Laboratorio N°1 de Bioanálisis Clínico I: “Valoración Volumétrica”

Objetivos del práctico:

Al término del práctico el alumno será capaz de:

a) Determinar la concentración desconocida de un compuesto a partir de otras

concentraciones y volúmenes conocidos.
b) Realizar correctamente titulaciones.
c) Reconocer distintos tipos de indicadores y sus respectivos rangos de pH.

INTRODUCCIÓN:

La valoración volumétrica o conocido como análisis volumétrico es una técnica analítica

que nos permite determinar la concentración de una solución. Consiste en medir el
volumen de una solución de concentración conocida, que reacciona con una cantidad fija
de la solución de concentración desconocida, este proceso se llama valorar.

El punto final de una titulación se alcanza cuando han reaccionado cantidades

equivalentes de reactivo de concentración conocida y de la sustancia que se valora. Esta
situación corresponde al punto de equivalencia o punto estequiométrico.
Como la normalidad de una solución corresponde al número de equivalentes tenemos
que:
V1 x N1 = V2 x N2

Para que una reacción pueda usarse en análisis volumétrico debe cumplir las siguientes
condiciones:
a) La reacción debe ocurrir de acuerdo a una ecuación química definida. No debe
haber reacciones secundarias.
b) La reacción debe terminar por completo en el punto de equivalencia. Esto quiere
decir que la constante de equilibrio debe ser muy grande
c) El punto de equivalencia debe visualizarse mediante algún cambio en las
propiedades físicas y químicas de la solución ya sea con el uso de indicadores o
métodos instrumentales.
d) Es conveniente que la reacción sea rápida para que la titulación pueda realizarse
en unos cuantos minutos.
e) Otras sustancias presentes en la solución no deben reaccionar o interferir con la
reacción principal.

Para valorar bases se usan entre otros, el ftalato de potasio (KHP) y el ác. Oxálico
dihidratado. Para los ácidos se puede usar Na2SO3, bicarbonato de potasio, bitartrato de
potasio, yodato de potasio, oxido mercúrico o bien oxalato de sodio. También pueden
estandarizarse mediante la titulación con soluciones de álcalis (NaOH) de titulo
exactamente conocido; ese último método se usara en el laboratorio para estandarizar el
HCl preparado aproximadamente al 0,01 N.

Un mol de CH3COOH y HCl pueden ser neutralizadas por la misma cantidad de base
fuerte, de acuerdo a esto podemos decir que, un litro de cualquier ácido fuerte 1N
neutralizará exactamente 1 litro de cualquier base fuerte 1N para formar sal y H2O (pH7).
Cabe resaltar que no siempre se va a obtener una solución de sal de pH7, esto depende de
los tipos de ácidos y bases que se emplean y a esto se refiere a mezclar bases fuertes con
ácidos débiles o viceversa. Siendo este el caso, los ácidos fuertes junto con las bases
débiles producirán una solución salina con un pH menor a 7 (alrededor de 5), mientras
que los ácidos débiles junto con las bases fuertes darán como resultado una solución
salina de pH mayor a 7 (alrededor de 9).
Indicadores:

Indicador Zona de viraje Ph Cambios de color

Fenolftaleína 8.0 – 9.8 Incoloro – Rosado
Rojo de metilo 4.4 – 6.3 Rojo – Amarillo
Azul de bromotimol 8.0 – 9.6 Amarillo – Azul

Parte experimental

A) Titulación de una solución patrón:

1) Con una pipeta de 5ml limpia y seca pipetee 5 ml de la solución acido patrón KHP
0,1 N dentro de un matraz Erlenmeyer.
2) Agregue 12.5 ml de agua destilada y luego 4 gotas de fenolftaleína.
3) Extraiga 10 ml de Hidróxido de Sodio (NaOH 0,1N) en una pipeta de 10 ml y vierta
lentamente gota a gota en el mismo matraz agitándolo constantemente (para
valorar la solución ácida) hasta que la solución de una coloración rosada
persistente. Este color se hace más visible si se coloca un papel blanco debajo del
matraz.
4) Apunte la lectura de la pipeta.
Repita la titulación, ya que cada valoración se debe hacer por duplicado.

