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Las microalgas son organismos unicelulares capaces de asimilar el CO 2 presente en el aire

y que además poseen la capacidad de emplear; luz solar, agua y algunos nutrientes para
producir biomasa y diversos productos naturales de alto valor agregado como proteínas y
aceites. Por lo cual estas microalgas están siendo muy estudiadas en la actualidad, de esta
manera se quiere integrarlas y desarrollarlas en procesos biotecnológicos, dichos procesos
pueden estar relacionados en su gran mayoría, con alimentos y biorremediaciones, aunque
estos últimos procesos son utilizados en sistemas abiertos1.

Para producir microalgas a gran escala hoy en día solo se pueden utilizar diferentes tipos de
sistemas para su cultivo. Los sistemas de cultivo se suelen clasificar según su configuración
y tipo de funcionamiento, hay una gran variedad de sistemas que se emplean para el cultivo
de microalgas, dependiendo principalmente de su aplicación. Conociendo el destino o del
uso de la biomasa producida se puede elegir la mejor opción para su óptimo cultivo a gran
escala2. Los principales sistemas para producción de microalgas son: sistemas abiertos y
sistemas cerrados. Cada uno de los sistemas presenta una serie de ventajas y desventajas
que se toman en consideración según sea la necesidad.

Los sistemas abiertos se llevan utilizando desde los años 50, y son uno de los más comunes
en la producción comercial de microalgas. Dentro de estos sistemas se pueden clasificar en
aguas superficiales naturales, como estanques, lagunas y lagos, y en estanques artificiales,
ya que para la producción de microalgas es necesario principalmente una fuente de luz,
agua y CO23. Los sistemas abiertos no necesitan grandes inversiones y mantenimiento y de
fácil escalado, pero su control es más complicado por lo que determina que estos sistemas
tengan bajas productividades y eficiencia, además de ser más susceptibles a
contaminaciones por otras algas o bacterias4.

Conociendo los problemas relacionados con los sistemas abiertos, especialmente la


imposibilidad de obtener cultivos puros, se desarrollan los sistemas cerrados. Gracias a
ellos es posible producir una sola cepa de microalga y aportar un ambiente controlado al
cultivo, ya que estos sistemas se encuentran aislados del ambiente exterior, por lo tanto, sin
contacto directo con la atmósfera, esto supone una reducción de la contaminación, un
mayor control de las condiciones de cultivo y en general una mayor rentabilidad. El
principal inconveniente es su coste5. Estos sistemas presentan una mayor productividad
frente a los sistemas abiertos consiguiendo una mayor eficiencia en la utilización y fijación
del CO2 inyectado, además permiten mantener condiciones idóneas para el crecimiento de
una microalga concreta, a la vez que dificultan la invasión por organismos contaminantes.
En los fotobiorreactores cerrados pueden mantenerse valores de densidad celular más
elevados que en los abiertos. Estos fotobiorreactores son sistemas flexibles que pueden ser
optimizados de acuerdo con las características biológicas y fisiológicas de las algas
cultivadas. Dependiendo de su forma o diseño este tipo de reactores ofrecen mejor control
sobre las condiciones del cultivo y los parámetros de crecimiento (pH, temperatura,
mezclado, flujo de CO2 y O2)6.
Entre los principales sistemas cerrados se encuentran las columnas de burbujeo que se
tratan de fotobiorreactores tubulares consistentes en una columna vertical con un radio que
puede oscilar entre 5 y 50 cm y una altura generalmente entre 1 a 4 m, en la cual la
agitación y el intercambio de gases se realizan por la inyección de aire enriquecido en CO 2
por el fondo de la columna, lo cual implica una restricción de altura relacionada con la
limitación en la transferencia de gases. La ventaja que ofrecen estos sistemas es que el
oxígeno no se acumula en el medio debido a la aireación, una de las desventajas de este
sistema es que la posición vertical produce que la luz solar incida con un ángulo mayor y la
radio superficie/volumen es menor, aumentando la presencia de zonas oscuras7.

