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GRUPO: 2
NIVEL: Cuarto
FECHA: 01/11/2019
TEMA:
PERÍODO:
SANTO DOMINGO-ECUADOR
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INDICE GENERAL
I. RESUMEN .......................................................................................................................... 4
II. INTRODUCCIÓN ........................................................................................................... 5
III. OBJETIVOS..................................................................................................................... 6
3.1 Objetivo general ............................................................................................................... 6
3.2 Objetivos específicos ....................................................................................................... 6
IV. REVISION LITERARIA ................................................................................................. 6
4.1 Potencial Hídrico .............................................................................................................. 6
4.1.1 Gradientes de Concentración ........................................................................................ 7
4.1.2 Movimientos del agua ................................................................................................... 7
4.1.3 Ósmosis ..................................................................................................................... 7
4.1.4 Plasmólisis................................................................................................................. 7
4.1.5 Tipos de medios ........................................................................................................ 7
4.1.6 Células con agua ........................................................................................................... 8
4.1.7 Turgencia................................................................................................................... 8
4.1.8 Plasmólisis................................................................................................................. 8
4.1.9 Vacuola ..................................................................................................................... 8
4.1.10 Funcionamiento de los estomas .............................................................................. 8
4.1.11 Luz........................................................................................................................... 9
4.1.12 CO2 ............................................................................................................................. 9
4.1.13 La transpiración ....................................................................................................... 9
4.1 .14 El Viento ................................................................................................................ 9
V. MATERIALES Y METODOLOGÍA ............................................................................ 10
5.2 Determinación del potencial hídrico por observación en microscopio .......................... 10
5.3 Metodología ................................................................................................................... 10
5.3 Determinación del potencial hídrico (método gravimétrico) ......................................... 12
5.3 Estomas y medida de la transpiración ............................................................................ 14
VI. RESULTADOS Y DISCUSIÓN .................................................................................... 18
6.1 Determinación del potencial hídrico por observación en el microscopio. ..................... 18
6.2 Determinación del potencial hídrico (Método gravimétrico) ......................................... 22
6.2.1 Cálculos del porcentaje de cambio de peso. ............................................................ 22
6.2.2 Cálculo del potencial osmótico (ΨЛ) de cada solución de sacarosa ....................... 22
VII. CONCLUSIONES ...................................................................................................... 25
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INDICE DE ILUSTACIONES
Ilustración 1 Pasos del corte de epidermis de cebolla en cuadros de 1cm^2. ......................... 10
Ilustración 2 cortes de epidermis en cajas Petri. ...................................................................... 11
Ilustración 3 Colocación de distintas concentraciones de sacarosa sobre la epidermis de
cebolla. .......................................................................................................................................... 11
Ilustración 4 Observación en microscopio de células de cebolla. ............................................ 11
Ilustración 5 Corte de cilindro de papa con sacabocado de 8mm. ........................................... 12
Ilustración 6 Regulación de los bordes del cilindro de papa. ................................................... 12
Ilustración 7 Reducción del cilindro de papa en rodajas. ......................................................... 13
Ilustración 8 Peso inicial de rodajas de papa de cada cilindro. ................................................ 13
Ilustración 9 Colocación de rodajas de papa en diferentes concentraciones de sacarosa. ....... 13
Ilustración 10 Secado y pesado final de las rodajas de cada cilindro de papa. ........................ 14
Ilustración 11 Plantas germinadas en condiciones normales. .................................................. 15
Ilustración 12 Raleo. ................................................................................................................ 15
Ilustración 13 Sellamiento de macetas hasta el cuello del maíz. ............................................. 15
