Caracterización del aceite de Leucaena mediante análisis en tiempo real y

cromatografía de gases
Introducción:
Characterization of Leucaena (Leucaena leucephala) oil by direct analysis in real
time (DART) ion source and gas chromatography. M. Alama, Research Center-
College of Science, King Saud University 06 February 2017.
Leucaena leucocephala es esencialmente una especie tropical que requiere
temperaturas cálidas (15–25 oC) para un crecimiento óptimo (Mullen et al., 2003).
Se encuentra en regiones de Australia, EE. UU., Filipinas, Tailandia, China, islas
del Pacífico, México e India. En la India se conoce comúnmente como Subabul /
Kababul.
Pertenece a la familia Fabaceae (Leguminosae) y subfamilia Mimosaceae El
tamaño de la leguminosa es de 10–17 cm de largo. que contiene 15-25 semillas
cada una (Muthukrishnan et al., 2013). L. leucocephala es un arbusto de rápido
crecimiento y tamaño mediano.

Se utiliza en cultivos puede liberar suficiente nitrógeno para satisfacer el requisito

del maíz cultivado en los cultivos (Mulongy et al., 1998). El extracto de la vaina es
un producto barato, no tóxico y ecológico. utilizado como inhibidor de la corrosión
en un medio ácido (Muthukrishnan et al., 2013).
La necesidad de caracterizar los aceites vegetales. surge en muchos aspectos,
como el desarrollo de productos, garantía de calidad, vida útil del producto y
detección de adulteración. El valor industrial de los aceites vegetales depende de
su composición de ácidos grasos y la facilidad con la que se pueden modificar
(Bhatnagar et al., 2009).
El método más común para el análisis de aceites vegetales es la cromatografía de
gases. Esta técnica se basa en la selección de fases estacionarias, fases móviles,
detectores, temperatura de columna programa y una resolución adecuada de
cadena de carbono.
El presente estudio investigó los triacilgliceroles (TAGs) de aceite puro de L.
leucocephala [LUCO] y sus FAME (ÉSTERES METÍLICOS DE ÁCIDOS
GRASOS), composición de ácidos grasos por GC, análisis estructural por 1H
NMR, 13C RMN y estabilidad térmica por el. También midió la citotoxicidad de
LUCO
Materiales y métodos:
Materiales:
Se recogieron legumbres maduras de la planta L. leucocephala (Campus
Universitario, Universidad Rey Saud) y semillas dela misma. Las semillas fueron
pulverizadas, y el el aceite se extrajo de las semillas en polvo a través de un
aparato soxhlet usando éter de petróleo como disolvente. Después de la
extracción, el éter de petróleo fue eliminado por un evaporador rotatorio al vacío y
el rendimiento se encontró como 5.67%. Éter de petróleo, ácido sulfúrico (BDH,
Poole, Inglaterra), y el metanol (Sigma-Aldrich, Steinheim, Alemania) se utilizaron
sin ninguna otra purificación.
Cromatografía de gases, Clarus 500 GC con FID, Perkin Elmer, EE.UU., Columna:
Cera Supelco, 30 m de largo, diámetro de 0.32 mm , espesor de fase 0.25μm,
modo de inyección: dividido; proporción de división, 1:100, inyección utilizada
1.0μL, diluida (1/10 v/v, FAMEs/hexano), La temperatura de la columna es de 140-
240 °C, 4°C/min, y La temperatura inicial se mantiene a 140 °C durante 5 min,
Flame ionización detector temperatura 260 °C, flujo de gas portador de helio 1.0
mL/min, Hidrógeno 30 mL/min, Aire 300 mL/min. El estándar de mezcla de FAME
fue analizado bajo el mismo condiciones operativas para determinar la identidad
del pico. Los FAME se expresaron como porcentaje de área relativa (Dodds y
otros, 2005; Fardin-Kia y otros, 2013).
Preparación de FAME de LUCO
Inicialmente LUCO fue derivado por saponificación alkalina del aceite vegetal
(para descomponer los glicéridos debido a su baja volatilidad en la naturaleza) y
se esterificó aún más en presencia de metanol y un catalizador.
LUCO (500mg) se reflujo con un Solución de hidróxido de sodio metanólico de
5mL (0.5M) a 150±5 °C durante 5 minutos en un plato caliente. 5 ml de una
solución trifluoruro de boro metanoico se añadio y todo el contenido se calentó aún
más a 150±5 °C por 5 minutos.
El frasco fue retirado de la placa caliente; se añadieron 5 mL de n-hexano y 10 mL
de una solución de cloruro de sodio saturada, el contenido se agitato a fondo. Una
alícuota del sobrenadante de la capa de hexano se transfirió a sulfato de sodio
anhidro para eliminar la humedad. Los filtrados anteriores de 10μL fueron
analizados por GC-FID (Lee et al., 1998; Reiter y otros, 2001; Řezanka y otros,
2001).
RESULTS AND DISCUSSION
Los espectros TOF-MS (espectroscopia de masas de tiempo de vuelo) de LUCO
El espectro representativo TOF-MS de LUCO se muestran en la figura 1. Los
espectros se dividieron en tres categorías según las fragmentaciones de iones.
Las composiciones elementales (C, H, O) de los principales picos fueron
calculados por un software basado en el número de masa exacto de los
elementos. Las diferencias de masa de los compuestos identificados diferían de
sus números de masa teórica por menos de 5 mmu, el objetivo se centró sólo en
triglicéridos, diglicéridos y monoglicéridos, y ninguna otra molécula.

