213 Medicina Veterinaria del ARS, 17 (3): 213-217, 2001.

ETIOLOGÍA Y SENSIBILIDAD de la mastitis BACTERIANAS

subclínico (búfalos Bubalus bubalis)

(Etiología SENSIBILIDAD DE bacteriana y mastitis en búfalos

subclínicas ( Bubalus bubalis))

H. Langoni 1 PF DOMINGUES 1
JR MOLERO HIJO 2 S. BALDINI 3

RESUMEN

El objetivo de esta investigación fue estudiar la etiología y la susceptibilidad antimicrobiana de los aislados a partir de muestras de leche a
partir de microorganismos 61 búfalos de Murrah con mastitis subclínica, identificado por Prueba de Mastitis de California ( CMT), teniendo en cuenta
la puntuación de 3+. Había cultivos bacteriológicos en agar sangre y MacConkey significa para el diagnóstico de la mastitis, y los microorganismos
se estudiaron mediante frotis teñidos por el método de Gram e identificados por pruebas taxonómica. A continuación, los microorganismos se
sometieron a prueba de sensibilidad bacteriana " in vitro ". De las 154 muestras de CMT positiva leche, se observó que 83 (53,9%) tenían el
crecimiento bacteriano, mientras que 71 (46,1%) resultaron negativas. Los microorganismos en cultivo puro y en combinación, fueron: bovis
(Corynebacterium n = 26; 31,3%) Staphylococcus epidermidis ( n = 25; 30,1%) agalactiae Streptococcus ( n = 22; 26,5%), Staphylococcus aureus ( n = 4;
4,8%); Acinetobacter calcoaceticus ( n = 2; 2,4%); Pasteurella multocida ( n = 2; 2,4%) y bacilo spp (n = 2; 2,4%). En la prueba de sensibilidad vitro Antimicrobianos
se observó que para Corynebacterium bovis, Staphylococcus epidermidis y Streptococcus agalactiae, que fueron los microorganismos más
frecuentemente, cloranfenicol, gentamicina y oxacilina fueron los fármacos más eficaces.

PALABRAS CLAVE: Buffalo, mastitis, microorganismos, antibióticos, antibiograma.

RESUMEN

El objetivo de la presente investigación fue estudiar la etiología y la sensibilidad antimicrobiana de microorganismos aislados de muestras de leche de 61
búfalos Murrah con mastitis subclínica, identificadas por "Prueba de Mastitis de California" (CMT), la puntuación siendo considerado 3+. Se llevaron a cabo los
cultivos bacteriológicos en meddien de agar-sangre y MacConkey, para el diagnóstico de la mastitis, y los microorganismos aislados fueron estudiados en frotis
coloreado por el método de Gram e identificados por la taxonomía; gusto. Los microorganismos fueron sometidos a la prueba de la sensibilidad bacteriana vitro. De las
154 muestras positivas de leche a la CMT, que era la observada 83 (53,9%) presentaron crecimiento bacteriano, mientras que 71 (46,1%) es eran negativos
mostrados. Los microorganismos aislados en cultivo y en asociación eran puros: bovis (Corynebacterium n = 26; 31,3%)

Staphylococcus epidermidis ( n = 25; 30,1%) agalactiae Streptococcus ( n = 22; 26,5%) Staphylococcus aureus ( n = 4; 4,8%);
Acinetobacter calcoaceticus ( n = 2; 2,4%); Pasteurella multocida ( n = 2; 2,4%) y bacilo spp (n = 2; 2,4%). En la prueba de la sensibilidad
antimicrobiana "in vitro" fue que se observa Corynebacterium bovis, Staphylococcus epidermidis y
Streptococcus agalactiae, Que fueron los microorganismos aislados con frecuencia más grande, el cloranfenicol, gentamicina

1 Profesor del Departamento de Higiene y Salud Pública Veterinaria, FMVZ, UNESP, campus Botucatu, CEP: 18618-000, Botucatu, SP.

