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Informe Laboratorio No.

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Transporte por difusión en membrana
Bermeo Maria Alejandra1 . Guevara, Valentina2
{Alejandra.bermeo, vallentina.guevara}@mail.escuelaing.edu.co
Universidad del Rosario – Escuela Colombiana de Ingeniería Julio Garavito
Bogotá, Colombia
de estas especies se comporta según la ecuación de Nerst, que
Abstract— The following report became apparent the relaciona el gradiente de concentración con la diferencia de
principles of electronic circuits and Ohm's law, to recognize potencial generado a través de la membrana[1].
these performance and its use. Through this we check your
variables by means of this law, by means of Assembly and Los mecanismos que permiten a las sustancias cruzar las
certain knowledge of the application of Physics in electricity as membranas plasmáticas son esenciales para la vida y la
result have variables represented in this law and understood the comunicación de las células. Para ello, la célula dispone de dos
need, the utility of this in everyday life and our future as a procesos: Transporte pasivo: cuando no se requiere energía para
biomedical engineers. In this practice, we assemble a series of que la sustancia cruce la membrana plasmática, Los mecanismos
circuits on a Breadboard and through power supply gave him as de transporte pasivo son: Difusión simple que consiste en la
the first variable a given voltage (5V) and made two shots of mezcla de estas moléculas debido a su energía cinética cuando
results, the theoretical which are only based on the equation existe un gradiente de concentración, es decir cuando en una
given by established law and the experimental which were taken parte de la solución la concentración de las moléculas es más
by a voltmeter, our main goal is to tell a difference between these elevada. La difusión tiene lugar hasta que la concentración se
results which are the variables that come and verify if our igual en todas las partes y será más rápida, cuanto mayor sea la
method of calculation was the successful. As a result we obtained energía cinética (que depende de la temperatura) y el gradiente
the answers needed to develop our hypothesis, and saw the de concentración menor sera el tamaño de las moléculas[2].
different behaviors of the mounted circuits.
La Osmosis consta de un disolvente - el agua en el caso de los
Resumen— El siguiente informe se evidenciaron los principios sistemas biológicos - pasa selectivamente a través de una
de los circuitos electrónico y la ley de Ohm, para así reconocer el membrana semi-permeable. La membrana de las células es una
funcionamiento de estos y su uso. Por medio de esto verificamos membrana semi-permeable ya que permite el paso del agua por
sus variables por medio de esta ley, por medio de un montaje y difusión pero no la de iones y otros materiales. Si la
ciertos conocimientos de la aplicación de la física en la concentración de agua es mayor (o lo que es lo mismo la
electricidad como resultado hayamos las variables representadas concentración de solutos menor) de un lado de la membrana es
en esta ley y comprendimos la necesidad, la utilidad de esta en la mayor que la del otro lado, existe una tendencia a que el agua
vida diaria y en nuestro futuro como ingenieros biomédicos. En pase al lado donde su concentración es menor. El movimiento del
esta práctica ensamblamos una serie de circuitos en una agua a través de la membrana semi-permeable genera un presión
protoboard y por medio de la fuente de corriente le dimos como hidrostática llamada presión osmótica. La presión osmótica es la
primer variable un voltaje determinado (5V) y se hicieron dos presión necesaria para prevenir el movimiento neto del agua a
tomas de resultados, las teóricas las cuales solo están basadas en través de una membrana semi-permeable que separa dos
la ecuación dada por la ley establecida y las experimentales las soluciones de diferentes concentraciones. Para mantener la forma
cuales fueron tomadas por un voltímetro, nuestro objetivo de un célula, por ejemplo un hematíe, esta debe estar rodeada de
principal es notar una diferencia entre estos resultados, cuales una solución isotónica, lo que quiere decir que la concentración
