GUÍA DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

RECOMENDACIONES GENERALES PARA LA PRÀCTICA

Presentarse puntualmente al laboratorio, con:

1. Bata de laboratorio blanca de manga larga. (úsela siempre abotonada)

2. La guía de laboratorio correspondiente. En este caso el diagrama de flujo
3. Cálculos correspondientes para cada práctica
4. Cuaderno de laboratorio
5. Paño de limpieza
6. Gafas de seguridad, úselas sobre los ojos mientras realiza la práctica
7. Mantener las balanzas limpias y descargadas.
8. Entregar limpio y en orden el material y el sitio de trabajo
1. Material quebrado hay que reponerlo. Éste debe tener la misma marca y
especificación
2. Usar zapatos completamente cerrados, para evitar que penetren líquidos al pie.
3. Tener cuidado con elementos (barba, pelo largo, corbatas ó collares), que pueden
enredarse, inflamarse ó absorber sustancias químicas.
4. No beber, no comer, no fumar, no llevarse las manos a la boca durante el
desarrollo de la práctica.
5. No succionar un reactivo con la boca, usar un dispositivo adecuado
6. Conocer el riesgo de los reactivos que está utilizando
7. No botar reactivos, ni basura a los desagües
8. Tratar todas las sustancias químicas como tóxicas. El olor NO es guía de confianza.
9. Usar pantalones largos.
 RECOMENDACIONES PARA LA ENTREGA DEL INFORME

1. Antes de entrar al laboratorio tener el diagrama de flujo donde se indique los

pasos a seguir para la realización de la práctica
2. Entregar UN (1) informe tipo artículo
3. Toda información consultada deberá ser referenciada con normas APA
4. No se aceptan consultas de Wikipedia, rincón del vago u otras páginas que no sean
académicas, Preferiblemente consulte libros o artículos para el análisis de los
resultados
5. El informe se presentará con el siguiente orden:
a. Título (debe ser breve y que explique las prácticas realizadas)
b. Autores con nombre completo y código
c. Institución a la que pertenece y programa
d. Introducción (diferente a la presentada en la guía) y referenciada. No debe
exceder las 1000 palabras.
e. Objetivo. El cual debe estar incluido en el último párrafo de la introducción
con una breve justificación de la práctica.
f. Metodología (resumida, el cual se incluye el (los) diagrama de flujo)
g. Resultados. Incluye todos los datos de manera ordenada obtenidos durante
la práctica, gráficos, cálculos, imágenes con una breve descripción de los
mismos. También se deben incluir los resultados de los demás compañeros
para hacer comparación en la discusión.
h. Discusión. De acuerdo a los resultados obtenidos explicar o dar una
explicación del por qué esa información, En este caso se incluyen
ecuaciones químicas y se referencia toda la información. Para la discusión
pueden basarse en las preguntas de las guías.
i. Referencias bibliográficas con normas APA
 PRÁCTICA No. 1
VALORACIÓN ÁCIDO BASE
Objetivo: Estudiar el comportamiento ácido-base de algunas sustancias.
Para el desarrollo del informe se debe de presentar las constantes y las ecuaciones
indicando las reacciones químicas en los procedimientos 1 y 3. Igualmente antes de entrar
al laboratorio se debe de tener los cálculos para preparar las soluciones a concentraciones
molares determinadas.
Una vez finalizada la práctica, entregar un pre informe con los cálculos y las curvas de pH.
Procedimiento 1.
Disolución de NaOH prepare 250 mL de disolución del patrón primario NaOH 0.08 M.
Calcule la masa de sólido que necesite y pese en una balanza analítica (precisión 0.1 mg)
una cantidad de NaOH aproximadamente igual al valor calculado. Prepare la disolución en
un matraz aforado y calcule finalmente su concentración exacta a partir del peso del
reactivo utilizado.
Disolución de ácido acético: preparar 250 mL de ácido acético aproximadamente 0.2 M.
Antes de empezar la preparación calcule el volumen de ácido acético concentrado
necesario para preparar la disolución. No es necesario medir los volúmenes de ácido o de
agua de forma exacta, ya que esta disolución se va a estandarizar con el NaOH (patrón
primario). No obstante, utilice una pipeta adecuada para traspasar el ácido concentrado al
matraz aforado de 250 mL. Realice esta operación en la campana extractora usando
guantes de protección. Enrase finalmente el matraz con agua destilada.
Estandarización de la disolución con ácido acético
a) Calibrado del pH-metro: seguir el manual de instrucciones del aparato para su
calibración con tampones patrón de pH 7 y pH 4. El electrodo del pH-metro se deteriora si
se roza o si queda expuesto al aire y debe permanecer sumergido en agua destilada
cuando el aparato no se utilice.
b) Lavado y llenado de la bureta: con la llave de la bureta cerrada, llenar la bureta con la
solución de ácido acético. Abrir la llave hasta vaciar la bureta y desechar el ácido acético
utilizado. Volver a llenar la bureta (con la llave cerrada) por encima del comienzo de la
escala graduada. Enrasar al cero de la escala abriendo la llave suavemente. Asegurarse de
que la punta terminal de la bureta queda llena de ácido, sin burbujas de aire.
c) Pasar 50 mL de NaOH a un vaso de precipitados de 250 mL y añadir unas gotas de
indicador fenolftaleína. Introducir el electrodo y el sensor de temperatura del pHmetro en
la disolución con cuidado de no rozarlos con el fondo o las paredes del vaso. Tomar el
valor del pH de la disolución de NaOH.
d) Comenzar la valoración tomando valores del pH tras adiciones de 1 o 2 mL de ácido
acético hasta las inmediaciones del volumen estimado para el primer punto final. Se
agitará en círculos la disolución a la vez que se añade el ácido, con cuidado de no rozar el
electrodo del pH-metro con el vaso. Al acercarnos al primer punto final (unos mL antes),
las adiciones de ácido se harán gota a gota, anotando el pH cada pocas décimas de mL
hasta el punto de cambio del color de rosa a incoloro de la fenolftaleína (colocar una hoja
de papel blanco bajo el vaso para visualizar mejor dicho cambio). Anotar el pH del punto
final y seguir añadiendo gota a gota y anotando el pH hasta la total desaparición del color
del indicador. Seguir añadiendo poco a poco valorante hasta haber superado
completamente la titulación.
Valoración de la disolución problema
Determinar primero con el indicador adecuado si la disolución problema es ácida o básica.
A continuación, comprobar este hecho midiendo el pH de la disolución problema con el
pH-metro. Si se confirma el pH básico de la muestra problema, proceder a su valoración
con ácido acético. Como se desconoce el volumen de valorante necesario para la
neutralización, se realizará una primera valoración rápida con adiciones de varios mililitros
cada vez, hasta la observación del punto final con un indicador adecuado. A continuación
se repite la valoración sistemática con el pH-metro midiendo la curva de valoración
completa (pH frente a volumen de valorante añadido) con adiciones gota a gota en las
inmediaciones del punto final hasta bien superado éste. Siga añadiendo hasta superar el
punto final en 2 ó 3 mililitros.
Presentación de resultados y cálculo de concentraciones Realizar los siguientes pasos para
cada una de las valoraciones de los experimentos descritos en los apartados anteriores:
1) Presentar en una tabla y representar en gráficas separadas, los valores del pH y de
sus dos primeras derivadas frente a volumen de valorante añadido.
2) A partir de los resultados numéricos y gráficos obtenidos, determinar la
concentración de la disolución de ácido acético final.
3) Calcular finalmente del mismo modo la concentración de la muestra problema.
Discutir si la sustancia problema es una base fuerte o débil y determinar su pK.
4) Utilizar las expresiones vistas en clase. para calcular teóricamente el pH en algunos
puntos de cada una de las curvas de valoración.
Procedimiento 2.
Reactivos NaOH 0,1 Mm Vinagre blanco, Solución alcohólica de fenolftaleína al 1 %
(Indicador). Sustancias de prueba: Detergente, jugo de limón lavandina vinagre, shampoo,
sal de mesa (NaCl) gaseosa de lima-limón
Colocar en tubos de ensayo 10 mL de las soluciones de sustancias de prueba,
identificarlos. Medir el pH con el indicador universal y con pH- metro. Completar el cuadro
del informe clasificándolas como ácidos o bases.

