FACULTAD DE

INGENIERIA
DE PROCESOS
ESCUELA
PROFESIONAL
DE
INGENIERIA
QUIMICA

INVESTIGACION FORMATIVA
TEMA: ESPECTROSCOPIA UV

ASIGNATURA: ANALISIS INSTRUMENTAL 2

DOCENTE: ING. ARMANDO SALINAS SANCHEZ

INTEGRANTES:
 BILBAO ALFARO PAMELA KAREN
 CHAMBI AGUILAR FLOR EDITH
 CRUCES LLERENA KATHERINE FIORELLA
 LUQUE FLORES ROSEMARY DEL PILAR

AREQUIPA-PERU
2019
 INTRODUCCION
Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis) es una de las técnicas analíticas versátil y
capaz de detectar casi cualquier molécula. Con espectroscopia UV-Vis, la luz de UV-Vis
se pasa a través de una muestra y se mide la transmitancia de la luz por una muestra.
De la transmitancia (T), la absorbancia se puede calcular como A=-log (T). Un espectro
de absorbancia se obtiene la absorbancia de un compuesto en diferentes longitudes de
onda. La cantidad de la absorbancia a cualquier longitud de onda es debido a la
estructura química de la molécula.
UV-Vis se puede utilizar de una manera cualitativa, para identificar grupos funcionales
o confirmar la identidad de un compuesto haciendo coincidir el espectro de
absorbancia. También puede ser utilizado de manera cuantitativa, como concentración
del analito se relaciona la absorbancia con la ley de Beer. Espectroscopia UV-Vis se
utiliza para cuantificar la cantidad de ADN o proteínas en una muestra, para análisis de
aguas y como un detector para muchos tipos de cromatografía. Cinética de las
reacciones químicas se miden también con espectroscopia UV-Vis tomando medidas
repetidas de UV-Vis con el tiempo. UV-Vis son generalmente mediciones con un
espectrofotómetro. UV-Vis es también un detector muy popular para otras técnicas
analíticas como la cromatografía, pueden detectar muchos compuestos.
Por lo general, UV-Vis no es técnica de espectroscopia más sensible, porque no mucha
luz es absorbida sobre una longitud de ruta corta. Otras técnicas de espectroscopia
tales como de fluorescencia tienen mayor sensibilidad, pero no son aplicables, como la
mayoría de las moléculas no es fluorescente. UV-Vis tiene una sensibilidad similar a
otras mediciones de absorbancia, tales como espectroscopia de infrarrojo.
INDICE
 CAPITULO I
MARCO TEORICO
1.1 DEFINICION Y PRINCIPIOS BASICOS DE ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA

El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación

absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida
de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas
las sustancias pueden absorber energía radiante. El vidrio, que parece ser
completamente transparente, absorbe longitudes de onda que pertenecen al
espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del IR. La absorción de
las radiaciones UV, visibles e IR depende de la estructura de las moléculas, y es
característica para cada sustancia química. El color de las sustancias se debe a que
absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo
dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida. Esta
espectrofotometría utiliza radiaciones del campo UV de 80 a 400 nm,
principalmente de 200 a 400 nm (UV cercano) y de luz visible de 400 a 800 nm, por
lo que es de gran utilidad para caracterizar las soluciones en la región ultravioleta-
visible del espectro. Se rige por una ley muy importante: la ecuación de Beer-
Lambert.

Nos permite:
-Identificar sustancias químicas (análisis cualitativo)
-Determinar su concentración (análisis cuantitativo)

Espectro electromagnético:
-UV: 190-350 nm
-Visible: 350-800 nm ; en esta región del espectro la longitud de onda lleva
asociada diferentes colores.
La absorción de radiación UV-visible se basa en las transiciones electrónicas entre
niveles energéticos de los átomos de la muestra: Los electrones más externos
pueden saltar a otro orbital vacío de mayor nivel energético si se les comunica la
energía adecuada. La absorción de un fotón cuya Energía coincida exactamente
con la diferencia entre el Estado fundamental ( E° ) y el estado excitado ( E1).

El tiempo de vida de un átomo excitado por absorción de radiación es breve. La

energía radiante absorbida se disipa cuando el electrón vuelve a su órbita
fundamental a esto se denomina procesos de relajación.

