Nuevas β-lactamasas en

enterobacterias

Dra. Elisenda Miró

Servicio de Microbiología, Hospital Sant Pau, Barcelona
 Evolución de la resistencia (R+I) a cefalosporinas de tercera
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC generación en E. coli y K. pneumoniae en Europa.
E. coli

K. pneumoniae

2000 2005 2010

Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Mecanismos implicados en la resistencia a
cefalosporinas de tercera generación

1 BLEE

2 pAmpC

3 Carbapenemasas
 E. coli y K. pneumoniae productores de BLEE, en España.
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC

2006
BLEE 4-5%
(rango 0.4-30%)

Díaz MA, et al. 2009. Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae productoras de betalactamasas de espectro extendido en hospitales
españoles: segundo estudio multicéntrico (proyecto GEIH-BLEE 2006). EIMC. 27:503-10.
 Porcentajes de enterobacterias resistentes a
cefalosporinas de tercera generación (R+I), en España.
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC

2009
pAmpC 0.64%

Miró et al. 2012. Prevalence and molecular epidemiology of acquired AmpC β-lactamases and carbapenemases in
Enterobacteriaceae isolates from 35 hospitals in Spain. IJAA (enviado a publicar)
 Prevalence: 0.85%
E. coli: 35/3116 (1.12%) Prevalence: 0.6%
Prevalence: 0.66%
CMY-2 33 (1.05%) Prevalence: 0.41% E. coli:
E. coli: 23/2402 (0.95%)
CMY-54 1 (0.03%) C. koseri: CMY-2 17/3145 (0.54%)
CMY-2 21 (0.87%)
CMY-55 1 (0.03%) CMY-2 1/41 (2.4%) K. oxytoca:
CMY-4 1 (0.04%)
DHA-1 1 (0.03%) E. coli: 14/2987 (0.47%) CMY-2 1/22 (4.55%)
CMY-7 1 (0.04%)
K. oxytoca: CMY-2 13 (0.44%) K. pneumoniae:
P. mirabilis:
CMY-2 1/152 (0.6%) DHA-1 1 (0.03%) CMY-2 1/65 (1.54%)
CMY-2 3/167 (1.8%) Prevalence: 0.92%
K. pneumoniae: P. mirabilis: P. mirabilis:
CMY-2 1/330 (0.3%) CMY-2 6/212 (2.83%) C. koseri: 3/34 (8.8%)
Prevalence: 0.61% CMY-2 2/352 (0.57%)
P. mirabilis: DHA-1 2 (0.06%);
E. coli: 81/9539 (0.85%) P. penneri:
CMY-2 4/473 (0.84%) ACC-1 + ACT-2 1 (0.03%)
CMY-2 79 (0.82%) CMY-2 1/1 Prevalence: 0.63% E. coli: 136/ 16059 (0.84%)
CMY-59 1 (0.01%) E. coli: 20/2804 (0.71%) ACC-1 3 (0.02%)
DHA-1 1 (0.01%) CMY-2 18 (0.64%) CMY-2 96 (0.6%)
K. pneumoniae: DHA-1 2 (0.06%) CMY-4 1
CMY-60 1/199 (0.5%) K. pneumoniae: 3/343 (0.87%) CMY-27 2
P. mirabilis: CMY-2 1/343 (0.3%) CMY-48 1
CMY-2 1/301 (0.33%) DHA-1 2 (0.6%) DHA-1 30 (0.18%)
Prevalence: 0% P. mirabilis: DHA-6 1
CMY-2 4/372 (1%) FOX-3 1
K. oxytoca: 13/400 (3.25%)
Prevalence: 0.5%
DHA-1 5 (1.25%)
E. coli: 81/12962 (0.62%)
K. pneumoniae: 58/2412
CMY-2 79 (0.60%) (2.4%)
DHA-1 2 ACC-1 3 (0.12%)
K. pneumoniae: 13/1651 (0.84%) CMY-2 3 (0.12%)
CMY-2 5 (0.36%) CMY-56 2 (0.08%)
DHA-1 3 (0.12%) Prevalence: 0.47% DHA-1 48 (2%)
P. mirabilis: E. coli: P. mirabilis: 24/1710 (1.4%)
CMY-2 10/1414 (0.7%) CMY-2 2/203 (0.99%) ACC-1 3 (0.17%)
Prevalence: 0.47% CMY-2 18 (1.05%)
Prevalence: 0.45% E. coli: 12/1431 (0.83%) DHA-1 3 (0.17%)
E. coli: 19/4360 (0.43%) CMY-2 8 (0.56%) Salmonella:
CMY-2 17 (0.4%) CMYt 3 (0.21%) DHA-1 1/28 (3.5%)
CMY-57 1 (0.02%) DHA-1 1 (0.07%)
DHA-1 1 (0.02%) K. pneumoniae: 15/237 (6.3%)
K. pneumoniae: 7/785 (0.89%) CMY-2 1 (0.42%) Prevalence: 0.35%
Prevalence: 0.62%
CMY-2 5 (0.63%) DHA-1 10 (4.2%) E. coli: 14/2956 (0.47%)
E. coli: 13/4088 (0.32%)
DHA-1 2 (0.25%) DHAt 3 (1.3%) CMY-2 13 (0.44%)
CMY-2 10 (0.24%)
P. mirabilis: CMY-2 + DHA-1 1 (0.42%) CMYt 1 (0.03%)
CMY-4 1 (0.02%)
CMY-2 5/230 (2.17%) P. mirabilis: K. pneumoniae:
FOX-8 2 (0.05%)
CMY-2 2/204 (0.98%) DHA-1 + VIM-1 1/58 (1.72%)
K. pneumoniae:
P. mirabilis:
CMY-2 1/357 (0.28%)
CMY-2 2/247 (0.81%)
 Evolución de la resistencia (R+I) a carbapenems en
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
E. coli y K. pneumoniae en Europa.
E. coli

