UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

PRACTICA N°2: TÉCNICAS DE

CULTIVO

INTEGRANTES:
 Huaroc Canchari, Yesica
 Hurtado Calderón, Marcos
 Inga Levi, Gina
 Pinto Aquino, Ángela
 Salazar Eusebio, Aracely
 Tito Pillaca, Nancy

DOCENTE RESPONSABLE:
 Julio Ruiz Quiroz.
Lima – Perú
2019-I
I. OBJETIVOS

 Emplear adecuadamente las condiciones de siembra para un cultivo de

Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus epidermidis
 Conocer y emplear las diferentes técnicas de sembrado en diferentes
medios.
 Identificar el tipo de bacteria, la morfología, caracterización de las diferentes
bacterias en el sembrado en medio líquido, semisólido y sólido en
Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus epidermidis.

II. INTRODUCCIÓN:

Los medios de cultivo son los materiales nutritivos donde se desarrollan y

multiplican los microorganismos, los cuales contienen los nutrientes
necesarios para su crecimiento. La elección de este medio se basa en el
propósito del estudio, estos medios pueden ser sintéticos o complejos
donde hay por lo menos un componente de composición desconocida.

Los medios de cultivo pueden clasificarse según diferentes criterios:

 Por su estado físico

I. Líquidos: comúnmente llamados caldos, constituido por nutrientes en
solución acuosa.
II. Sólidos: llamados generalmente agar, estos medios son colocados en
cajas Petri o dejarlo solidificar en tubo inclinado. Para poder observar
sus características.
III. Semisólidos: son medios de cultivo liquido con el agregado de agar, se
utilizan para determinar la motilidad de los microrganismos.
 Por su origen
I. Naturales: Obtenidas a partir de sustancias naturales animales o
vegetales.
II. Sintéticos: compuesto por componentes químicamente definidos
III. Semisinteticos o complejos: Son medios sintéticos a los cuales se
agregan factores de crecimiento como extracto de levadura, carne o
vegetales.
 Por su utilidad
I. Comunes: contiene sustancias nutritivas mínimas para el crecimiento.
II. Enriquecidos: Favorecen el crecimiento de microorganismos exigentes.
III. Selectivos: Permiten el crecimiento de determinados microorganismos.
IV. Diferenciales: Permiten la diferenciación de colonias de
microrganismos semejantes
 Sembrar un microorganismo es colocar en un ambiente artificial apropiado para
que lleve a cabo su metabolismo, su desarrollo y reproducción. Las técnicas de
siembra varían según el estado físico del medio o las necesidades del
microorganismo.

Una condición básica de la siembra es que se realice bajo reglas de asepsia,

debido a que es indispensable evitar el crecimiento de otros microrganismos en
el ambiente de cultivo, otra condición es la temperatura de incubación; ya que los
gérmenes presentan diferentes temperaturas de desarrollo.

III. METODOLOGÍA

a) Técnica de sembrado por aislamiento

I. Medio líquido

Primero se Cerca al
esteriliza la Se toma la mechero se
asa muestra del siembra en el Incubar a 37°
colocandolo al microorganism tubo que por 24 horasy
borde de la o con el asa contiene al observar.
llama de circular caldo se agita
mechero. y se retira.
 II. Medio semisólido

se siembra en
Primero se
Se toma la el medio incubamos a
esteriliza la asa
muestra del semisolido por 37° por 24
colocandolo al
microorganismo donde ingresa horas y se
borde de la
con el asa tipo sale la aguja sin observa si es
llama de
aguja hacer movil o inmovil
mechero.
movimientos
 III. Medio sólido

incubamos a
Primero se
Se toma la 37° por 24
esteriliza la asa Se siembra en
muestra del horas y se
colocandolo al la placa petri de
microorganismo observa y
borde de la diferentes
con el asa describe la
llama de formas
circular morfologia de
mechero.
las colonias
 IV. RESULTADOS

Pseudomonas aeruginosa

Tabla 1: Cultivo de Pseudomonas aeruginosa en medio sólido, líquido y

semisólido

Medio sólido Medio líquido Medio semisólido

-Verde fluorescente -Turbidez -Móvil

-Borde ondulado -Película mucosa blanca
-Elevación convexa -Aeróbico

Medio sólido Medio líquido Medio semisólido

-Blanco -Turbidez lnmóvil
-Borde puntiforme y circular -Precipitado blanco
-Elevación plana -Anaeróbico
Staphylococcus epidermidis

Tabla 2: Cultivo de Staphylococcus epidermidis en medio sólido, líquido y

semisólido.
 V. DISCUSIÓN

 Según los resultados obtenidos de los medios de cultivo de

Pseudomonas aeruginosa en medio líquido se observó una película
mucosa blanca en el extremo superior de la solución lo cual comprueba
que es aeróbica. En el medio semisólido se observó que hubo desarrollo
difuso hacia fuera de la línea de sembrado lo que indica que es móvil,
esto se debe a la presencia de un flagelo polar, aunque también se han
encontrado con dos o tres flagelos. En el medio sólido el cultivo tenía
una coloración verde, esto se debe a la producción de pigmentos
fluorescentes como la pioverdina (pigmento amarillo verdoso), la
piocianina (pigmento azul hidrosoluble) y es menos frecuente la
piorrubina (pigmento rojo) o piomelanina (marrón negruzco) 3.

 En el caso de los cultivos de Staphylococcus epidermidis, en medio

líquido se observó turbidez y un precipitado blanco, comprobando que
es anaeróbico facultativo. En medio semisólido el cultivo creció en la
línea de siembra, indicando que es inmóvil, ya que Staphylococcus
epidermidis carece de flagelo. En medio sólido se observaron colonias
de color blanco y con elevación plana, pero según Salyers A. las
colonias tienen elevación elevada 4, estas diferencias de resultados
pudieron deberse al error de observación de los miembros de nuestro
grupo. Las colonias de Staphylococcus epidermidis también se
caracterizan por ser puntiformes y de borde entero, lo que concuerda
con la información de CEPARIO UNICACH(Cepas microbiológicas de la
Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas)5.

VI. CONCLUSIONES

 Se realizaron siembras en condiciones asepticas de Pseudomonas

aeruginosa y Staphylococcus epidermidis en diferentes medios de cultivo
como líquido, semisólido y sólido.
 Se observaron las características de los microorganismos de Pseudomonas
aeruginosa y Staphylococcus epidermidis en medíos de cultivo líquido,
semisólido y la morfología de las colonias en medio sólido.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Olivas E, Alarcón L. Manual de prácticas de Microbiología básica y

Microbiología de alimentos. 1ra ed. Ciudad Juárez: UACJ. 2004.
2. Negroni M. Microbiología Estomatológica. 2da ed. Buenos Aires: Editorial
Médica panamericana; 2009.
3. Montero M. Pseudomonas aeruginosa multirresistente: aspectos
epidemiológicos, clínicos y terapéuticos. España: Universidad Autónoma de
Barcelona;2012. pp. 9-10
4. Salyers, A. Patogenia bacteriana: un enfoque molecular. 2ª ed. Washington;
2002.

5. CEPARIO UNICACH(Cepas microbiológicas de la Universidad de Ciencias

y Artes de Chiapas). Staphylococcus epidermidis [Internet].Disponible en :
https://cepariounicach.wordpress.com/2014/10/03/staphylococcus-
epidermidis/