Ilustración 14 Medición de peso de cada planta antes de ser expuesta al tratamiento. ............ 16
Ilustración 15 Planta en condiciones de oscuridad................................................................... 16
Ilustración 16 Planta en condiciones de luminosidad. ............................................................. 16
Ilustración 17 Planta en condiciones ambientales. ................................................................... 17
Ilustración 18 Selección y colocación de capa de esmalte. ...................................................... 17
Ilustración 19 Colocación de cinta. .......................................................................................... 17
Ilustración 20 Laminilla. .......................................................................................................... 18
Ilustración 21observación en microscopio. .............................................................................. 18
Ilustración 22 Estomas. ............................................................................................................ 18
Ilustración 23. Proceso de selección, capa de esmalte, laminilla y observación de estomas. .. 18
Ilustración 24. Tejido de cebolla a 0.2 M de sacarosa en lente de 10X ................................. 19
Ilustración 25. Tejido de cebolla a 0.2 M de sacarosa en lente de 40X ................................. 19
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INDICE DE GRÁFICAS
Gráfica 1. Porcentaje de células plasmolizadas según la concentración de sacarosa .............. 20
Gráfica 2. Porcentaje de cambio en el peso según la concentración molal de sacarosa .......... 23
INDICE DE CUADROS
Cuadro 1. Plantas de maíz sometidas a diferentes condiciones ambientales. .......................... 24
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I. RESUMEN
El trabajo realizado abarcó tres prácticas de laboratorio similares con el mismo fin y objetivo,
evaluar el potencial hídrico de las células de las plantas con diferentes métodos y la manera de
como interviene el agua en la misma, es decir, los cambios que presentan las células de las
plantas, en la primera práctica se observaron células de la epidermis de una cebolla paiteña
(Allium cepa) sumergiéndolas en diferentes medios de concentración de sacarosa donde se pudo
concluir que en la concentración de 1M se haya el mayor porcentaje de células plásmolizadas
con un 94% (medio hipertónico) lo que quiere decir que el contenido celular migró al exterior de
la célula. Para la segunda práctica se realizó el método gravimétrico usando una papa (Solanum
tuberosum) primero se pesó cada cilindro hecho tajadas, luego se introdujo en diferentes
concentraciones de sacarosa durante una hora y por último se volvió a pesar cada muestra de las
diferentes soluciones, el mayor cambio de peso fue en concentración de 0.05M lo que nos
permite concluir que el medio de sacarosa no era tan concentrado como el jugo celular de la
papa. Como última práctica se realizó diferentes pruebas con plantas de maíz (Zea mayz) y de
pimiento (Capsicum annuum) en diferentes estados de germinación, luz, oscuridad y estrés
hídrico. Las plantas de maíz se colocaron a diferentes ambientes para demostrar la pérdida de
agua mediante la transpiración, en donde la planta expuesta a la lámpara tuvo más pérdida de
agua, debido a la iluminación, en las plantas de pimiento se observó la abertura de las estomas en
una planta germinada al ambiente y otra en condiciones de oscuridad y estrés hídrico, el mayor
porcentaje de estomas abiertos se pudo ver en la planta con buenas condiciones.
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II. INTRODUCCIÓN
El agua juega un papel crucial en la vida de la planta. Para cada gramo de materia orgánica
hecha por la planta, aproximadamente 500 (g) de agua es absorbido por las raíces, transportado a
través de la planta y perdido a la atmósfera. Incluso pequeños desequilibrios en este flujo de agua
pueden causar déficit de agua y mal funcionamiento de los procesos celulares. Por lo tanto, cada
planta debe equilibrar delicadamente su absorción y pérdida de agua. Este equilibrio es un serio
desafío para las plantas. Para llevar a cabo la fotosíntesis, necesitan extraer dióxido de carbono
de la atmósfera, pero esto los expone a la pérdida de agua y la amenaza de deshidratación, es por
eso que es considero como un mal necesario. (Zeiger, 2010)
El agua constituye la mayor parte de la masa de células vegetales, como podemos apreciar
fácilmente si observamos secciones microscópicas de células vegetales: cada célula contiene una
gran vacuola llena de agua; en tales células, el citoplasma tiene solo del 5 al 10% del volumen
celular; el resto está ocupado por vacuola. El agua típicamente constituye del 80 al 95% de la
masa de los tejidos vegetales en crecimiento. Las paredes celulares permiten que las células
vegetales acumulen una gran capacidad hidrostática, denominada presión de turgencia que es
esencial para muchos procesos fisiológicos, incluyendo los movimientos celulares (plásticos y
elásticos), intercambio de gases en las hojas, transporte en el floema y diversos procesos de
transporte a través de las membranas. (Hernández, 2013)
El agua se mueve por una diferencia de presión, por osmosis atreves de las membranas, que
crean diferentes gradiente de concentración, esto da lugar al aumento o disminución de la energía
libre del agua, estos gradiente comúnmente son medido como una diferencia en el potencial
hídrico. La concentración de solutos y la presión hidrostática son los dos factores principales que
afectan el potencial hídrico, aunque cuando es grande las distancias verticales también se suma la
gravedad.
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III. OBJETIVOS
3.1 Objetivo general
Evaluar el Potencial Hídrico y la medida de traspiración sobre distintas células
vegetales y plantas sometidas a distintas situaciones.
