ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE

a) Da el enunciado y la ecuación de la Ley General de Absorción de Radiación

Electromagnética (Ley de Beer)
La absorbancia de una sustancia o especie es directamente proporcional a la
concentración de la misma.
A=εbc
Donde:
A= absorbancia
ε = constante, absortividad molar/ coeficiente de extinción molar (L abs/ mol
cm)
b= longitud de la trayectoria de la radiación (cm)
c=concentración de las especies absorbentes (g/L)

b) Que es luz analítica en los sistemas de absorción de radiación

electromagnética y explica como interacciona con la materia la radiación
espectral de la región visible.
La radiación electromagnética es una forma de energía que se transmite por el
espacio a velocidades muy altas. A la radiación electromagnética de la región
UV/Visible, y en ocasiones a la del IR, la llamamos luz.
La radiación electromagnética puede describirse como una onda, que tiene
propiedades de longitud de onda, frecuencia, velocidad y amplitud. Para
entender los procesos de absorción y emisión de la energía radiante, se
considera a la radiación electromagnética como ondas de partículas o como
paquetes de energía llamados fotones cuantos.
Las interacciones que son importantes en la espectroscopia son las que dan
lugar a transiciones entre diferentes niveles de energía de las especies
químicas, las moléculas experimentan tres tipos de cambios energéticos
cuando son excitadas por la radiación electromagnética. En la región visible se
basa en la absorción de radiación ultravioleta y visible por el analito, como
consecuencia de lo cual se origina un estado activado que posteriormente
elimina su exceso de energía en forma de calor. Cuando un átomo absorbe un
fotón UV o un fotón de luz visible, la energía de ese fotón puede excitar uno de
los electrones del átomo de tal forma que alcance un nivel de energía mayor.
Este movimiento del electrón, de un menor nivel de energía a uno mayor, o de
regreso de un nivel mayor de energía a uno menor, se conoce como transición.
Sin embargo, una vez que el electrón es excitado y alcanza un mayor nivel de
energía, está en una posición más inestable que en la que estaba cuando se
hallaba relajado en su estado base. Así, el electrón rápidamente caerá al
estado de menor energía y, al hacerlo, emitirá un fotón con la misma energía
que la diferencia entre los niveles energéticos.
2. Integra por módulos un espectrofotómetro de un haz y de doble haz.

 De un haz Obturador

Lámpara Filtro Referencia Detector

Muestra

 De doble haz
Referencia

Filtro
Lámpara

Detector
Muestra

Obturador

3. a) Haz esquema de un monocromador e indica la función de cada uno de los

elementos que lo constituyen.

a) Rendija de
entrada:
funciona
como una
fuente de
radiación;
su imagen
se enfoca
en última
 instancia en el plano focal que contiene la rendija de salida. Si la fuente de
radiación consta de algunas longitudes de ondas discretas, aparece una serie
de imágenes rectangulares en esta superficie como líneas brillantes, y cada
una corresponde a cierta longitud de onda. Se puede enfocar una línea
particular en la rendija de salida haciendo girar el elemento dispersor.
b) Colimadores: elementos que se encargan de dar dirección al haz, con ellos se
busca que todos los haces que inciden sobre los elementos ópticos, sobre la
muestra y finalmente al detector sean paralelos entre sí.
c) Elementos dispersores: Elementos dispersores. Hay dos tipos de dispersores
en los monocromadores, redes y prismas de reflexión.
d) Rendija de salida: Cuando la radiación dispersada choca con la rendija de
salida que esta ajustado para una determinada longitud de onda λ'' y tanto la
rendija de entrada como la de salida tienen la misma anchura. La imagen de la
rendija de entrada llena justo la rendija de salida.

b) El prisma y la rejilla, son dos tipos fundamentales de dispersores de radiación

lumínica: ¿Cómo dispersa la luz cada uno de ellos?

 Prisma: la refracción en las dos caras da como resultado la dispersión

angular de la radiación.
 Rejilla: la dispersión angular de las longitudes de onda es el resultado de la
difracción, la cual se presenta en la superficie reflectora.

4. Discute las desviaciones de la Ley de Beer instrumentales, reales y químicas.

Las desviaciones a la Ley de Beer caen en tres categorías: reales,
instrumentales y químicas. Dichas desviaciones pueden ser positivas - si la
absorbancia medida es mayor que la real - o negativas - si la absorbancia
medida es menor que la real y llevan a que no se obtengan relaciones lineales
entre la absorbancia y la concentración.

 Desviaciones reales: en la deducción de la ley de Beer, no se ha

considerado que la absortividad depende del índice de refracción, n, según
la expresión:
n
ε =ε verdadero 2 2
( n + 2)
Como, a su vez, el índice de refracción varía con la concentración, la
absortividad no es rigurosamente constante para cualquier concentración,
provocando desviaciones negativas. De todas formas, en la práctica, para
concentraciones inferiores a 10–3 M puede prescindirse de la influencia de
este factor, al ser el índice de refracción esencialmente constante.

