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Autor al que se le dirige la correspondencia:
Tel. (+574) 4159095 ext 117, fax 4112372.
E-mail: piedad.ganan@upb.edu.co (Piedad Gañán).
J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12
considerable. Pese al uso de aditivos que buscan unida a hemicelulosas, lignina y pectinas
incrementar la degradación de los materiales principalmente. La mayor parte de la celuosa de
sintéticos, la alternativa de emplear materias origen vegetal que se extrae a nivel mundial
primas de origen natural, buscando asegurar la procede de maderas, sin embargo en los últimos
biodegradabilidad, se convierte cada vez en una años otras especies vegetales no madereras e
mejor opción, pues estos compuestos cumplen incluso residuos agroindustriales se vienen
con los requerimientos que desde el punto de empleando, tal es el caso de los desechos de
vista ecológico se han establecido para una cultivos de cereales (Sun et al., 2004), o
adecuada disposición final del material. Estos Musaceas (Zuluaga et al., 2007). Es posible
criterios incluyen las siguientes etapas obtener celulosa de algas como la Valonia (Baker
(Albertsson, 1993; Arvanitoyannis et al., 1998): et al., 1997) o la actividad extracelular de
microorganismos como el Acetobacter,
1. Un tiempo de inducción durante el cual no se Agrobacteria, Rhizobia o Sarcina (Jung et al.,
presentan cambios en las propiedades. 2005). El tipo de fuente empleada condiciona
2. Al final del período de inducción puede tanto las características físicas como morfológicas
presentarse un acelerado estado de y mecánicas de la celulosa.
fragmentación.
3. En la etapa final se presenta una asimilación En el caso de la manosa, se encuentra conformada
de los productos de la fragmentación por el por unidades β-1,4-manosa. Es un material
ecosistema. abundante en la naturaleza y se encuentra como
homopolímero en los endospermas de plantas
Dentro de las potenciales materias primas que como Phytelephas Macrocarpa Palmae
permiten cumplir con estos requerimientos se (conocida en Colombia como Tagua y en otras
encuentran los polisacáridos de origen natural, regiones del mundo como marfil vegetal)
que gracias a las múltiples fuentes de los cuales combinado con celulosa y hemicelulosas en
pueden ser aislados, cuentan con una alta algunos casos. También se encuentra presente en
disponibilidad y un costo moderado. algas como Codiaceas o Dasycladaceas (Hori et
al., 2007) y semillas de leguminosas (Petkowicz
Sumado al desarrollo de materiales poliméricos o et al., 2001). Cuenta con dos fases, el tipo I se
composites, otros sectores como el alimenticio, el encuentra en la naturaleza en un alto estado
cosmético o el biomédico ven en este tipo de cristalino, en tanto que la tipo II es más
sustancias materias primas de calidad para el semicristalina. Pese que existen varios estudios
desarrollo de múltiples productos. En este sentido sobre su composición y morfología (Chanzy et.
Colombia debido tanto a su biodiversidad como a al., 1987, Hori et al., 2007, Kapoor et al., 1995)
su alta vocación agrícola, cuenta con un gran no existen mayor información sobre especies
potencial para el aprovechamiento o explotación producidas en Colombia, pues hasta el momento
de polisacáridos semicristalinos como la celulosa sus aplicaciones se encuentran orientadas al
y la manosa, los cuales pueden ser aislados bien desarrollo de artesanías. En el presente trabajo, se
sea de las paredes vegetales de las plantas o como exponen entonces los principales aspectos
producto de la actividad extracelular de relacionados con la composición química,
microorganismos como bacterias. Estos estructura cristalina y comportamiento térmico de
compuestos pueden ser ampliamente utilizados muestras de celulosa y manosa obtenidas de
bien sea como reforzantes de compuestos, en el fuentes naturales colombianas y que incluyen
caso de la celulosa, o como aditivo para pinturas, desechos agroindustriales de Musaceas, obtenidas
papel, cuero, textiles, pinturas, industria plástica, mediante los procesos fermentativos del
coméstica y de alimentos. Pese a lo anterior, hasta Acetobacter xylinum spp y de semillas maduras
ahora existen muy pocas referencias respecto al de Phytelephas Macrocarpa Palmae.
aislamiento o aún más utilización de este tipo de
compuestos obtenidos a partir de fuentes
colombianas (Zuluaga et al., 2007).