El proceso está perfectamente controlado y todos los mecanismos adaptativos de las plantas
siempre van encaminados a mantener el equilibrio entre el agua que se pierde por transpiración y
el agua que se gana por absorción, todos estos procesos varían según los distintos ambientes de
concentración en el que se encuentre. El agua genera la presión de turgencia, por la pared celular.
Es el factor limitante en la productividad vegetal. (Duque, 2017)
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4.1.3 Ósmosis
Es el movimiento de agua a través de membranas semipermeables, hasta encontran un
equilibrio. Tanto los gradientes de concentración como los de presión influyen en el movimiento
a través de membranas, influyendo en su dirección y velocidad. (Arntzen, 2014).
4.1.4 Plasmólisis
Sucede cuando la célula es sometida a un medio hipertónico (concentración de solutos externa
mayor que la interna) el agua en la vacuola sale al medio exterior, la célula se deshidrata
reduciendo su tamaño y la membrana plasmática se separa de la pared. Si la deshidratación es
marcada, esta separación de la pared es irreversible y se la denomina plasmólisis permanente y
lleva a la muerte celular. También existe la plasmólisis incipiente que es el caso en el que la
célula vegetal pierde agua pero puede volver al estado natural. (Arntzen, 2014)
4.1.7 Turgencia
Cuando existe una expansión de la célula vegetal debido a la presión ejercida por el fluido
interior de la célula sobre su membrana celular, esto provoca que haya un tensado tocando a la
pared celular y permite así el normal funcionamiento de la célula. Debido a la turgencia, las
plantas se mantienen erguidas, ya que sus células contienen en su interior suficiente agua para
mantenerse expandidas. (Vera, 2018)
4.1.8 Plasmólisis
Cuando se reduce el volumen vacuolar por la pérdida de agua, disminuye al mismo tiempo, la
presión de turgencia hasta valores insignificantes por lo tanto las células pierden turgencia y el
contenido protoplasmático (citoplasma y núcleo) se contrae y comienza a separarse de la pared
celular. Este proceso se denomina plasmólisis. Sucede cuando la célula se encuentra en un medio
hipertónico lo que hace que el fluido interior de la célula salga. Cuando la mayoría de las células
de la planta pierden agua y se contraen, esto da como resultado una planta que pierde rigidez,
que se dobla y que no puede mantenerse en pie (por falta de turgencia de sus células) y que
finalmente muere (Vera, 2018).
4.1.9 Vacuola
A está llegan los productos de desecho, y por lo tanto la vacuola cumple la función de
mantener el equilibrio de agua dentro y fuera de la célula , por lo cual se deshace de las toxinas
dañinas borrando el espacio extracelular. (Gahl, 2010)
El cierre de los estomas se produce por una pérdida de iones K+y de cantidades equivalentes
de un anión por parte de las células oclusivas con el consiguiente aumento de su potencial
osmótico, lo que a su vez determina una salida de agua y la disminución de la turgencia de las
células oclusivas. La apertura es causada por la acumulación de solutos en las células oclusivas,
mientras que el cierre se debe a la salida de los mismos (Evans, 1992).
4.1.11 Luz
Los estomas responden a la luz. Existe una respuesta directa a la radiación fotosintéticamente
activa, una respuesta directa a la luz azul. La respuesta indirecta a la radiación fotosintéticamente
activa se produce debido a la reducción producida por la fotosíntesis de la concentración de CO2
del espacio aéreo del mesófilo y la subsiguiente respuesta de los estomas a esa disminución de la
concentración de CO2. (Evans, 1992)
4.1.12 CO2
Los estomas son sensibles a la concentración intercelular de CO2, estos se abren cuando la
concentración intercelular disminuye y se cierran cuando aumenta (Evans, 1992).
4.1.13 La transpiración
Se entiende por transpiración la pérdida de agua, en forma de vapor, a través de las
distintas partes de la planta, si bien se realiza fundamentalmente por las hojas. La transpiración
está íntimamente relacionada con el crecimiento de las plantas, la fotosíntesis, la absorción de
dióxido de carbono y la pérdida de agua por transpiración están inseparablemente enlazadas en la
vida de las plantas (Flores, 2009).
V. MATERIALES Y METODOLOGÍA
5.2 Determinación del potencial hídrico por observación en microscopio
Materiales, equipos, insumos, muestras y reactivos.