son las variables que se acercan y verificar si nuestro método de de agua de esta solución es la misma que la del interior de la
cálculo fue el acertado. Como resultado obtuvimos las respuestas célula. Si los hematíes son llevados a una solución que contenga
necesarias para desarrollar nuestra hipótesis, y vimos los menos sales (se dice que la solución es hipotónica) Por el
diferentes comportamientos de los circuitos montados. contrario, si los hematíes se llevan a una solución hipertónica
(con una concentración de sales superior a la del hematíe).la
Key Words— Cell, concentration, gradient, membrane, Nerst, Ultrafiltración, el agua y algunos solutos pasan a través de una
transport. membrana por efecto de una presión hidrostática[3]. el
movimiento es siempre desde el área de mayor presión al de
menos presión. Difusión facilitada. Algunas moléculas son
demasiado grandes como para difundir a través de los canales de
I. INTRODUCCIÓN la membrana y demasiado insolubles en lípidos como para poder
La membrana es una estructura laminar formada por difundir a través de la capa de fosfolípidos. Tal es el caso de la
fosfolípidos que cumple funciones de protección, movilidad, glucosa y algunos otros monosacáridos. Esta sustancias, pueden
control del flujo de sustancias y conservación de la energía. No sin embargo cruzar la membrana plasmática mediante el proceso
solamente delimitan a las células, sino, incluso a los organelos de difusión facilitada, con la ayuda de una proteina
dentro de ellas (particularmente en las células eucariotas), transportadora[2].
separándolas del medio intracelular para que puedan desarrollar
procesos particulares fuera de las condiciones en las que se La membrana está formada por una bicapa lipídica, por
encuentra el citosol. Las membranas son sistemas dinámicos que proteínas periféricas en la parte interna y externa y por proteínas
realizan un control selectivo de moléculas, gracias a la amplia integrales que atraviesan de punta a punta la membrana, son los
gama de transportadores capaces de responder al medio extra e llamados canales por donde pasan los iones. Esos canales pueden
intracelular. El movimiento de iones a través de ellas está estar en estados diferentes, abiertos o cerrados. Cuando una
regulado a través de los potenciales electroquímicos que se célula está en reposo los canales de potasio están abiertos, el
generan por la diferencia en las concentraciones de especies potasio tenderá a salir hacia el exterior (iones de K), son cargas
cargadas tanto del medio extra- como intra-celular. La difusión positivas por tanto el interior celular será negativo respecto al
exterior celular, las células excitables (neuronas) poseen un
potencial de reposo muy estable (entre -60 y -100 mV). En las II. Objetivos:
células no excitables, el potencial de reposo es menos estable, Objetivo General:
pueden haber oscilaciones entre (-40 y -60 mV), está más 1. Analizar el transporte por difusión en
despolarizado.[3]. El potencial de reposo se debe principalmente membranas.
a la permeabilidad a otros iones. La contracción sincronizada de Objetivos específicos:
todas las células que están acopladas eléctricamente
constituyendo el tejido cardíaco, genera la contracción sincrónica 1. - Comprobar el paso de solutos y agua a
de cada una de las cámaras del corazón través de una membrana biológica.
2. - Verificar en un modelo experimental la
La contracción de cada célula está asociada a un potencial de generación de una diferencia de potencial
acción. Se puede medir esa diferencia insertando un de membrana
microelectrodo en la célula y conectarlo a un voltímetro[4]. La
ecuación de Nernst da una formula que relaciona el valor mínimo
de los gradientes de concentración con el gradiente eléctrico para 3. - Determinar la ecuación de Nernst a partir
balancearlo. La ecuación de ernst no solo es fundamental para de un modelo experimental de transporte
entender los mecanismos que generan el potencial de membrana por difusión simple
sino que ayudan a explicar la generación de potenciales de acción
y potenciales sinápticos [5]. III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA EXPERIMENTAL

