ASPECTOS MOLECULARES Y FUNCIONALES DE LOS ANTICUERPOS

Las inmunoglobulinas son glicoproteínas solubles que vamos a encontrar en el cuerpo. El

suero humano cuando lo sometemos a separación electroforética (fundamento de la
electroforesis de proteínas: separar las proteínas del suero o del plasma sobre la base de
su carga eléctrica).

Cuando separamos el suero humano por medio de electroforesis de zona vemos que se
sepraran 5 fracciones: 1 homogenea (albumina) y 4 heterogeneas (globulinas alfa 1, alfa 2,
gamma globulinas y beta globulinas ). La gran mayoría de los anticuerpos migran en la
fracción gamma globulina ( por eso anteriormente se designaban a los anticuerpos
“gamma globulinas”), esto no quiere decir que en la fracción beta o en la fracción alfa no
migren algunos anticuerpos, pero la gran mayoría de los anticuerpos migran en la fracción
gamma. ¿Quién es la fuente principal de esas gamma globulinas o anticuerpos? Son las
células plasmáticas (son las células del estadio final de maduración del linfocito B),
recuerden que las células B cuando se unen a su antígeno se estimulan, se activan, migran
a la MO donde se convierten en células plasmáticas, también puede llegar al centro
germinal de los ganglios linfáticos en los foliculos linfoides y en el bazo donde también
hay celulas plasmáticas productoras de anticuerpos, pero la gran mayoria de células
plasmáticas productoras de anticuerpos están en la MO.

Las moléculas de anticuerpos están formadas o tienen una estructura (estas moléculas se
descubrieron hace varias décadas y se dilucido su estructura cristalográfica) que es un
monómero formado por dos cadenas pesadas idénticas unidas por puentes disulfuro, y
dos cadenas livianas idénticas (en la naturaleza no hay moléculas hibridas, esto significa
que no hay moléculas que tienen una cadena pesada de una clase y otra de otra , ni una
cadena que reconozca un antígeno y otra que reconozca otro antígeno diferente; sin
embargo si se pueden crear en los laboratorios). Las cadenas pesadas definen el tipo o la
clase del anticuerpo, osea que si tenemos cinco clases de anticuerpos también habran
cinco clases de cadenas pesadas; las cinco clases de cadenas pesadas son: la cadena
pesada gamma que sirve para formar la IgG, la cadena pesada alfa que sirve para formar la
IgA, la cadena pesada miu para la IgM, la cadena pesada delta para la IgD y la epsilo para
la IgE. En el extremo amino terminal de la cadena pesada y de la cadena liviana se
encuentra un dominio que varia mucho de cadena a cadena y por lo tanto se le denomina
“dominio variable”, en el extremo carboxilo terminal de las cadenas pesadas existen
dominios (en algunas tres y en algunas cuatro) que varian menos y se denominan
“dominios constantes. En la cadena liviana es lo mismo. Hay dos clases de cadena liviana:
la kappa y la lambda; la mas común (la tiene el 90% de la molecula de anticuerpo) es las
cadena de tipo kappa, y la cadena liviana de tipo lambda la tiene el 10% de los
anticuerpos.

La unión entre cadena pesada y cadena liviana se da por puentes disulfuro intercatenarios
entre cisteínas conservadas, de esta manera se mantiene la estabilidad del monómero.
Los dominios variables y constantes se mantienen estables gracias a los puentes disulfuro
intracatenarios, osea son puentes entre cisteínas que están en zonas equidistantes que le
permiten formar asas.

En la región variable existen zonas mucho mas variables todavía (regiones hipervariables o
TDR) llamadas regiones de complementariedad, estas zonas son tres, alli la frecuencia de
aminoácidos varia mucho mas que el resto. Las zonas que están entre las regones
hipervariables se llama regiones o zonas marcos, estas son cuatro; la clave esta en que las
regiones hipervariables son las regiones de conctacto con el antígeno, especialmente las
regiones 1, 2 y 3 de la cadena pesada, y las regiones 1, 2, y 3 de la cadena liviana, estas
tres regiones hipervariables de las cadenas conforman la zona de contacto con el epitope
del antígeno, es decir, el paratope.

La molecula de anticuerpo también tiene una región de bisagra que le da flexiilidad,

también tiene puentes disulfuro en esta región, tiene carbohidratos, cuando digerimos
con papaína el anticuerpo obtenemos dos fragmentos: uno que mantiene la capacidad de
unirse al antígeno (fragmento AB) y un fragmento que es cristalizable (FC) que es por
donde se mantiene muchas de las actividades biológicas de los anticuerpos:

 Muchas células como macrófagos y neutrofilos tienen receptores para la porción

FC de los anticuerpos, lo que le permite a este ultimo interactuar con las células y
ejercer muchas funciones importantes.
 En la porción FC se encuentran sitios que hacen que se active el sistema de
complemento para amplificar la respuesta inflamatoria.

