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Tipos de Desinfectantes PDF
Tipos de Desinfectantes PDF
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial
Para optar por el titulo de microbióloga Industrial
1
NOTA DE ADVERTENCIA
2
EVALUACIÓN DE LA EFICACIA DEL DESINFECTANTE LARK
SANITIZER® EMPLEADO EN LAS AREAS DE ELABORACIÓN DE
ENVASES Y TAPAS PLÁSTICAS EN ECSI S.A.
3
EVALUACIÓN DE LA EFICACIA DEL DESINFECTANTE LARK
SANITIZER® EMPLEADO EN LAS AREAS DE ELABORACIÓN DE
ENVASES Y TAPAS PLÁSTICAS EN ECSI S.A.
APROBADO
4
AGRADECIMIENTOS
5
DEDICATORIA
6
RESUMEN
7
TABLA DE CONTENIDO
Pág.
1. INTRODUCCIÓN 1
2. MARCO TEORICO 3
2.1 DESCRIPCIÓN DE LA COMPAÑÍA 3
2.1.1 Reseña histórica de la empresa 3
2.1.2 Presentación de la empresa 3
2.1.3 Misión 5
2.1.4 Visión 6
2.1.5 Política de calidad 6
2.2 ENVASES Y EMPAQUES DE PLÁSTICO 7
2.2.1 Plásticos 7
2.2.2 Historia de los Plásticos 7
2.2.3 Tipos de Plásticos 9
2.2.3.1 Termoplásticos 9
2.2.3.2 Termoestables 9
2.2.3.3 Elastómeros 10
2.2.4 Plásticos más usados en la elaboración de envases 11
2.2.5 Métodos de transformación 12
2.2.5.1 Reacción de polimerización 12
2.2.5.2 Etapas de la polimerización en cadena 13
2.2.6 Procesado de materiales plásticos 14
2.2.6.1 Moldeo por Inyección 14
2.2.6.2 Moldeo por Soplado 15
2.2.6.3 Moldeo por Compresión 16
2.2.7 Función de los empaques 16
2.2.7.1 Función de contener 16
2.2.7.2 Función de proteger 17
2.2.7.3 Función de informar 17
2.3 TIPOS DE MICROORGANISMOS CONTAMINANTES 17
2.3.1 Los mohos 17
2.3.1.1 Aspergillus niger 18
2.3.2 Las levaduras 18
2.3.2.1 Candida albicans 19
2.3.3 Las bacterias 19
2.3.3.1 Escherichia coli 20
2.3.3.2 Staphylococcus aureus 20
2.3.3.3 Bacillus subtillis 21
2.4 DINAMICA DE CRECIMIENTO 22
2.4.1 Fase de retraso o de crecimiento bajo 22
2.4.2 Fase de arranque 22
2.4.3 Fase de crecimiento logarítmico 22
2.4.4 Fase de crecimiento estacionario 23
2.4.5 Fase de muerte acelerada 23
8
2.4.6 Fase de muerte reducida 23
2.5 CINETICA DE MUERTE MICROBIANA 24
2.6 CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACCIÓN
ANTIMICROBIANA 25
2.6.1 Agua 25
2.6.2 Temperatura 26
2.6.3 pH 26
2.6.4 Formulación 26
2.6.5 Numero de microorganismos 26
2.6.6 Naturaleza del organismo 27
2.6.7 Estado fisiológico de los microorganismos 27
2.6.8 Tiempo 27
2.7 CARACTERISTICAS DE LOS DESINFECTANTES 27
2.7.1 Requisitos generales 27
2.7.2 Grupos de desinfectantes 29
2.7.2.1 Halógenos y sus compuestos 29
2.7.2.1.1 Cloro 29
2.7.2.1.2 Yodo 30
2.7.2.1.3 Bromo 31
2.7.2.1.4 Fluor 32
2.7.2.2 Productos superficie activos 32
2.7.2.2.1 Compuestos de amonio cuaternario 32
2.7.2.3 Desinfectantes ácidos 33
2.7.2.4 Biguanidas 34
2.7.2.4.1 Clorhidrato de polihexametilenbiguanida 34
2.7.2.4.1.1 Nombre común 34
2.7.2.4.1.2 Formula 35
2.7.2.4.1.3 Datos Físicos 35
2.7.2.4.1.4 Espectro de actividad 35
2.7.2.4.1.5 Toxicidad 35
2.7.2.4.1.6 Usos 35
2.7.3 Modo de acción antimicrobiana 36
2.7.3.1 Compuestos clorados 37
2.7.3.2 Compuestos yodados 37
2.7.3.3 Compuestos de amonio cuaternario 38
2.7.3.4 Desinfectantes ácidos 38
2.7.3.5 Desinfectantes a base de biguaninas 38
2.7.4 Desinfección de superficies 39
2.8 CONTROL DEL EFECTO DESINFECTANTE 40
2.8.1 Métodos de evaluación de desinfectantes 40
2.8.1.1 Método del coeficiente fenolico 40
2.8.1.2 Técnica de la dilución en tubo 41
2.8.1.3 Técnica placa de agar 41
2.8.1.4 Método de siembra por estrías 42
9
3. JUSTIFICACIÓN 43
4. MATERIALES Y METODOS 44
4.1 Formulación del problema 44
4.1.1 Población universo 44
4.1.2 Muestreo 44
4.1.3 Variables 44
4.1.3.1 Variable dependiente 44
4.1.3.2 Variable independiente 44
4.1.4 Método de muestreo 44
4.1.5 Análisis del porcentaje de inhibición del desinfectante
Lark Sanitizer® 45
4.1.6 Hipótesis de estudio 45
4.1.7 Análisis estadístico de resultados 45
5. OBJETIVOS 46
5.1 Objetivo general 46
5.2 Objetivo especifico 46
6. METODOLOGÍA 47
6.1 Muestreo 47
6.2 Obtención de las cepas 47
6.3 Obtención de los medios de cultivo 47
6.4 Recuperación de microorganismos liofilizados 48
6.5 Preparación de la dilución del desinfectante 50
6.6 Preparación del tubo #2 del patrón de Mac Farland 51
6.7 Preparación de la emulsión de bacterias, hongos y
levaduras 51
6.8 Evaluación del desinfectante Lark Sanitizer® 52
6.9 Lectura e interpretación 52
6.10 Análisis estadísticos 53
7. RESULTADOS 54
7.1 Porcentajes de inhibición 54
7.1.1 Staphylococcus aureus 54
7.1.2 Escherichia coli 54
7.1.3 Bacillus subtillis 56
7.1.4 Candida albicans 57
7.1.5 Aspergillus niger 58
7.2 Analisis estadistico 59
7.2.1 Staphylococcus aureus 59
7.2.2 Escherichia coli 63
7.2.3 Bacillus subtillis 67
7.2.4 Candida albicans 71
7.2.5 Aspergillus niger 75
8. DISCUSIÓN 77
8.1.1 Staphylococcus aureus 77
8.1.2 Escherichia coli 78
8.1.3 Bacillus subtillis 79
10
8.1.4 Candida albicans 80
8.1.5 Aspergillus niger 80
9. CONCLUSIONES 83
10. RECOMENDACIONES 84
11. REFERENCIAS 85
ANEXOS 88
11
INDICE DE TABLAS
Pagina
12
INDICE DE FIGURAS
Pagina
13
INDICE DE GRAFICAS
Pagina
14
INDICE DE ANEXOS
Pagina
Anexo A
Figura 9. Siembra en estría para S. aureus 88
Figura 10. Siembra en estría para E.coli 88
Figura 11. Siembra en estría para B. subtillis 89
Figura 12. Siembra en estría para C. albicans 89
Figura 13. Siembra en estría para A. niger 90
Anexo B Composición de los medios de cultivo usados 91
Anexo C Ficha técnica del desinfectante Lark Sanitizer®
15
1. INTRODUCCIÓN
16
idealizada Seguridad alimentaría como objetivo común de industriales y
consumidores.