Materiales Equipos
5.3 Metodología
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2. Se dispuso sobre la mesa seis cajas Petri y en cada una de ellas se colocó un cuadro de
epidermis seleccionada anteriormente.
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4. Se dejó sumergido los tejidos durante 30 minutos, pasado el tiempo, se colocó cada
muestra en diferentes portaobjetos, se procedió a observar y contabilizar las células
turgentes o plasmolizadas en un microscopio.
1 2
Materiales Equipos
1 2
1 2
6. Después de dejar sumergidas las rodajas en las concentraciones de 0.05, 0.1, 0.2, 0.4,
0.5, 0.3M durante una hora se procedió a secarlas y pesar las rodajas.
1
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Materiales Equipos
2 Portaobjetos Microscopio
Esmalte de uñas transparente Ventilador
Plástico de polipropileno
1 bisturí Lámpara led
Cinta Balanza analítica
Reactivos Muestras
Ilustración 12 Raleo.
3. Se selló cada maceta con una porción de plástico de polipropileno hasta la zona del
cuello de la planta.
1 2 3
6. La segunda planta se la expuso a luz led durante los mismos tiempos que la planta en
fase obscura, pesando cada treinta minutos.
7. Así mismo, al igual que las otras plantas, la última maceta con maíz se puso al
ambiente del laboratorio realizando el mismo procedimiento que en las anteriores.
1 2
11. Una vez observado la cantidad de estomas abiertos y cerrados se tomó otra planta de
pimiento con 15 días de germinadas en condiciones normales y con estrés hídrico, se
realizó el mismo proceso que con la planta de pimiento anterior.
Ilustración 24. Tejido de cebolla a 0.2 M Ilustración 25. Tejido de cebolla a 0.2 M
de sacarosa en lente de 10X de sacarosa en lente de 40X
Ilustración 26. Tejido de cebolla a 0.4 M Ilustración 27. Tejido de cebolla a 0.4 M
de sacarosa en lente de 10X de sacarosa en lente de 40X
Ilustración 30. Tejido de cebolla a 0.8 M Ilustración 31. Tejido de cebolla a 0.8 M
de sacarosa en lente de 10X de sacarosa en lente de 40X
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6.1.1 Calculo del potencial hídrico del tejido cuando alcanza el 50% de sus células la
plasmólisis
En donde:
m = molalidad de la solución.
i = constante de ionización (1 para la sacarosa).
R = constante de los gases (0.083 litro atmósfera/mol grado)
T = temperatura absoluta (0̊ C = 273).
El valor del ΨЛ se lo obtiene en bares que equivale a 0,1 Mpa.
Según (Vera, 2018) manifiesta que cuando la célula tiene la cantidad apropiada de agua en su
interior y está turgente, es decir ingresa agua a la vacuola, su membrana toca a la pared
protectora. En la ilustración 1 y 2 se observa un mayor porcentaje de células turgentes en
comparación con la ilustración 9 y 10 en donde las células en su mayoría se encuentran
plasmolizadas, es decir han perdido agua (deshidratación).
A su vez (Duque, 2017) argumenta que el movimiento de agua hacia el interior o exterior de
la planta dependerá del potencial hídrico (gradientes de concentración), por tal razón un medio
hipotónico se lleva acabo cuando las concentraciones de soluto intracelulares son mayores que
en el medio extracelular. En la tabla 1 se visualizó que en la concentración de 0.2 M las células
se encontraban en su mayoría turgentes, esto debido a la diferencia de gradientes de
concentración, para lo cual el agua entra a la célula, provocando un estado de turgencia, es decir
la célula tiende a hincharse y este estado es el que le permite a la planta mantenerse rigorosa.
Por otro lado (Arntzen, 2014) manifiesta que la plasmólisis se produce cuando las células
son sometidas a medios hipertónicos (con una concentración de solutos mayor que la contenida
en el interior de la célula). En la gráfica 1 se observa que a medida que aumenta la concentración
de sacarosa aumenta el porcentaje de células plasmolizadas, esto se debe a lo antes mencionado
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por el autor. Entonces en este caso el agua contenida en la vacuola tiende a salir al medio
exterior, por gradientes de concentración, lo que hace que la célula se deshidrate, si la
deshidratación es demasiado severa produciría un estado crítico para la planta, impidiendo que la
célula vuelva a su forma natural, a tal punto que pueda llegar a morirse. La concentración que se
acercó al 50% de células plamolizadas fue la de 0.6 M, lo cual hace referencia a una plasmólisis
incipiente, en donde la célula vegetal pierde agua, pero puede volver a su estado natural.
