproductores, extraer los
huevos a un recipiente seco y extraer la esperma
colocandola sobre los huevos, mezclando suave-
mente con una pluma o cuchara plastica. Pasados
I a 2 minutos se enjuagan bien los huevos con
agua y se transfieren a un mayor volumen de agua
(varios litros) para su expansion y endureci-
miento. Despues de este proceso, que concluye en
aproximadamente una hora, los huevos pueden
pasarse a una incubadora o dispositivo de cria.
Los huevos de la carpa comun y de la carpa
china son pegajosos y pueden aglutinarse redu-
ciendo el oxigeno disponible para los de mas
abajo. Esto se evita agregando a los huevos una
solucion de NaCl al 0,4% y urea al 0,3%
inmediatamente despues de mezclarlos con la
esperma (Woynarovich 1975; Kossmann 1976).
La solucion debe agregarse primero en cantidad
aproximadamente equivalente al volumen de los
huevos y puede reponerse, agi tando, a medida que
se absorbe. Antes de sacar los huevos de la
incubadora, conviene hacerles un ultimo bafto en
solucion de tanino al 0,15% para remover cual-
quier vestigio de material adhesivo.
El desove natural se emplea con frecuencia
para la carpa de la India y tiene la ventaja de
limitar el manipuleo de los reproductores. Sin
embargo, las enfermedades y la predacion pueden
producir una proporcion inaceptablemente baja
de sobrevivencia de crias, si la incubacion tiene
28
lugar en el estanque de desove. Por esta razon,
despues de su endurecimiento, generalmente se
recogen los huevos fecundados y se pasan a
dispositivos de incubacion especiales o a recintos
de cria. Para obtener alta proporcion de sobre-
vivencia, esto debe hacerse minuciosa y cuidado-
samente.
METODO DE INCUBACION
Los huevos fecundados por desove natural que
se dejan incubar en el estanque, estan expuestos a
enfermedades y a la predacion, y la proporcion de
crias puede bajar hasta 1-5. El tradicional 'hapa'
incubador da alguna proteccion contra la preda-
cion; este sencillo dispositivo (Figura 6) consiste
en varias bandejas pandas que flotan dentro de un
marco exterior mayor. Las bandejas interiores
estan recubiertas por malla gruesa, como de
mosquitero, y las larvas producidas por los huevos
que estan dentro de ellas pueden escapar dejando
astras los huevos muertos y los cascarones. El
'hapa' exterior si detiene las larvas, pues esta
recubierto por malla fina. Para mejores resul-
tados, de be instalarse en agua corriente y se puede
limitar la predacion de pajaros y sapos colocan-
dole una tapa. Empero, este dispositivo de incu-
bacion de estanque sigue sujeto a riesgos incon-
trolables como cambios en la temperatura y bajas
de! nivel de! agua; para la produccion de crias en
gran escala se requiere una instalacion de incuba-
cion cubierta. Es esencial contar con una tuberia
de agua, a fin de permitir la graduacion de! flujo y
la oxigenacion asi como la aplicacion controlada
de agentes para combatir las enfermedades bac-
terianas y micoticas.
El equipo de incubacion cubierto puede tener
un disefio muy sencillo; sus principales funciones
son proporcionar suficiente agua circulante para
mantener un suave movimiento rodante de los
huevos a fin de remover facilmente los desechos,
como huevos muertos y cascarones, y permitir la
extraccion de las larvas para transferirlas al
estanque de cria. La Figura 7 indica un sencillo
dispositivo para incubar huevos de carpa; tiene
capacidad para 80 litros y puede recibir hasta
70.000 huevos de carpa china. El flujo de agua
debe mantenerse en 1-2 litros por minuto. El
embudo puede construirse en hierro galvanizado
o plastico, siendo muy facil adaptar une paila
plastic a. En la version mas sencilla, la incubadora
es suspendida de un soporte alto y el agua sale por
la malla de nilon. A esta version se le pueden
sumar numerosos aditamentos: si se gradua el
flujo de agua de ta! manera que los huevos en lenta
circulacion asciendan solo hasta la mitad de!
embudo, las larvas podran escapar a tr aves de una
Fig. 6. Diagram a de! principio de operaci6n de! 'hapa' de cria. Se ha omitido la red Jina que cubre el marco
exterior, para apreciar los detail es de la construccion. Las larvas producidas por los huevos que se han colocado
sob re las bandejasflotantes, escapan a traves de la malla gruesa que rodea a estos recipientes pero no pasan por la
mallafina de! 'hapa' externo.

salida colocada sobre un vertedero. Para obtener DESOVE ARTIFICIAL

una mejor circulaci6n de! agua se puede instalar
en la entrada de agua un surtidor o un tamiz.
LISA
La lisa, esp. Mugil es una especie particular-
mente atractiva para la acuocultura; se encuentra
en muchos lugares, es resistente a la temperatura
yes omnivora, ademas de eurihalina por lo cu al se
puede criar en agua dulce, salobre o salada. La
recolecci6n de alevinos en aguas estuarinas esta
sin embargo sujeta a fluctuaciones cuantitativas
impredecibles y en los ultimos af10s se han
intensificado las investigaciones para asegurar la
provision mediante la cria artificial.
Durante la ultima decada se ha logrado con exito
la inducci6n de la ovulaci6n en la lisa aunque
todavia nose ha encontrado un metodo que reuna
la confiabilidad con el bajo costo. Se ha utilizado
gran variedadde sustancias inductoras, incluyendo
hip6fisis de carpa homogeneizada (Yashouv 1969),
hip6fisis de lisa homogeneizada mezclada con
Synahorin (Liao 1975), gonadotropina de salmon
parcialmente purificada, SG-G 100 (Shehadeh et
al. 197 3a) y gonadotropina cori6nica humana,
GCH (Kuo et al. 1973b).
Desde 1963 en Taiwan, Liao y sus colegas han
investigado el desove de la lisa gris M ugil cepha-
lus y los avances has ta 197 3 se encuentran
sintetizados (Liao 1975). Hay dos puntos de este

29
trabajo especialmente significativos: los repro-
ductores eran en su mayoria peces salvajes captu-
rados durante la migracion anual de desove
(Diciembre-Febrero) y no se intento evaluar
objetivamente el estado de desarrollo gonadal
antes de la inyeccion. Ya se ha dicho que el estado
de disposicion femenino es basico para el exito de
cualquier programa de ovulacion inducida. El uso
de peces salvajes tambien tiene sus inconvenientes:
no solo es dificil obtenerlos de los pescadores sino
que a menudo durante la captura se golpean y se
raspan, ademas de no estar acostumbrados a ser
manipulados. A pesar de esas dificultades, se ha
tenido exito en la induccion de! desove mediante
una combinacion de Synahorin e hipofisis de lisa
madura secada con acetona. Cualquiera de los
dos componentes utilizado solo, se encontro
ineficaz. La mejor dosis total se determino en 2,5
a 6 hip6fisis combinadas con I 0--60 unidades
rabbit administrada por via intramuscular en dos
inyecciones aproximadamente iguales, aplicadas
con 24 horas de diferencia. Se dice que la adicion
de vitamina E, 0-300 mg ha aumentado el por-
centaje de hembras que responden: el 71,4% de
las hembras tratadas, ovularon con exito. Liao
reconoce los inconvenientes de calcular la dosis
por el numero de hipofisis enteras y sugiere que
los resultados podrian mejorar calculando la dosis
en base al peso/peso. Los intentos de fecundacion
natural fracasaron y fue preciso desovar a las
hembras y extraer el semen a los machos. Se
utilizaron con igual exito los metodos de fecunda-
cion "seco" y "humedo". La hipofisacion de los
machos se encontro innecesaria y en efecto, este
es un aspecto comun a todos los informes publi-
cados sobre el desove de la lisa en cautiverio.
En la India, se ha em pie ado con cierto exito una
tecnica semejante para el Mugil macrolepis (Se-
bastian y Nair 1975). Tambien se usaron repro-
ductores salvajes y se inyecto a las hembras con
un total de siete hip6fisis de lisa madura adminis-
tradas en dos dosis con 6 horas de diferencia. No
se practico biopsia ovarica y la fecundacion
natural resulto ineficaz. Se ha informado que el
cuarenta por ciento de las hembras inyectadas
ovularon eficazmente. Cabe mencionar que las
dosis de material pituitario usadas en este estudio
fueron muy altas; sin embargo, es significativo el
hecho de que fueron efectivas sin sinergistas de
mamiferos tales como Synahorin y GCH.
La cria de lisa en gran escala es dificil de lograr
cuando la provision de machos y hem bras maduros
depende de fuentes naturales. Son pues impor-
tantes los estudios realizados en el Instituto
Oceanico de Hawai, ya que los reproductores
provinieron de cardumenes criados en estanque,
desovando naturalmente en tanques de reproduc-
30
cion, por lo cual no fue necesario el desove
artificial (Kuo et al. 1974).
La introduccion de un metodo seguro y con-
fiable de biopsia ovarica elmino un segundo
obstaculo para el exito (Kuo et al. 1974) ( capitulo
5). La induccion era mas segura cuando el
diametro promedio de los oocitos era mayor de
0,6 mm, siendo el ideal 0,65 mm. Los mejores
resultados se han obtenido con gonadotropina de
salmon parcialmente purificada, SG-G I 00 admi-
nistrada por via intramuscular en dos inyecciones:
una dosis inicial con la tercera parte de! total y 48
horas despues los otros dos tercios. La relacion
entre la dosis de gonadotropina necesaria para
inducir el desove y el diametro inicial de! huevo
de! receptor aparecen indicados en la Figura 8; la
cantidad de hormona que se debe inyectar puede
calcularse directamente en este grafico. En casos
en que el tamafto promedio de! huevo sea inferior
a 0,6 mm, el desove todavia se puede inducir
mediante una inyeccion diaria de SG-G 100 au-
mentando la dosis de 0,12-3,4 µg/g de peso
corporal. Dicho procedimiento se efectua durante
6 a 8 dias seguido por la hipofisacion.
Debido al alto cos to de la SG-G I 00, el metodo
resulta inadecuado para muchas zonas en desa-
rrollo. La gonadotropina corionica humana (GCH)
es mas economica y mas facil de obtener; Kuo y
sus co le gas ( 197 3b ), en estudios preliminares han
demostrado que esta hormona puede emplearse
so la para inducir la ovulacion de! Mugil cephalus.
Se encontro que el mejor procedimiento era
I
I
20
embudo
(metalico o
plast1co)
- - d1spositivo de
riego (opc1onal)
Entrada de agua
Fig. 7. lncubadora para huevos de carpa.
 \
lncubadora sencilla de flujo ascendente uti/izada para los huevos de carpa en Tailandia.
(Foto WH.L. Allsopp).
inyectar una dosis preliminar de aproximada-
mente 20 UI de GCH/g de peso corporal cuando
el diametro promedio de oocitos llegara a 0,6 mm,
seguida 24 horas despues por una segunda dosis
de aproximadamente 40 UI/g. El porcentaje de
fertilidad vari6 del 45 al 98%.
La mayor parte de la investigaci6n sobre la
inducci6n de la ovulaci6n en la lisa se ha centrado
31
en el comienzo del desove durante el pico de la
estaci6n natural de cria. En un intento por prolon-
gar la estaci6n de cria del M. cephalus cautivo,
Kuo y Nash ( 1975) indujeron con exito la madura-
ci6n ovarica fuera de la estaci6n, por medio del
control del fotoperiodo y de la temperatura. Encon-
traron que la iniciaci6n de la vitelogenesis, que
normalmente ocurre despues de un periodo de 235
 Cuadro 2. Reproducci6n Inducida - Tecnicas para el Bagre.