2. METOLOGÍA
La celulosa es un polímero semicristalino
homogéneo compuesto por unidades β-(1-4) 2.1. Materiales
glucosa. Su principal fuente son las paredes
celulares de las plantas, en donde se encuentra Las muestras analizadas proceden de dos fuentes:
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J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12
• Haces fibrosos extraídos de raquis de banano Para su análisis fueron lavadas cuidadosamente
(Musa AAB, variedades Valery y Gran utilizando agua destilada hasta alcanzar un pH
Enano) cultivadas en la región de Urabá neutro. La denominación para estas muestras en
(Colombia). el texto será B.
• La celulosa bacteriana fue obtenida de la Para realizar una adecuada caracterización, las
actividad extracelular del Acetobacter semillas de maduras de Phytelephas Macrocarpa
xylinum spp, tradicionalmente empleado para Palmae fueron sometidas a un vigoroso raspado
la elaboración de vinagre casero. mecánico utilizando herramientas tradicionales
• Semillas maduras de Phytelephas como sierras metálicas. El resultado fue un polvo
Macrocarpa Palmae recolectadas en la región blanco con un tamaño de malla de 240. Estas
norte del departamento de Chocó (Colombia) muestras serán denominadas en lo sucesivo como
y que tradicionalmente son empleadas para la T.
elaboración de productos artesanales.
2.3. Caracterización de los polisacáridos
2.2. Obtención de los polisacáridos
Los ensayos de espectroscopia infrarroja FTIR
Tras someterlos a un proceso de secado a 105 °C fueron realizados empleando un equipo marca
durante 24 h, los haces fibrosos de raquis de Nicolet 460 ESP. Al menos 20 barridos usando
banano obtenidos mediante extracción mecánica una resolución de 4 cm-1 fueron llevados cabo en
en un equipo de desfibrado mecánico dotado con cada una de las muestras. En cuanto al estudio de
cuchillas de acero, fueron sometidos a la acción la estructura cristalina, fue utilizado un
de diversos tratamientos químicos sucesivos, y difractómetro Rigaku Miniflex 3D/Max con una
que esencialmente son: radiación de Ni filtrada con CuKα en una
• Disposición de los haces fibrosos en una longitud de onda de 0,1542 nm. La unidad fue
solución de KOH al 5 % en peso durante 14 h operada a 40 kV y 30 mA, con un velocidad de
a temperatura ambiente. evaluación del ángulo de 5-50º a 2 º/min.
• Tras alcanzar un pH neutro, el precipitado se
dispone en una solución al 1 % en peso de El análisis térmico de las muestras fue realizado
NaClO2 a 70 ºC durante 1h. en un equipo de termogravimetría marca Metler
• El precipitado es nuevamente puesto en una Toledo TGA/SDTA85, utilizando atmósfera de
solución de solución al 5 % en peso de KOH nitrógeno y una velocidad de calentamiento de 10
durante 14 h a temperatura ambiente. °C/min.
• Los tratamientos químicos finalizan
Con miras a establecer el tamaño de las muestras
utilizando una solución de HCl al 1 % en
de celulosa aisladas, un microscopio de fuerza
peso a 80 ºC durante 2 h.
atómica marca Nanoscope IIIa (Digital
Instruments, Santa Barbara CA, USA) con una
Una vez el residuo final alcanza un pH neutro, es
cabeza multimodo fue utilizado para la muestra
sometido a la acción mecánica, utilizando un
R. Mientras que la celulosa bacterial, muestra B,
waring blender, durante varios minutos. Estas
fue analizado a través de micrografías realizadas
muestras serán denominadas en el resto del texto
en un microscopio electrónico de barrido, Jeol
como R.
