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Departamento Cs. Biológicas

Microbiología general
BIOL150-2020

DESTRUCCIÓN E INHIBICIÓN
DE MICROORGANISMOS
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Conceptos básicos
 Esterilización: proceso físico o químico destinado a destruir TODA vida microbiana,
incluyendo esporas bacterianas, en materiales u objetos inanimados.

 Desinfección: proceso que busca eliminar la mayoría de los microorganismos patógenos,

excepto esporas y algunos virus, en objetos inanimados.

Un desinfectante no necesariamente esteriliza un objeto, ya que

pueden permanecer algunos microorganismos o esporas.

 Desinfección de alto nivel: producto químico que destruye todos los patógenos
microbianos, excepto grandes números de esporas bacterianas.

 Desinfección de nivel intermedio: producto químico que destruye todos los patógenos
microbianos excepto las esporas bacterianas.

 Desinfección de bajo nivel: producto químico que destruye la mayoría de las bacterias
vegetativas y virus con cubierta lipídica o tamaño medio.
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Conceptos básicos
 Antisepsia: proceso que utiliza agentes químicos para impedir infecciones en tejidos vivos.
Los antisépticos actúan provocando muerte de los microorganismos patógenos o impidiendo
su multiplicación

 Asepsia: procedimiento que pretende acabar con los microorganismos presentes sobre
objetos o superficies inanimadas, por lo que se hace referencia a espacios, superficies o
instrumental.

 Sepsia: Presencia de microorganismos patógenos en una o varias estructuras orgánicas.

«bacteremia» sepsis en sangre
«septicemia» respuesta inflamatoria sistémica
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Conceptos básicos
 Sanitización o higienización: proceso que utiliza

lavado mecánico o agentes químicos para reducir el

número de patógenos presentes en un objeto hasta
niveles aceptables para la salud pública.

 Pasteurización: calentamiento de alimentos a altas

temperaturas (71ºC) por cortos períodos de tiempo (15

seg) con el objetivo de matar a la mayoría de los
microorganismos y mejorar la calidad del producto.
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Esterilización
Agentes físicos: Calor
 Agente esterilizante más utilizado (tiempo de exposición y temperatura)

 Mecanismo de acción:
 Calor seco: oxidación de proteínas
 Calor húmedo: desnaturalización de proteínas

 Eficacia:
 Húmedo>>Seco
 Mayor poder de penetración.
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Calor húmedo: autoclave (presión y calor)

• Ventajas calor húmedo:
• Rápido calentamiento y penetración
• 120°C durante 30 minutos aproximado.
• Destrucción de bacterias y esporas en corto tiempo
• No deja residuos tóxicos
• Hay bajo deterioro del material expuesto
• Económico

Desventajas
- No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el
agua
- Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metálicos
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Ciclo del autoclave

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Calor húmedo
• Por agua en ebullición: 100ºC por 10 a 20 minutos, mata
sólo formas vegetativas.

• Por vapor fluente: se utiliza para instrumentos de la

industria 15 min a 100ºC, no destruye esporas.
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Calor seco: horno (aire caliente)

• La acción del calor seco es idéntica al calor húmedo del autoclave, pero el
agua no participa en la desnaturalización de proteínas.
• Es un mecanismo de esterilización.
• Diversas condiciones de uso:
• 140°C durante 3 horas
• 160°C durante 2 horas
• 180°C durante 30 minutos

Ventajas
• No es corrosivo para metales e instrumentos
• Permite la esterilización de sustancias en polvo y no acuosas.

Desventajas
• Requiere mayor tiempo de esterilización, respecto al calor húmedo
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Calor seco
FLAMEADO
INCINERACIÓN
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LA ACCIÓN LETAL DEL CALOR: RELACIÓN DE TIEMPO Y

TEMPERATURA

La mayoría de bacterias, levaduras y hongos 80oC , 5-10 min

Mycobacterium tuberculosis 58oC , 30 min

Mycobacterium tuberculosis 59oC , 20 min

Mycobacterium tuberculosis 65oC , 2 min

Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis 60oC , 60 min

La mayoría de esporas patógenas 120oC , pocos min

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Cuantificación del efecto de la temperatura

• Tiempo de reducción decimal: tiempo que reduce 90% de la

población a una determinada temperatura.

• Tiempo térmico mortal: menor tiempo que elimina toda la

población a una determinada temperatura.