17
2. MARCO TEORICO
18
• Directivos 5
• Administrativos 35
• Técnicos 52
• Operativos 318
• Envases Plásticos
• Tapas Plásticas
• Canastas
• Cuñetes
• Bidones
(Manual de Calidad ECSI S.A., 2004)
19
NTC ISO 9001/2000
• PIRA INT. Shell Group world wides Basis
• QUAKER Quaker Oats Corp.
(Manual de Calidad ECSI S.A., 2004)
2.1.3 Misión
“ Nuestra empresa tiene como misión, la producción y comercialización de
artículos plásticos con el fin de satisfacer las necesidades de nuestros
clientes. Para esto combinamos el mejor talento humano con la más
avanzada tecnología. Esto nos lleva a estar en los primeros lugares del
mercado nacional y ser reconocidos en el mercado internacional. Nuestro
más importante patrimonio es la calidad de nuestra gente y nuestra mayor
preocupación el servicio, la atención y el aporte que hagamos a nuestros
clientes, de esta forma estamos contribuyendo al desarrollo económico e
20
industrial de nuestro país y así mismo al progreso y mejoramiento de nuestra
empresa y del nivel de vida de nuestra gente.”
2.1.4 Visión
“ ECSI S.A. será una empresa líder: en servicio, producción y
comercialización de artículos plásticos, reconocida en el mercado nacional e
internacional. La calidad de nuestros productos dará completa satisfacción a
nuestros clientes y será el resultado de personas capaces, de tecnología
avanzada, de procesos altamente productivos y de la oportunidad y calidad
de nuestros servicios. Estaremos colaborando en la investigación y desarrollo
de materiales y procesos que contribuyan a la conservación del medio
ambiente. Nuestro gran reto y desafió continuara siendo la calidad y
lograremos la excelencia en todos los aspectos de nuestra organización.”
21
2.2 ENVASES Y EMPAQUES DE PLASTICO
2.2.1 Plásticos
La palabra “plástico “debe entenderse como un termino general, que describe
una gran variedad de sustancias, las cuales se distinguen entre si por su
estructura, propiedades y composición. (SENA, 1995)
Los plásticos tienen algo en común: se originan del entrecruzamiento o
encadenamiento de moléculas muy largas, denominadas macromoléculas.
A menudo constan de más de 100 unidades estructurales, una detrás de
otra. Como sus macromoléculas están conformadas por un gran número de
unidades estructurales sencillas llamadas “monómeros” ( mono:uno, meros:
parte), los plásticos reciben también el nombre de “polímeros” (poli: muchos).
La sustancia de partida de los polímeros se llama monómero, y es posible
producir diversos polímeros a partir e la misma sustancia, modificando el
proceso de producción o mediante mezclas. (SENA, 1995)
Los plásticos son materiales susceptibles de moldearse mediante procesos
térmicos, a altas temperaturas y presiones. Presentan una serie de
propiedades físicas y químicas muy útiles en la producción de envases y
embalajes de múltiples productos, ya sea líquidos, sólidos o gaseosos.
(Vidales , 1995).
22
transformación , que utilizamos actualmente, arrancan de aquella época.
(Vidales , 1995).
23
poliariletercetonas y polímeros de cristal líquido. Algunas de estas
investigaciones están abiertas en la época actual.
24
termoestables constan de una red de átomos de Carbono unidos por enlaces
covalentes para formar un sólido rígido. (Fortune, 2004)
Algunos termofijos son resinas o masas de colada melamina-formaldehido,
polimetil-metacrilato, Polimetil penteno, Poliacetal, Poliuretanos, hule natural
y sintético etc.
25
2.2.4 Tabla # 1. Plásticos más usados en la elaboración de envases.
26
- Material termoplástico entre - Se emplea en
transparente y blanquecino. contenedores, en la
- Existen dos tipos: De baja fabricación de
densidad que tiene una estructura material químico, en
Polietileno de cadena ramificada que hace la fabricación de
que disminuya su grado de productos para el
cristalinidad, densidad y hogar y de botellas
resistencia mientras el de alta moldeadas.
densidad tiene estructura de
cadena lineal.
(Sena, 1995)
(Vidales. 1995)
(Fortune. 2004)
27
carbono de la anterior molécula de etileno tiene un electrón libre para el
enlace covalente con otro electrón libre de otra molécula.
28
Ecuación Nº 2
29
un mecanismo de tornillo alternativo para fundir el plástico e inyectarlo dentro
del molde. Las maquinas antiguas utilizaban un pistón para inyectar la
fundición.
30
2.2.6.2 Moldeo por Soplado
Se coloca un cilindro o tubo de plástico calentado llamado preforma entre las
mordazas de un molde. El molde se cierra para sellar los extremos del
cilindro y se insufla dentro aire comprimido forzando el plástico contra las
paredes del molde (Ver figura 2).
La velocidad del proceso, es decir la cantidad de piezas obtenidas por unidad
de tiempo depende de la velocidad de solidificación del plástico caliente.
( Mink. 1991)
31
2.2.7.2 Función de proteger
La primera misión de un embalaje es la de proteger la mercancía que
contiene frente a influencias externas. Tales influencias externas pueden ser
de tipo mecánico como choques, caídas, doblado, presión etc., o bien de
naturaleza físico-química como las producidas por fuerte frió o calor,
excesiva radiación solar o humedad o, microbiológicas donde el producto se
ve afectado por bacterias, hongos, parásitos o virus que evidentemente
cambiaran sus propiedades iniciales. (KUHNE,D.1990)
32
En su 80-90% las paredes celulares fungicas están compuestas de
polisacaridos, mientras que los lípidos y polifosfatos e iones inorgánicos
forman una matriz cementante. (MADIGAN,M.1991).