Funciones efectoras de los anticuerpos:

 Fijar el complemento para movilizar células, para liberar moléculas

biologicamente activas que atraigan otro tipo de células o que produzcan
vasodilatación.

Podemos decir que el anticuerpo es una molecula divalente porque tienen dos valencias
para unirse a dos aticuerpos, pero al mismo timepo también es una molecula que cumple
una función biológica por su función FC.

Por ser proteínas, los anticuerpos tiene una estructura primaria que es subsecuente;
cuando los primeros investigadores se dieron a la tarea de secuenciar moléculas de
anticuerpos y compararon esas secuencias se dieron cuenta de que había una zona (del
aminoácido 1 hasta el 109 por ejemplo) en donde había mucha variación de aminoácidos,
y entonces a esa zona la llamaron zona de alta variabilidad (región variable) y a la que
tenia poca variabilidad la llamaron región constante. La estructura secundaria de los
anticuerpos esta formada por hojas beta y por algunas hélices alfa que interconectan esas
hojas beta; se considera que en la región constante hay unas siete u ocho hijas beta y en
la región variable hay unas ocho hojas beta y de esta manera se realiza la estructura
secundaria. La estructura terciaria es la forma como se dispone en el espacio
normalmente la proteína y la cuaternaria es cuando se asocia esta estructura terciaria con
otra y forman dimeros o tretameros.

Existen cuatro subclases de IgG: la IgG 1,2,3 y 4, entonces habran cuatro subclases de
cadena pesada tipo gamma que conforma junto con una cadena kappa o una cadena
lambda el monómero de IgG. La IgM no tiene subclases y la podemos encontrar en forma
monomerica o en forma pentamerica. La IgA puede formar dimeros, trimeros o
tetrámeros, y la hay en dos subclases: alfa 1 y 2. La IgD y la IgE no tienen subclases.

Como bien sabemos, las moléculas de anticuerpos son proteínas y por ende están
conformadas por genes que están localizados en los cromosomas. Los genes de la cadena
pesados están en la banda q32.2 del cromosoma 14, la cadena kappa en el cromosoma 2
en la banda q1.2 y la cadena lambda en el cromosoma 22 en la banda q11.2. Saber estas
localizaciones es importante porque hay enfermedades como el linfoma de Burkitt donde
se produce una delecion en un intercambio de material entre el cromosoma 14 y el
cromosoma 7 que es promovida por la infección del virus de Esten bar y entonces hay un
fragmento de un proto-oncogen llamado el C-MIC anómalo y asi el individuo desarrolla
tumores de linfocitos B.

¿Cómo hace el individuo para producir tantos anticuerpos como antígenos que hay en la
naturaleza con un numero limitado de genes? Se han descubierto muchos mecanismos de
recombinación somatica y se propuso que los humanos teníamos un numero limitado de
genes para producir un numero casi ilimitado de moléculas de anticuerpos porque hay
genes que codifican para la región constante y una gran cantidad de genes que codifican
para la región variable de las cadenas livianas y pesadas de los anticuerpos, y que estos
genes en la línea germinal en los linfocitos B inmaduros están separados y que cuando los
linfocitos B se maduran lo que hacen es aproximar unos genes de región constante a unos
genes de región variable y generar un segmento que codifique para una cadena pesada o
para una cadena liviana, esto es lo que conoce como “recombinación somatica”, y se
denomino de esta manera porque hasta fechas antes de reconocer este mecanismo solo
se conocía que la recombinación solo se daba en los gametos, posteriormente se
descubrió que los linfocitos B y los linfocitos T tenían este mecanismo para generar
diversidad, estos eran las únicas dos células somáticas que utilizaban ese mecanismo.

En la línea germinal, por ejemplo en el locus de la cadena pesada vamos a encontrar los
distintos locus que codifican para las cadenas pesadas de los cinco isotipos de los
anticuerpos y sus subclases con dos segmentos de genes que están metidos allí para
generar más diversidad como son genes de unión y los genes de diversidad. También
encontramos un grupo de genes que codifican para la región variable. En el caso de la
cadena liviana kappa por ejemplo solo tenemos un gen que codifica para su segmento
constante, unos grupos de genes para unión, y el resto son genes de región variable; para
la lambda igual: los variables, los de unión y algunos genes que nos pueden determinar
subtipos de cadena liviana para lambda (a diferencia de la kappa que no tiene subtipos),
entonces podemos encontrar lambda 1, lambda 2, lambda 3. Esto es en la línea germinal
del linfocito B inmaduro.