El desarrollo de la práctica experimental se divide en dos


subsecciones. La primera presenta el diseño y en la segunda los
resultados encontrados en la práctica.
A. Diseño
Materiales

Fig.1. (ecuación de Nernst) tomado de [6]


E0 = Potencial estándar del sistema
T = Temperatura absoluta en °K
R = Constante universal de los gases (8,3 joule/°K-mol)
F = Número de Faraday (96.500 Coulomb)
n = Número de electrones que pasan de la forma reducida a la
oxidada o viceversa.
[Ox] = Concentración molar de la forma oxidada del sistema.
[Re d ] = Concentración molar de la forma reducida del
sistema. [7]

La ecuación de Nernst define el potencial eléctrico a través de la


membrana que balancea un gradiente de concentración químico
particular de un ion al cual la membrana es permeable. La
membrana celular cuenta una bicapa lipídica la diálisis tiene
como función de eliminar productos de desechos y exceso de
liquidos, equilibrar los electrolitos y otras moleculas. durante la
diálisis, una membrana semipermeable separa la sangre del
líquido de diálisis. Esta membrana permite el paso a algunas
sustancias, pero no a otras. Permite que los productos de
desecho, el agua, los electrolitos y otras sustancias pasen desde la
sangre al líquido de diálisis (y algunas veces en la dirección Fig 2. Soluciones clasificadas en tubos de ensayo (A-E)
opuesta) mediante un proceso llamado difusión. El movimiento
de los productos de desecho y otras sustancias depende de la
permeabilidad de la membrana, el tamaño y la estructura de
dichas sustancias, la constitución del líquido de diálisis y de la
cantidad de sangre en contacto con la membrana[7].
TABLA 3: Potencial (Mv) Grupo 3.

concentracion
Volumen volumen final
Solución Concentración inicial inicial final ((C1xV1)/V2)
A 5,1 mM 1 mL 0,0005L 1020mM
B 1020mM 1 mL 2mL 510 mM
C 510 mM 1 mL 2mL 255 mM
D 255 mM 1,3 mL 2mL 165.75 mM
Fig 3. Eritocitos en tubos Eppernof E 165.75 mM 0,5 mL 2mL 41.43 mM
Tabla 4: Concentración final de las soluciones
B. Resultados
[KH2PO4]extracelular [KH2PO4]intracelular Potencial
mM mM (mV)
0,1 18,4 IV. ANÁLISIS DE RESULTADOS
con respecto al experimento numero 2, los resultados los
0,5 55 analizaremos teniendo en cuenta las diferentes variables que
0,1 1,0 81,3 afectan directamente y es la presión osmótica al igual que la
osmolaridad de cada solución. Teniendo en cuenta que la presión
5,0 79,4 osmótica es afectada directamente de la concentración que
depende de la cantidad de partículas de soluto, por tanto, hay que
10 73,2 tener en cuenta el grado de ionización del soluto. Una solución
de 1M de NaCl tiene una presión osmotica de 2 mOsm, esto se
20 63,3 ve directamente asociado a la cantidad de iones del soluto que se
tienen que no están disociados [8]. En una solución de 1M de
NaCL, el ion Na+ tendría una concentración de 1M y Cl- tendría
1M así que la cantidad de moléculas del soluto de que se necesita
TABLA1: Potencial (mV) grupo 1 disociar sea de 2M lo cual representa 2 miliOsmoles. Recordando
el concepto de presión osmótica, fisiológicamente se define
como una solución isotónica aquella con presión osmótica
equivalente a la presión osmotica intracelular. Contrario a lo
anterior las soluciones hipertónicas son aquellas que presentan
una concentración de solutos mayor a la concentración
intracelular; las soluciones hipotónicas son las que tienes la
concentración de soluto menor [9]. En este caso en específico
una solución de 1M de NaCl su Osmolaridad se calcula por
medio de una equacion la cual respresenta el producto del
coeficiente de equlibrio, el numero de iones formados por la
disociación de una molecula de soluto y la concentración molar
del soluto (moles de soluto por litros de solución) [8];
TABLA 2: Potencial (mV) Grupo 2 considerando entonces las variables establecidas en el
experimento la presión osmótica se calculo que en el eritrocito es
de 320 mOsm. Teniendo en cuenta la tabla número 4 de
resultados, esta se refiere a la cantidad de concentración de cad
solución teniendo en cuenta la variaciones del soluto, siendo así
esta concentración será duplicada y asi dando resultado a la
presio osmótica ya que la relación que ya antes ha sido explicada
es de 1mM es a 2mOsm. Entonces damos resultado a estas intracelular se igualan [8]. Este fenómeno se le denomina
presiones osmóticas plasmoptisis. Como se ve en la solución E.
Solución Concentración mM m Osmoles
A 1020 2040
B 510 1020
C 255 510
D 165,75 331,5
E 41,43 82,85
Tabla 5. Presión osmótica de las diferentes soluciones salinas

Al tener como resultado estas cantidades de osmolaridad ya se


puede efectuar una comparación con respecto a la osmolaridad
calculada en las condiciones dadas en el experimento. Con
respecto a eso, tomamos en cuenta solo tres soluciones que
fueron la A, D y E. a estas se les inserto eritocitos para ver
fisiológicamente la osmosis entre ellos y la solución salina. La
siguiente tabla mostrara la comparación de el resultado que
representa la presión osmótica ideal para tener una solución
isotónica y las osmolaridades que se calcularon al duplicar la Fig 5. Eritocitos sumergidos en una solución hipotónica (solución E)
concentración miliMolar
por ultimo encontramos la solución mas cercana a la isosmotica
que es la solución D con una osmolaridad de 331,5 muy cercana,
para ser mas exactos solo a 11,5 mOsm por encima del ideal.

