CARTOFRAFIA DE RESTRICION

Las moléculas de ADN que componen los genomas de los organismos vivos
son demasiado largas como para ser analizadas directamente. Sin embargo,
pueden se cortadas en fragmentos relativamente pequeños de un modo
reproducible. Con este propósito han aislado unas 400 endonucleasas de
restricción diferente, provenientes de varias bacterias. Las endonucleasas
de restricción (enzimas de restricción) son enzimas que cortan el ADN en
sitios definidos. Estas enzimas protegen a las bacterias del ADN extraño, el
cual es cortado en fragmentos pequeños.
La cartografía genética es una disciplina de la genética que, mediante varias
técnicas, busca asignar a los distintos genes de un genoma su lugar físico en
aquel. Existen dos variantes fundamentales de mapas: los genéticos, definidos
mediante unidades de frecuencia de recombinación, y los físicos, en los que las
distancias entre locus (es una posición fija en un cromosoma, que determina la
posición de un gen o de un marcador (marcador genético) ) se expresan en
unidades de distancia en nucleótidos.
- Técnicas

FISH
La hibridación fluorescente in situ es una técnica que se basa en la unión selectiva
de un polinucleótido de cadena sencilla y de secuencia dada (denominado sonda)
a una o más zonas del genoma que posean secuencias complementarias, en una
preparación de células o tejidos. Dicha unión se observa mediante un microscopio
de fluorescencia o un microscopio confocal, puesto que la sonda está marcada
mediante un fluorocromo.

RFLP
Un RFLP, es decir, «polimorfismo en la longitud del fragmento de restricción»)
representa un polimorfismo asociado generalmente a una mutación puntual en un
punto determinado de un genoma. Se detecta mediante la digestión
mediante enzimas de restricción de ADN genómico o bien de un amplicón
producido mediante PCR previamente.

Cartografía mediante deleciones

Las deleciones son mutaciones que ocasionan la pérdida de fragmentos de ADN.
Empleando cruzamientos de mutantes, las deleciones pueden permitir la topología
de una determinada secuencia. Este método permitió a Seymour Benzer definir la
topología del gen, es decir, la forma en que están interconectadas sus partes.
PCR (Reacción en cadena de la polimerasa)
La PCR es una técnica utilizada en biología molecular que permite conseguir una
gran cantidad de copias de un fragmento de ADN, partiendo de una cantidad
ínfima de esta biomolécula. se basa en una actividad enzimática que sucede de
forma normal en las células de nuestro organismo. En las células, el ADN
polimerasas son capaces de replicar el ADN nuclear, para obtener dos copias
idénticas, que después serán repartidas a las células hijas en la mitosis.

POLIFORMISMO
Un polimorfismo implica una de dos o más variantes de una secuencia particular
de ADN. El tipo más común de polimorfismo implica la variación en un solo par de
bases. Los polimorfismos también pueden ser de mucho mayor tamaño implicando
largos tramos de ADN. Los llamados polimorfismos de nucleótido sencillo, o SNP.