33
- Incremento de la presión en los envases, de tal forma que cuando se
este abriendo hace espuma exagerada.
- Olores fermentados y pérdida de sabor.
- Sedimentos o trozos ligeros en el fondo de los envases.
- Pérdida o cambio de color y apariencia física.
- Surgimiento de puntos de color blanco a crema.
(GTC 85.2003)
34
El riesgo de contaminación para un producto natural, vegetal o animal y un
producto alimentario transformado o no, es permanente a lo largo de la
cadena alimentaría y durante los procesos de fermentación. (LEVEAU J.2002)
E.coli forma parte de la carga normal del intestino grueso del hombre y la
mayoría son apatógenas, sin embargo algunas pueden producir infecciones
del tracto urinario y causantes de intoxicaciones alimentarias, septicemia y
meningitis. La contaminación fecal de los alimentos bien por contacto directo
o indirectamente por medio de agua es el método de transmisión más
importante. (ELEY A.1994)
El control debe ser mediante la higiene del personal: manipuladores y evitar
el uso de aguas residuales.
35
El peptidoglicano representa hasta el 90% de la pared, aunque los ácidos
teoicos también están presentes en pequeñas cantidades que son polímeros
de la pared, de la membrana o de la cápsula que contienen unidades de
glicerol o ribitolfosfato. Debido a su carga negativa, los ácidos teoicos son, en
parte, responsables de la carga negativa neta de la superficie de las células y
puede intervenir en el paso de iones a travez de la pared celular. Algunos de
estos ácidos contienen glicerol que están unidos a los lípidos de la
membrana debido a esta asociación se denominan ácidos lipoteioicos.
(MADIGAN,M.1991)
36
2.4 DINAMICA DE CRECIMIENTO
37
microbios que contribuyen a la proliferación durante esta fase de crecimiento.
(MARRIOT,N.1999).
38
2.5 CINETICA DE MUERTE MICROBIANA
39
2.6 CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACCIÓN ANTIMICROBIANA
2.6.1 Agua
La inclusión del agua en las industrias, en establecimientos y casas
particulares en la preparación de alimentos y limpieza es imprescindible por
ello, debe ser agua apta. El agua utilizada con fines técnicos recibe el
nombre de “ Agua Industrial” y no debe ser siempre de calidad potable , pero
los requisitos pueden ser mayores si tienen contacto con los alimentos, de
manera que elementos presentes en ella como el Hierro y el Cobre pueden
influir sobre la calidad y capacidad de conservación de los alimentos.
(WILDBRETT,G 2000).
El agua de tipo industrial debe cumplir con diferentes especificaciones entre
ellas se encuentra un estándar mínimo en lo referente a especie y número de
gérmenes. El empleo de aguas cargadas de microbios en la limpieza y
desinfección supone un peligro, al poder transmitir gérmenes patógenos al
producto elaborado. Además debe ser insípida e inodora y la tasa de
elementos indeseables no debe exceder los limites legales entre estas están
los Hidrocarburos Clorados que al acumularse pueden desarrollar una acción
cancerigena. (WILDBRETT,G.2000).
40
2.6.2 Temperatura
Los desinfectantes químicos son comúnmente utilizados a temperatura
ambiente, pero algunos son posibles de usar en conjunto con procesos
calientes de limpieza.(GARNEDNER,J.1991).
Un aumento de temperatura con un agente químico apresura la destrucción
de microorganismos. Así una cantidad pequeña de agente químico a una
temperatura elevada logrará el mismo resultado que una cantidad mayor del
mismo agente a una temperatura más baja.
Es importante tener en cuenta que la estabilidad de algunos desinfectantes
se ve afectada por el aumento de temperatura por ejemplo, los Halógenos, el
Cloro y el Yodo. (PELCZAR,M.1994).
2.6.3 pH
La acidez o alcalinidad de una solución afectará la eficacia de un agente
químico. Los bactericidas ácidos (aniónicos) como los ácidos orgánicos y el
fenol son más eficaces a un pH bajo. Los microbicidas catiónicos tienden a
ser inhibidos por pH bajos y aniones. (FROBISHER,M.1976).
2.6.4 Formulación
Algunos desinfectantes tienen en su formulación soluciones que garantizan
una mayor penetración como algunos desinfectantes de piel. Los
desinfectantes fenolicos contienen agentes activos de superficie para
promover la solubilidad de compuestos activos, los compuestos de amonio
cuaternario son formulados con detergentes.
Es importante saber que una mezcla no autorizada de diferentes
desinfectantes puede resultar en desactivación. (GARNEDNER,J.1991).
41
erradas. A mayor número de microorganismos el tiempo de ajuste para
destruir a todos los microorganismos es más largo. (GARNEDNER,J.1991).
2.6.8 Tiempo
El tiempo de contacto o de aplicación tiene gran importancia en la
desinfección. Los productos químicos requieren cierto tiempo para establecer
contacto con los microorganismos y reaccionar con ellos. (FROBISHER,M.1976).
42
alimentos o elementos relacionados, un desinfectante debe cumplir una
extensa serie de requisitos:
El desinfectante como producto concentrado:
- Alto contenido de principio activo
- Buena capacidad de transporte y estabilidad en el almacenado
- Buena solubilidad, miscibilidad y dosificación en la preparación de las
diluciones habituales. (WILDBRETT,G.2000).
Propiedades del desinfectante en solución
- Breves plazos de destrucción de gérmenes con bajas
concentraciones, también a bajas temperaturas.
- Igual acción sobre todas las especies de microorganismos
- Ningún perjuicio para los procesos de limpieza, sino facilidad de
dispersión para conseguir contactos complejos entre el principio activo
y los gérmenes.
- Indiferencia a la inclusión de suciedades.
- Suficiente estabilidad del principio activo en mojaduras prolongadas o
repetidas con soluciones preparadas y, si es el caso, almacenadas
durante cierto tiempo.
- Control sencillo, y si es posible automatizado, de la concentración del
principio activo.
- Ningún ataque a los materiales tratados.
- Seguridad y comodidad de empleo, con tolerancia para la piel y olor
neutro. (WILDBRETT,G.2000).
Comportamiento en lo referente a residuos y otras precauciones.
- Prolongada acción protectora sobre las superficies tratadas.
- Buena capacidad de enjuagado de las superficies de contacto con el
alimento .
- Ninguna influencia sobre el olor y sabor del alimento.
- Inocuidad de los residuos para el hombre, animales y entorno.
- Inocuidad de las aguas residuales. (WILDBRETT,G.2000).