Según (Flores, 2009) argumenta que las hojas pierden agua irremediablemente a través de
los poros estomáticos, como consecuencia de la actividad fotosintética de las células del
mesófilo. Entonces se podría decir que la transpiración es un mal necesario, ya que sí los
estomas no se abren no penetra el CO2 requerido para la fotosíntesis. Además (Golberg,
2010) ) manifiesta que el viento puede modificar las tasas de transpiración de las plantas
removiendo la capa frontera, es decir incrementando la salida de agua de las hojas. Esto
explica el motivo por el cual la planta de maíz que estuvo expuesta al viento (ventilador),
perdió más peso por transpiración con respecto a la planta de maíz que estaba expuesta a la
oscuridad por 24 H. Sin embargo, el viento (fuerte) tiene dos efectos, primero elimina la capa
frontera, pero a su vez provoca la deshidratación de las células guarda, por lo cual se ven
obligados a cerrar los estomas y se cesa la transpiración. Por tal motivo la tasa respiratoria
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fue menor en comparación con la planta de maíz que estaba expuesta a condiciones normales
de laboratorio.
Por otro lado (Evans, 1992) manifiesta que la luz promueve la apertura de los estomas y
que por lo contrario la oscuridad cierra los estomas. Este fenómeno se debe a que la luz
estimula la expulsión de protones (H+) hacia fuera de la célula oclusiva, permitiendo la
entrada de los iones K+ y Cl- haciendo que el estoma se abra, es decir la acumulación de
solutos osmóticamente activos en las células guarda provoca la acumulación de agua, un
aumento en la presión de turgencia y finalmente la apertura del estoma. Por tal motivo la
planta de pimiento que estaba expuesta a la luz presentó mayor número de estomas abiertos
en comparación con las plantas que permanecieron en oscuridad por 24 H. Este mismo
fenómeno permite explicar porque en las plantas de maíz que estuvieron expuestas a la
oscuridad presentaron la menor tasa de transpiración, debido a que los estomas se
encontraban en su mayoría cerrados. Entonces ggracias a los resultados se puede confirmar la
teoría acerca de la importancia de la luz en la transpiración.
A su vez (Evans, 1992) dice que la apertura estomática ocurre cuando disminuye la
concentración de CO2 en las células guardas como resultado de la fotosíntesis, mientras que
se cierra al aumentar esta concentración, inclusive en presencia de luz. Esto permite explicar
por qué en las plantas de pimiento la mayoría de sus estomas se encontraban cerrados, debido
a la acumulación de CO2, por motivo que no se realizó fotosíntesis para la disminución de
CO2.
VII. CONCLUSIONES
A medida que se aumenta la concentración de solutos en el medio externo, como resultado
hay pérdida progresiva de agua en el medio interno, ya que se crean gradientes de concentración;
las células de la epidermis de la cebolla en un inicio estaban turgentes por estar en un medio
hipotónico, cuando la solución de sacarosa fue superior a 0,2M las células pasaron a un estado
de plasmólisis, por tratarse de una solución hipertónica. A partir de 0,6 M de solución de
sacarosa la plasmólisis es irreversible, la célula ya no puede volver a su estado natural.
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La apertura estomática está relacionada a las condiciones de la planta, en el pimiento que fue
regado normalmente tenía las células oclusivas que rodean los estomas “turgentes” y por lo tanto
algunos estomas abiertos, por lo contario la planta sometida a estrés hídrico los estomas
mayormente cerrados, para no perder agua por transpiración, lo mismo que reduce la funciones
fisiológicas de las plantas, por esa razón estaban deshidratadas.
VIII. RECOMENDACIONES
Evitar el uso excesivo de fertilizantes es una solución para mantener las diferencias en el
potencial hídrico suelo-planta, ya que una concentración mayor de solutos en el suelo producirá
que la célula pierde agua, produciéndose así una plasmólisis y posterior muerte celular.
IX. BIBLIOGRAFÍA
Arntzen, D. (2014). Las Plantas y el agua. Argentina: UNNE.
Evans, L. (1992). Las Plantas y el agua. Buenos Aires: Faculta de Agronomía UBA.
Lallana, M. (2001). Relaciones hídricas de células y tejidos. Entre Ríos, Uruguay: Faculta de
Ciencias Agropecuarias UNER.