RESULTADOS

Seguimiento (días)
Parámetros
1 2 3 4 5 6 7 8 9

Columna pH 7 7 8 8 8 8 9 9 10
de Temperatura
burbujeo 20 27 27 27 27 27 27 27 27
(°C)
Oxígeno
93,9 105,5 164,6 175,8 204 205,1 198,2 191,9 191,4
disuelto (%)
Tanque
pH 7 7 8 9 9 9 9 9 9
agitado
Temperatura
19,4 31 29,4 29,4 30,4 31 29 29,4 30
(°C)
pH 7 8,03 8,06 8,10 8,13 8,01 8,8 8,47 8,61
Oxígeno
97,4 47,7 38,6 31,3 32,7 25,3 26 21 20,5
Airlift disuelto (%)
Temperatura
20,7 28,5 31,7 28,4 28,8 30,2 29,8 29,1 28,3
(°C)
Tabla 1. Datos obtenidos de los parámetros fisicoquímicos medidos a través del tiempo en
las columnas de burbujeo, tanque agitado y el fotobiorreactor Airlift.

Determinación de la densidad celular


Para la determinación celular por cm3 de microalgas en el tiempo se promediaron los
resultados obtenidos del conteo celular en la cámara neubauer y se reemplazó en la
siguiente formula:
¿ cel contabilizadas
∗10 mm 3
¿ cel 0,2 mm∗0,2 mm∗0,1 mm
=
cm3 1 cm3
Las distancias corresponden a las medidas de las celdas en donde se contabilizaron las
células (lado*lado*profundidad)

Tabla 2. Cuantificación del número de microalgas por centímetro cubico para el


fotobiorreactor Airlift, la columna de burbujeo y el tanque agitado

Concentración de células (Cell/cm3)


Tiempo
Columna de
(días) Airlift Tanque agitado
burbujeo
0 6,5x105 3,5 x106 1,05x106
1 2,3X106 5,9X106 1,95X106
6 6
2 3,5X10 6,4X10 2,55X106
3 4,9X106 9,9X106 3,65x106
6 7
4 5,6X10 1,27X10 4,35x106
5 5,4X106 1,83X107 5,65x106
6 1,17X107 2,48X107 7,8x106
7 7
7 1,47X10 2,76X10 1x107
8 1,84X107 3,48X107 1,27x107

4.0E+07.

3.5E+07.
Concentración celular (cel/cm3)

3.0E+07.

2.5E+07.

2.0E+07.

1.5E+07.

1.0E+07.

5.0E+06.

0.0E+00.
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Tiempo (días)

Tanque agitado Airlif Columna de burbujeo

Gráfica 1. Cinética de crecimiento celular en el tiempo en un fotobiorreactor Airlift, en


columna de burbujeo y en tanque agitado

Ecuación empleada para hallar los valores de velocidad especifica de crecimiento de la


microalga en cada uno de los fitobiorreactores:
X
ln ( )
X0
µ=
(t ¿ ¿ 2−t 1)¿

Donde:
µ= Velocidad especifica de crecimiento
X= Crecimiento celular final de la fase exponencial de crecimiento
X0= Crecimiento celular al inicio de la fase exponencial de crecimiento
T2= Tiempo final de la fase exponencial de crecimiento
T1= Tiempo inicial de la fase exponencial de crecimiento
Ejemplo:
ln (18400000 ¿ cel/mL¿¿ 4900000 ¿ cel/mL ¿)
µ= =0,011 h−1
( 192−72 ) h

Ecuación empleada para hallar los valores de tiempo de duplicación celular en cada
uno de los fitobiorreactores:

ln ⁡( 2)
Td=
µ
Donde
Td= tiempo de duplicación
µ= Velocidad especifica de crecimiento

Ejemplo:
ln ⁡( 2)
=63,01 h
0,011 h−1
Tabla 3. Resultado de los parámetros cinéticos evaluados para Nannochloropsis sp en el
Fotobiorreactor Airlift, en la columna de burbujeo y en el tanque agitado

Columna de
Parámetro Airlift Tanque agitado
burbujeo
µ (h-1) 0,011 0,011 0,010
td (h) 63,01 63,01 69,31

Determinación de la concentración de colorantes.