• Punto térmico mortal: menor temperatura que elimina toda la

población en un determinado tiempo (referencia 10 minutos)
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Cinética de esterilización por calor

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Agentes físicos: Radiación

Generalmente las radiaciones producen daño en el ADN

• Radiación UV (ruptura del ADN): sólo para esterilizar superficies, ya que

no penetra material opaco o que absorba la luz

• Rayos X y Rayos gamma: penetran la materia, dañando a los

microorganismos. Se puede irradiar cualquier tipo de material, incluso
alimentos y agua

• Microondas: esteriliza por medio del calor que se produce al agitar las
moléculas de agua.
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Agentes mecánicos: Filtración

Se usa para esterilizar líquidos o gases que pueden dañarse con el calor.
Tamaño de poro: 0.005 a 1 um.
Los virus no son retenidos

Fibras de papel o asbesto Filtro de nitrocelulosa que Filtro con bacterias en

intrincadas que “atrapan” retiene las partículas en la su superficie
las partículas superficie, debido al tamaño de
los poros
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• Filtros de membrana para líquidos

• Filtros HEPA para crear ambientes estériles
compuestos por una malla de fibras dispuestas al azar.
fibras compuestas por fibra de vidrio
con diámetros entre 0.5 y 2 μm.
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Esterilizantes químicos:

• Óxido de etileno: método de esterilización química más utilizado.

• Aldehído
• Glutaraldehído
• Formaldehído
• Gas de peróxido de hidrógeno
• Vapor de peróxido de hidrógeno

Cámara de óxido de etileno

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Desinfección
Clasificación de acuerdo a aplicación en implementos de uso clínico

 DESINFECCIÓN DE ALTO NIVEL:

Elementos invasivos que no soportan mecanismos de esterilización para
erradicación completa de microorganismos, se debe limpiar la superficie
antes para eliminar materia orgánica. (calor húmedo, glutaraldehído,
peróxido de hidrogeno) Ej. Endoscopio

 DESINFECCIÓN DE MEDIO NIVEL :

Materiales o equipos donde es poco probable la contaminación por
esporas (alcoholes, compuestos con yodóforos, compuestos fenólicos)
Ej. Otoscopio

 DESINFECCIÓN DE BAJO NIVEL:

Materiales que no atraviesan mucosas (compuestos de amonio
cuaternario). Ej: termómetro, electrodos de electrocardiograma
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Desinfección
Clasificación de Spaulding (1968)

CRÍTICOS: Penetran tejidos y cavidades (estériles)

SEMICRÍTICOS: En contacto con mucosas (libres de bacterias)
NO CRÍTICOS: deben ser por lo menos lavados, en contacto con piel sana

Nivel Spaulding Nivel de control

CRÍTICO Esterilización

SEMICRÍTICO Desinfección de alto nivel

NO CRÍTICO Desinfección de medio y bajo nivel

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Desinfección
Agentes químicos desinfectantes

Alcoholes, fenoles, sales de metales pesados: desnaturan las proteínas y

deshidratan las células. Se utilizan en la limpieza de superficies.

Detergentes: se insertan en la membrana celular e interfieren con sus

funciones. Se utilizan en la limpieza de material.

Agentes oxidantes (cloro, yodo, acido paracético, agua oxigenada):

Dañan proteínas (oxidan los grupos – SH de las proteínas) y otras
macromoléculas (I y Cl).

Agentes alquilantes: Dañan el DNA (sustituyen los átomos de H por radicales

alquilo).
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Antisepsia
• Los antisépticos se utilizan para reducir el número de microorganismos en las superficies
cutáneas. Estos compuestos se seleccionan en base a su seguridad y su eficacia.

• Alcoholes: excelente actividad frente a todos los microorganismos excepto esporas, no

son tóxicos aunque tienen a resecar la superficie cutánea ya que eliminan lípidos.

• Yodóforos: espectro de actividad similar a los alcoholes, ligeramente mas tóxicos que los
alcoholes para la piel, son inactivados por materia orgánica.

• Clorhexidina: actividad antimicrobiana extensa, aunque destruye microorganismos a una

velocidad mucho menor que el alcohol.

• Paraclorometaxilenol (PCMX): se limita principalmente a bacterias Gram positivas,

como no es tóxico se ha utilizado en productos para el lavado de manos.

• Triclosán: es activo frente a bacterias, pero no mucho frente a otros microorganismos, es

un antiséptico de uso habitual en jabones desodorantes y algunos dentríficos.
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Propiedades de desinfectantes y antisépticos

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Principales antisépticos y desinfectantes de uso hospitalario

Compuesto Características y aplicaciones

Alcoholes Antiséptico para la piel intacta. Volátil. Acción rápida. Poco uso

Aldehídos Desinfección de salas. Uso limitado, tóxicos

Compuestos de Antísépticos cutáneos. Incompatibles con jabones
amonio cuaternario
Cloro y derivados Acción rápida. Activo frente a bacterias y virus. Irritan la piel

Clorhexidina Antisépticos de piel y mucosas. Combinado con detergentes

es eficaz para lavado de manos quirúrgico
Fenol Uso general no es esporicida. Irrita la piel
Sales de mercurio Antisépticos cutáneos tópicos. Débil acción
Yodo Antisépticos cutáneos. Acción prolongada