 Desviaciones instrumentales: Las fluctuaciones producidas en la corriente

eléctrica, la inestabilidad de algunas fuentes de radiación o la respuesta no
 lineal del detector pueden originar el funcionamiento incorrecto de un
determinado aparato. Además de éstos, pueden considerarse los
siguientes factores de tipo instrumental como causas de desviaciones de la
ley de Beer: a) Uso de radiación no monocromática. La deducción de la ley
de Beer se hizo sobre la base de utilizar radiación monocromática, lo cual,
en sentido estricto, nunca se cumple, pues en la práctica, todos los
dispositivos seleccionan una banda más o menos ancha en torno a una
determinada longitud de onda. b) Presencia de radiación parásita. c)
Errores de lectura.
 Desviaciones químicas: serie de desviaciones aparentes de la ley de Beer
producidas como consecuencia de procesos químicos en los que participan
las especies absorbentes:
a) Influencia del equilibrio. Cuando la sustancia problema interviene o
forma parte de un sistema en equilibrio con otras especies, el
desplazamiento del equilibrio implica una modificación en la
concentración, y, en consecuencia, en la absorbancia.
b) Influencia del disolvente. Como consecuencia de las interacciones
soluto– disolvente se originan con frecuencia desplazamientos
espectrales, ensanchamientos de bandas y otros fenómenos que
pueden provocar desviaciones en la ley de Beer.
c) Influencia de la temperatura. La temperatura puede influir modificando
el equilibrio químico de algunos sistemas. De todas formas, la
temperatura no suele ser un factor a considerar en la mayor parte de
los sistemas absorbentes sencillos.
d) Presencia de impurezas en los reactivos. Muchos métodos
espectrofotométricos son lo suficientemente sensibles como para
detectar cantidades a nivel de trazas, por lo que la presencia de
impurezas absorbentes en los mismos reactivos pueden originar errores
considerables.
e) Interacciones entre especies absorbentes. Cuando en una disolución
existen varias especies absorbentes, la ley de Beer se cumple para
cada una de ellas, si todas actúan independientemente. Sin embargo, la
interacción entre ellas puede producir alteraciones en la distribución de
cargas, como consecuencia de lo cual puede modificarse la energía
requerida para la absorción y, en consecuencia, variaciones en la
posición, forma y altura de las bandas de absorción.

5. Describe el fundamento analítico del método de adición de estándar para curva

de calibración y del método de dilución.

El método de adición estándar se usa cuando es imposible suprimir interferencias

físicas o químicas en la matriz de la muestra. Se toman alícuotas iguales de
muestra, se le añade a cada una por separado cantidades de patrón, excepto a
una de ellas y se realiza la medida. La escala de concentración (x) se define con
las concentraciones de analito agregadas a las alícuotas de muestra, por tanto, la
 concentración desconocida está dada por el punto en el cual la línea extrapolada
corta el eje de concentración. La recta de regresión se establece mediante
mínimos cuadrados.

La dilución es una técnica consistente en añadir a la muestra problema una

cantidad conocida de un patrón enriquecido en isótopo no frecuente, de forma
semejante al patrón interno en análisis cuantitativo. el método de dilución isotópica
comprende la adición de cantidades conocidas de sustancias isotópicamente
enriquecidas a la muestra analizada. La mezcla del estándar isotópico con la
muestra efectivamente "diluye" el enriquecimiento isotópico del estándar y esto es
la base del método de dilución isotópica. 

Bibliografía: apuntes da libreta de análisis instrumental.

a) Para la determinación espectrofotométrica de una solución de hierro con una

solución de 1,10, fenantrolina, describe:
1. El fundamento de la determinación.
El hierro (II) reacciona con la 1-10 fenantrolina para dar un complejo
anaranjado rojizo, muy estable, esta reacción es la base para la determinación
de pequeñas cantidades de hierro mediante un método sensible.
Puesto que solo los iones ferrosos reaccionan con el reactivo 1-10 fenantrolina,
es preciso reducir todo el hierro (si hubiera hierro III) antes de iniciar el
desarrollo del color. La hidroxilamina sirve, dentro de un intervalo de pH
limitado, como un excelente reactivo para la reducción del hierro (III), como se
muestra en la reacción:
+3 +2

2 NH 2 OH +2 OH −¿+ 2 Fe →2 Fe +N 2+4 H 2O ¿

2. La reacción estequiométrica.

3. Algunos factores de influencia en esta reacción.

El pH, la temperatura de la reacción.

b) 1. Menciona los principales materiales que se utilizan en la elaboración de cubetas

o celdas portamuestras para usos en absorción de radiación visible y ultravioleta.
Para radiación visible se utiliza plástico, para ultravioleta cuarzo o sílice fundida.