Edad
Epoca del Nlimero Temp. Evaluaci6n
del Reprod. de del Agua del estado Inyecci6n
-------- ·-----
Especie (Pais) Aiio · (a) Hembras (OC) gonadal Sustancia (via) Disolvente Dos is
Pangasius sutchi Junio- 28-32 H: vientre Hip6fisis de Agua Imprecisa; la segunda dosis de
(Tailandia) Sept. distendido; bagre frescas o destilada la hembra es 1,5-3 veces
poro preservadas mayor que la primera; el
rosaduzco; (IM) macho recibe Y. de la dosis
huevos femenina al tiempo con la
sueltos, segunda dosis de la hembra.
brillantes y
amarillos.
M: aparici6n
de esperma
bajo presi6n.
Pangasius Agosto 5--0 2 27-31 Hip6fisis de NaCl H: 3 inyecciones con 2, 6 y 12
pangasius Clari as 0,8% hip6fisis.
(Tail andia) batrachus (IM) M: 2 pituitarias al tiempo con
la primera inyecci6n de la
hernbra.
Clarias fuscus 1,5-2 26-29 H: vientre Hip6fisis de NaCl H: 1 hip6fisis del donante 2-3
(Taiwan) blando, Cyprinus 0,7%; veces el peso corporal del
distendido; carpio KCl receptor, mezclada con 20
poro genital mezcladas con 0,03%; unidades "rabbit" de
rojo, Synahorin CaCb Synahorin, administrada en 2
distendido. 0,026%; inyecciones.
NaHCOi
0,003%;
Cl arias Mayo- 153 H: vientre GCH (IM) H: inyecci6n linica:
macrocephalus Sept. distendido; 400-500UI
(Filipinas) poro genital M: 150-250 UI.
rojo.
M: papila
genital
prorninente,
blancuzca.
Clari as 7 27-31 Hip6fisis de 80-90 mg/kg; no se da otra
batrachus (India) carpa de la India informaci6n.

dias posterior al desove, podia inducirse hasta en
56 dias, bajo un fotoperiodo constante de 6 horas
luz/18 oscuridad, a una temperatura de 21 °C. Los
peces "acelerados" podian luego desovar previa
inyecci6n de SG-G 100. Esto sugiere que la lisa
gris puede, bajo condiciones controladas, desovar
mas de una vez al afio lo cual representa un paso
importante en el uso de estimulos ambientales para
inducir la maduraci6n gonadal.
CRiA DE LAS LARVAS
Aunque hoy en dia es posible controlar la
ovulaci6n y el desove de varias especies de lisa,
todavia persisten algunos obstaculos graves en el
camino hacia la cria de larvas en gran escala.
Mientras que la proporci6n de incubaci6n puede
ser alta, la sobrevivencia en los primeros 42 dias de
desarrollo se ha citado, en la mayoria de los
estudios, inferior al 5%, siendo el 20% la mayor
cifra presentada (Liao 197 5). La mortalidad en
general se relaciona con cambios en el peso
especifico de las larvas, que pasan por dos grandes
descensos en la columna de agua: el primero a los
2,5 dias y el segundo a los 8 dias despues de la
eclosi6n (Kuo et al. 1973a). La mortalidad es
generalmente mayor despues del segundo descenso
y es a menudo total. Nash y Kuo (1975) han
analizado los problemas relacionados con la cria de
la lisa y sugieren que el contenido de agua duke en

32
(Cuadro 2. fin)

Demora
t.Ta de la Metodo de Metodo de
(h) ovulaci6n fecundaci6n incubaci6n Resultados Comentarios Referencias
8-12 Desove Los huevos No se dan resultados Puede cateterizarse a las hembras Potaros y Sitasit
artificial; en fecundados se para determinar el grado de (1976)
seco esparcen sobre madurez de los huevos. La
malezas entre un inyecci6n de GCH para las
'hapa'. hembras aumenta el numero de
respuestas; 1" inyecci6n
100-250 UJ agregadas al
extracto pituitario; 2° inyecci6n
300-700UJ.

6 4 Desove Los huevos Ovulaci6n con 100% de Boonbrahm et al.

artificial; en fecundados se fecundidad (1968)
seco ponen en ramas
acuitticas dentro de
'hapas'.
8-10 18-24 H: desovadas Malla de nil6n 80-90% de super- Los machos pequeiios y j6venes Chen (1976)
M: extracci6n en estanque de cria. vivencia de los alevinos recibieron una inyecci6n con la
de testiculos y a los 40 dias despues de mi tad de la dosis para las hembras,
mezcla de la la incubaci6n en el memento de la segunda
materiaconlos inyecci6n de las hembras.
huevos

Desove 5 8% de respuesta Para la biopsia ovarica se pueden Carreon et al. ( 1976)

natural promedio de desove, cateteri zar las hem bras con gotero
usando GCH. medico. Se puede obtener un 7 5%
Cria 68% de desove usando extracto
pituitario de bagre pero es mils
costoso que la GCH.

Desove Respuesta cercana al Tambien son eficaces las hip6fisis An6nimo ( l 977c)
natural en 100% del bagre marino Tachysurus.
pequeiios
arrozales
(3,5 X 3 m;
15-20 cm de
profundidad)

el alimento de las larvas puede contribuir en gran
medida al fenomeno de la mortalidad por hundi-
miento, al afectarse su peso especifico. La influen-
cia de la temperatura, salinidad y dieta tambien es
importante. Nash et al. ( 1973) dan procedimientos
detallados sobre la cria de larvas de lisa gris; son
tambien interesantes los metodos utilizados actual-
mente en la Union Sovietica (Anonimo 1976) yen
la India (Sebastian y Nair 1975).
SA.BALO
El sabalo Chanos chanos es una especie euroha-
lina cultivada extensamente en los lagos salobres
costeros y en corrales en lagunas de agua duke en
Indonesia, Filipinas y Taiwan. Abunda en toda la
region Indo-Pacifica yen varios otros paises estan
tratando de cultivarlo para el consumo humano y
para camada en la pesca de! atUn. Los problemas
de la reproduccion inducida son en muchos aspectos
similares a los de la cria de la lisa y, en efecto, las
investigaciones mas recientes sobre el desove de!
sabalo las han efectuado grupos que anterior-
mente estudiaron la reproduccion de la lisa.
Cientificos de institutos de investigaciones ma-
rinas en Taiwan y Hawaijunto con investigadores
de! Centro de Desarrollo Pesquero de! Sudeste
Asiatico en Filipinas, han dado los primeros
pasos hacia la produccion de crias bajo condi-

33
ciones controladas. Es preciso seflalar que el
trabajo en este campo apenas esta comenzado y
que los informes son en general de caracter
preliminar.
Los experimentos de reproduccion con sabalos
recien capturados presentan muchos de los proble-
mas encontrados con la lisa salvaje. General-
mente no toleran bien la tension de! manipuleo,
aunque Vanstone et al. ( l 976a) ha dado parte de
tecnicas de captura, transporte y domesticacion
que han demostrado ser efectivas para reducir la
mortalidad. Mas importante aun es el hecho de
que entre los sabalos maduros capturados en el
mar, la gran mayoria ya estan agotados y por
consiguiente resultan inutiles para los experi-
mentos de reproduccion. Asi pues, es esencial
mantener en cautiverio a los sabalos desovados
hasta que maduren de nuevo, o criarlos en
cautiverio desde pequeflos. Esto ultimo no es
facil; en Indonesia, por ejemplo, los sabalos
criados en grandes lagos de agua salobre a los 8
aflos de edad no habian alcanzado la madurez
sexual (Alikunhi 1976). Trabajadores indonesios
y filipinos han iniciado programas de cria de peces
de 2 aflos de edad en grandes lagos de marea y
recintos flotantes, empleando dietas controladas
para tratar de superar dicha obstinacion. Las
represas costeras pobladas de sabalos de un aflo
de edad tambien se han considerado como fuente
de reproductores. No obstante, Liao y Chang
( 1976) presentaron evidencia de la maduracion
sexual de! sabalo cautivo, al desarrollar crias
recogidas naturalmente en tanques de concreto al
aire libre. Varios machos produjeron esperma a la
edad de 5 aflos (en Taiwan el periodo normal de
maduracion sexual es de 4 a 5 aflos) y a solo una
hembra de 6 aflos se le encontraron oocitos en la
vesicula vitelina. Los autores sugieren que unos
meses mas podrian ser suficientes para lograr el
diametro critico de los huevos, con el cual se
puede intentar la induccion de la ovulacion. Nash
y Kuo ( 1976) han fijado el limite en 0, 7 a 0,8 mm
y dan igualmente informacion sobre la reproduc-
cion de peces cautivos.
Aunque solo se ha tenido exito con el desove
artificial de algunos pocos sabalos, los resultados
son alentadores y sugieren que en un futuro
cercano se podra controlar la reproduccion.
Nash y Kuo (1976) y Vanstone et al. (1976b)
dieron parte de la ovulacion en hembras cautivas
inyectadas con gonadotropina de salmon parcial-
mente purificada (SG-G 100); nose llevo a cabo
la fecundacion en esos experimentos prelirninares.
Los resultados mas significativos, hasta la fecha,
provienen de investigadores de! Centro de Desa-
rrollo Pesquero de! Sudeste Asiatico en Filipinas,
quienes lograron inducir la ovulacion en dos
34
sabalos hembras maduras recien capturadas, por
medio de la inyeccion de una mezcla de hip6fisis
de salmon pulverizada en acetona, con gonado-
tropina corionica humana (GCH). I..os huevos se
fecundaron con esperma obtenida quirurgicamente
de machos desovados por vias naturales, que
contuvieran vestigios de liquido espermatico viable
y se incubaron en un tanque de hule de 4 m de
diametro, lleno de agua de mar gaseosa filtrada,
con una profundidad de I m. Treinta y dos larvas
llegaron a la edad de 7 4 di as con una dieta de
Ch/ore/la, Brachionus inmaduros, zooplanct6n
silvestre variado y diatomeas cultivadas variadas,
despues de lo cual se transladaron a tanques mas
grandes con floraciones de algas naturales y un
suplemento alimenticio de pez picado (Vanstone
et al. 197 7). Al fin de! aflo 1979, los 32 peces
seguian vivos ( comunicacion personal de W.E.
Vanstone). Tanto la GCH como el polvo pitui-
tario son relativamente economicos y es intere-
sante saber que la ovulacion puede inducirse sin
necesidad de utilizar el costoso SG-G I 00.
BAG RE
El bagre es un pez comestible de alta calidad,
con bastante tolerancia al agrupamiento y a las
condiciones ambientales adversas y los miembros
de los generos Pangasius y Clarias estan asu-
miendo gran importancia en las actividades de
acuocultura en el Sudeste Asiatico y en la India.
Los miembros de la familia Clariidae son especial-
mente resistentes, ya que poseen un organo
accesorio para respirar aire, que Jes permite
sobrevivir en aguas con poco contenido de oxigeno.
Los Clarias batrachus y Clarias macrocephalus
se han cultivado extensamente en Tailandia, en
donde la disponibilidad de alimentos economicos
en forma de peces de desecho provenientes de la
industria de pesca costanera, ha estimulado dra-
maticamente la produccion en los ultimos diez
aflos.
De las especies de bagre cultivadas en cual-
quier numero en el Sudeste Asiatico yen la India,
solamente el C. batrachus desova en cautiverio y
en los ultimos aflos se han visto nacer esfuerzos
tendientes a desarrollar tecnicas de induccion de!
desove. Sin embargo, la literatura sobre ese tema
no es extensa; el comentario critico hecho ante-
riormente a proposito de la literatura sobre el
desove inducido en la carpa, es tambien aplicable
al bagre. El Cuadro 2 presenta evidencia de la
naturaleza incompleta de muchos informes. Las
notas aclaratorias sobre la reproduccion inducida
de la carpa son en general aplicables. Empero,
hay que mencionar brevemente las diferencias
relativas al control ambiental de la reproducci6n y
a las tecnicas de incubaci6n.
CONTROL AMBIENTAL DE LA
REPRODUCCION
El desove de las variedades asiaticas de! bagre
es estacional, al igual que el de otros peces criados
en lagos; los intentos de inducir la ovulaci6n
mediante la inyecci6n hormonal generalmente se
efectuan entre mayo y octubre. Ya hemos dicho
que con frecuencia ha sido posible hacer desovar
a la carpa mas de una vez en la misma estaci6n y
aunque no hay informes semejantes para el bagre
de cultivo, la investigaci6n reciente de! bagre
indio Heteropneustes fossilis sugiere enfatica-
mente que esto es posible. Sundararaj y Vasa!
( 1976) demostraron que el bagre hembra puede
quedar prefJ.ada dos meses antes de lo natural,
despues de un fotoperiodo largo ( 14 horas/dia) a
una temperatura de 25 °C durante 6 semanas y
que se le puede inducir satisfactoriamente el
desove administrando hormona luteinizante ovina.
Mas aun, la exposici6n continuada de las hem-
bras agotadas al mismo regimen de! fotoperiodo,
incita la reiniciaci6n de la vitelogenesis en 30
dias, induciendo asi artificialmente un nuevo
desove. El proceso se ha repetido con exito hasta
cuatro veces en el periodo comprendido entre
abril y julio de! mismo afJ.o, dando asi cuatro
cosechas de huevos en un periodo en que normal-
mente dan una. Estos hallazgos en el campo de!
cultivo de! bagre son de gran importancia y es
probable que con el perfeccionamiento adecuado,
la tecnica pueda aplicarse a otras especies culti-
vadas. Falta investigar si un manejo ambiental
similar puede efectuarse bajo condiciones de
campo.
35
lNCUBACION DE HUEVOS
FECUNDADOS
Por lo general la fecundaci6n de los huevos de
bagre se efectua por desove natural, aunque
ocasionalmente se practica la extracci6n y la
mezcla en seco. Tai como se anot6 en el caso de la
carpa, el mayor porcentaje de eclosi6n se obtiene
cuando se recogen los huevos fecundados y se
incuban en condiciones controladas; aun asi, los
metodos utilizados actualmente para el cultivo de!
bagre en Asia son poco sofisticados. Los huevos
de bagre son pequefJ.os y adhesivos y pueden
extenderse sobre soportes de nil6n sumergidos en
pequefJ.os lagos estancados, provistos de aireaci6n
(Chen 1976); con mas frecuencia se dejan adherir
a juncos acuaticos o fibras de palma y esos
"transportadores de huevos" se encierran luego
para que floten dentro de un 'hapa' de incubaci6n
(Potaros y Sitasit 1976; Boonbrahm et al. 1968).
En los Estados Unidos se han disefJ.ado sistemas
perfeccionados con bateas de incubaci6n suspen-
didas en agua corriente para el cultivo de! bagre a
gran escala en el sur de dicho pais (Bardach et al.
1972) y es posible que el porcentaje de alevinos
en Asia aumente considerablemente al adoptar
tecnicas similares.