REARREGLO DE LINFOCITOS B
El rearreglo de los genes de cadena pesada se da cuando el linfocito B comienza su
proceso de maduración, en el cual se activan una serie de genes entre los cuales
encontramos inicialmente los RAG, genes de la recombinasa, que codifican para dos
enzimas que son la recombinasa 1 (RAG1) y la recombinasa 2 (RAG2) y otra que es la RAG
endonucleasa, las RAG se ubican al lado de cada segmento variable o al lado de cada
segmento de diversidad donde hay una secuencia específica para la recombinasa, esa
secuencia específica para la recombinasa son secuencias de aproximadamente 7
nucleótidos que se conocen como los heptámetros, esa secuencia es blanco de la RAG1
para que active todo el sistema de la sinapsis de recombinación, esto va a garantizar que
el segmento que fue seleccionado (que es aleatorio) se asegure, todo el ADN que está en
la mitad de los segmentos seleccionados se pierde (se circulariza y es eliminado ). Con los
segmentos seleccionados es codificado el segmento de unión al antígeno. El recambio solo
está dado a nivel de ADN por lo que hasta ese momento tenemos un linfocito proB que
todavía no se ha convertido en linfocito maduro totalmente y viene lo que se conoce
como la transcripción del trancripto primario, que es un transcripto grande, un RNAm
grande, que tiene codificada el segmento variable VDJ y se trae consigo todos los
segmentos constantes lo que nos garantiza que 1. En la respuesta primaria se produzca un
isotipo de anticuerpo (el anticuerpo de la respuesta inmune primaria es la IgM), 2. Que en
la respuesta secundaria se produzca otro isotipo de anticuerpo (el anticuerpo que usa
para la respuesta inmune secundaria es la IgG o la IgE, IgH, lo que se conoce como
recambio de isotipo con la misma región variable). El transcripto primario es procesado y
solo queda con dos posibilidades inicialmente: Cµ o Cδ, la cadena pesada µ para producir
IgM o la cadena pesada δ para producir IgD. La mayoría de los lifocitos B tanto IgD como
IgM para su membrana como receptor de membrana porque lo que se produce
inicialmente por el linfocito maduro es un anticuerpo que va a actuar como receptor en la
membrana del linfocito B, en este caso va a ser o IgM o IgD, aunque en la mayoría de los
casos pueda expresar las dos por que el tiene la capacidad de hacerlo. Cuando este
linfocito B es estimulado por el antígeno entonces hace el cambio de isotipo y puede
comenzar a producir posteriormente cualquier otra molécula de los isotipos de
anticuerpos por que el queda con esa habilidad y el se convierte en célula plasmática
cuando se queda produciendo un solo isotipo de molécula de anticuerpo. Luego de la
transcripción viene la traducción que es la conversión del RNAm por su cadena de
proteínas y esa proteína luego va a ser anclada en la membrana, inicialmente como
proteína de membrana, posteriormente cuando el linfocito se activa van a ser producidas
como anticuerpos solubles. la zona de unión al antígeno está formada por los 3 CDR de la
cadena pesada y los 3 CDR de la cadena liviana esta es la zona que hace contacto directo
con el epítope. El proceso de maduración del linfocito B en relación con el rearregro de
genes de Igs se da en médula ósea en relación con la periferia. En médula ósea
encontramos la célula madre pluripotencial, el linfocito proB y y el inmaduro que posee
IgM o la IgD, entonces en la médula ósea ocurre todo el proceso de rearreglo de los genes,
por tanto las personas que tienen un daño a nivel de médula ósea poeden tener
problemas de inmunodeficiencia, o in síndrome de hiper-IgM. Las células al salir de la
médula ósea, pasan a la sangre va a los tejidos y allí puede recibir un estímulo antigénico
(requerimiento para que se convierta en célula plasmática).