Procedimiento 3. DETERMINACIÓN DE LA CONSTANTE DE EQUILIBRIO DE UN ÁCIDO DÉBIL

Partiendo de la expresión de la ecuación de la constante de equilibrio: Ka = [HAc] [Ac [•] H O ] 3 −
+ , se puede deducir la expresión en forma logarítmica pH = pKa + log [HAc] [Ac ] − , (ecuación de
Henderson-Hasselbach) y al representar gráficamente pH frente a log ([base]/[ácido])
obtendremos una línea recta cuya ordenada en el origen es pKa, lo que nos permitirá determinar
la Ka del ácido de que se trate. Por efecto del ión común, puede aproximarse la concentración de
base a la de sal inicial y la de ácido a la de ácido inicial: log ([base]/[ácido]) ≈ log ([sal]/[ácido]).

Materiales y Reactivos

· Vasos de precipitados
· Acetato de sódio 0,1 M
· Buretas
· Acido acético 0,1 M

Tomar 4 vasos de precipitados de 50 mL limpios y secos. Numerarlos de 1 a 4. Poner en cada uno

de ellos los siguientes volúmenes de las disoluciones de HAc y NaAc :

Vaso 1: 20 mL HAc 0,1 M + 5 mL NaAc 0,1 M

Vaso 2: 15 mL HAc 0,1 M + 10 mL NaAc 0,1 M

Vaso 3: 10 mL HAc 0,1 M + 15 mL NaAc 0,1 M

Vaso 4: 5 mL HAc 0,1 M + 20 mL NaAc 0,1 M

Homogeneizar las muestras así preparadas y medir con un pH-metro los pH de las disoluciones y
Calcular la constante
Guías de laboratorios citadas
Universidad Nacional de Patagonia (s.f.). Guía de laboratorio 6. Consultado en:
http://www.ing.unp.edu.ar/asignaturas/quimica/practicos_de_laboratorio_pdf/lab6.p
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