5. METODOS DE BIOPSIA
OVARICA
La cantidad de hormona requerida para provo-
car la ovulaci6n, varia directamente con el estado
de madurez de Ios oocitos y es probable que el
fracaso de muchos intentos de hipofisaci6n radi-
que en Ia evaluaci6n inadecuada de! desarrollo de
Ios huevos. Ya se ha seflalado que caracteristicas
externas como "vientre hinchado" y "cloaca
rosaduzca" son indicadores relativos e inexactos
de! desarrollo ovarico y deben reemplazarse a la
mayor brevedad por metodos mas precisos. Un
buen metodo se basaria en Ios siguientes criterios:
rapido y tecnicamente sencillo de aplicar, sin
requerir equipos muy sofisticados y con un pro-
cedimiento Io menos traumatizante para el pez a
fin de poderlo repetir cuantas veces sea necesario.
En Ia actualidad, el enfoque mas promisorio
como criterio de madurez en Ia carpa; aun asi, Ia
interpretaci6n es claramente subjetiva y Ios in-
formes publicados son a menudo contradictorios.
Se puede obtener mas informaci6n con el examen
histol6gico de Ios oocitos: se ha descrito Ia
apariencia microsc6pica de Ios huevos en diver-
sas etapas de desarrollo en la carpa (Chen et al.
1969) (Bienarz et al. 1977) yen Ia Iisa (Kuo et al.
1974 ). Sin embargo, Ios procedimientos histol6-
gicos son largos y requieren interpretaci6n subje-
tiva de Ios resultados de manera que es posible
que el metodo de biopsia mas rapido y confiable
se base unicamente en el tamaflo de Ios oocitos.
Shehadeh et al. ( 197 3 b) determinaron una
biopsia basada en el principio de! diametro medio
de! oocito, aplicable a Ia Iisa Mugil cephalus. Se
extraen por succi6n varios oocitos de una hembra
no anestesiada, mediante una canula de polieti-
Ieno insertada en el oviducto hasta 6 a 7 cm. de
distancia de! poro genital. Los huevos se Iavan, se
fijan en una soluci6n de formalina al I% en NaCI
al 0,6% y se colocan sobre una placa de Plexiglas
para medirlos con un micr6metro ocular. La dos is
hormonal eficaz es inversamente proporcional al
diametro medio de! huevo y Ios mejores resul-
tados se obtienen cuando el diametro es mayor de
0,65 mm. El cultivador puede calcular Ia dosis
sencillamente haciendo Ia interpolaci6n en un
grafico que relacione el diametro medio de! huevo
y Ia dosis eficaz (Figura 8). El metodo es preciso,
rapido y si se efectua cuidadosamente, es seguro
para Ia repetici6n de! muestreo. Se puede adaptar
['!
0

parece ser Ia extracci6n y examen de Ios huevos. e-0 25

()
y = 66 29 - 74 53 x
La extracci6n generalmente se efectua mediante 0
(J)
el proceso de cateterizaci6n, introduciendo hasta CD
Cl.
el ovario un tubo de plastico fino (el diametro CD 20
1J
varia segun el tamaflo de Ios huevos) a traves de! !2:
poro genital, para extraer por succi6n una pequefla c
•O
muestra de Ios huevos. Dicho metodo funciona ~ 15
cu
con Ia carpa, Ia Iisa y el bagre, teniendo cuidado (J)

CD
de evitar el manipuleo brusco de! pez, que podria 1J
cu 10
ocasionarle atresia. (Chen et al. 1969). En este c
·a_
sentido, debe investigarse el uso de anestesia. e
Bienarz y sus colegas ( 1977) informaron reciente- 0
mente sobre un metodo de punci6n abdominal que
1J
cu 5
c
0
ha demostrado ser seguro para el continuo mues- 0
treo en Ia carpa comun Cyprinus carpio. En esta 01
::l.
tecnica, se utiliza una aguja de 2,5 mm de diametro 600 650 700
para perforar Ia pared abdominal 2 cm arriba de la
Diametro media inicial del huevo (µ)
al eta ventral y se extraen muestras de una profun-
didad de 2 a 3 cm. Fig. 8. Relacion entre el diametro media inicial de!
El color, apariencia histol6gica y tamaflo, es lo huevo de la lisa hembra receptora y la cantidad de
que da Ia informaci6n sobre el estado de madurez gonadotropina necesariapara inducirel desove. Segun
de Ios huevos. El color se emplea comunmente Kuo et al. (1974).

36
con exito a otras especies de peces, bajo las
siguientes condiciones:
• Que la anatomia de! tracto genital de la hem bra
sea ta!, que el paso de la canula pueda predecirse.
En la lisa, la carpa y el bagre parece que no hay
problema en este sentido, pues el ovario y ovi-
ducto son continuos y un tubo introducido por el
poro genital invariablemente pasara a la masa
ovarica. En el sabalo, por el contrario, los huevos
maduros pasan a la cavidad periotoneal y de ahi a
un embudo recolector que los conduce al poro
genital; en ese caso, el ovario y oviducto no son
continuos y la canula introducida por el poro
genital podria perforar los 6rganos intemos. Por
lo tanto, la tecnica puede resultar inadecuada
para dicha especie (Nash y Kuo 1976).
• Que los oocitos se desarrollen al mismo tiempo;
es decir, no debe haber gran diferencia en el
estado de madurez de la muestra de oocitos
tomada de diferentes regiones de! ovario. El
metodo no sera confiable si los huevos extraidos
de la porci6n anterior de! ovario son definitiva-
mente mas maduros que los extraidos de! seg-
mento posterior, pues no siempre se logra la
colocaci6n exacta de la canula. El desarrollo
sincronizado se ha demostrado en la lisa (Shehadeh
et al. 1973b) y deben efectuarse estudios para
determinar cua! es el caso de otras especies de
peces cultivados.
• Que el diametro de los oocitos se conozca en
todas las etapas de maduraci6n, de forma que se
pueda recopilar un "atlas" de! desarrollo de los
huevos para cada especie. Ya se cuenta con esta
informaci6n para la lisa y actualmente se esta
recopilando para el sabalo (Nash y Kuo 197 6 ); es
preciso realizar estudios similares para la carpa y
el bagre, a fin de determinar si el diametro media
puede emplearse como indicador de la madurez
de los oocitos.