JSM 5910 LV. Debido a la naturaleza no
conductora de las muestras, estas fueron
En el caso de la celulosa bacterial, una cepa de un
recubiertas con oro empleando un sputter coater.
precultivo elaborado a partir de Acetobacter
xylinum spp fue utilizada. Para ello, se realizó la
inoculación de 10 ml del sobrenadante de un 3. RESULTADOS
precultivo, la cual fue dispuesta en 1 l de sustrato
rico en glucosa, como el jugo de piña. El pH del Los espectros de los tres tipos de muestras
medio fue ajustado a 4,0 con ácido acético al 10 aisladas se presentan en la Fig. 1. En las tres
% con miras a estimular la producción de muestras existe una marcada presencia de los
celulosa. Este cultivo se realizó en condiciones grupos hidrófilos, especialmente en la región
estáticas, a temperatura ambiente y en un lugar entre 3400 y 3300 cm-1 así como alrededor de
oscuro. Las muestras de celulosa fueron extraídas 1650 cm-1, lo cual indica su tendencia a la
a partir del quinto día del montaje del cultivo. captación de humedad. En el caso de la muestra
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Transmitancia
En todas las muestras, bandas asociadas con la
celulosa tales como 1426 cm-1 relacionada con las B
observada corresponde a una de tipo ortorómbica antes tiene baja influencia en la degradación de la
(Hori et al., 2007). muestra. Se aprecia también que aún a 800 °C, la
pérdida de peso no es total, sugiriendo la
El comportamiento térmico de las muestras de presencia de impurezas, posiblemente sales.
polisacáridos aislados se presenta en la Fig. 3. La
muestra B, contiene una región de degradación En la micrografia por AFM de la Fig. 4 se
adicional cuando se compara con las demás, en observan microfibrillas de celulosa aisladas de
especial con la otra muestra de celulosa, en este raquis de banano. En este caso se aprecian tanto
caso vegetal denominada R. Es posible que esta microfibrillas individuales con diámetros
región de degradación se encuentre asociada con promedios entre 5 y 10 nm así como haces con
componentes no celulósicas tales como pectinas, diámetros entre 50 y 60 nm. La existencia de los
proteínas, ácidos nucleicos y demás restos de mismos, se encuentra asociada con la
membrana de las células bacteriales, siendo hemicelulosa residual presente en la muestra, tal
alguno de estos componentes observado antes en como se comentó antes. Haces fibrosos con
los ensayos de espectroscopia infrarroja (George diámetros del orden de 160 nm son observados en
et al., 2005). Estas sustancias pueden ser la micrografía obtenida mediante microscopía
removidas mediante la utilización de tratamientos SEM para la celulosa procedente de los cultivos
químicos que mejoren la pureza de la muestra de bacteriales. Es posible que a su vez estos se
celulosa. La primera región de degradación que se encuentren conformados por microfibrillas de
observa para todas las muestras se relaciona con menor tamaño, y que para obtenerlas es necesario
la tendencia a la captación de humedad, tal como emplear tratamientos químicos o mecánicos
se observo antes en los resultados obtenidos adicionales.
usando espectroscopia infrarroja. Respecto a la
tercera zona de pérdida en peso, para las muestras
R y B corresponde a la degradación de la
celulosa. Superada esta región, la muestra B
contiene un mayor nivel de residuos, esto puede
estar ligado a impurezas de carácter mineral
asociados al sustrato empleado para el cultivo y
que no fueron removidos por el proceso de
limpieza de la muestra.
100
R
Pérdida en peso (%)
40
20
10
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Adicionalmente, sobre la superficie de los haces Chanzy, H. Pérez, S., Millar, D., Paradossi, G. y
de microfibrillas de celulosa de la muestra B, ver W. Winter (1997). An electrón difraction study
Fig. 5, se aprecian sustancias con forma poco of mannan I. Crystal and molecular structure.
definida, a modo de recubrimiento, que se Macromolecules, 20: 2407-2413.
relacionan con los componentes no celulósicos Embuscado, M., Marks, J.y H. BeMiller (1994).