Para hallar la concentración de cada uno de los colorantes, Clorofila a (Ca), Clorofila b
(Cb) y Caroteno producidos por el alga Nannochloropsis sp en cada uno de los
biorreactores se utilizaron las siguientes ecuaciones.
Ca=11,93*A664 – 1,93*A647
Cb=20,36*A647 – 5,50*A664
Carotenos=7,6(A480– 1,49*A510)

Tabla 4. Resultados obtenidos de la concentración de colorantes producidos en el tiempo


por Nannochloropsis sp. en cada uno de los biorreactores empleados (Fotobiorreactor
Airlift, columna de burbujeo y tanque agitado)
Columna de burbujeo Airlift Tanque agitado
Concentració Concentració Concentració Concentració
Colorant Concentración Concentración
n inicial n final n inicial n inicial
e final (µg/mL) final (µg/mL)
(µ/mL) (µg/mL) (µg/mL) (µg/mL)
Ca 0,1223 1,1617 0,1530 0,2854 0,1526 0,9329
Cb 0,0331 0,3964 0,0463 0,1176 0,0503 0,3642
Caroteno 0,2900 0,9569 0,2557 0,5634 0,3107 0,8852

DISCUSIÓN
En los resultados presentados en la tabla 1 se puede observar que los parametros
fisicoquímicos como temperatura y pH evaluados en cada uno de los sistemas, no se vio
mucha variación en el tiempo, estos estuvieron controlados ya que no se ven cambios
drásticos, por el contrario la concentración de oxígeno si mostró valores más variables y a
su vez se observó que el tanque agitado fue el sistema el cual presentó mayor concentración
de oxígeno en el medio, esto puede ser dado por las características físicas de este sistema el
cual cuenta con un sistema de aireación mecánica por medio de turbinas que hacen que el
medio se mantenga en constante agitación permitiéndole así tener mayor concentración y
transferencia de oxígeno.
Por otro lado, se pudo determinar la concentración celular en cada uno de los sistemas
donde se puede observar en la ilustración 1 que el sistema que más favoreció el crecimiento
celular del alga Nannochloropsis sp. fue el fotobiorreactor Airlift donde se obtuvo una
concentración de biomasa de 3,48x107 Cel/mL, seguido por la columna de burbujeo y el
tanque agitado con 1,84x107 y 1,27x107 cel/mL, respectivamente, estos resultados son
coherentes dado que en los cultivos de microalgas, la turbulencia es necesaria para prevenir
la sedimentación de las células, para asegurar que todas las células de la población estén
igualmente expuestas a la luz y que los nutrientes se distribuyan homogéneamente entre
todas las células; además hay que tener presente las características de la microalga respecto
al uso de un flujo turbulento, ya que no todas las especies toleran una mezcla vigorosa,
debido a que las burbujas de aire o la fricción con dispositivos mecánicos, pueden
ocasionar daño celular, y esto es posiblemente lo que se observa en los resultados, pues la
columna de burbujeo solo se agitó con la propia influencia del flujo, e igualmente el Airlift,
pero este tenia la ayuda del cilindro tubular que amenizaba la velocidad de corte del gas a
través del líquido beneficiándose en la producción, por tanto se evidencia que es la
agitación mecánica pudo se demasiado turbulento y por ende se afecta la concentración y la
velocidad celular.
Así mismo, se calculó la velocidad especifica de crecimiento a partir de la curva de
crecimiento celular (ver grafica 1) para la columna de burbujeo, el Airlift y el tanque
agitado, donde se mostraron valores de 0,011, 0,011 y 0,010 h -1, respectivamente, y a partir
de esto se obtuvo un tiempo de duplicación de 63,01, 63,01 y 69,31 h, respectivamente; así,
se puede afirmar que la velocidad específica de crecimiento que obtenga el microorganismo
en los diferentes sistemas está influenciada por factores como la relación altura/diámetro, el
sistema de agitación, el tamaño de las burbujas y su velocidad de ascenso y por la
iluminación (Cortés et al., 2013). Aunque se esperaba mejores valores de µ como en el td
en el Airlift que en la columna de burbujeo, dado que controla muchas más variables como:
capacidad de transferencia de masa entre gas-líquido, suministro de luz, absorción de
nutrientes y el mínimo riesgo de contaminación (Cortés et al., 2013), por ello, al obtener los
mismos valores no es preciso afirmar la exactitud de los resultados dado que es posible que
no se haya determinado correctamente la fase exponencial. Sin embargo, los resultados del
tiempo de duplicación fueron coherentes con los hallados en--- dado que encontraron como
optimo un tiempo de 2 días en condiciones similares a las evaluadas.
Del mismo modo se evaluó la producción de pigmentos en cada sistema, obteniendo mayor
producción de Ca, Cb y Carotenos en la columna de burbujeo y en tanque agitado que el
sistema Airlift. Si bien, la intensidad de la luz es importante para la fotosíntesis y
crecimiento microalgal, por ende, para la producción de pigmentos, la eficiencia
fotosintética depende de la intensidad, la calidad espectral y del fotoperiodo. Por esto,
puede decirse que, aunque se esperaba mayor producción en el Airlift, este pudo presentar
una intensidad de luz muy alta, provocando una fotoinhibición. Mientras que la columna de
burbujeo mostró mayor producción que el tanque agitado, dado que este presentó menor
densidad celular y la mayoría de los pigmentos son metabolitos asociados al crecimiento.