37

6. PRESERVACION DE
GAMET OS
Es deseable la preservacion de los garnetos
viables de peces cultivados, a fin de compensar
cualquier deficiencia de disponibilidad, de permi-
tir la reproduccion, aunque la maduracion de los
machos y de las hembras no coincida, y de
establecer una reserva de material genetico de
calidad comprobada, para la iniciacion de pro-
gramas de reproduccion selectiva. Estos objetivos
se logran generalmente por medio del almacena-
miento de esperma, aspecto que ha recibido la
mayor atencion. No es probable que el almacena-
miento de huevos asuma mucha importancia,
salvo en ocasiones en que se vayan a conservar
garnetos de una composicion genetica deseable
como medio de ampliar la base de reproduccion.
Los trabajos en este campo estan todavia en la
etapa experimental y solo los mencionaremos
brevemente.
En los grupos de peces considerados en la
presente reseiia, los huevos y los espermatozoides
son expulsados simultanearnente al agua circun-
dante y el comportamiento reproductor adecuado
asegura el momento y la posicion correcta del
macho y de la hembra para que se lleve a cabo
inmediatamente la mezcla y la fecundacion. La
esperma se define como la suspension de esper-
matozoides individual es en el liquido espermatico
o seminal, resultante de la hidratacion de los
testiculos. Es importante seiialar que los esper-
matozoides no tienen motilidad hasta que no
entran en contacto con el agua. El proceso de
adquisicion de la motilidad se denomina activa-
cion y ocurre en el instante en que la esperma es
liberada al agua circundante. El agua, en este
contexto, se refiere al medio en el cual normal-
mente ocurre la fecundacion y puede ser dulce,
salobre o salada, segun la especie. Todavia nose
han identificado los estimulos responsables de la
38
actividad espermatica en la mayoria de las espe-
cies de peces cultivados; el pH, la presion osmotic a
y el contenido ionico del medio pueden ser
importantes (Hines y Yashouv 1971 ).
La motilidad de los espermatozoides una vez
activados es variable. Dura mucho mas en los
espermatozoides de peces que desovan en agua
salobre y salada que en los que desovan en agua
dulce; un caso extremo es el del arenque del
Pacifico Clupea harengus, cuyos espermatozoides
pueden conservar su motilidad hasta 4 o 5 dias
(Yanagimachi 1957). Por el contrario, los esper-
matozoides de peces que desovan en agua dulce
conservan la motilidad durante no mas de 2 a 3
minutos. La duracion del movimiento energico en
la carpa comun Cyprinus carpio por ejemplo, es
de 30 a 60 segundos y la motilidad detectable
desaparece despues de 5 minutos (Ginzburg
1972). Aunque la motilidad no es en si una
garantia absoluta de fertilidad, los espermatozoides
que han perdido la motilidad ya no estan en
capacidad de fecundar. Asi pues, como regla
general es esencial evitar que la esperma alma-
cenada entre en contacto con el agua, hastajusto
antes de mezclarla con los huevos.
PRESERVACION DE LA ESPERMA
La esperma puede preservarse por corto o largo
tiempo, por motivos de conveniencia: el esperma-
tismo puede inducirse antes de la ovulacion, de
manera que la esperma este a mano cuando se
desove a la hembra, reduciendo a un solo pez la
manipulacion para la fecundacion. Es un proce-
dimiento relativamente sencillo, que incluye la
conservacion del semen fresco en hielo o en un
refrigerador, a temperaturas entre 0 y 10° C. El
periodo de almacenamiento puede variar desde
unas cuantas horas hasta 5 dias. El almacena-
miento a largo plazo (criopreservacion) se lleva a
cabo a temperaturas muy inferiores ( entre -20 y
-196 °C) y deberia mantener esperma viable
durante varios aiios. La mayor parte de las tecnicas
de criopreservacion en la actualidad incluyen el
enfriamiento rapido y el almacenamiento en C02
solido o en nitrogeno liquido (N2 liq.) como parte
del procedimiento. Los resultados recientes de la
esperma de salmon secada al vacio son alenta-
dores pero todavia preliminares (Zell 1978).
Aunque se ha investigado mucho el aspecto de
la preservacion de la esperma de salmonidos (ver
Wiltzius 197 3; Horton y Ott 197 6 ), comparativa-
mente se ha prestado poca atencion a las especies
tropicales y sub-tropicales. Los pocos estudios
sobre la preservacion de la esperma de carpa son
preliminares y hasta la fecha solamente se han
 Cuadro 3. Criopreservacion de la Espenna de Carpa y Lisa.

Crio-
Pez (Referencia) Diluyente protector Relacion Equilibria Congelacii>n Almacenamiento Descongelaci6n Resultado
Cyprinus carpio Soluci6n DMSO I :I/ 5 seg. Se En Ni liq. -196 'C Bano de agua a Se obtuvo 12%
(Moczarski 1977) de 10% 1:2 mantuvieron sin especificar la 30'C de alevinos;
Alsever" las arnpolletas duraciOn. fecundacii>n del
3-5 cm 47%
por encima de
Ni liq. hasta
congelarlas.
Cyprinus carpio Mezclab DMSO 1:3 0 seg. Griumlos de En Ni liq. -196 'C; 3 griululos/ I 0 ml Alta motilidad; no
(Stein y Bayrle 10% 0,2 ml sobre 7 dias NaHCO, I%; hubo fecundaci6n
1978) C02 s6lido agitando.
Cyprinus carpio Mezclac DMSO 1:3 60-180 Ampolletas en En Ni liq. -196 'C; Bano de agua a 11%de
(Pavlovici y 5% min. vapores de 24 h 21 'C; 1-2 min. fecundacii>n
Vlad 1976) 0-2'C Ni liq. nose
especifica la
velocidad.
Aristichthys nobi/is Mezclad Combina- I :9• COi/acetona; COi; -79'C; Bafio de agua 2,7-5,7% de
(Sin 1974) ci6n: no se controli> 30-60 min. a 6-IO'C fecundaci6n
DMSO la velocidad.
7,4% y
glicerina
9,3%
Cyprinus carpio, Etileno En Ni liq. -196 'C; Se produjo I /I 0
An"stichthys nobi/is, glicol I afio de larvas con
Ctenopharyngodon relaci6n a los
idellus controles.
(Anonimo 1974)
Cyprinus carpio, Mezclal DMSO 1:4 0 seg. Se mantuvieron En Ni liq. -196 'C; Bai'Io de agua a C. carpio y
Labeo rohita, 10% las arnpolletas 24 h 25-30'C P. gonionotus:
Puntiusgonionotus 2 cm por 5-20% motilidad;
(F.C. Withler, encima de la L. rohita:
sin pub) superificie de 5 8% de super-
Ni liq. vivencia hasta la
5-10 min. primera etapa de
alevino.
Mugil cephalus 5 I% agua Glicerol 1:1 Griululos de En Ni liq. -196 'C; "Alguna"
(Pruginin y de mar; 15% COi; I min. 2-4 meses motilidad;
Cirlin 1976) 34% agua ninguna
destil. fecundaci6n
Mugil cephalus Ringerg DMSO 1:1 ~I h Los pitillos de En Ni liq. -196 'C; Bafio de agua 2,7% de
(Chao et al. 1975) de 10% 0,5 ml. se I afio a "temperatura fecundaci6n;
tele6steo mantienen en del arnbiente" 31,85% de criah
marina vapor de Ni liq. por 4-5 min.
durante 4 min.

asoluci6n Alsever (Hodgins y Ridgeway 1964: citrato de sodio (C,HsNa20,), 0,8 %; dextrosa, 2,05 %; NaCl, 0,4 %.

bNaCI, 750 mg; NaHCO,, 200 mg; NaiHPO., 53 mg; MgS0.·7HiO, 23 mg; KC!, 38 mg; CaCh·2HiO, 46 mg; glucosa, 100 mg;
glicina 500 mg; yema de huevo 20 ml; HiO, 100 ml.

cKCI, 0,75 %; lecitina, IO%; HiO hasta 100 ml.

dNaCI, 0.6 %; KCI, 0,038 %; CaCb·2Hi0, 0,023 %; NaHCO,, 0,1 %; NaHPO. ·HiO, 0,041 %; MgS0.·7HiO, 0,023 %.

eAument6 mucho la motilidad con una diluci6n de I :3 pero ne se dispuso de esperma en esta dilucion para las pruebas de fertilidad.

fNaCI, 730 mg; NaHCO,, 500 mg; fructosa 500 mg; lecitina 750 mg; manitol 500 mg; HiO, 100 ml.

gSoluci6n de Ringer de tele6steo marino (Burton, 1975): NaCl, 231 mM; KC!, 8 mM; CaCb, 2,2 mM; MgCb, 3,7 mM.

hcuando se agreg6 como crioprotector I 0% de glicerina, se obtuvieron Ios resultados siguientes: 2,47% de fecundaci6n, 52,5% de cria.

publicado dos informes sobre la criopreservaci6n principios que aunque han sido establecidos prin-
de la esperma de lisa. Como resultado de esa cipalmente para los salm6nidos, es probable que
escasez de informaci6n, la siguiente exposici6n es se puedan adaptar a otros peces. El Cuadro 3
de caracter general y trata de presentar ciertos presenta detalles de tecnicas que han probado ser