Si hacemos un barrido espectral y representamos gráficamente la intensidad de

absorción de radiación, en función de longitud de onda de la radiación se
denomina huella dactilar que es único los espectros de absorción de cada
elemento, presentan máximos de energía, a longitud de onda característico y con
distinta intensidad.

- Análisis cualitativo: la localización de los máximos de energía en un espectro,

se puede identificar y diferenciar unos elementos de otros.

- Análisis cuantitativos: la intensidad de absorción de cada elemento. A su

longitud de onda característico, es mayor cuanto mayor sea su concentración.
1.2 COMPONENTES DE ESPECTROSCOPIA UV

1.2.1 Fuente de luz: Es una lámpara que emite una luz (por incandescencia de
un filamento) policromática, es decir que contiene distintas longitudes de onda con
distintas intensidades E°

1.2.2 Sistema óptico: A través de filtros, lentes y redes de difracción se focaliza el

haz de luz y se selecciona una longitud de onda fija.

1.2.3 Compartimiento muestra: Es donde se coloca la muestra, con un espesor

conocido, normalmente disuelta y en una cubeta de 1 cm de paso óptico, sobre la
que se hace incidir el haz de luz monocromática.

1.2.4 Sistema óptico: Recibe la luz transmitida por la muestra, la focaliza y

selecciona por longitudes de onda.

1.2.5 Detector: Recibe la señal de la intensidad de la luz transmitida a cada

longitud de onda y la transforma en señal eléctrica que un ordenador pueda
procesar.

Para realizar un espectro de un amuestra determinada se conecta la fuente de luz

que emite luz policromática, a través del sistema óptico irradia la muestra con luz
en un intervalo de λ y detectando cuanta de esa luz incidente I °, es transmitida I,
por la muestra a cada λ.
 Recta de calibrado

Seleccionando la longitud de onda máxima a la que absorbe la sustancia y

utilizando unas muestras patrón, de concentración conocida se obtiene los datos
de absorbancia frente a concentración , A vs [ ], que debidamente representados
dan lugar una recta (Ec. Lambert-Beer) de calibrado. A través de una recta de
calibrado este método sirve como análisis cuantitativo de una sustancia
determinada.

Para un amuestra de concentración desconocida se mide su absorbancia a la

longitud de onda del máximo y extrapolar en la curva de calibrado el valor de la
concentración.

1.3 TIPOS DE ESPECTROFOTOMETRO

1.3.1 Espectrofotómetro de doble haz: Es aquel que cuenta con dos

compartimientos para celdas de muestra que le permite medir
simultáneamente la cantidad de energía radiante absorbida por una matriz
(blanco) y la energía absorbida por la muestra compuesta por la matriz y la
especie de interés.

En estos aparatos el haz es dividido,

e incide tanto en la celda que
contiene el blanco como en la celda
que contiene la muestra. El
detector compara estas dos señales
continuamente o muchas veces en
un segundo y efectúa la lectura
relacionando la lectura de la
muestra con la lectura del blanco.
De esta manera se compensan las
fluctuaciones que pudiesen existir
por: ruido, variación de voltaje,
Fig. N° 1: Diagrama esquemático de un espectrofotómetro
de doble haz
 variación en la intensidad de la fuente luminosa, etc. Estos instrumentos son
más complicados y costosos.
1.3.2 Espectrofotómetro de haz simple: Cuenta con un único compartimiento de
celda con lo cual se debe realizar la medida de absorción del “blanco” para
poder registrar un cero (o referencia) y luego medir la absorción de la muestra.

En este tipo de instrumentos se requiere de calibrar el aparato a cero de

absorbancia (o 100% de transmitancia) con el blanco. Una vez ajustado se retira
la celda con el blanco y se colocan las muestras y estándares que si contienen la
especie absorbente y se efectúa la lectura correspondiente.

Estos equipos requieren de componentes estables y de alta calidad en la

fuente, detector y amplificador. Los parámetros de ajuste iniciales (cero y 100%
de transmitancia o cero a ∞ de absorbancia), deben permanecer estables
durante periodos más o menos largos y hacer reajustes de estos parámetros
periódicamente, si el instrumento se va a utilizar más de 30 minutos.

Este tipo de espectrofotómetros es más barato que los de doble haz, y se

pueden utilizar ampliamente si los resultados que se desean obtener no
requieren de muy alta precisión.

Fig. N° 2: Sistema de espectrofotómetro de haz simple