K. pneumoniae

2000 2005 2010

 Evolución de la resistencia (R+I) a carbapenems en
Enterobacterias en España.
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC

E. coli:
VIM-1 1/ 16059
K. oxytoca:
VIM-1 8/400 (2%)
K. pneumoniae:
VIM-1 3/2412 (0.12%)
E. cloacae: 6/209 (1.4%)
K. pneumoniae: VIM-1 4 (1.9%)
VIM-1 5/1651 (0.3%) DHA-7 + VIM-1 2 (0.95%)
K. oxytoca: 3/65 (4.61%)
VIM-1 2 (3.07%)
IMP-28 1 (1.53%)
E. cloacae:
VIM-1 5/85 (5.88%) K. pneumoniae:
DHA-1 + VIM-1 1/58 (1.72%)

K. pneumoniae:
IMP-22 9/785 (1.14%)
VIM-1 1/785 (0.12%)

2009
Carb: 0.04%

Miró et al. 2012. Prevalence and molecular epidemiology of acquired AmpC β-lactamases and carbapenemases in
Enterobacteriaceae isolates from 35 hospitals in Spain. IJAA (enviado a publicar)
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Prevalencia de los mecanismos implicados
en la resistencia a cefalosporinas de tercera
generación y/o carbapenémicos

1 BLEE 4-5% (0,4-30%)

2 pAmpC 0,64% (0-0,92%)

3 Carbapenemasas 0,04% (0-0,07%)

Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC

OXA-48
KPC
NDM
Nuevas carbapenemasas
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Distribución de KPC, NDM y OXA-48

NDM-1: 2008 Suecia

ECDC: 2008: 8, 2009:
2001. KPC en EEUU. 30, 2010: 9.
2003. KPC en Grecia,
asociadas a VIM, BLEE En España,
o pAmpC. KPC: 2010.
OXA-48: 2011.
NDM-1: 2012

2001. OXA-48 en Turquía.

Área mediterránea.
Norte Europa y Sudamérica
SMART: 0,06%
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Perfil de sustrato

Clasificación
Espectro Inhibidores
(Ambler/Bush)

Ác.
Todos los
KPC A/2f
betalactámicos
Clavulánico/
Tazobactam

Todos los
betalactámicos
NDM B/3a
Excepto
Resistentes
aztreonam
Hidrolizan
penicilinas y
OXA-48t C/2d carbapenemas Resistentes
pero no C3G o
C4G ni aztreonam
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Nivel de resistencia a imipenem
•KPC-2 a KPC-12 (KPC-4 y KPC-5
con menor afinidad)

•NDM-1 a NDM-6.
•OXA-162, OXA-163, OXA-181

B
A
Alteraciones permeabilitat:
MIC IMP Kp y OmpK36
(mg/l)
KPC 0.25 -32
NDM 8-16
OXA-48t 4-32

C Otras β-lactamasas: BLEE, pAmpC, OXAs, etc.

Ejemplo, NDM-1:
•CTX-M-15 + SHV-28 + OXA-1 + OXA-9 + CMY-9 + ArmA (Omán)
•CTX-M-15 + OXA-1 + OXA-9 + CMY-6 + RmtC (Omán)
•CTX-M-15 + TEM-1 + SHV-11 + OXA-1 + OXA-9 + OXA-10 + CMY-16 + CMY-30 +
ArmA + Qnr (Ginebra)
•CTX-M-15 + TEM-1 + ΔDHA-1+ ArmA + Qnr (España)
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Detección

•El método para su detección es observar reducción

del halo de ertapenem y corroborarlo con el test
modificado de Hodge.
Girlich D, et al. (2012 JCM. 50:477-9). “The modified Hodge
test has an excellent sensitivity for detecting enterobacterial
isolates producing Ambler class A (KPC) and class D (OXA-
48) carbapenemases. Its sensitivity is low for NDM-1
producers (50%) but is increased to 85.7% by adding
ZnSO(4) (100 μg/ml) in the culture medium. However, this
test has a low specificity and is time-consuming”.

•Técnica definitiva: PCR.