39
al menos parcialmente satisfactorias para la carp a
y la lisa (no hay ninguna para el sabalo y el bagre );
la gran variaci6n en el procedimiento es testi-
monio de! incipiente desarrollo en este campo.
Cabe sefialar que la criopreservaci6n de la esper-
ma se efectua de manera rutinaria en los centros
de inseminaci6n artificial para ganado, en donde
generalmente se puede adquirir el nitr6geno liquido.
Es por ello que debe fomentarse la vinculaci6n
entre los criadores de peces y de ganado.
CRIOPRESERV ACION DE LA ESPERMA
Recoleccion de la esperma: Los cultivadores
deben a toda costa evitar la activaci6n de los
espermatozoides, por lo cual es esencial mantener
escrupulosamente secos el poro genital y el
recipiente de vidrio para recoger la esperma. Para
ello, es ventajoso anestesiar al donante y suspen-
der la alimentaci6n un dia antes para asegurar que
sus vias digestivas esten vacias.
Con frecuencia es necesario, en especial bajo
condiciones de campo, almacenar la esperma
recien recogida durante varias horas antes de
llevar a cabo la diluci6n y la congelaci6n. La
experiencia con la preservaci6n a corto plaza
sugiere que esto debe efectuarse sabre hielo y que
los frascos deben ser suficientemente grandes
coma para permitir un intercambio gaseoso ade-
cuado. Horton y Ott ( 1976) sugieren una rela-
ci6n de I: 10 de semen/espacio de aire, si los
frascos estan sellados.
Preparacion y adicion del diluyente: Un dilu-
yente apropiado debe mantener vivas pero inactivos
a los espermatozoides antes de la congelaci6n:
debe ser isot6nico con el semen y amortiguado
para contrarrestar la acidez o alcalinidad de!
agente crioprotector (comunicaci6n personal de
F.C. Withler). Se han probado innumerables
variantes, en su mayoria basadas en la soluci6n
salina fisiol6gica para tele6steos marinas o de
agua dulce, con o sin adici6n de di versos "nutrien-
tes" y "estabilizadores" (v.g. fructosa, manitol,
yema de huevo, lecitina, glicina). Horton y Ott
( 1976) recomiendan que el numero de consti-
tuyentes sea el minima y que la concentraci6n de
cada uno este determinada experimentalmente en
base a la motilidad observada en los espermato-
zoides. Este sencillo concepto parece ser el
apropiado. De los intentos de criopreservar la
esperma de la lisa y de la carpa, sintetizados en el
Cuadro 3, el mas exitoso fue aquel en el que se
emple6 coma diiuyente una soluci6n de Ringer de
tele6steo marina sin modificar (Chao et al. 1975).
No obstante, es inevitable un concepto empirico,
pues es imposible predecir si se lograran transferir
los diluyentes de un pez a otro: Ott ( 197 5) sefiala
40
que se requirieron diferentes diluyentes y con-
centraciones de crioprotector para cada especie
de Oncorhynchus; aun asi, algunos diluyentes
empleados rutinariamente para congelar esperma
de salm6nido han arrojado resultados prelimi-
nares alentadores en la carpa comun Cyprinus
carpio y en la carpa de la India Labeo rohita
(F.C. Withler sin publicar).
Hay muy poco consenso en cuanto a la canti-
dad de diluyente que se debe agregar, lo cual
tambien debe determinarse experimentalmente.
Esperma satisfactoria: las proporciones de dilu-
yente para salm6nidos oscilanentre I :4 y I :9 (Ott
1975;Hortony0tt 1976). Sinembargo,Moczarski
(1977) encontr6 que la viabilidad de la esperma
criopreservada de carpa comun, era mayor a I: I o
1:2 que a 1:6. Sin (1974) observ6 un efecto
similar en la carpa plateada y en la carpa cabe-
zona cuya motilidad y viabilidad aumentaron
considerablemente al bajar la relaci6n de! dilu-
yente de I :9 a I :3. La criopreservaci6n exitosa de
la esperma de lisa se ha logrado con una propor-
ci6n de diluci6n de 1:1 (Chao et al. 1975).
Cualquiera que sea la proporci6n, el diluyente y la
esperma deben ser isotermicos antes de mezclarlos.
Crioprotector: Los deterioros por congelaci6n y
descongelaci6n se reducen al minima agregando
agentes coma DMSO (sulfoxido dimetilo), eti-
leno, glicol o glicerol al diluyente, antes de
mezclarlo con la esperma. El DMSO se reco-
mienda para los salm6nidos (Horton y Ott 197 6)
y es el que ha producido los mayores exitos en la
criopreservaci6n para los peces cultivados (Cuadro
3). La concentraci6n agregada al diluyente debe
establecerse experimentalmente; por lo general se
usa un I 0%. La rapidez con que el DMSO
penetra en las membranas celulares parece hacer
innecesario cualquier balance entre la esperma y
el diluyente y debe iniciarse de inmediato la
congelaci6n. Chao y sus colegas ( 1975) dejan un
periodo de equilibria de hasta I hara antes de
congelar la esperma de lisa, pero no han dado
justificaci6n alguna para ese procedimiento.
Tasa de congelacion: La mayoria de las tecnicas
de criopreservaci6n incluyen el almacenamiento
de la esperma congelada en N2 liquido a -196 °C;
esto puede hacerse en alicuotas de I ml. en
ampolletas de vidrio o en pitillos plasticos de
0,5 ml. sellados en los dos extremos. El descenso
inicial de la temperatura de la muestra puede
efectuarse ya sea suspendiendo el esperma diluido
y protegido, en vapor de N2 liquido o mediante un
procedimiento menos frecuente, formando granu-
los en C02 s6lido. La primera tecnica permite el
control de la tasa de congelaci6n, congelandose
mas rapidamente los recipientes mas cercanos a
Ia superficie de! liquido. La congelacion dura
aproximadamente de 4 a 5 minutos a una distan-
cia de 2 cm de Ia superficie. Con la tecnica de Ios
granulos y el C02 Ia congelacion es mucho mas
rapida (Nagase 1964), al verter gotas alicuotas de
semen diluido, en orificios en el C02 solido
durante aproximadamente I minuto; Iuego se
sacan para almacenarlas en N2 liquido, dentro de
tubos de ensayo cubiertos. Esta tecnica se ha
empleado para el semen de carpa comun (Stein y
Bayrle 1978) y de Iisa (Pruginin y Cirlin 1976).
Hay diversos conceptos sobre el tiempo optimo
requerido para Ia congelacion de Ia esperma de
teleosteos: el proceso debe ser Io suficientemente
rapido como para que el choque termico sea
minimo y sin embargo no tan rapido como para
permitir Ia formacion de cristales de hielo intra-
celulares (Meryman 1966; Farrant 1972).
Descogelaci6n y fecundaci6n: Horton y Ott
( 1976) recomiendan que Ia esperma de salmonido
criopreservada se descongele Io mas rapidamente
posible, agitando Ia am poll eta dentro de agua a 50
o 60 °C. Withler y Morley ( 1968) sin embargo,
obtuvieron resultados igualmente buenos con
esperma de salmonido descongelada a 11 y
45 °C; el efecto de ese factor no se ha estudiado
sistematicamente en Ia carpa ni en Ia Iisa y como
se ha seflalado en el Cuadro 3, se ha ensayado una
variedad de metodos. La esperma congelada
mediante Ia tecnica de Ios granulos en C02, debe
descongelarse agregando NaHCOJ al I% (Stein
y Bayrle 1978). Ya que Ia motilidad de Ios
espermatozoides descongelados y activados dura
apenas unos segundos, el contenido de Ia ampolleta
debe mezclarse con Ios huevos frescos tan pronto
como empiece a ablandar.
PRE SE RV A CI ON DE ESPERMA A CORTO
PLAZO
La falta de equipo adecuado impide a veces el
almacenamiento criogenico de Ia esperma. La
conservacion a corto plazo es un procedimiento
mas sencillo y puede ser muy beneficioso para Ios
cultivadores porque Ia recoleccion de semen
incluso unas pocas horas antes de desovar Ia
hembra, es una forma simple de hacer mas
efectiva Ia mezcla de Ios huevos y Ia esperma.
Ademas, Ios piscicultores podran confirmar Ia
motilidad en una pequefla alicuota antes de utili-
zarla y en esta forma tener al menos una idea de Ia
viabilidad general de Ia esperma. Los metodos
actuales de almacenamiento a corto plazo estan
sin embargo ma! definidos y son contradictorios,
por Io cual se requieren esfuerzos coherentes de
investigacion tendientes a estandarizar Ios proce-
dimientos.
41
Por ejemplo, existe cierta confusion respecto a
Ia dilucion de! semen. El semen de Ia trucha arco
iris permanece fertil despues de almacenarlo a
4 °C bajo 02 o aire durante 21 dias en estado no
diluido (Stoss et al. 1978) y F.C. Withler (sin
publicar) ha demostrado que el semen no diluido
de Ia carpa comun Cyprinus carpio, de! bagre
Pangasius sutchi, de Ia carpa de Ia IndiaLabeo
rohita y de! Puntius gonionotus (tawes) puede
activarse hasta 24 horas despues de Ia expulsion,
si se mantiene frio en un refrigeradoro sobre hielo.
De igual manera, Ia esperma sin diluir de Ia Iis a gris
Mugil capita almacenada a I 0 °C, podria acti-
varse agregandole agua de mar dentro de las
siguientes 36 horas; empero, el numero de esper-
matozoides nadadores es bajo (Hines y Yashouv
1971 ). Se han ensayado diversos diluyentes.
Cuando Ia esperma de Iisa se diluyo con solucion
Ringer de teleosteo marino en proporcion de I : I
(Burton 197 5) y se almaceno a 5 °C, Ios esper-
matozoides conservaron Ia motilidad durante 23
di as y el potencial de fecundacion despues de 3 a 6
dias de almacenada resulto de! I al 3% (Chao et
al. 197 5 ). Se encontro que Ia solucion de Ringer
era superior al agua de mar para efectos de
prolongar Ia motilidad posterior a Ia activacion.
J.D. Funk (sin publicar) ha llevado a cabo
pruebas preliminares de preservacion de Ia es-
perma de Pun ti us gonionotis en Malasia y seflala
que el semen diluido 4: I con solucion salina de
Cortland (Wolf 1963) produjo un 74% de fecun-
dacion despues de 5 dias de almacenamiento a 1-
5 °C. La esperma de Ia carpa de Ia India Labeo
rohita y de Ia carpa comun Cypn'nus carpio
presentaron motilidad despues de 72 horas de
almacenamiento a 0-5° C en un diluyente de I%
de glicerina en solucion de Ringer (frog Ringer
solution) (Wolf 1963); Ia eliminacion de Ia gli-
cerina tuvo un efecto perjudicial en Ia superviven-
cia de Ios espermatozoides (Bhowmick y Bagchi
1971 ). La esperma deL. rohita, al ser almacenada
en Ringer-glicerina durante 4 horas a 28 °C
mantuvo su fertilidad.
Todavia no se sabe con certeza si el uso de un
diluyente es ventajoso o si, por el contrario,
representa un paso adicional de valor incierto. La
opinion se encuentra dividida en cuanto al uso de
crioprotectores que parecen innecesarios a tem-
peraturas superiores a 0 °C. Cualquier diluyente
debe mantener a Ios espermatozoides vivos pero
inactivos; por ejemplo, al agregarle agua, Ia
esperma de carpa se activa inmediatamente pero
Ia activacion dura menos de un minuto, por Io cu al
Ia extraccion de Ia esperma debe efectuarse en
condiciones muy secas. Debido a que todavia no
se han identificado Ios estimulos responsables de
Ia activacion de Ios espermatozoides en Ia mayoria
de las especies de los peces cultivados, la compo-
sici6n de un diluyente debe determinarse empiri-
camente. Una vez determinada, queda el interro-
gante sobre el momento mas adecuado para
mezclarlo con el semen, pues la diluci6n no se
efectua necesariamente antes de la refrigeraci6n.
El semen puede diluirsedespues de almacenado a
baja temperatura, incubandolo en el diluyente
hasta I hora, antes de mezclarlo con los huevos
frescos. Zell ( 1978) informa que el porcentaje de
huevos fecundados con semen de trucha arco iris
sin diluir, almacenado por 2 dias a 0 °C, aument6
de un promedio de 10% a un 78% despues de la
incubaci6n en soluci6n de Poulik. Funk en sus
trabajos con la carpa china (sin pu blicar) tambien
observ6 esa "restauraci6n" de la esperma en-
vejecida.
Al refrigerar la esperma, debe tenerse en cuenta
el intercambio gaseoso. Deben llenarse unica-
mente tres cuartas partes de! frasco, dejandolo sin
sellar y evitando agitarlo (Stoss et al. 1978).
CRIOPRESERVACION DE LOS HUEVOS
El tamaflo y complejidad de los 6vulos de
tele6steos convierten la criopreservaci6n en un
desafio tecnico mucho mayor que el que presen-
tan los espermatozoides; sin embargo, el exito en
la criopreservaci6n de embriones mamiferos sugiere
que las dificultades pueden superarse (Whitting-
ham et al. 1972; Leibo 1977). Zell ( 1978) ha
reportado la criopreservaci6n satisfactoria de
huevos de tele6steo no fecundados y de cigotos.
En estudios que incluyeron 6vulos de salmon de!
Atlantico, trucha arco iris y trucha de arroyo, los
huevos sin fecundar que fueron congelados durante
5 minutos a - 20 °C en nitr6geno liquido, resul-
taron fortiles al descongelarse y un elevado
porcentaje de cigotos y huevos fecundados sobre-
vivieron tras someterse a temperaturas hasta de
-50 °C. Se utiliz6 la soluci6n salina de Hanks
como medio de congelaci6n (Wolf 1963); nose
agregaron crioprotectores. La eclosi6n de todos
los huevos super-enfriados o congelados a -12 o
-5 °C fue consistentemente alta; la mayor difi-
42
cultad tecnica result6 ser el control sobre la tasa
de enfriamiento
CRITERIOS DE EXITO
Segun el Cuadro 3, se deduce que no solo se
han efectuado pocos estudios sobre la criopreser-
vaci6n de la esperma de especies icticolas culti-
vadas, sino queen los pocos que hay, los criterios
de exito son, por decir lo menos, dispares. Decir
de los espermatozoides que tienen "gran motili-
dad" es algo vago pues no se sabe si eso significa
que una gran proporci6n de los espermatozoides
observados present6 alguna forma de motilidad o
si se observ6 un vigor excepcional en celulas
espermaticas individuales. La fertilidad es un
mejor criterio, aunque tambien es vago a menos
que se especifique el grado de desarrollo alcanzado.
La eclosi6n de los huevos representa un evento
ambiguo que ocurre lo suficientemente tarde en el
desarrollo como para representar una verdadera
viabilidad de los gametos, pero no tan tarde como
para que un experimento de criopreservaci6n se
convierta en una experiencia de cria de larvas. Se
sugiere adoptar dicho criterio como medida de
exito en futuros estudios.
Muy pocos informes sobre experimentos de
preservaci6n de esperma determinan la relaci6n
esperma/6vulo empleada en las pruebas de fertili-
dad y sin embargo es un factor de mucha impor-
tancia: por ejemplo, la aplicaci6n de 2 ml. de
es perm a descongelada a media docena de huevos,
casi con seguridad producira un porcentaje de
fecundaci6n ilusoriamente alto. Por ello sugerimos
tambien que se informe sobre el numero aproxi-
mado de esperrnatozoides y 6vulos empleados en
cada experimento de fertilidad.