Estas observaciones confirmaron que los resultados obtenidos de los datos del
TOF-MS eran buenos, Por lo tanto, es necesario recurrir a las técnicas
multivariantes, que son importantes además de ser técnicas probadas para el
análisis de datos complejos (Vaclavik et al., 2009).
Los ácidos grasos involucrados pueden tener el mismo o diferente número de
ácidos en muchas combinaciones posibles. Es precisamente esta variación da
lugar al amplio espectro de aceites vegetales. Aunque no es posible aquí escribir
la secuencia exacta de ácidos grasos de los triglicéridos. La TOF-MS nos
proporciona una nueva forma para el análisis de los aceites vegetales con
velocidad del análisis, simplicidad, introducción de la muestra y alta sensibilidad
(Lesiak A D et al., 2014).
Composición de los ácidos grasos de LUCO
El resultado de la determinación de la composición basada en el área del pico de
LUCO se da en la tabla 3. Los aceites vegetales tienen una composición de ácidos
grasos característica que es útil para la autentificación de productos (Tavassoli-
Kafrani et al., 2016). Por otro lado, La composición no sólo depende de las
especies sino también de región, clima, grado de madurez, cosecha y condiciones
de procesamiento. El LUCO es rico en ácido linoleico (52,08%); la fracción
analizada contiene palmíco, esteárico, oleico, linolénico, araquídico, gadoleico y
ácido behénico (Nehdi et al., 2013, 2014).

Estabilidad térmica
termograma de L. leucocephala el aceite vegetal muestra dos endotermas, la
primera a -30.25 a -13.53 °C, centrado en -24.51 °C, la segunda endoterma a
partir de -11.50 a 8.57 °C, centrado en 3.33 °C. El primer endotérmico pertenece a
la fase transición y la segunda a la fusión
CONCLUSIÓN
La técnica TOF-MS se aplicó eficazmente para estudiar la composición de los
Acidos grasos de LUCO. Las condiciones de funcionamiento aplicadas del ión
DART (análisis en tiempo real) fueron investigados con éxito para obtener el mejor
límite de detección con un perfil de masas de alta calidad. El estudio de las huellas
dactilares del TOF-MS podría proporcionar una técnica útil para la rápida
identificación de los aceites vegetales, adulteración, garantía de calidad, y la
evaluación de similitudes y mejoras