2 veterinario Autónoma.
3 Residencia en Medicina Veterinaria, FMVZ, UNESP, campus Botucatu.
Medicina Veterinaria del ARS, 17 (3): 213-217, 2001.
y oxacilina fueron los fármacos de mayor efectividad.
PALABRAS CLAVE: Búfalos, mastitis, los microorganismos, los antibióticos, la susceptibilidad antibacteriana.
INTRODUCCIÓN
La mastitis es una inflamación de la glándula mamaria por lo
general causada por la presencia de microorganismos, promoviendo
cambios en la composición de la leche y los altos índices de células
somáticas, se considera el más enfermedad causa pérdidas económicas a la
industria de productos lácteos de calidad de la leche mundial.A búfalos como
los aspectos físico-químicas y los índices de productividad han sido
evaluados por los investigadores en Brasil y en el extranjero (PEREIRA et al. 1996),
sin embargo, el aspecto de la salud ha sido poco estudiada (MOTA, 1999).
En los últimos años, hubo varios países que tienen
que prestar más atención a los búfalos, utilizando para el control
de la mastitis en esta especie las mismas técnicas de creación y
gestión adecuado para bovinos (ABB 1993). Debido a la
excelente rendimiento zootécnico, principalmente en la
producción de leche por la India y Pakistán, que concentra los
rebaños más grandes, especial importancia se le ha dado a la
mastitis (ABB 1993).
A pesar del creciente interés en el búfalo en Brasil, un
hecho que ha proporcionado un mayor uso de la leche de las
hembras, hay poca información disponible acerca de la mastitis
en búfalos.
Sin embargo algunas investigaciones muestran la
prevalencia y la susceptibilidad antimicrobiana de
microorganismos aislados de búfalos con muestras de leche
mastitis (SYAAMASUNDAR y Choudhuri, 1988; RAJANGAM et
al. 1989; Saini et al. 1994; COSTA et al. 1995; COSTA et al. 1997).
Dada la importancia de la mastitis y el interés en búfalo, que
está dirigido, en el presente trabajo fue estudiar la etiología y la
susceptibilidad antimicrobiana de microorganismos aislados de
muestras de leche de búfalo con mastitis subclínica.
MATERIAL Y MÉTODOS
Se examinaron 154 muestras de leche de 61 búfalos
Murrah de lactantes, la mastitis subclínica en el municipio de
Sarapui, Estado de Sao Paulo. mastitis subclínica se identificó
inicialmente por el uso de Prueba de Mastitis de California
(CMT) Schalm de acuerdo y Noorlander (1957),
214
teniendo en cuenta los cuartos mamarios positivos con una puntuación de 3+;
el diagnóstico definitivo fue confirmada por cultivo microbiológico.
Para la recogida de las muestras de leche, techos se enjuagaron
previamente con agua y se secaron con una toalla de papel desechable. A
continuación, el ostium techo fue tomada asépticamente con alcohol al 70% y las
muestras recogidas en frascos de vidrio estériles y se envía al laboratorio bajo
enfriamiento en un cuadro de isotérmica que contiene los paquetes de hielo.
En el laboratorio, cultivos se llevaron a cabo
con 0,01 ml de leche microbiológico en placas de Petri que contienen
agar sangre y medios MacConkey, incubando a 37 ° C. Las lecturas de
las placas se hizo a los 24, 48 y 72 horas, mediante la observación de
la morfología de las colonias, y se desliza entonces teñidas se preparó
por el método de Gram para comprobar en el microscopio, la
morfología bacteriana y su tinte característico y el rebote de infusión
de cerebro y corazón medio (BHI), para llevar a cabo la evidencia
taxonómica, según Carter & COLE JUNIOR (1990) y Quinn et al. ( 1994),
y las pruebas de sensibilidad vitro según BAUER et al. ( 1966),
utilizando placas que contenían agar Muller-Hinton. fue cuando el
agente a ensayar estreptococo spp o Corynebacterium bovis, placas se
utilizaron con el mismo medio de cultivo suplementado sangre bovina
10%, para facilitar el crecimiento de estos microorganismos.
RESULTADOS
De las 154 muestras de leche CMT positiva, dio el
aislamiento de cultivos puros en 63 (40,9%), como se muestra en la
Tabla 1. La Tabla 2 muestra que la combinación más frecuente de
agentes en muestras de leche eran Staphylococcus epidermidis y agalactiae
Streptococcus ( 40,0%). El número total de microorganismos,
teniendo en cuenta el número de aislamiento en cultivo puro y en
combinación, fue del 83 (53,9%), como se muestra en la Tabla 3.
Analizar también la Tabla 3, que considera el número
microorganismos totales, parece que la bovis (Corynebacterium 31,3%)
fue el agente más frecuentemente aislado, seguido de Staphylococcus
epidermidis ( 30,1%) y Streptococcus agalactiae
(26,5%). Los resultados del perfil de sensibilidad de los
antibióticos ensayados se muestran en la Tabla 4, que muestra
cloranfenicol, gentamicina y oxacilina
 215 Medicina Veterinaria del ARS, 17 (3): 213-217, 2001.