REFERENCIAS
Abraham, M. 1975. The pituitary of Mugil
cephalus during adaptation to biotopes of
different salinities. Aquaculture (Paises Bajos),
5, 199-204.
Alikunhi, K.H. 1976. Ongoing research studies on
maturation and spawning of milkfish Chanos
chanos at the Brackishwater Shrimp and Mi&-
fish Culture Applied Research and Training
Project, J epara, Indonesia. International Milk-
fish Workshop Conference, lloilo, Philippines,
1976. 29-34.
An6nimo. 1972. Induced breeding ofClan'as batra-
chus. FAO Aquaculture Bull. (Italia), 5, 4.
197 4. Cryopreservation of fish spermatozoa.
FAO Aquaculture Bull. (Italia), 6, 3.
1976. Artificial breeding of mullet. FAO
Aquaculture Bull. (Italia), 8, 3-4.
1977 a. A new highly effective ovulating agent
for fish reproduction. Sci. Sin. (China), 4,
469-474.
l 977b. Further research into the effects of
LRH-A on induced ovulation of farm fish.
Fish. Mar. Serv. Transl. 4469. Originally
published in Biophys. Sinica 9, 14-23.
l 977c. Induced spawning ofClan'as batrachus.
F AO Aquaculture Bull. (Italia), 8, 4.
1977d. Announcements: pituitary bank. FAO
Aquaculture Bull. (Italia), 6, 37.
1978. Aquaculture products for anesthesia
and disease control. Vancouver, BC, Syndel
Laboratories, I Sp.
Arimura, A., Vilchez-Martinez, J.A., Coy, D.H.,
Coy, E.J., Hirotsu, Y. y Schally, A.V. 1974.
D-Ala6 , Des-Gly-NH2 10 -LR-RH-ethylamide:
a new analogue with unusually high LH-RH/
FSH-RH activity. Endocrinology (E.U.), 95,
1174-1177.
Atz, J.W. y Pickford, G.E. 1959. The use of
pituitary hormones in fish culture. Endeavour
(Ed. inglesa)(lnglaterra), 18, 125-129.
43
Bailey, W.M. y Boyd, R.L. 1970. A preliminary
report on spawning and rearing of grass carp
Ctenopharyngodon idella in Arkansas. Pre-
sentado al 24th Annual Conf. Southeastern
Association of Game and Fisheries Commis-
sioners, Atlanta, Georgia, 1970.
Ball, J.N. y Baker, RI. 1969. The pituitary gland:
anatomy and histophysiology. In Hoar, W.S. y
Randall, D.J., ed., Fish physiology, Vol. 2. New
York, N.Y., Academic Press Inc., 1-111.
Barannikova, I.A., Boev, A.A., Moiseeva, E.B. y
Travkin, B.G. 1975. Methods of determining the
gonadotropic activity of the pituitary glands of
fishes in connection with the standardization of a
preparation for hypophyseal injections. Fish.
Mar. Serv. Trans. 3819 (1976).
Bardach, J.E., Ryther, J.H. y McLarney, W.O.
1972. Aquaculture. The farming and husbandry
of freshwater and marine organisms. New York,
N.Y., John Wiley & Sons Inc. (Interscience).
Barrington, E.J. 1975. An introduction to general
and comparative endocrinology. Oxford, Clar-
endon Press.
Bell, G .R. 1967. A guide to the properties, charac-
teristics and uses of some general anesthetics for
fish, 2nd ed. Ottawa, Queen's Printer.
Bhowmick, R.H. 1979. Observations on the use of
human chorionic gonadotropin prepared in the
laboratory in induced spawning in the major carp
Labeo rohita. Tech. Pap. 16. Presentado al
Symposium on Inland Aquaculture, Barrack-
pore, India, 1979.
Bhowmick, R.H. y Bagchi, M.M. 1971. A note on
the preservation of sperms of carps. J. Inland
Fish. Soc. India (India), 3, 119-120.
Bhowmick, R.H. y Kowtal, G.V. 1973. Simplified
technique ofhypophysation of major carps. J. In-
land Fish. Soc. India (India), 5, 218-222.
Bhowmick, R.H., Kowtal, G.V., Jana, R.K. y
Gupta, S.D. 1977. Experiments on second
spawning of major Indian carps in the same
season by hypophysation. Aquaculture (Paises
Bajos), 12, 149-155.
1979. Observations on the use of various hor-
mones and clomiphene citrate in hypophysation
of Indian major carps. Tech. Pap. 14. Presen-
tado al Symposium on Inland Aquaculture,
Barrackpore, India, 1979.
Bienarz, K., Epler, P. y Popek, W. 1977. Histo-
logical changes in the ovaries of mature female
carp in the summer time. Inv. Pesq. (Espana),
41, 95-102.
Billard, R. y Escaffre, AM., 1973. Effects ofHCG
and carp gonadotropin on the maintenance of
spermatogenesis in hypophysectomized gold-
fish (Carassius auratus). Int. Res. Commun.
Syst. 73, 12-15.
Billard, R. y Peter, R.E. 1977. Gonadotropin
release after implantation of antiestrogens in the
pituitary and hypothalamus of goldfish, Caras-
sius auratus. Gen. Comp. Endocrinol. (E.U.),
32, 213-220.
Billard, R., Richard, M. y Breton, B. 1977. Stimu-
lation of gonadotropin secretion after castration
in rainbow trout. Gen. Comp. Endocrinol.
(E.U.), 33, 163-165.
Boonbrahm, M., Tarnuchalanukit, W. y Chuapoehuk,
W. 1968. Induced spawning by pituitary hor-
mone injection of pond-reared fishes. Proc.
lndo-Pacific Fish. Comm. 13, 162-170.
Breton, B., Billard, R., Jalabert, B. y Kann, G.
1972. Dosage radioimmunologique des gonado-
trophines plasmatiques chez Carassius auratus,
au cours de nycthemere et pendant )'ovulation.
Gen. Comp. Endocrinol. (E.U.), 18, 463-
468. (En frances).
Breton, B., Jalabert, B. y Postier, A. 1975a.
Induction de decharges gonadotropes hypo-
physaires chez la carpe (Cyprinus Carpio) a
l'aide du citrate de cisclomiphene. Gen. Comp.
Endocrinol. (E.U.), 25, 400-404. (En fran-
ces).
Breton, B., Jalabert, B., Postier, A. y Billard, R.
1975b. Etude sur le cycle reproducteur de la
truite arc-en-ciel et de la tanche. Effet de
variations experimentales de la temperature.
J. Physiol. (Paris) (Francia), 30, 561-564.
(En frances).
Breton, B., Jalabert, B. y Weill, C. 1975c. Carac-
terisation partielle d'un facteur hypothala-
mique de la liberation des hormones gonado-
tropes chez Ia carpe (Cyprinus Carpio): etude
in vitro. Gen. Comp. Endocrinol. (E.U.), 25,
405-415. (En frances).
Breton, B., Prunet, P. y Reinaud, P. 1978. Sexual
differences in salmon gonadotropin. Ann. Biol.
Anim. Biochim. Biophys. (Francia), 18, 759-
767.
Breton, B. y Weill, C. 1973. Effets du LH/FSH-
RH synthetique et d' extraits hypothalamiques
de carpe sur la secretion d'hormone gonadotrope
in vivo chez la carpe (Cyprinus carpio ). C.R.
Acad. Sci. 277, 2061-2064. (En frances).
Burlakov, AB. 1975. On the quantity of gonado-
tropic hormones in the hypophysis of the carp,
Cyprinus carpio. J. lchthyol. (Traducci6n
inglesa VOPR. lkhtiol.)(E.U.), 15, 635-644.
Burlakov, A.B., Belova, N.V. y Belyanov, N.I.
1976. Specificity of gonadotropic hormones of
the hypophysis of fish. Fish. Mar. Serv. Trans.
4152 ( 1977). PublicadooriginalmenteenMinist.
Rybn. Khoz. SSSR Tsentr. Nauchno lssled.
Inst. Tekh. Ekon. lssled. 1, 143-146.
Burton, R.F. 1975. Ringer solutions and physio-
44
logical salines. Scientechnica, Bristol.
Burzawa-Gerard, E. 1971. Purification d'une hor-
mone gonadotrope hypophysaire de poisson
teleosteen, la carpe (Cyprinus carpio ). Bio-
chimie (Paris)(Francia), 53, 545-552. (En
frances).
Burzawa-Gerard, E. y Fontaine, Y.A. 1972. The
gonadotropins oflowervertebrates. Gen. Comp.
Endocrinol. Suppl. (E.U.), 3, 715-728.
Burzawa-Gerard, E., Goncharov, B., Dumas, A. y
Fontaine, Y.A. 1976. Further biochemical studies
on carp gonadotropin; biochemical and bio-
logical comparison of c-GTH and a gonado-
tropin fromAcipenserstellatus (Chondrostei).
Gen. Comp. Endocrinol. (E.U.), 29, 498-
505.
Campbell, C.M. y Idler, D.R. 1976. Hormonal
control of vitellogenesis in hypophysectomized
flounder (Pseudopleuronectes americanus ).
Gen. Comp. Endocrinol. (E.U.), 28, 143-
150.
Carreon, J.A., Estocapio, F.A. y Enderez, E.M.
1976. Recommended procedures for induced
spawning and fingerling production of Clarias
macrocephalus Gunther. Aquaculture (Paises
Bajos), 8, 269-281.
Chao, N-H., Chen, H-P. y Liao, 1-C. 1975. Study
on cryogenic preservation of grey mullet sperm.
Aquaculture (Paises Bajos), 5, 389-406.
Chaudhuri, H. 1972. Production of fish seed by
induced breeding. Presentado al Seminar on
production of quality fish seed for fish culture,
Barrackpore, India, 1972. 270-286.
1976. Use of hormones in induced spawning of
carps. J. Fish. Res. Board Can. (Canada), 33,
940-947.
Chen, T.P. 1976. Aquaculture practices in Taiwan.
Page, Noiwich, Fishing News (Books) Ltd.
Chen, F.Y., Chow, M. y Sin, B.K. 1969. Induced
spawning of the three major Chinese carps in
Malacca, Malaysia. Malay. Agric. J. (Malasia),
47, 24-38.
Crim, L.W. y Cluett, D.M. 1974. Elevation of
plasma gonadotropin concentration in response
to mammalian gonadotropin-releasing hormone
(GRH) treatment of the male brown trout as
determined by radioimmunoassay. Endocrinol.
Res. Commun. 1, 101-110.
Crim, L.W., Peter, R.E. y Billard, R 1976.
Stimulation of gonadotropin secretion by intra-
ventricular injection of hypothalamic extracts in
the goldfish, Carassius auratus. Gen. Comp.
Endocrinol. (E.U.), 30, 77-82.
Crim,L.W., Watts, E.G. yEvans,D.M.1975. The