La hiper mutación somática se da en los centros germinales de los ganglios linfáticos por
estímulo antigénico, facilitado por la enzima AID. Cuando se dan múltiples estímulos
antigénicos se puede dar un cambio de isotipo ya sea IgA o IgG o IgE, este proceso se da
en el ganglio linfático

CLASES DE Igs

Monoméricas:

IgD:

IgE:

IgG: tiene subclases 1, 2, 3, 4

Poliméricas: IgM (pentamérica), IgA (di, tri o tetramérica)

Y la Ig4 baja concentración tiene una vida media de 23 días, no activa el complemento y
atraviesa la barrera placentaria, se relaciona con algunas reacciones alérgicas. La IgA es la
inmunoglobulina de las secreciones, se encuentra en gran cantidad en calostro, leche
materna, orina, saliva etc. Tiene forma dimerica, pero también se encuentra como
monómero, trímero y hasta tetrámero. La IgA se produce en las mucosas por las células
plasmáticas se une a un receptor que está en la parte interna de la célula epitelial, es
endocitada y luego es expulsada a la luz de la mucosa y se mezcla con las secreciones, es
el anticuerpo fundamental en las secreciones, permite neutralizar los patógenos que
quieran entran a través de la mucosa. La deficiencia de anticuerpos más común es la de la
IgA, en muchos niños (1 de cada 800 nacidos vivos) pueden nacer sin la capacidad de
producirla o sin la capacidad de transportarla, hay niños que la producen pero no poseen
el receptor de transporte “la tiene en la sangre, pero no en las secreciones” o puede ser
que no la produzca por un defecto defecto en el linfocito B, ella tiene una proteína
secretoria y una de unión que mantiene unido al homodimero, su peso molecular
depende de si es monómero 150 y si es tetrámero 600 sus valores normales son 3 mg/ml y
su vida media es de 6 días encontrándose en las mucosas en grandes cantidades. Cuando
los niños tienen deficiencia de IgA sufren infecciones en las mucosas como diarreas,
infecciones urinarias. La IgM es un pentámero, y es la encargada de la respuesta inmune
primaria, su valor normal en suero es de 1,5 mg/ml su vida media es de 5 días y no
atraviesa la placenta. Activa muy bien el complemento es el receptor de linfocito B. la IgD
es una anticuerpo que se mantuvo enigmático durante muchos años, y recientemente se
ha demostrado su papel en la defensa contra algunos microbios, su valor normal es
bastante bajo tiene una vida media de 3 días, no atraviesa la placenta y no activa el
complemento. Tiene un receptor distinto a los demás anticuerpos, tiene actividad
antimicrobiana uniéndose al basofilo e incremente la actividad antimicrobiana y
antiinflamatoria, jugando así un papel importante. La IgE se caracteriza por que tiene un
dominio constante, su valor normal es de 0,0003 mg/ml; tiene una vida media de 2,5 no
activa el complemento, no atraviesa la placenta, no es receptor de membrana. Existen
receptores de membrana para su anclaje (Tr1 Tr2) el de alta afinidad es el 1, que se
encuentra en basofilos y en células cebadas en donde se ancla la IgE y luego reacciona con
el alérgeno y desgranula las células liberando las histamina generando así la inflamación.
Se descubrió en la genética de las células de Acs, fusionaron linfocitos B con células
tumorales generando los hibridomas y se dieron cuenta que estas células podían producir
grandes cantidades de anticuerpos de un solo origen llamados anticuerpos monoclonales.
Estos anticuerpos son una gran herramienta en la investigación diagnostico y terapéutica.
Los anticuerpos monoclonales fueron probados en ratones inicialmente y con el paso del
tiempo y el desarrollo de la biología molecular se fueron desarrollando Acs. Quiméricos en
donde un porcentaje era de origen humano y el otro de rata y luego se realizaron unos
humanizados con solo la región intervariable de ratón y el resto humano. Hoy en dia los
monoclonales son 100% humanos desarrollados para el diagnostico, inmunohistoquimica
etc. (Ejemplo: un inhibidor del FNT alfa, entre otro) así se pude bloquear los procesos
inflamatorios. Si el monoclonal es de origen humano lleva una letra en el medio que diga
u, si es ratón “o” si es rata “a” etc. Las nuevas terapias bloquean a la IgE inhibiendo una
reacción alérgica grave que complique el estado del paciente (maní, mariscos, huevo etc.)
el mieloma de células plasmáticas es un tumor que destruye los huesos en el paciente y
que produce grandes cantidades de un anticuerpo de un solo tipo y eso se llama
gamapatia monoclonal y gracias a este tumor se ha podido comprender bien la bioquímica
de los anticuerpos, gran parte de la estructura y el conocimiento se lo debemos al
mieloma múltiple de células plasmáticas.

Entonces con base en la información del Dr marrugo podemos concluir que los Acs
funcionan de maneras distintas cada uno sintetizado con funciones divergentes pero que
tienen como finalidad proteger al organismo de cualquier agente patógeno que quiera
penetrar a los sistemas del cuerpo humano.