Tabla 1 - Número y porcentaje de microorganismos Tabla 4 - Resultados de la prueba de sensibilidad vitro

aislado en puras muestras de leche de búfalo cultura para S. epidermidis C. bovis y S. agalactiae
con mastitis subclínica. aislado de las muestras de leche de búfalo con mastitis
microorganismos número % subclínica.

Corynebacterium bovis 23 36.5

Staphylococcus epidermidis 21 33.3

Streptococcus agalactiae 14 22.2

Staphylococcus aureus 03 4.8

Acinetobacter calcoaceticus 01 1.6

Pasteurella multocida 01 1.6

total 63 100,0

como ingredientes activos con el mayor porcentaje de acción contra

Tabla 2 - Número y porcentaje de microorganismos los agentes Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium bovis y agalactiae
aislado en asociación con las muestras de leche de Streptococcus.
búfalo mastitis subclínica.
microorganismos número%

DISCUSIÓN
epidermidis Staphylococcus + Streptococcus agalactiae 04 40.0

Corynebacterium bovis + Bacillus spp 02 20.0 De las 154 muestras de leche analizadas, se observó que 83
antimicrobiano epidermidis ( n = 25)
Staphylococcus C. bovis ( n = 26)agalactiae S. agalactiae ( n = 22)
aureus + Streptococcus 01 10.0 (53,9%) tuvieron crecimiento bacteriano, mientras que 71 (46,1%)
% %
Streptococcus agalactiae + Acinetobacter calcoaceticus
%
01 10.0 resultaron negativas. Estos cultivos negativos pueden estar
Streptococcus agalactiae + Corynebacterium bovis 01 10.0 relacionados probablemente a la aséptica o tratamiento de la mastitis es
ampicilina 40.0 38.5 68.2
Pasteurella multocida + Streptococcus agalactiae 01 10.0 que los microorganismos requieren condiciones especiales de medios
cefalexina 72.0 76.9 72.7

cloranfenicol total 88.0 92.3 90.9 10 100,0 de cultivo para su aislamiento, el tiempo de incubación adecuado, y
enrofloxacina 44.0 69.2 77.3 también las características metabólicas (LANGONI, 1995). Sin
gentamicina 80.0 96.2 95.5 embargo, según LAU et al. ( 1985) métodos indirectos empleados en el
neomicina 36.0 57.7 54.5
diagnóstico de la mastitis subclínica de búfalos son los mismos
nitrofurantoína 56.0 69.2 77.3
utilizados para el ganado, pero generalmente no muestran con precisión
oxacilina 76.0 84.6 95.5

tetraciclina
Tabla68.03 - Número y porcentaje
65.4
de microorganismos
63.6
entre sí. Por lo tanto, es probable que el número de muestras negativas
aislado en un cultivo puro y en asociación en el examen microbiológico puede estar relacionado con resultados
muestras de leche de búfalo reactivos CMT. falsos positivos en el CMT. El porcentaje de aislamientos de
microorganismos en el presente estudio (53,9%) difiere de la observada

microorganismos número% por SAINI et al. 1.994 (76,13%) y COSTA et al. 1.995 (45,3%).