plasma gonadotropin profile during sexual ma-
turation in a variety of salmonid fishes. Gen.
Comp. Endocrinol. (E.U.), 27, 62-70.
Donaldson, E.M. 1973. Reproductive endocrinology
offishes. Am. Zoo!. (E.U.), 13, 909-927.
1976. Technological improvements in controlled
reproduction of fish. Manuscrito, FAO Tech.
Conf. Aquaculture, Kyoto, Japan. I Op.
Donaldson, E.M., Fagerlund, U.H.M., Higgs, D.A.
y McBride, J.R 1979. Hormonal enhancement
of growth. En Hoar, W.S., Randall, D.J. y
Brett, J.R, ed., Fish physiology, Volume 8. New
York, N.Y., Academic Press Inc., 456-599.
Donaldson, E.M., Hunter, G. y Dye, H.M. 1978.
Induced ovulation in the coho salmon (Oncho-
rhynchus kisutch) using salmon pituitary pre-
parations, gonadotropin releasing hormones and
an antiestrogen. Western Reg. Conf. Gen.
Comp. Endocrinol., Santa Cruz. (Abstr. 24).
197 9. Relative potency of gonadotropin releasing
hormone and gonadotropin releasing hormone
analogues for induced ovulation in the coho
salmon (Onchorhynchus kisutch ). Western Reg.
Conf. Gen. Comp. Endocrinol., Eugene, Oregon.
Donaldson, E.M., Yamazaki, F., Dye, H. y Philleo,
W.W. 19 72. Preparation of gonadotropin from
salmon (Onchorhynchus tshawytscha) pitui-
tary glands. Gen. Comp. Endocrinol. (E. U.),
18, 469-481.
Farmer, S.W. y Papkoff, H. 1977. A teleost
(Tilapia mossambica) gonadotropin that resem-
bles luteinizing hormone. Life Sci. (E.U.), 20,
1227-1232.
Farrant, J. 1972. Mechanisms of injury and
protection in living cells and tissues at low
temperatures. In Smith, A.V., ed., Current
trends in cryobiology. New York, N.Y., Plenum
Publishing Corp., 139-153.
Fontaine, M. 1976. Hormones and the control of
reproduction in aquaculture. J. Fish. Res. Board
Can. (Canada), 33, 922-939.
Fontaine, Y.A. y Gerard, E. 1963. Purification
d'un facteur gonadotrope de l'hypophyse d'un
teleosteen, la carpe (Cypn·nus carpio ). C.R.
Hebd. Seances Acad. Sci. (Francia), 256, 5634-
5637. (En frances).
Fontaine, Y.A., Salmon, C., Fontaine-Bertrand, E.,
Burzawa-Gerard, E. y Donaldson, E.M. 1972.
Comparison of the activities of two purified fish
gonadotropins on adenylcyclase activity in the
goldfish ovary. Can. J. Zoo!. (Canada), 50,
1673-1676.
Ginzburg, A.S. 1972. Fertilization in fishes and the
problem of polyspermy. Israel. Program for
Scientific Translations, Jerusalem.
Gupta, M.V. y Sharma, B.K. 1974. A note on the
transport of Chinese carp breeders using MS
222. J. Inland Fish. Soc. India (India), 6, 99-
100.
45
Hines, R. y Yashouv, A. 1971. Some environ-
mental factors influencing the activity of sperma-
tozoa of Mugil capita Cuvier, a grey mullet. J.
Fish. Biol (lnglaterra ), 3, 12 3-12 7.
Hirose, K. e Ishida, R. 1974. Induction of
ovulation in the ayu, Plecoglossus altivelis,
with LR-releasing hormone (LH-RH). Bull.
Jpn. Soc. Sci. Fish. (Jap6n), 40, 1235-1240.
Ho, F.C-W. y Vanstone, W.E. 1961. Effect of
estradiol monobenzoate on some serum consti-
tuents of maturing sock eye salmon (Onchorhyn-
chus nerka ). J. Fish. Res. Board Can. (Canada),
18, 859-864.
Hoar, W.S. 1975. General and comparative physi-
ology. New York, Prentice-Hall.
Hoar, W.S. y Nagahama, Y. 1978. The cellular
sources of sex steroids in teleost gonads. Ann.
Biol. Anim. Biochim. Biophys. (Francia), 18,
893-898.
Hodgins, J.O. y Ridgeway, G.J. 1964. Recovery of
viable salmon spermatozoa after fast-freezing.
Prog. Fish-Cult. (E. U.), 26, 95.
Horton, H.F. y Ott, A.G. 1976. Cryopreservation
offish spermatozoa and ova. J. Fish. Res. Board
Can. (Canada), 33, 995-1000.
Houssay, B.A. 1931. Action sexuelle de l'hypophyse
sur Jes poissons et Jes reptiles. C. P. Soc. Biol.
106, 377-378. (En frances).
Hurlburt, M.E. l 977a. Role of the thyroid gland in
ovarian maturation of the goldfish Carassius
auratus L. Can. J. Zoo!. (Canada), 55(11),
1906-1913.
l 977b. Effects of thyroxine administration on
plasma thyroxine levels in the goldfish Caras-
sius auratus L. Can. J. Zoo!. (Canada), 55,
255-258.
Idler, D.R., Bazar, L.S. y Hwang, S.J. 1975. Fish
gonadotropin( s). III. Evidence for more than one
gonadotropin in chum salmon pituitary glands.
Endocr. Res. Commun. 2, 237-249.
Jalabert, B. 1976. In vitro oocyte maturation and
ovulation in rainbow trout (Salmo gairdneri)
northern pike (Esox lucius) and goldfish (Caras-
sius auratus) J. Fish. Res. Board Can. (Canada),
33, 974-988.
Jalabert, B., Bry, C., Breton, B. y Campbell, C.
1976. Action de la l 7a hydroxy-20,8 dihydro-
progesterone et de la progesterone sur la matura-
tion et !'ovulation in vivo et sur le niocase
d'hormone gonadotrope plasmatique t-GtH chez
la truite arc-en-ciel. C.R. Acad. Sci. 281, 811-
814. (En frances).
Jalabert, B., Breton, B., Brzuska, E., Postier, A. y
Wieniawski, J. 1977. A new tool for induced
spawning. The use of l 7a hydroxy- 20,8 dihydro-
 progesterone to spawn carp at low temperature.
Aquaculture (Paises Bajos), 10, 353-364.
Jhingran, V.G. y Gopalakrishnan, V. 1974. A
catalogue of cultivated aquatic organisms. Roma,
FAO, Fisheries Technical Paper No. 130.
Khoo, K.H. 197 4. Steroidogenesis and the role of
steroids in the endocrine control of oogenesis
and vitellogenesis in the goldfish, Carassius
auratus. Ph.D. thesis, University of British
Columbia, Vancouver, BC, l 26p.
197 5. The corpus luteum of goldfish (Carassius
auratus) and its functions. Can. J. Zool.
(Canada), 53, 1306-1323.
1979. The histochemistry and endocrine control
of vitellogenesis in goldfish ovaries. Can. J.
Zool. (Canada), 57, 617-626.
Kim, Y.S., Stumpf, W.E., Sar, M. y Martinez-
Vargas, M.C. 1978. Estrogen and androgen
target cells in the brain of fishes, reptiles and
birds: phylogeny and ontogeny. Am. Zool.
(E.U.), 18, 425-435.
Kossmann, H. 1976. Rearing of carp fry under
laboratory conditions. EIFAC Workshop on
Controlled Reproduction of Cultivated Fishes,
Hamburg, 1973. Tech. Pap. No. 10, 127-129.
Kuo, C-M. y Nash, C.E. 1975. Recent progress on
the control of ovarian development and induced
spawning of the grey mullet (Mugil cephalus L. ).
Aquaculture (Paises Bajos), 5, 19-29.
Kuo, C-M, Nash, C.E. y Shehadeh, Z.H. 1974. A
procedural guide to induced spawning in the grey
mullet (Mugil cephalus L.). Aquaculture (Paises
Bajos), 3, 1-14.
Kuo, C-M., Shehadeh, Z.H. y Milisen, K.K. l 973a.
A preliminary report on the development, growth
and survival of laboratory-reared larvae of the
grey mullet (Mugil cephalus L.). J. Fish. Biol.
(lnglaterra), 5, 459-470.
Kuo, C-M. Shehadeh, Z.H. y Nash, C.E. l 973b.
Induced spawning of captive grey mullet (Mugil
cephalus L.) females by injection of human
chorionic gonadotropin (HCG). Aquaculture
(Paises Bajos), 1, 429-432.
Lam, T.J., Pandey, S. y Hoar, W.S. 1975.
Induction of ovulation in goldfish by synthetic
luteinizing hormone-releasing hormone (LH-
RH). Can. J. Zool. (Canada), 5 3, 1189-1192.
Lam, T.J., Pandey, S., Nagahama, Y. y Hoar,
W.S. 1976. Infective syntheticluteinizinghor-
mone-releasing hormone (LH-RH) on ovulation
and pituitary psychology of the goldfish Caras-
sius a uratus. Can. J. Zool. 5 4, 816-8 24.
1978. Endocrine control of oogenesis, ovulation
and oviposition in goldfish. En Gaillard, P.J. y
Boer, H.H., ed., Comparative Endocrinology.
Amsterdam, Elsevier, 55-64.
46
Leibo, S.P. 1977. Preservation of mammalian cells
and embryos by freezing. En Simatos, D., Strong,
D.M. y Turc, J.M. Cryoimrnunologie, Colloq.
INSERM. 62, 311-334.
Liao, 1-C. 1975. Experiments on induced breeding
of the grey mullet in Taiwan from 1963-1973.
Aquaculture (Paises Bajos ), 6, 31-58.
Liao, 1-C. y Chang, Y-S. 1976. A preliminary
report on the gonadal development of adult
milkfish, Chanos chanos, reared in tanks. Pre-
sentado al Intl. Milkfish Workshop Conf., Iloilo,
Philippines, 1976. 121-133.
Makeyeva, A.P. y Verigin, B.V. 1970. Use of the
method of pituitary injections in the propagation
of silver carp and grass carp. J. lchthyol. 11,
174-185.
Meryman, H.T. 1966. Review of biological freezing.
En Meryman, H.T., ed., Cryobiology. New
York, N.Y., Academic Press Inc., 1-114.
Moczarski, M. 1977. Deep freezing of carp
(Cyprinus carpio L.) sperm. Bull. Acad. Pol.
Sci. Ser. Sci. Biol. (Polonia), 25, 187-190.
Monahan, M.W., Amoss, M.S., Anderson, H.A. y
Vale, W. 1973. Synthetic analogs of the hypo-
thalamic luteinizing hormone releasing factor
with increased agonist properties. Biochemistry
(E.U.), 12, 4616-4620.
Nagase, H. 1964. Deep freezing bull semen in
concentrated pellet form. Proc. Intl. Congr.
Reprod. Anim. Insem. Artif. Trento, 3, 503.
Nash, C.E. y Kuo, C-M. 1975. Hypothesis for
problems impeding the mass propagation of grey
mullet and other finfish. Aquaculture (Paises