43
2.7.2 Grupos de Desinfectantes
2.7.2.1.1 Cloro
Funcionan como desinfectantes el Cloro líquido, hipocloritos, cloramina
inorgánica, cloramina orgánica y dióxido de Cloro.
El cloro gaseoso puede inyectarse en agua para formar oxido hipocloroso
(HOCL), EL Cloro Liquido es una solución de Hipoclorito sólido (NaOCl) en
agua. El ion Hipocloroso es 80 veces más activo que una concentración
equivalente del ión Hipoclorito. (MARRIOT,N.1999).
Los compuestos clorados ejercen mayor efecto antimicrobiano con un pH
bajo , en el que predomine la presencia de ácido hipocloroso (pH <4), a
medida que aumenta el pH, predomina el ión hipoclorito (pH >5), que no es
tan eficaz como bactericida. (MARRIOT,N.1999).
El tiempo de reacción de los desinfectantes a base de Cloro depende de la
Temperatura. Hasta 52ºC, la velocidad de reacción se duplica cada 10ºC de
aumento de temperatura. Aunque los hipocloritos son relativamente estables,
la solubilidad del Cl2 disminuye rápidamente por encima de 50ºC.
Se sabe que el cloro es eficaz como desinfectante en la limpieza mecanizada
de acero inoxidable sin corroer y superficies de policarbonato reduciendo las
poblaciones microbianas presentes a menos de 1.0 log ufc/cm².
(MARRIOT,N.1999).
Las cloraminas inorgánicas se forman en la reacción de Cloro con Nitrógeno
y las cloraminas inorgánicas por la reacción del ácido hipocloroso con
aminas. Las esporas bacterianas son más resistentes a estos compuestos y
44
libera lentamente el Cloro ya que sus efectos letales también son más lentos.
(MARRIOT,N.1999).
VENTAJAS DESVENTAJAS
Eficaces contra una amplia variedad Son inestables y desaparecen
de bacterias, hongos y Virus. rápidamente con el calor o con la
contaminación de materia orgánica.
Incluyen compuestos de efecto Su eficacia disminuye a medida que
rápido. aumenta el pH de la solución.
Económicos Son corrosivos para el acero
inoxidable y otros metales
Si se aplican soluciones con 200ppm Se deterioran cuando se almacenan
o menos no hay necesidad de bajo luz solar o a temperaturas
enjuagar el equipo. superiores de 60ºC.
Se presenta de forma liquida o Soluciones con bajo pH pueden
granulada. formar cloro gaseoso toxico y
corrosivo.
No resultan afectados por las aguas Concentrados en forma liquida
duras, solo si se registran variaciones pueden ser explosivos.
en el pH.
No se originan subproductos tóxicos.
(MARRIOT,N.1999).
2.7.2.1.2 Yodo
El Yodo diatómico es el agente antimicrobiano más importante, generalmente
el Yodo libre en forma de elemento y el Ácido hipoyodoso son los agentes
activos en la destrucción microbiana. (MARRIOT,N.1999).
Los principales compuestos yodados utilizados como desinfectantes son los
que generalmente llevan yodoforos usados en superficies y en piel.
El complejo portador del Yodo libera un ion triyoduro intermediario que, en
presencia de ácido, se convierte rápidamente en ácido hipoyodoso y yodo
45
diatópico, que son las formas antimicrobianas activas de los desinfectantes
portadores de Yodo. (MARRIOT,N.1999)
Los agentes iónicos superficieactivos son compuestos formados por dos
grupos funcionales; una parte es lipófila y la otra es hidrófila. Introducidas en
agua estas moléculas se ionizan y los dos grupos cargan a la molécula
surfactante con una carga concreta, que resulta positiva o negativa. Los
desinfectantes aniónicos y catiónicos tienen modos de acción semejantes.
(MARRIOT,N.1999).
VENTAJAS DESVENTAJAS
En forma concentrada tiene larga vida En forma liquida se evapora a una
comercial. temperatura mayor de 50ºC.
Tiñe la suciedad, facilitando su Puede SER absorbido por plásticos y
identificación. gomas causando alteraciones.
No se ve afectado por las aguas Si ya hay depósitos de aguas duras el
duras. yodo no los destruye
Eficaces en la desinfección de Más costoso que el Cloro
manos.
Son menos eficaces contra las
esporas bacterianas y bacteriófagos
que los compuestos clorados.
Su eficiencia es escasa a
temperaturas bajas, y son sensibles a
los cambios de pH.
(MARRIOT,N.1999).
2.7.2.1.3 Bromo
El Bromo solo se ha utilizado en combinación con otros compuestos, más en
tratamiento de aguas que como desinfectante de equipos y utensilios de
instalaciones. Con pH normal o ligeramente ácido, los componentes
orgánicos de cloramina son más eficaces en la destrucción de esporas que
46
los compuestos orgánicos de Bromo, pero la cloramina con Bromo tiende a
ser menos afectada por un pH alcalino de 7.5 o más alto. Si se agrega Bromo
a una solución de compuesto clorado se consiguen mejores resultados.
(MARRIOT,N.1999).
2.7.2.1.4 Fluor
El fluor en si mismo es inadecuado como desinfectante, pero el ácido-fluor-
silicoso y el difloruro de amonio tienen empleo en la industria alimentaría.
(WILDBRETT,G.2000).
47
TABLA #4. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE AMONIO CUATERNARIO COMO
DESINFECTANTE
VENTAJAS DESVENTAJAS
Incoloros e inodoros. Eficacia limitada frente a la mayoría
de los gérmenes Gram. -.
Estables en presencia de materia Incompatibles con detergentes
orgánica. sintéticos aniónicos.
Resistentes a la corrosión de Formación de película en la
metales. manipulación de alimentos y en el
equipo procesador de estos.
Estables ante fluctuaciones de
temperatura.
No irritan la piel
No tóxicos.
Buenos surfactantes.
(MARRIOT,N.1999).
VENTAJAS DESVENTAJAS
Neutralizan el exceso de alcalinidad, Cuando aumenta el pH no son tan
después de aplicar el limpiador. eficaces contra termofilos
Evitan la formación de depósitos Pierden toda su eficacia contra
alcalinos. residuos alcalinos o surfactantes
catiónicos.
48
Reaccionan con las bacterias debido
a que poseen diferente carga.
De acción rápida contra levaduras y
virus
Tiene propiedades humectantes por
lo tanto no corroe.
No son afectados por aguas duras ni
materia orgánica.
(MARRIOT,N.1999).