EBA Ryn Co bo v c es Terium 26 31.3

En la Tabla 1 se puede ver que el cultivo puro de
TAPH S y s p id co CCU es ERMID 25 30.1 microorganismos fueron:
TREP S a co AGA CCU s y era ct 22 26.5 bovis (Corynebacterium 30,5%) Staphylococcus epidermidis ( 33,3%)
agalactiae Streptococcus ( 22,2%)
S y TAPH que co REU CCU s au s 04 4.8
Staphylococcus aureus ( 4,8%); Acinetobacter calcoaceticus ( 1,6%)
Tob Ac en y que tiene ac t UCI ca c Alcoa s 02 2.4 y Pasteurella multocida ( 1,6%). Tabla 2 a su vez muestra que se
mu re Pa STEU l l la a Id del c 02 2.4 observó la asociación más frecuente Staphylococcus epidermidis
y
Ba lu s cil s pp 02 2.4
agalactiae Streptococcus ( 40%). Los microorganismos aislados con
Para ta l 83 100,0 mayor frecuencia fueron bovis (Corynebacterium 31,3%) Staphylococcus
epidermidis ( 30,1%) y
Medicina Veterinaria del ARS, 17 (3): 213-217, 2001.
agalactiae Streptococcus ( 26,5%) como se muestra en la Tabla 3.
La prevalencia de mastitis subclínica aislados de
microorganismos en búfalos de agua, se observa que los
resultados de este estudio son similares a COAST et al. ( 1995) y
COSTA et al. ( 1997), que también encontró un porcentaje más
alto para
Corynebacterium sp, estafilococo spp y estreptococo
spp.
El estudio de sensibilidad frente bacteriana a diferentes
fármacos antimicrobianos mostró que para
Corynebacterium bovis, Staphylococcus epidermidis y
Streptococcus agalactiae, fueron los agentes individuales con más
frecuencia, cloranfenicol, gentamicina y oxacilina fueron los mejores
antibióticos de acción (Tabla
4). BHINDWALE et al. ( 1990) estudiaron 47 muestras de leche con
una respuesta positiva a la CMT (3+), encontró que los antibióticos
que exhiben una mejor sensibilidad resultado vitro Eran
nitrofurantoína, tetraciclina, eritromicina, ampicilina y penicilina.
En SAINI de trabajo et al. ( 1994), que
investigado la prevalencia y la etiología de la mastitis subclínica en
búfalos 241, observado aislamiento de microorganismos en la
leche 76,13% de las muestras examinadas, y los agentes fueron: Staphylococcus
HD Singh, NP, HESS, SJ La comparación de las pruebas indirectas,
aureus ( 54,0%) estafilococo estafilococos negativos (19,4%) estreptococo en el diagnóstico de la mastitis subclínica en los búfalos. Belém:
spp (12,9%) y Escherichia coli
(12,9%). Los resultados de susceptibilidad a los antibióticos mostraron que
90,0% de las cepas probadas fueron sensibles a la gentamicina,
cloranfenicol, cotrimoxazol y nitrofurantoína. Por lo tanto, se observa
que los resultados de perfil de susceptibilidad antimicrobiana fue
similar a la investigación actual con respecto a cloranfenicol y
gentamicina.
Se concluyó que los estudios sobre la etiología y
sensibilidad vitro de los microorganismos a los antibióticos frente
puede proporcionar información que si se aplica en los programas de
control y el tratamiento de esta condición en la creación de búfalos,
permiten aumento de la productividad del hato, y una mejor calidad