Además, otro factor que pudo haber intervenido en el desarrollo del crecimiento celular es el
volumen de medio utilizado para cada biorreactor, pues en el sistema Airlift se empleó un volumen
de 2,7 litros mientras que en la columna de burbujeo un volumen de 1,6 litros, si el volumen es en
ambos biorreactores es diferente la transferencia de masa también lo será y si la transferencia de
masa del sistema no es la óptima para el crecimiento del microorganismo se verá afectado y de la
misma manera se afectara la producción de pigmentos (Huang, Jiang, Wang, & Yang, 2017).

CONCLUSIONES
 Se comprobó que el fotobiorreactor Airlift utilizado como sistema de cultivo para la
microalga Nannochloropsis sp es más eficiente, en comparación con los
biorreactores columna de burbujeo y tanque de agitación, ya que presentó una
mayor concentración celular.

 La velocidad de crecimiento de la microalga Nannochloropsis sp se vio favorecida


en los sistemas de cultivo Airlift y columna de burbujeo ya que presentaron una
velocidad de 0,01 1h−1en comparación con el tanque agitado que presento un valor
de 0,01 0 h−1

 Se evaluó la producción de pigmentos (Ca, Cb y Carotenos) en cada sistema de


cultivo donde se obtuvo mayor producción de estos en la columna de burbujeo y en
tanque agitado que el fotobiorreactor Airlift.

REFERENCIAS.

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International Journal of Life Cycle Assessment, 15 (7), 704-714.
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technologies for production,processing and extraction of biofuels and co-products.
Renewable and Sustainable Energy Reviews 14,557-577.
3. Borowitzka, M., 1999. Commercial production of microalgae: ponds, tanks, tubes
and fermenters. Journalof Biotechnology 70, 313.321.
4. Camacho Rubio, F., Acién Fernández, F. G., Sánchez Perez, J. A., García Camacho,
F., & MolinaGrima, E. (1999). Prediction of dissolved oxygen and carbon dioxide
concentration profiles in tubularphotobioreactors for microalgal culture.
Biotechnology and Bioengineering, 62, 71-86
5. Posten, C. (2009). Design principles of photo-bioreactors for cultivation of
microalgae. Engineering LifeScience, 9(3), 165-177.
6. Sierra, E., Acien, F. G., Fernández, J. M., García, J. L., González, C., & Molina, E.
(2008).Characterization of a flat plate photobioreactor for the production of
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7. Molina Grima, E., Fernández , J., Acién Fernández, F. G., & Chisti, Y. (2011).
Tubular photobioreactordesign for algas cultures. Journal of Biotechnology, 92,
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 Huang, Q., Jiang, F., Wang, L., & Yang, C. (2017). Design of Photobioreactors for Mass
Cultivation of Photosynthetic Organisms. Engineering, 3(3), 318–329.
https://doi.org/10.1016/J.ENG.2017.03.020
Cortés, F.; Rubio, D.; Gómez, E. (2013). Análisis comparativo de modelos hidrodinámicos y
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http://www.scielo.org.co/pdf/itec/v10n1/v10n1a08.pdf

de los casos. https://scielo.conicyt.cl/pdf/revbiolmar/v49n2/art01.pdf

https://www.researchgate.net/publication/317597059_SINTESIS_DE_LIPIDOS_DE_LA_
MICROALGA_Nannochloropsis_oculata_PARA_SU_USO_POTENCIAL_EN_LA_PRO
DUCCION_DE_BIODIESEL Algunos parametros cineticos

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