Tabla 6. Estado de Osmolaridad de las soluciones en el eritocito

Las membranas plasmáticas de la mayoría de las células


corporales son relativamente impermeables a muchos solutos del
liquido extracelular, pero son muy permeables al agua. Por tanto,
cuando la presión osmótica del liquido extracelular aumenta, el
agua sale de la célula por osmosis y la célula se retrae hasta que
las presiones osmóticas celular y extracelular se igualan [8], esta
lleva a que la viscosidad del ambiente intracelular y disminuirá
su volumen lo que llevara a la retracción de la membrana
citoplasmática, este fenómeno se denomina como plasmólisis[9],
como se ve en la solución A.
Fig 6. Eritocitos sumergidos en una solución isosmotica (solución A)

V. CONCLUSIONES
A menudo se utilizan los eritocitos para ilustrar las propiedades
osmoticas de las celulas. En un determinado rango de
concentraciones de solutos externos, los eritocitos se comportan
como un osmometro, ya que su volumen se relaciona
inversamente con la concentracion de solute en el medio
extracelular. El volumen de los eritocitos, expresado como
fracción del volumen normal que ocupan en el plasma, se
muestra la funcion de la concentracion de la solucion de NaCl
donde se encuentran suspendidos [8]. Dados los resultados
concluimos que la practica que exitosa ya que se pudo mostrar y
comprobar como la concentración de los solutos puede generar
una reacción de osmolaridad el cual afecta fisiológicamente la
Fig 4. Eritocitos sumergidos en una solución hiperosmotica (solución A)
celula. Tal como se vio en las diferentes soluciones al calcular su
osmolaridad, en el caso de los eritocitos suspendidos en la
Por lo contrario, si la presión osmótica del líquido extracelular solución A, se deduce que esta solución es una solución
desciende, el agua entra en la celula. La celula continúa hiperosmotica ya que la diferencia entre la isosmolaridad ideal a
hinchándose hasta que las presiones osmóticas extracelular e comparación de la osmolaridad generada por esta celula es de
1770 lo cual indica que esta sobre el rango casi unas 6 veces mas
elevado, esto se debe a que su composición e la solución tenia un
alto porcentaje de NaCl lo cual indica que esta solución salina
necesitaba mayor cantidad de agua para regularse conrespecto a
la presión intracelular . Por otro lado la solución E genera una
diferencia negativa, ya que significa que le falta osmolaridad al
medio para que sea una solución isotónica. La cual fue de
-237,15 esto genero una reacción hiperosmolar, la cantidad
añadida de solución salina fue una cantidad reducida, ya que
había sido parte de las disoluciones de las anteriores soluciones,
y el porcentaje agua-soluto muestra que hay mas agua en la
solución que solución salina asi que esta ace que la presión
extracelular sea mas baja e intenta proporcionarle la cantidad de
agua necesaria al eritocito para estabilizarce lo que lleva a que se
hinche el eritocito por el agua adquirida. La solución D, en
particular tuvo un nivel igual al medirse porcentaje agua-soluto
lo que lleva a que la solución tenga la misma presión osmótica qu
el elitrocito mismo, lo cual lleva a una solución isosmotico ya
que esta en equidad la presión extra e intercelular.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

[ 1 ] Albert. B., Bray, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts and J.D


Watson. Molecular Biology of the Cell (3ra edicion)
Nueva York, 1994.
[ 2 ] Byrne. J.H and S. G Schultz. An introduction to
membrane transport and bioelectricity. Nueva York,
1988.
[ 3 ] N.N Principios de la famacologia “bases moleculares
de la farmacologia”. 2012
[ 4 ] M. Parisi. Biofisica “potencial de la membrana”.
Volumen 10. Capitulo 5 pp 87-94. 2008
[ 5 ] University of Valencia. Ingeníeria Biomédica.
Maestria. Tema 5. “termodinamica de procesos
electroquimicos”. PDF
[ 6 ] Universidad nacional de la Patagonia San Bosco
Facultad de Ingenieria. Catedra quimica. Laboratorio N°
8. “practica de laboratorio 8”.
[ 7 ] Magazine Diaverium Care. Clasificacion: Treatment.
“how its work the dialysis?”. 2013.

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