2.7.2.4 Biguanidas
Son derivados de la guanidina, una sustancia que se encuentra en forma
natural en vegetales y cereales. El grupo incluye un pequeño numero de
materiales que han sido identificados como poseedores de propiedades
bactericidas. Estos son bis-guanidinas o biguanidas poliméricas. Solamente
las biguanidas poliméricas tienen un uso significativo en la desinfección de
plantas de alimentos.(GTC 85.2003)
Estos materiales no son tensioactivos y son esencialmente no espumantes,
no corrosivos y no irritantes. Se pueden usar solos para desinfección manual,
por circulación o por atomización. La baja corrosividad de las biguanidas para
la mayoría de los materiales, permite el uso de tiempos de contacto
prolongados.
Las biguanidas se desactivan en contacto con los materiales aniónicos y con
el cloro. .(GTC 85.2003)
Las biguanidas se precipitan con hidróxido de sodio (soda cáustica) y otros
álcalis tales como silicatos y carbonatos, y por lo tanto no se debería permitir
su mezcla con estos agentes químicos. .(GTC 85.2003)
49
2.7.2.4.1.2 Formula:
((CH2)3 – NH – C – NH – C – NH - (CH2)3)n - HCl
NH NH
2.7.2.4.1.3 Datos Físicos
El PHMB se presenta generalmente en forma de solución acuosa, incolora o
amarillenta. Es termoestable y no volátil, de carácter cationico y soluble en
todas las proporciones de agua. Es incompatible con bases como el
hidróxido de sodio, el metasilicato de sodio, tensoactivos aniónicos y
proteínas.
Los aceros inoxidables, las aleaciones de Aluminio, el acero estañado, el
cobre estañado y el níquel no son afectados. (LEVEAU J. 2002)
2.7.2.4.1.5 Toxicidad
DL 50 Ratón vía oral: 2500 mg/kg
El PHMB es irritante en solución concentrada , es un principio poco agresivo
para la piel y las mucosas en las dosis de empleo y bien tolerado por el
hombre. (LEVEAU J. 2002)
2.7.2.4.1.6 Usos
Debido al débil espectro antimicrobiano se necesita de asociaciones con
principios activos pero esta es una operación delicada debido a la
incompatibilidad con las demás familias antimicrobianas. (LEVEAU J. 2002)
50
TABLA #6. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DEL PHMB COMO DESINFECTANTE
VENTAJAS DESVENTAJAS
Bactericida No funguicida, virucida y esporicida
Poco toxico Incompatibilidades químicas
No espumante Costo elevado
No corrosivo
Ausencia de olor
Buena tolerancia cutánea
(LEVEAU J. 2002)
51
2.7.3.1 Compuestos Clorados
El ácido hipocloroso mata a la célula microbiana impidiendo la oxidación de
la glucosa, oxidando con el cloro los grupos sufihidrilos de ciertas enzimas
importantes en el metabolismo hidrocarbonado. (MARRIOT,N.1999).
Además se ha observado que interrumpe la síntesis proteica,
descarboxilación oxidativa de aminoácidos y aldehídos , reacciones con
ácidos nucleicos, purinas y pirimidinas, desequilibrio metabólico consecuente
con la destrucción de enzimas claves, inducción de alteraciones del ácido
(DNA) con la subsiguiente perdida de la capacidad de transformar el DNA ,
inhibición del aprovechamiento de oxigeno y de la fosforilación oxidativa,
acompañado de la perdida de algunas macromoléculas, formación de
derivados tóxicos N-cloro de citosina y producción de aberraciones
cromosomicas. (MARRIOT,N.1999).
Además se ha comprobado que los compuestos liberadores de Cloro
estimulan la germinación de esporas para a continuación inactivar la espora
germinada. Las esporas bacterianas son más resistentes a los hipocloritos
que las células vegetativas. El tiempo necesario para una reducción del 90%
de la población microbiana puede oscilar de unos 7 seg. A más de 20 min. La
concentración de Cloro libre disponible requerida para inactivar esporas
bacterianas es de aproximadamente de 10 a 1.000 veces mayor que para
células vegetativas. (MARRIOT,N.1999).
52
2.7.3.3 Compuestos de Amonio Cuaternario
La naturaleza superficieactiva del quat envuelve y cubre la membrana
exterior de la célula microbiana, con el trastorno funcional de la pared y
subsiguiente salida de corpúsculos internos e inhibición enzimática.
Además forman una película bacteriostática tras ser aplicados en las
superficies. Los quats no matan las esporas bacterianas pero inhiben su
crecimiento. (MARRIOT,N.1999).
53
- Precipitación de elementos del citoplasma por formación de complejos
que poseen funciones fosfato como el ATP y los ácidos nucleicos. (Mc
Donell G. 1999)
- No es esporicida, es esporoestatico, inhibe el crecimiento de las
esporas pero no su germinación, es decir inhibe la formación del
cortex entre la membrana interna y externa antes de que se de la
maduración y liberación de la espora (RUSELL,A.1990).
- En cuanto a las levaduras causa lisis del protoplasto y salida de
material intracelular, altas concentraciones causan coagulación
intracelular.(Mc Donell G. 1999).
54
descuidado no contribuirá a la higiene de los alimentos y productos
relacionados.
55
La mayor dilución del desinfectante que mate a los microorganismos en 10
min pero no en 5 se divide por la dilución mayor del fenol que de los mismos
resultados. El número que se obtiene de esta división es el coeficiente
fenolico de la sustancia probada. (PELCZAR,M.1994)
56
2.8.1.4 Método de Siembra por estrías
Se prepara para cada ensayo una serie de tres diluciones del desinfectante a
concentraciones por encima y debajo de las recomendadas por el fabricante,
usando agua purificada proveniente de la planta de producción.
Se toman 2.0 ml de cada concentración del producto y a esta se le agregan
0.2 ml de la suspensión bacteriana según el tubo # 2 de Mac Farland. Los
tiempos de contacto microorganismo-desinfectante varían.
Pasado cada uno de los tiempos de contacto se procede a sembrar con asa
calibrada por estrias haciendo trazos sobre la superficie del Agar Tripticasa
de Soya o Agar OGY.
Se toma como control la suspensión bacteriana que no tiene contacto con el
desinfectante.
Posteriormente se incuban las cajas a 35ºC por 48 h y los hongos a 25ºC
por 5 días.
Finalmente se interpreta el crecimiento de las estrias, cada una tiene un valor
de 25% así se expresara en % de efectividad de 0 a 100% donde el 100%
significa la ausencia se estrias excepto las del control. (CARRASCAL,A. 2003)
57
3. JUSTIFICACIÓN
58
4. MATERIALES Y METODOS
4.1.2 Muestreo
El estudio se llevo a cabó con seis muestreos, donde se enfrentaron 5
microorganismos: E.coli, S.aureus, B.subtillis, C.albicans y A.niger ante
tres concentraciones diferentes del desinfectante: a la mitad de la
concentración recomendada, a la concentración recomendada y al doble de
la concentración recomendada, exponiéndolos a tres tiempos diferentes: 2,5
y 10 minutos.