de la leche producida.
GRACIAS
D. José Fernando Paganini Listoni, técnico de
laboratorio, los servicios de laboratorio pertinentes.
Referencias
BAUER, AW, Kirby, WM, Sherris, JC, Turck
M. pruebas de sensibilidad a los antibióticos por un método único disco
estandarizado. American Journal of Clinical Pathology,
V.45, p. 493-6, 1966.
216
BHINDWALE, S., SUPEKAR, PG, SHUKLA, Sensibilidad PC de
patógenos aislados de casos de mastitis subclínica (SCM) en búfalos
del tracto malwa. India Veterinary Medical Journal, v.14, n.2,
p.94-7, 1990. Carter, GR, Cole JR ,, JUNIOR Los procedimientos
de diagnóstico en la bacteriología y micología veterinaria.
5.ed. Nueva York: Academic Press, 1990. 620. COSTA, Y EL,
Gabaldi, SH, Lopes, VCBA Rossini, V., Sanches, RB, Venzon,
búfalos P. ( Bubalus bubalis): mastite.In incidencia de agentes
etiológicos: Congreso Nacional de Microbiología, 18, Santos,
SP, 1995. Anais ... p.138. COSTA, Y EL Watanabe, ET
RIBEIRO, AR GARINO JUNIOR, F. Horiuti, búfalo AM etiología
mastitis, mastitis clínica y niveles subclínicos. En: CONGRESO
INTERNACIONAL DE MEDICINA VETERINARIA, 25, Césped,
1997. Anais ... p.161. Langoni H. Etiología de la mastitis bovina
subclínica y clínica: el perfil de sensibilidad microbiana, el
control y el impacto sobre la producción de leche y la salud
pública.
Botucatu, SP. 1995. 200p. Tesis (Habilitación) - Facultad de
Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Estatal Paulista. LAU
Embrapa-CPATU 1985, p.5-13 (Investigación Boletín 77).
MOTA, RA mastitis Bubalina. En: Los investigadores REUNIÓN
EN mastitis, III, Botucatu, SP,
1999. Anais ... p.103-4.
OBA E. actualiza temas relacionados con la reproducción de las
especies de búfalos. En: SAMARA, SI, Dutra, IS, SON MOLERO, JR
Chacur, MGM La salud y la productividad de búfalo. Jaboticabal:
Unesp / FUNEP,
1993, p.87-110.
Pereira, RGA, Magellan, JA, Silva Neto,
FG, Tavares, CA Cote, máquina NL Buffalo para producir carne,
leche y trabajo. Porto Velho, RO, 1996. EMBRAPA-CPAF, 14p.
Quinn, P. J., Carter, ME, Markey B. La mastitis. En: ____. Microbiología
Clínica Veterinaria. Londres: Mosby-Year Book Europe Limited,
1994. Cap.36, p.327-
44.
RAJANGAM, RK, Suresh Subramanian RV
M., Balachandran, S. sensibilidad antibiótica de los organismos que
producen mastitis. Indian Journal Veterinaria,
v.66, n.3, p.272-3 1989.
SAINI, SS, Sharma, JK, Kwatra, MS Prevalencia y etiología de la
mastitis subclínica entre búfalos vacas cruzadas y en Punjab. Indian
Journal of Dairy Science,
V.47, no.2, p.103-6, 1994.
Schalm, W, Noorlander, experimentos y observaciones DD que
lleva al desarrollo de California
217 Medicina Veterinaria del ARS, 17 (3): 213-217, 2001.

Prueba de Mastitis. Revista de la American Veterinary Medical Asociación, La prevalencia de mastitis subclínica en los búfalos. Indian Journal of
v. 130, p.199-204, 1957. SYAAMASUNDAR, N., Choudhuri, PC Un Dairy Science, V.41, no.3, p.353-4, 1988.
estudio sobre