comentados antes. Bacterial cellulose. II. Optimization of
cellulose production by Acetobacter xylinum
through response surface methodology. Food
4. CONCLUSIONES Hydrocoll, 8:419-430.
George, J., Ramana, V., Sabapathy, N.,
En el presente trabajo dos tipos de polisacáridos, Jagannath, H. y S. Bawa (2005).
la celulosa y la manosa, obtenidos a partir de tres Characterization of chemically treated bacterial
tipos diferentes de fuentes naturales han sido (Acetobacter xylinum) biopolymer: Some
estudiados. Los diferentes resultados indican que thermo-mechanical properties. Int. J.
gracias a su estructura y características, estos Biological Macrom. Structure, Function and
polisacáridos pueden ser empleados para el Interactions, 37: 189-1945.
desarrollo de múltiples tipos de materiales bien Hori, R., Sugiyama, J. y M. Wada (2007). The
sea desde su desempeño térmico o mediante el thermal expansion of mannan I obtained from
aprovechamiento de sus estructuras cristalinas. ivory nuts. Carbohyd. Polym., 70: 298-303.
De otro lado, tratamientos químicos Jung, J., Park, J. y H. Chang (2005). Bacterial
principalmente, deben ser considerados con miras cellulose production by Glyconacetobacter
a incrementar la pureza de las muestras, en hansenii in an agitated culture without living
especial a las obtenidas a partir de la actividad non-cellulose producing cells. Enzyme Microb.
extracelular del Acetobacter xylium spp, en el Tech., 37: 347-354.
caso de la celulosa o de las semillas de Kacuráková, M., Smith, A., Gidley, M. y R.
Phytelephas Macrocarpa Palmae para la manosa. Wilson (2002). Molecular interactions in
bacterial cellulose composites studied by 1D
FT-IR and dynamic 2D FT-IR spectroscopy.
AGRADECIMIENTO Carbohyd. Polym., 37: 1145-1153.
Kapoor, V., Chanza, H. y F. Taravel (1995).
Los autores expresan su agradecimiento al CIDI- Research Note. X-ray diffraction studies on
UPB y Colciencias por el apoyo financiero al some seed galactomannans from India.
desarrollo de los proyectos de investigación cuyos Carbohyd. Polym., 27: 229-233.
resultados se presentan en este trabajo. Navarini, L. Gilli, R., Gombac, V, Abantangelo,
Igualmente a los estudiantes del programa de A., Bosco, M. y R. Toffanin (1999).
Ingeniería Mecánica por su motivación y esfuerzo Polysaccharides from hot water extracts of
para el desarrollo del mismo. roasted Coffea arabica beans: isolation and
characterization. Carbohyd. Polym., 40: 71–81.
Petkowicz, C., Reicher, F., Chanza, F., Taravel,
F. y R Vuong (2001). Linear mannan in the
REFERENCIAS
endosperm of Schizolobium amazonicum.
Albertsson, A. (1993). Degradable polymers. J Carbohyd. Polym., 44:107-112
Macromol. Sci. Part A., 9-10:757-765. Sun, X., Sun, R., Su, Y. y J. Sun. y M. Wada
Arvanitoyannis, I., Biliaderis, C., Ogawa, H. y N. (2004). Comparative study of crude and
Kawasaki (1998). Biodegradable films made purified cellulose from wheat straw. J. Agric.
from low density polyethylene (LDPE), rice Food Chem., 52: 839-847.
starch and potatio starch for food packaging Watanabe, K., Tabuchi, M., Morinaga, Y. y F.
applications: Part 1. Carbohyd. Polym., 36: 89- Yoshinaga (1998). Structural Features and
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Baker, A., Helbert, W. Sugiyama, J. y M. Miles Agitated Culture, Cellulose 5: 187–200.
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Microscopy of Native Valonia Cellulose I Mondragon, I.; Gañán, P. Cellulose
Microcrystals. J. Struct. Biol., 119: 129-138. microfibrils from banana farming residues:
isolation and characterization. Cellulose, 2007,
DOI 10.1007/s10570-007-9118-z.
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J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12
Jorge Saldarriaga
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