4.1.3 Variables
59
donde se realizaron los seis muestreos en los meses de Agosto y
Septiembre.
60
5. OBJETIVOS
5.1 GENERAL
5.2 ESPECIFICOS
61
6. METODOLOGÍA
6.1 MUESTREO
62
6.4 RECUPERACIÓN DE MICROORGANISMOS LIOFILIZADOS
6.4.1 Las cepas liofilizadas se recuperaron según los protocolos descritos por
la casa comercial .
6.4.2 Se realizaron 2 subcultivos y pruebas de pureza mediante la coloración
de gram y azul de lactofenol antes de utilizar el aislamiento. (Ver Figuras 4-5-
6-7-8).
63
FIGURA 5. Aislamiento de Candida albicans
64
FIGURA 7. Aislamiento de Escherichia coli.
65
6.5 PREPARACIÓN DE LA DILUCIÓN DEL DESINFECTANTE
Para cada uno de los seis muestreos se prepararon las siguientes diluciones:
66
6.8 EVALUACIÓN DEL DESINFECTANTE LARK SANITIZER®.
6.8.5 Las cajas se dividieron en 4 segmentos donde por medio de estrías (4),
se sembraron las muestras a la mitad, a la recomendada y al doble de la
concentración y el control según se iban cumpliendo los tiempos 2 min, 5 min
y 10 min para cada microorganismo.
Este procedimiento de realizó para los seis muestreos.
6.8.6 Las cajas se incubaron a 22ºC por 5 días para Hongos y Levaduras y a
37ºC por 48 horas para bacterias.
67
6.10 ANALISIS ESTADÍSTICOS
Los datos se analizaron con la ayuda del programa estadístico SPSS versión
13.0, el cual al registrar los datos arrojó la media, desviación estándar y
análisis T-student, logrando correlacionar concentraciones del desinfectante
y tiempos de contacto que cumplieran con el porcentaje formulado en la
hipótesis propuesta.
68
7. RESULTADOS
69
Tabla 8 . Porcentaje de inhibición para S. aureus
7.1.2 Escherichia.coli
70
Tabla 9 . Porcentaje de inhibición para E.coli
71
Tabla 10 . Porcentaje de inhibición para B.subtillis
72
Tabla 11. Porcentaje de inhibición para C.albicans
73
Tabla 12 . Porcentaje de inhibición para A.niger
74
Tabla 13. Estadísticos descriptivos y T student para S. aureus con 2 min de
contacto con el desinfectante.
Estadística Descriptiva
Número de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Intervalo de
Grados confianza
de Sig. (1 y 2- Diferencia
T Libertad colas) de medias Bajo Alto
75
Tabla 14. Estadísticos descriptivos para S. aureus con 5 min de contacto con
el desinfectante.
Estadística Descriptiva
Numero
de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Intervalo de
Grados confianza
de Sig. (1 y 2- Diferencia
T libertad colas) de medias Bajo Alto
76
95%). Para la concentración 2% la media fue de 100 por lo tanto el
desinfectante fue efectivo en un 100%. (Ver tabla 14).
Estadistica Descriptiva
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Intervalo de
Grados confianza
de Sig. (1 y 2- Diferencia
t libertad colas) de medias Bajo Alto
77
(intervalo de confianza del 95%), por lo tanto el desinfectante fue efectivo en
un 100%. (Ver tabla 15).
120
100
80
% Inhibición
60
40
M itad co ncent.
20
Co ncent.
reco mendada
0 Do ble co ncent.
2min 5min 10min
Co ntro l
Tiem po
78
Tabla 16. Estadísticos descriptivos y T student para E.coli con 2 min de
contacto con el desinfectante.
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Intervalo de
Grados confianza
de Sig. (1 y 2- Diferencia
t Libertad colas) de medias Bajo Alto
79
microorganismo es mayor al 75% ya que p>0.05 (intervalo de confianza del
95%). Para la concentración 2% la media fue de 100 por lo tanto el
desinfectante fue efectivo en un 100%. (Ver tabla 16).
Tabla 17. Estadísticos descriptivos para E. coli con 5 min de contacto con el
desinfectante.
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Intervalo de
Grados confianza
de Sig. (1 y 2- Diferencia
t libertad colas) de medias Bajo Alto
80
desinfectante ante el microorganismo sea mayor al 75% ya que p<0.05
mientras que para la concentración 1% existe evidencia estadísticamente
significativa de que el porcentaje de inhibición del desinfectante ante el
microorganismo es mayor al 75% ya que p>0.05 (intervalo de confianza del
95%). Para la concentración 2% la media fue de 100 por lo tanto el
desinfectante fue efectivo en un 100%. (Ver tabla 17).
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Intervalo de
Grados confianza
de Sig. (1 y 2- Diferencia
t Libertad colas) de medias Bajo Alto
81
En la prueba de T student para la concentración 0.5% no existe evidencia
estadísticamente significativa de que el porcentaje de inhibición del
desinfectante ante el microorganismo sea mayor al 75% ya que p<0.05
mientras que para las concentraciones 1% y 2% existe evidencia
estadísticamente significativa de que el porcentaje de inhibición del
desinfectante ante el microorganismo es mayor al 75% ya que p>0.05
(intervalo de confianza del 95%), por lo tanto el desinfectante fue efectivo en
un 100%. (Ver tabla 18)
120
100
80
% Inhibición
60
40
M itad co ncent.
20
Co ncent.
reco mendada
0 Do ble co ncent.
2min 5min 10min
Co ntro l
Tiem po
82
Tabla 19 .Estadísticos descriptivos y T student para B.subtillis con 2 min de
contacto con el desinfectante.
Analisis Estadisticos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Análisis T-Student
Valor = 75
Grados
de Sig. (1 y 2- Diferencia 95% Intervalo de
t libertad colas) de medias confianza
Bajo Alto
83
desinfectante ante el microorganismo sea mayor al 75% ya que p<0.05
mientras que para la concentración 2% existe evidencia estadísticamente
significativa de que el porcentaje de inhibición del desinfectante ante el
microorganismo es mayor al 75% ya que p>0.05 (intervalo de confianza del
95%). (Ver tabla 19)
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Intervalo de
Grados confianza
de Sig. (1 y 2- Diferencia
t libertad colas) de medias Bajo Alto
84
En la prueba de T student para la concentración 0.5% no se realizó por tener
una media de 0, para las concentraciones 1% y 2% existe evidencia
estadísticamente significativa de que el porcentaje de inhibición del
desinfectante ante el microorganismo sea mayor al 75% ya que p<0.05
(intervalo de confianza del 95%). (Ver tabla 20).