Estandarización del NaOH 1ra titulación 2da titulación

Lectura inicial de la pipeta (NaOH) 10ml 10ml

Lectura final de la pipeta (NaOH) 5,9ml 5,6ml

Volumen del ácido patrón utilizado (ml) 5ml 5ml

Normalidad del NaOH 0,1136N 0,1136

NORMALIDAD DEL ACIDO PATRON: ______0.1N___________

1ra titulación 2da titulación
V1 X N2 = V2 X N2 V1 x N1 = V2 x N2
5ml x 0,1N = 4,1ml X N2 5mL X 0,1N = 4,4ml X N2
0.5mlN/4,1ml = N2 0,5 mlN/4,4 ml = N2
0,1219mlN = N2 0,1136N = N2

Titulación de ácido – base

 Repetir el procedimiento anterior, reemplazando el ácido patrón por las soluciones
desconocidos ( ácido clorhídrico, ácido acético, hidróxido de amonio y vinagre blanco)

Muestra Indicador ml gastados de Normalidad de la

solución titulante solución titulada
1) HCl (Titulación de un 1.-0,6ml 1.-
acido fuerte(HCl) con Fenolftaleína 2.-0,5ml 2.- 0.01136N
una base fuerte
1.-0,75ml 1.-
(NaOH))
Azul de bromotimol 2.-0,6ml 2.- 0.013956N
2) Ácido acético 1.-5,5ml 1.-
Titulación de un ácido Fenolftaleína 2.-5,0ml 2.- 0.1136N
débil (CH3COOH) con
1.-5,0ml 1.-
una base fuerte (NaOH)
Azul de bromotimol 2.-4,9ml 2.- 0.013956N
3) Ácido Clorhidrico 1.-0.5ml 1.-
Titulación de un ácido Fenolftaleína 2.-0,4ml 2.- 0.1113N
fuerte (HCl) con una 1.-0,41ml 1.-
base débil NH4OH Rojo de metilo 2.-0,4ml 2.- 0.174N
4) NaOH Titulación 1.-0,65ml 1.-
base fuerte (NaOH) Fenolftaleína 2.-0,6ml 2.- 0.013632N
con vinagre blanco 1.-1,5ml 1.-
Rojo de metilo 2.-1,1ml 2.- 0.0204N

1) HCl (Titulación de un 5ml X N1 = 0,5ml X 0,1136N

acido fuerte(HCl) con Fenolftaleína
N1 = 0.0568mlN/5ml
una base fuerte
(NaOH)) N1==0,6ml
5ml X N1 0.01136 N
X 0,1136N
Azul de bromotimol
N1 = 0.06978mlN/5ml
2) Ácido acético N1 = 0.013956N
5ml X N1 = 5,0ml X 0,1136N
Titulación de un ácido Fenolftaleína
débil (CH3COOH) con N1 = 0.568mlN/5ml
una base fuerte 5ml X N1 = 4,9ml X 0,1136N N1 = 0.1136N
Azul de bromotimol
(NaOH) N1 = 0.5566mlN/5ml
3) Ácido Clorhidrico 5ml X 0.013956 N =N0,4ml X N2
N1 = 0.1113
Titulación de un ácido Fenolftaleína
fuerte (HCl) con una 0.06978mlN/0.4ml=N2
5mL X 0.013956N = 0,4ml X N2
base débil NH4OH Rojo de metilo 0.174N = N2
0.06978mlN/0.4ml=N2
4) NaOH Titulación Fenolftaleína 0,1136N
0,6ml X0.174 = 5mL X N2
N = N2
0.06978mlN/0,5ml = N2
base fuerte (NaOH)
0.013632N = N2
con vinagre blanco Rojo de metilo 0,9ml X 0,1136N = 5mL X N2
0,10224mlN/5ml = N2
0.0204N = N2

Siempre elegir el indicador que este lo más cerca posible del pH en que se obtendrá el punto de
equivalencia, ya que el punto de equivalencia se obtendrá de acuerdo con el indicador utilizado y
al tipo de reactantes presentes en la muestra donde este será añadido.

indicadores
MUESTRAS FENOFTALEÍNA Azul de bromotimol Rojo de metilo

1) HCl (Titulación de un acido Viraje incoloro a rosa Viraje amarillo a

fuerte(HCl) con una base fuerte pálido a los 0.5ml de verde a los 0.9ml de
(NaOH)) adición titulante adición titulante
2) Ácido acético Titulación de Viraje incoloro a rosa Viraje amarillo a
un ácido débil (CH3COOH) con pálido, a los 5ml de verde a los 4.9ml de
una base fuerte (NaOH) adición titulante adición titulante
Viraje rojo a amarillo
a los 0.6ml de
adición titulante
Viraje rojo a amarillo
a los 0.9ml de
adición titulante
3) Ácido Clorhidrico Titulación
de un ácido fuerte (HCl) con
una base débil NH4OH
4) NaOH Titulación base
fuerte (NaOH) con vinagre
blanco
Viraje incoloro a rosa
pálido a los 0,4ml de
adición titulante
Viraje incoloro a rosa
pálido a los 5ml de
adición titulante