CULTIVO DE MICROORGANISMOS EN

MEDIO DE CULTIVO
CULTIVATION OF MICROORGANISMS IN CULTURE
WALDO JOSÉ FLORES MAMANI
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO-FACULTAD DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS, Programa de Microbiología, Puno-Perú.
waldo_jose@hotmail.com

RESUMEN
Esta práctica se realizó en el laboratorio de Biotecnología de la Facultad de Ciencias
Biológicas de la Universidad Nacional del Altiplano a fecha 28 de marzo de 2019 con el
fin de cultivar diferentes microrganismos en un medio de cultivo sólido en este caso
Agar Manitol Salado, donde se utilizó el método de cultivo de aislamiento por estrías,
donde se sembró los diferentes microorganismo de muestras de orina y restos de piel,
por medio de un procedimiento adecuado se consiguió ver el crecimiento de
poblaciones de posibles muestras de Staphilococus sp. En conclusión se llegó a realizar
el correcto proceso de cultivo de microorganismos logrando así el crecimiento de
poblaciones de las diferentes muestras.

PALABRAS CLAVE: Cultivo, Siembra, Asa, Estrias, Estéril.

ABSTRACT
This practice was carried out in the Biotechnology laboratory of the Faculty of
Biological Sciences of the National University of the Altiplano on March 28, 2019 in
order to cultivate different microorganisms in a solid culture medium in this case Salty
Mannitol Agar, where He used the method of cultivation of isolation by striae, where
the different microorganism of urine samples and skin remains was seeded, by means of
a suitable procedure it was possible to see the population growth of possible samples of
Staphilococus sp. In conclusion, the correct process of cultivation of microorganisms
was achieved, thus achieving the growth of populations of the different samples.

KEY WORDS: Cultivation, Sowing, Handle, Striae, Sterile.

INTRODUCCIÓN
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metabólica de los microorganismos es muy amplia; por
ello, la variedad de medios de cultivo es también muy grande, no existiendo un medio
de cultivo universal adecuado para todos ellos[ CITATION And10 \l 10250 ].  

Un cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones físicas,

químicas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada. En
general, podemos distinguir cultivos líquidos y sólidos en función de las características
del medio y cultivos discontinuos y continuos en función de la disponibilidad de
nutrientes en el medio[ CITATION Mad03 \l 10250 ].

Por lo expuesto anteriormente nos planteamos el objetivo de Aprender a cultivar de

manera correcta en el medio de Agar Manitol Salado, y observar las reacciones que
producen los organismos en el medio cuando se cultivan.

MARCO TEÓRICO
Aislamiento: Es la separación de un determinado microorganismo del resto de
microorganismos que le acompañan. El método más usual es la siembra por estría
simple  sobre un medio de cultivo solido adecuado dispuesta en una placa
Petri[ CITATION Pas92 \l 10250 ].

 Para ello se toma una pequeña cantidad de muestra con un asa de platino y se reparte
sobre la superficie del medio de cultivo. Sobre el medio quedan separadas
e inmovilizadas las células bacterianas. Tras la incubación en condiciones adecuadas,
cada célula viable  origina una colonia  visible resultado de sucesivas divisiones
celulares [ CITATION Bro96 \l 10250 ]. Cada colonia bacteriana tiene unas
características determinadas en cuanto a
suforma, borde, elevación, tamaño, consistencia, etc. Los tipos de bacterias presentes en
la muestra original son visibles como tipos diferentes de colonias. A partir de colonias
separadas suficientemente es posible obtener un cultivo puro de cada uno de los tipos de
bacterias presentes en la muestra original[ CITATION San12 \l 10250 ].

Estría Múltiples mediante esta técnica se obtiene colonias aisladas a partir de una
muestra que contenga un elevado número de gérmenes [ CITATION Mic04 \l 10250 ].
  

Figura 1. Resultado de aislamiento

mediante técnica de estría múltiple.
Encontrado en:
http://www.academia.edu/11620994/T
%C3%A9cnicas_de_siembra  

En la técnica de los Cuatro cuadrantes se divide la placa en cuatro cuadrantes. Se

toma el inoculo y se siembra consecutivamente en 1–  2– 3– 4 .En el cuarto cuadrante,
al menos, obtendríamos colonias aisladas[ CITATION Mic04 \l 10250 ].

Figura 2. Aislamiento de
microorganismos
mediante la técnica delos
cuatro cuadrantes.:

http://www.academia.edu/11620994/T%C3%A9cnicas_de_siembra  
Aislamiento por agotamiento. La técnica por agotamiento es una de las más utilizadas
en el área de la microbiología [ CITATION Mal15 \l 10250 ], ya que permite ver el
desarrollo de colonias de forma aislada en zonas específicas del medio de cultivo, en
este informe se describe la técnica y los resultados obtenidos mediante esta[ CITATION
And10 \l 10250 ].