Estadistica Descriptiva
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
85
PORCENTAJE DE INHIBICIÓN DEL DESINFECTANTE LARK SANITIZER
ANTE B.subtillis.
120
100
80
% Inhibición
60
40
M itad co ncent.
20
Co ncent.
reco mendada
0 Do ble co ncent.
2min 5min 10min
Co ntro l
Tiem po
86
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
95% Confidence
Interval of the
Grados Difference
de Sig. (1 y 2- Diferencia
t libertad colas) de medias Bajo Alto
87
Tabla 23. Estadísticos descriptivos para C. albicans con 5 min de contacto
con el desinfectante.
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media Estándar
Analisis T-Student
Valor = 75
Grados
de Sig. (1 y 2- Diferencia 95% Intervalo de
t libertad colas) de medias confianza
Bajo Alto
88
Tabla 24. Estadísticos descriptivos para C. albicans con 10 min de contacto
con el desinfectante.
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media Estándar
120
100
80
% Inhibición
60
40
M itad co ncent.
20
Co ncent.
reco mendada
0 Do ble co ncent.
2min 5min 10min
Co ntro l
Tiem po
89
7.2.5 Aspergillus niger
Estadisticos Descriptivos
Numero de Desviación
muestras Mínimo Máximo Media estándar
90
PORCENTAJE DE INHIBICIÓN DEL DESINFECTANTE LARK SANITIZER
ANTE A. niger.
120
100
80
% Inhibición
60
40
M itad co ncent.
20
Co ncent.
reco mendada
0 Do ble co ncent.
2min 5min 10min
Co ntro l
Tiem po
91
8. DISCUSIÓN
92
microorganismos que tal como observó en la revisión bibliografica
(MADIGAN,M.1991) se basa en la rápida atracción del desinfectante con carga
positiva hacia la célula Gram. positiva con carga negativa en su superficie
gracias a los ácidos teicóicos presentes en su pared celular , posteriormente
el desinfectante actúa contra los fosfolipidos presentes en la membrana
citoplasmática inactivándola, destruyendo la integridad de la célula
liberándose al medio componentes que la integran, afectando el ATP y
ácidos nucleicos compuestos de grupos fosfato (Mac Donell,G.1999)
93
galactosa-n-acetilglucosamina y fosfato (MADIGAN,M.1991). Así el
desinfectante desestabiliza la membrana y se une a los iones fosfato pero
de la membrana citoplasmática que posee iones calcio y magnesio que
contribuyen a su estabilización a través de interacciones iónicas con los
grupos polares de carga negativa como el fósforo que al ser afectado por el
desinfectante rompe estos enlaces acabando con la estabilidad de la
membrana y permitiendo la fuga de componentes como el potasio e
interactuando con componentes que poseen la función fosfato como el ATP y
los ácidos nucleicos (Mc Donell,G.1999), generando la muerte celular.
94
las concentraciones el desinfectante ejerció su acción contra las esporas
impidiendo la formación del cortex entre la membrana interna y externa antes
de la maduración y liberación de la espora madura. (RUSELL,A.1990),
impidiendo nuevamente su desarrollo en el medio de cultivo propuesto para
desarrollar este estudio.
95
Los hongos son generalmente más resistentes que las levaduras y
considerablemente más resistentes que las bacterias no esporuladas. Las
esporas de los hongos son menos resistentes que las esporas bacterianas a
los agentes biocidas, (Mac Donell and Rusell. 1999)
Según los autores Mac Donall and Rusell estos microorganismos presentan
mecanismos de resistencia donde la célula presenta una barrera para reducir
la entrada de un agente microbiano; por esta razón se ha propuesto el uso de
este desinfectante a base de biguanidas poliméricas con otras soluciones
que no conlleven a su desactivación.
96
que es debida a la inhibición de la producción de metabolitos esenciales para
la rápida división celular. (Aldana-Sarasa. 1999).
97
9. CONCLUSIONES
98
10. RECOMENDACIONES
99
11. BIBLIOGRAFÍA
100
• HOBS B,1993 Higiene y toxicología de los alimentos. Ed. Acribia.
España..470 pag.
• IKEDA T. 1984. New polimeric biocides: Síntesis and antibacterial
activities of polications with pendant biguanide groups. Antimicrobial
agents and chemotherapy. 26 (2). 139-144.
• IKEDA T. 1986. New polimeric biocides: Polications biocides with
pendant active groups molecular weight dependence of antibacterial
activity. Antimicrobial agents and chemotherapy. 30 (1). 132-136
• JOKLINK W. 1986. Zinder Microbiología. 18 ED. Editorial Medica
Panamericana. Buenos Aires.
• LEVEAU J. 2002. Manual técnico de higiene. Limpieza y desinfección.
AMU Ediciones. Madrid España. 623 pag.
• MAC DONELL G.1999. Antiseptics and desinfectans: Activity, Action,
and Resistence. Clinical Microbiology Rewiews. 147-179 pag.
• MADIGAN M. 1991. Microbiología. Ed Prentice Hall. México. 67,69,75-
79 PAG.
• MARRIOT N.1999.Principios de Higiene Alimentaría. Ed Acribia. 416
pag.
• MERK. 2000. Microbiology Manual.
• MINISTERIO DE SALUD.1997. Buenas Practicas de Manufactura.
Decreto 3075.
• MINK W. 1991. El plástico en la industria. Segunda edición. México.
• PELZARC M. 1994. Microbiología. Segunda Edición. Ed Mac Graw
Hill. México.
• PINTO, Jorge y ULLOA, Juan.2000.Evaluación y validación de tres
desinfectantes para uso en superficies, un jabón liquido desinfectante
para manos y un gel desinfectante para manos en una empresa
farmacéutica. Tesis de pregrado. Pontificia Universidad Javeriana.
101
Facultad de ciencias. Departamento de microbiología. Bogota
Colombia.
• SENA. 1995. IV Seminario internacional de Procesos de
Transformación de plásticos por Inyección. Aplicaciones en materiales
de Ingenieria. Cali. Colombia. 718 pág.
• TORTORA, G. 1993. introducción a la microbiología. Ed Acribia.
Barcelona España. Pag 175-191.
• TYLER B. 2002. Actino of clorhexidine digluconato againts yeast and
filamentous forms in a early stages Candida albicans biofilm
antimicrobial agents and chemotherapy. 46 (11) 3522-3531.
• VIDALES M. 1995. El mundo del envase, manual para el diseño y
producción de envases y embalajes. Barcelona.
• WILBRETT G. 2000. Limpieza y desinfección en la industria
alimentaría. Ed. Acribia.
Recursos electronicos
102
12. ANEXOS
ANEXO A. IMÁGENES
103
FIGURA 11. Siembra en estría para B. subtillis.
104
FIGURA 13. Siembra en estría para Calbicans.