Bajos), 5, 119-133.
1976. Preliminary capture, husbandry and in-
duced breeding results with the milkfish, Chanos
chanos. Presentado al Intl. Milkfish Work-
shop Conf., lloilo, Philippines, 1976. 139-160.
Nash, C.E., Kuo, C-M. y Mcconnel, S.C., 1973.
Operational procedures for rearing. In The grey
mullet: induced breeding and larval rearing.
National Sea Grant Report No. 73-128, 23-37.
Ng, T.B. y Idler, D.R 1978. 'Big' and 'little' forms
of plaice vitellogenic and maturational hormones.
Gen. Comp. Endocrinol. (E.U.), 34, 408-420.
Ott, A.G. 197 5. Cryopreservation of pacific salmon
and steelhead trout sperm. Ph.D. thesis, Oregon
State University, Corvallis, Oregon, l 45p.
Pandey, S. y Hoar, W.S. 1972. Induction of
ovulation in goldfish by clomiphene citrate. Can.
J. Zool. (Canada), 50, 1679-1680.
Pandey, S. y Stacey, N. 1975. Antiestrogenic
action of clomiphene citrate in goldfish. Can. J.
Zool. (Canada), 53, 102-103.
Pavlovici, I. y Vlad, C. 1976. Some data on the
 preservation of carp ( Cypn'nus carpio) seminal
material by freezing. Fis. Mar. Serv. Transl. No.
3965. Publicado originalmente en Cresterea
Anim. 4, 45-48.
Perks,A.M.1969. Theneurohypophysis.EnHoar,
W.S. y Randall, DJ., ed., Fish physiology,
Volume 2. New York, N.Y., Academic Press
Inc., 112-206.
Peter, RE. y Crim, L.W. 1978. Hypothalamic
lesions of goldfish: effects on gonadal recrudes-
cence and on gonadotropin secretion. Ann. Biol.
Anim. Biochim. Biophys. (Francia), 18, 819-
823.
1979. Reproductive endocrinology of fishes:
gonadal cycles and gonadotropin in teleosts.
Ann. Rev. Physiol. (E.U.), 41, 323-335.
Pickford, G.E. y Atz, J.W. 1957. The physiology of
the pituitary gland of fishes. New York Zoo-
logical Society, New York.
Potaros, M. y Sitasit, P., 1976. Induced spawning of
Pangasius sutchi (Fowler). Tech. Pap. 15,
Freshwater Fisheries Division, Department of
Fisheries, Bangkok, Thailand.
Pruginin, Y. y Cirlin, B. 1976. Techniques used in
controlled breeding and productionoflarvae and
fry in Israel. Tech. Pap. 25, EIFAC Workshop
on Controlled Reproduction of Cultivated Fish,
Hamburg, 1973. 90-100.
Sage, M. 1973. The evolution of thyroidal function
in fishes. Am. Zoo!. (E.U.), 13, 899-905.
Schreibman, M.P., Leatherland, J.F. y McKeown,
B.A. 1973. Functional morphology of the teleost
pituitary gland. Am. Zoo!. (E.U.), 13, 719-742.
Sebastian, M.J. y Nair, V.A. 1975. The induced
spawning of the grey mullet (Mugil macrolepis)
and the large-scale rearing of its larvae. Aqua-
culture (Paises Bajos), 5, 41-52.
Shehadeh, Z.H. 1972. Controlled breeding of cul-
turable species offish - a review of progress and
current problems. EnPillay, T.V.R, ed., Coastal
Aquaculture in the Indopacific Region. London,
Fishing News (Books) Ltd., 180-194.
1976. Induced breeding techniques - a review
of progress and problems. Tech. Pap. 5, Work-
shop on Controlled Reproduction of Cultivated
Fishes, Hamburg, 1973, 72-88.
Shehadeh, Z.H., Kuo, C-M. y Milisen, K.K.
l 973a. Induced spawning of grey mullet Mugil
cephalus with fractionated salmon pituitary ex-
tract. J. Fish Biol. (lnglaterra), 5, 471-478.
l 973b. Validation of an in vivo method for
monitoring ovarian development in the grey
mullet (Mugil cephalus L.). J. Fish Biol.
(Inglaterra), 5, 489-496.
Shrestha, S.B. 1973. Induced breeding of grass
carp in Nepal. Bamidgeh (Israel) 25, 10-16.
47
Sin, A.W. 1974. Preliminary results on cryogenic
preservation of sperm of silver carp (Hypo-
phthalmichthys molitn'x) and bighead (An'stich-
thys nobilis). Hong Kong Fish. Bull. 4, 33-36.
Singh, S.B., Sukumaran, K.K. y Chakrabarti, P.C.
1970. Furtherobservations on induced breeding
of silver carp and grass carp during 1968. Proc.
Nat. Acad. Sci. India 40, 88-98.
Sokolowska, M., Popek, W. y Bienarz, K. 1978.
Synthetic releasing hormones LH/FSH-RH
and LH-RH: effect of intracerebral and intra-
muscular injection on female carp (Cyprinus
carpio L.) maturation. Ann. Biol. Anim. Biochim.
Biophys. (Francia), 18, 963-969.
Stacey, N.E., Cook, A.F. y Peter, RE. 1979.
Ovulatory surge of gonadotropin in the goldfish,
Carassius auratus. Gen. Comp. Endocrinol.
(E.U.), 37, 246-249.
1979. Spontaneous and gonadotropin-induced
ovulation in the goldfish, Carassius auratus:
effects of several external factors. J. Fish. Biol.
(Inglaterra).
Stacey, N.E. y Pandey, S. 1975. Effects of indo-
methacin and prostaglandins on ovulation of
goldfish. Prostaglandins (E.U.), 9, 597-607.
Stein, H. y Bayrle, H. 1978. Cryopreservation of
the sperm of some freshwaterteleosts. Ann. Biol.
Anim. Biochim. Biophys. (Francia), 18, 1073-
1076.
Stoss, J., Buyukhatipoglu, S. y Holtz, W. 1978.
Short-term and cryopreservation of rainbow
trout (Salmo gairdneri Richardson) sperm.
Ann. Biol. Anim. Biochim. Biophys. (Francia),
18, 1077-1082.
Sundararaj, B.I., Anand, T.C. y Donaldson, E.M.
197 2. Effects of partially purified salmon gona-
dotropin on ovarian maintenance, vitellogenesis
and ovulation in the hypophysectomized catfish,
Heteropneustes fossilis (Bloch). Gen. Comp.
Endocrinol. (E.U.), 18, 102-114.
Sundararaj, B.I. yVasal, S. 1976. Photoperiod and
temperature control in the regulation of repro-
duction in the female catfish Heteropneustes
fossilis. J. Fish. Res. Board Can. (Canada), 33,
959-973.
Takashima, F., Hibiya, T. Ngan, P. y Aida, K.
1972. Endocrinological studies on lipid metabo-
lism in rainbow trout II. Effects of sex steroids,
thyroid powder and adrenocorticotropin on
plasma lipid content. Bull. Jpn. Soc. Sci. Fish.
(Japan), 38, 43-49.
Tay, S.H. 1973. Induced breeding of "koi"(Japanese
fancy carp). Singapore J. Pri. Ind. 1, 1-6.
Vanstone, W.E., Tiro, L.B., Villaluz, A.C., Ram-
singh, D.C., Kumagni, S., Dulduco, P.J., Barnes,
M.M.L. y Duenas, C.E. 1977. Breeding and
 larval rearing of the milkfish Chanos chanos culture in Nepal. Roma, FAO. 138p.
(Pisces: Chanidae ). SEAFDEC Tech. Rep. 3
3-17. , Yamazaki, F. 1965. Endocrinological studies on
the reproduction of the female goldfish Caras-
Vanstone, W.E., Villaluz, AC., Bombeo, P.E. y
sius auratus L., with special reference to the
Belicano, R.B. 1976a. Capture, transport and function of the pituitary gland. Mem. Fae.
domestication of adult milkfish, Chanos chanos.
Fish. Hokkaido Univ. (Jap6n), 13, 1-64.
Presentado al Intl. Milkfish Workshop Conf.
1976. Application of hormones in fish culture.
Iloilo, Philippines, 1976. 204-222. '
J. Fish. Res. Board Can. (Canada), 33, 948-
Vanstone, W.E., Villaluz, AC. y Tiro, Jr., L.B.
958.
1976b. Spawning ofmilkfish, Chanos chanos, in
Yanagimachi, R. 195 7. Studies of fertility in
captivity. Presentado al Intl. Milkfish Work-
Clupea pallasi II. Structure and activity of
shop Conf., Iloilo, Philippines, 1976. 222-228.
spermatozoa. Zoo!. Mag. (Tokyo)(Jap6n), 5,
Varghese, T.J., Satyanarayana, G.P., Devaraj,
222-225. (En japones con resumen en ingles)
K.V. y ~handrasekhar, B. 1975. Preliminary Yashouv, A 1969. Preliminary report on induced
observations on the use of marine catfish pitui- spawning of Mugil cephalus L. reared in cap-
tary glands for induced spawning of the Indian
tivity in freshwater ponds. Bamidgeh (Israel),
major carps. Curr. Sci. (Bangalore)(India) 44 21, 19-24.
75-78. , ,
Yu, Y.S., Sin, AW. y Chan, Y.W. 1973. Results of
von Ihering, R. 19 37. A method for inducing fish to
indu.c~d spawning of the bighead (An'stichthys
spawn. Prog. Fish-Cult. (E.U.), 34, 15-16. nobzlzs ), grass carp (Ctenopharyngodon idella)
Whittingham, D.C., Leibo, S.P. y Mazur, P. '.1Ild silver carp (Hypophthalmichthys molitn'x)
1972. Survival of mouse embryos frozen to m Hong Kong, 1969-1971. Hong Kong Fish.
-196 and -296 °C. Nature (Lond)(lngla- Bull. 3, 55-76.
terra), 236, 411-414.
Zell, S.R. 1978. Cryopreservation of gametes and
Wiltzius, W.J. 1973. Selected bibliography on the embryos of salmonid fishes. Ann. Biol. Anirn.
collection, fertilization, vitality, storage and
Biochim. Biophys. (Francia), 18, 1089-1099.
cryo~reservation of gametes, particularly sal-
momds. Colo. Dep. Nat. Resour. Fish. Inf.
Leaflet No. 23, 4p.
Withler, F.C. y Morley, R.B. 1968. Effects of
chilled storage on viability of stored ova and
sperm of sockeye and pink salmon. J. Fish.
Res. Board Can. (Canada), 25, 2695-2699.
Wolf, K. 1963. Physiological salines for fresh-
water teleosts. Prog. Fish-Cult. (E.U.) 25
135-140. , ,
Woynarovich, E., 1975. Elementary guide to fish

PROVEEDORES DE MATERIAL DE DESOVE

Syndel Laboratories Ltd., 8879 Selkirk Street, Vancouver, B.C. Canada

The 1979 Buyer's Guide. 1978. Commercial fish farmer and aquaculture news
5(1 ), noviembre, 10-49 .

48