•En su mayoría son cepas también resistentes a aminoglucósidos (aac-6’-Ib-cr o arm) y

quinolonas (qnrB2).

•Las cepas productoras de NDM son normalmente sólo sensibles a colistina.

Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Expansión
•Difusión clonal:
• Clones predominantes en KPC: ST258 (Europa y
América) y ST11 (Asia).
• Clones predominantes en NDM:
•India: ST14, ST11, ST149, ST231, ST147, ST101
• UK: ST101, ST405, ST648, ST90, ST410, ST156
• Francia: ST15
• Omán: ST14, ST340
• Clones predominantes en OXA-48:
ST101(CTX-M-15, TEM-1, OXA-1) (Turquía, UK,
España)

•Difusión de un plásmido:
•En KPC: Tamaño: 23 Kb, 50 Kb, 70 Kb /
Grupos de incompatibilidad: IncN, incFIIA,
incX, colE types
•En NDM: Tamaño: 88 Kb, 170 Kb, 300 Kb /
Grupos de incompatibilidad: IncA/C, incL/M,
•Difusión del entorno genético: inc F

•blaKPC y blaOXA-48 están situados en Tn4410 (a o b) y •OXA-48 difunde mayoritariamente en un

Tn1999, respectivament. plásmido de 70 kb del grupo incL/M o ColE.

•En blaNDM se han encontrado numerosas IS (IS26, • blaOXA-181 se ha relacionado con un plásmido
ISCR1, tnpU, tnpACp2, tnpD), siendo la más frecuente ColE de 7,6 Kb y la ISEcp1.
la ISAba125 •blaOXA-162 se ha relacionado con un plásmido
incL/M y la IS1999.
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
En España
•KPC:
•Curiao T., et al. 2010. Emergence of bla KPC-3-Tn4401a associated with a pKPN3/4-like plasmid within ST384 and ST388
Klebsiella pneumoniae clones in Spain. J Antimicrob Chemother. 65:1608-14.
•Pintado V, et al. 2012. Estudio comparativo de las infecciones producidas por enterobacterias productoras de
carbapenemasas de tipo MBL y KPC. XVI SEIMC P-299.

•NDM:
•Struelens et al. 2010. Una cepa de K. pneumoniae aislada de un absceso abdominal de un paciente de 36 años que había
sido hospitalizado en la India. Euro Surveill. 15(46):pii=19716
•Solé et al. 2011. Una cepa de E. coli aislada de un coprocultivo de un paciente con diarrea del viajero proveniente de la
India. AAC. 55:4402-4404.
•Sanz et al. 2012. Klebsiella pneumoniae productora de una carbapenemasa NDM-1: nuevo caso en España. XVI SEIMC
P-550.
•OXA-48:
•Pitart et al. 2011. First outbreak of a plasmid-mediated carbapenem-hydrolysing OXA-48 β-lactamase in Klebsiella
pneumoniae in Spain. AAC:55:4398-4401.
•XVI Congreso SEIMC:
• Vilamala et al. 2012. Brote de Klebsiella pneumoniae OXA-48 en un hospital comarcal. Abstrat 526.
•Rodríguez et al. 2012. Asociación de los genes blaOXA-48 y qnrB1 en aislados clínicos de Klebsiella pneumoniae en
España. Abstrat 664.
•Gómez-Gil et al. 2012. Emergencia de un nuevo fenotipo BLEE con resistencia a carbapenem en
Enterobacteriaceae: Carbapenemasa OXA-48 con BLEE CTX-M-15. Abstrat 670.
•Torres et al. 2012. Caracterización de un aislado de Enterobacter aerogenes productor de OXA-48 y no productor de
betalactamasas de espectro extendido. XVI Congreso SEIMC. Abstrat 676.
•Miró et al. 2012. Difusión de dos clones de Klebsiella pneumoniae productora de OXA-48. Caracterización de los
plásmidos portadores de esta carbapenemasa y de su entorno. Abstrat 677.
Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC
Conclusiones

☺En España las nuevas betalactamases en Enterobacterias tienen una

incidencia <1%.

☺En general muestran un fenotipo de resistencia a todos los betalactámicos

debido que en su mayoría van asociadas a BLEE y/o pAmpC. Presentan
también resistencia a aminoglucósidos y quinolonas.

☺Las técnicas fenotípicas son poco sensibles y específicas. EL test de Hodge

modificado parece la mejor técnica, con una alta sensibilidad para KPC y OXA-
48, pero no para NDM.

☺La difusión de estas enzimas:

☺No se debe a la expansión de un clon concreto, aunque hay ST más
predominantes.
☺No se debe a la expansión de un plásmido concreto.
☺En el caso de las KPC y OXA-48 el entorno genético parece conservado
encontrándose dos transposones, el Tn4401 y Tn1999, respectivamente.
 Nuevas β-lactamasas en Enterobacterias. GEMARA. XVI Congreso SEIMC

Gracias

La Sardana. Gaspar Homar. 1903