105
ANEXO B
Composición de los Medios de Cultivo
• Peptona de Caseina
• Peptona de soya
• Lactosa
• Cloruro de sodio
• Polisorbato
• Lecitina
• Agar-agar
106
EVALUACIÓN DE LA EFICACIA DEL DESINFECTANTE LARK SANITIZER®
EMPLEADO EN LAS AREAS DE ELABORACIÓN DE ENVASES Y TAPAS
PLÁSTICAS EN ECSI S.A.
107
Resumen
108
Abstract
The food and drink contaminate for microbial is a topic of big precaution
because the capacity that they have to affect the product, safety and the
acceptation for the client. Quality problems are associated directly with the
microbe contamination of primary ingredients before or during the product
process, or through of the pack. The mistakes in surety and safety are
commonly culprit of the contaminate and the loss product.
The purpose of this study was evaluate the disinfectants “Lark Sanitizer®”
used in cleaner and disinfections process of surface in the production rooms
of container and cover.
The technique used was sowing in groove, the inhibit percentage was
evaluate with the disinfectant with PHMB, opposite to 5 microbes with
property different: S. aureus, E. coli, B. subtillis, C. albicans and A. niger.
The efficacy was determinate with three concentrations : the middle,
recommend and the double recommended by the business house, further
more this concentrations were combine with three different times: 2-5-10
minutes.
109
1. Introducción
2. Materiales y métodos
2.2 Preparación de la dilución del desinfectante : Para cada uno de los seis
muestreos se prepararon las siguientes diluciones: A la mitad de la
concentración de la recomendada por el fabricante: 0.5 ml de desinfectante
Lark Sanitizer® y 50 ml de agua. A la dosis recomendada por el fabricante: 1
ml de desinfectante Lark Sanitizer® y 100 ml de agua. Al doble de la dosis
recomendada: 2 ml de desinfectante Lark Sanitizer® y 100 ml de agua.
110
2.4 Evaluación del desinfectante lark sanitizer®: Se tomaron 2ml de cada
concentración (a la mitad, a la recomendada y al doble) y del control (agua)
con pipetas estériles y se llevaron a cuatro tubos 13x100 para cada
microorganismo posteriormente se añadieron 0.2 ml de la suspensión de
cada una de las 5 cepas a las concentraciones y al control. Se agitaron los
tubos y a partir de este momento se empezó a contabilizar 2 min, 5 min y 10
min. Luego se sembró por el método de estrías en las cajas con los medios
de cultivo OGY para C.albicans y A.niger y Tripticasa de soya para
B.subtillis, E.coli y S.aureus.
Las cajas se incubaron a 22ºC por 5 días para Hongos y Levaduras y a 37ºC
por 48 horas para bacterias.
3. Resultados
3.1 S. aureus
111
tanto arrojo una desviación estándar de 0. En la prueba de T student para la
concentración 0.5% no existe evidencia estadísticamente significativa de que
el porcentaje de inhibición del desinfectante ante el microorganismo sea
mayor al 75% ya que p<0.05 mientras que para las concentraciones 1% y 2%
existe evidencia estadísticamente significativa de que el porcentaje de
inhibición del desinfectante ante el microorganismo es mayor al 75% ya que
p>0.05 (intervalo de confianza del 95%), por lo tanto el desinfectante fue
efectivo en un 100%.
3.2 E. coli
112
estadísticamente significativa de que el porcentaje de inhibición del
desinfectante ante el microorganismo es mayor al 75% ya que p>0.05
(intervalo de confianza del 95%), por lo tanto el desinfectante fue efectivo en
un 100%.
3.3 B. subtillis
3.4 C. albicans
113
En la prueba de T student para la concentración 0.5% no existe evidencia
estadísticamente significativa de que el porcentaje de inhibición del
desinfectante ante el microorganismo sea mayor al 75% ya que p<0.05
mientras que para la concentración 1% existe evidencia estadísticamente
significativa de que el porcentaje de inhibición del desinfectante ante el
microorganismo es mayor al 75% ya que p>0.05 (intervalo de confianza del
95%), para la concentración 2% no se realizó la prueba ya que el valor
arrojado para la desviación estándar corresponde a 0 por lo tanto no existía
diferencia de medias.
Con cinco minutos de contacto la media para la concentración 0.5% fue de
63.33 con una desviación estándar de 7.187 ,para la concentración 1% la
media fue de 75 y la desviación estándar de 0, para la concentración 2% la
media fue de 75 con una desviación estándar de 0 y el control obtuvo una
media de 100 con una desviación estándar de 0.
En la prueba de T student para la concentración 0.5% no existe evidencia
estadísticamente significativa de que el porcentaje de inhibición del
desinfectante ante el microorganismo sea mayor al 75% ya que p<0.05
(intervalo de confianza del 95%), para las concentraciones 1% y 2% no se
realizó la prueba ya que el valor arrojado para la desviación estándar
corresponde a 0 por lo tanto no existía diferencia de medias.
A los 10 minutos la media para la concentraciones 0.5%, 1%, 2% y el control
fue de 100 con una desviación estándar de 0 por lo tanto el desinfectante
tuvo un porcentaje de inhibición del 100% .
La prueba de T student no se realizó ya que los datos arrojaron una
desviación estándar de 0 por lo tanto no existía diferencia de medias.
3.5 A. niger
En los análisis descriptivos la media con los tiempos 2-5-10 min y para las
concentraciones 0.5%, 1%, 2% el control fue de 0 con una desviación
estándar de 0 por lo tanto el desinfectante tuvo un porcentaje de inhibición
del 0%. El control arrojo una media de 100% con una desviación estándar de
0.
La prueba de T student no se realizó ya que los datos arrojaron una
desviación estándar de 0 por lo tanto no existía diferencia de medias.
4. Discusión
4.1 S. aureus
114
generar resistencias, y alterar el mecanismo de acción sobre estos
microorganismos que se basa en la rápida atracción del desinfectante con
carga positiva hacia la célula Gram. positiva con carga negativa en su
superficie gracias a los ácidos teicoicos presentes en su pared celular ,
posteriormente el desinfectante actúa contra los fosfolipidos presentes en la
membrana citoplasmática inactivándola, destruyendo la integridad de la
célula liberándose al medio componentes que la integran, afectando el ATP
y ácidos nucleicos compuestos de grupos fosfato (Mac Donell,G.1999)
produciéndose la muerte celular.
4.2 E. coli
4.3 B.subtillis
115
4.4 C. albicans
Para causar la lisis del protoplasto y ocasionar la salida del material celular
(MAC DONELL G.1999) se deben manejar tiempos no mayores a cinco minutos
y concentraciones que no excedan la concentración recomendada por la
casa comercial 1% v/v.
4.5 A. niger
5. Agradecimientos
6. Literatura citada
116