Figura 3. Aislamiento de microorganismos

mediante la técnica de Aislamiento por
agotamiento

Disponible en:
http://www.academia.edu/11620994/T
%C3%A9cnicas_de_siembra 

METODOLOGÍA

MATERIALES
BIOSEGURIDAD

- Mandil
- Barbijo
- Gorra
- Guantes quirúrgicos
- Gafas de laboratorio

PARA EL CULTIVO

- Medio de cultivo ya preparado (Agar Manitol Salado)

- Asa de siembra
- Mecheros (3)
- Muestras Biológicas (Orina y Restos de tejido de piel)
MÉTODO
Para realizar la siembra bacteriana en el medio de cultivo (Agar Manitol
Salado), mediante la técnica de siembra por agotamiento, a partir de muestras de orina y
restos de piel, se procedió de la siguiente manera: 

Con un asa redonda, previamente esterilizada por calentamiento del alambre hasta el
rojo vivo en el mechero, se tomó una muestra del cultivo de microorganismos.

Luego se extendió sobre un área pequeña de la superficie de la caja con Agar Manitol
Salado, para hacer una línea recta en posición vertical, para luego hacer unas estrías por
toda esta línea no muy juntas y sin tratar de dañar el Agar; este procedimiento se dio
para las muestras de orina.

Para la muestra de restos de piel primero se tomó la muestra con un hisopo esterilizado
directo de la piel de un individuo para luego ser colocado en la placa donde se colocó
sobre una pequeña área dela superficie del agar para hacer una línea recta en posición
vertical, para luego hacer unas estrías por toda esta línea no muy juntas y sin tratar de
dañar el Agar.

Para los tubos de ensayo nuevamente se flamea el asa en este caso de punta, se enfría, y
se coge pequeña parte de muestra para luego llevarla al tubo de ensayo donde se hace
solo el trazo de estrías, sin dañar el agar esto para la muestra de Orina.

Para la muestra de restos de piel se utiliza un nuevo hisopo esterilizado se coge la

muestra del individuo y se realiza las estrías en el tubo de ensayo con el agar todo cerca
a los mecheros para que no ocurra una contaminación.

Después de ello, tanto cajas como tubos de ensayos ya cultivados tuvieron que ser
cubiertos por una capa de plasticraft para que no ocurra una contaminación durante el
proceso de maduración de las muestras sembradas.

Finalmente se llevó a Incubar las cajas y los tubos de ensayo, en posición invertida, a 37
° C aprox. Durante 48 horas.

RESULTADO
Como resultado en los cultivos de Orina, se logró ver el crecimiento de una población
de organismos además que el color del Agar cambio el tono de Rojo Fenol a un
Amarillo Pálido demostrando que los microorganismos fueron capaces de fermentar en
Manitol posiblemente sea una especie de Staphilococcus sp. O una muestra E. Coli.
Mientras en las muestras de restos de piel también hubo cierto crecimiento aunque no se
mostró el cambio de color a un amarillo palido. En caso de los tubos de ensayo solo
creció el cultivo de microorganismos en caso de los restos de piel mas no sin embargo
encontrándose el cambio de color del Agar.

Figura 4. Tubo de ensayo con crecimiento de

microorganismos.

Fuente: Quispe, 2019.

Figura 5. Placas con Crecimiento de

microorganismos sacados de restos de piel.

Fuente: Quispe, 2019.

Figura 6. Placa Petri con posible crecimiento de una especie de Staphilococcus sp.
DISCUSIÓN

Cuadro
01. Medio de cultivo Agar Manitol Salado

Como se muestra en el cuadro hecho por la corporación Britania [ CITATION BRI12 \l

10250 ] demuestra que el cambio de color de Rojo a uno Amarillento posiblemente se
deba a la especie de Staphylococcus aureus y en caso de las muestras en donde no hay
un cambio de color pero si presencia ce crecimiento de microorganismos pueda deberse
a la especie de Sthaphylococcus epidermis.

CONCLUSIÓN
En conclusión se llegó a desarrollar el correcto cultivo de microorganismos en el medio
de Agar Manitol Salado evitando la proliferación de agentes externos contaminantes
además de observar el crecimiento de las microorganismos de las diferentes muestras
biológicas caso nuestro Orina y Restos de piel, consecuentemente se observó las
reacciones que producen los organismos en el medio cuando se cultivan encontrándose
tanto el cambio de color de un rojo a un amarillo pálido donde existió el crecimiento de
microorganismos como también se encontró el desarrollo de microorganismos pero sin
la necesidad de hallarse el cambio de coloración antes presentado.

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
x

1. Andueza FD. Microbiología del agua. Riobamba:; 2010.

2. Madigan M. Libro Brock Biología de los Microorganismos 10a edición: editorial

Pearson; 2003.

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 Santos S.A.; 1992.

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1996.

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https://es.slideshare.net/tmfvidal/medios-de-cultivo-mtodos-de-siembra.

6. Michael T. Madigan JMJ. Biología de los microorganismos. Mexico:; 2004.

7. Malajovich MA. INTRODUCCION A LAS TECNICAS MICROBIOLOGICAS.

[Online].; 2015 [cited 2019 Abril 12. Available from:
https://bteduc.com/roteiros_es/2015_Tecnicas_microbiologicas.pdf.

8. BRITANIA. MANITOL AGAR SALADO. [Online].; 2012. Available from:

https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2ed6c53aed1.pdf.