UNIVERSIDAD PRIVADA FRANZ TAMAYO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA

DETERMINACION DE MICRONUCLEOS EN
PERSONAS EXPUESTAS AGENTES
GENOTOXICOS DE LAS
FOTOCOPIADORAS.
DOCENTE: Dr. Edilberto Ramírez

ESTUDIANTES:

-GUTIERREZ FABIAN MARIA ISABEL

-LIMACHI UGARTE HELEN SHIRLEY

-MAMANI QUISBERT GARY

-MONASTERIOS TICONA GABRIELA

-QUISPE HUASCO JESSICA

-RAMOS QUISPE STEPHANIE CINDY

ASIGNATURA: CITOLOGIA

FECHA: 18/12/19

LA PAZ – BOLIVIA
 I. INTRODUCCION

En octubre de 1937, Chester Carlson, un abogado de patentes en Nueva York, inventó

un proceso llamado electro fotografía. En 1938, pasó a llamarse Xerography y la
primera fotocopia conocida fue la «Astoria 10-22-38». El proceso de copia de
Xerography se convirtió en uno de los inventos más conocidos del siglo XX. Carlson
recibió la aclamación mundial y se volvió extremadamente rico a medida que su invento
creó una industria de mil millones de dólares. Se estima que Carlson donó casi $ 100
millones a organizaciones benéficas y fundaciones antes de su muerte en 1968. (6)

Canon fue probablemente la empresa copiadora más exitosa en emplear esta táctica.
Para 1985, se habían convertido en la compañía de fotocopiadoras líder en el mundo.
Canon invirtió mucho en el desarrollo y produjo la primera copiadora a color. (7)

Los daños y riesgos a la salud de trabajadores expuestos a fotocopiadoras y sobre los

efectos negativos del carbono que es un componente importante para el buen
funcionamiento de las fotocopiadoras y los daños que puede ocasionar en la salud
humana ya que la población que está expuesta a emisiones de carbono presentan
daños celulares que incluyen alteraciones a nivel del ADN, inestabilidad cromosomal y
cambios celulares y aumentan el desarrollo de cáncer y otras enfermedades. (6)

Las fotocopiadoras son instrumentos utilizados mayormente en oficinas otras personas

las usan como medio de trabajo sin saber el daño al que están expuestos por estar en
contacto con estas ya que determinadas impresoras contaminan el aire de la habitación
en la que se encuentran de tal modo que la salud del ser humano que este cerca se ve
amenazada casi en la misma manera que si hubiera un fumador las partículas
pequeñas son peligrosas porque se pueden respirar y pasar fácilmente a las regiones
más pequeñas de los pulmones e incluso el riego sanguíneo potencialmente puede
causar problemas respiratorios y cardiovasculares los productos químicos típicos son
monóxido de carbono, óxido de nitrógeno y una gama de compuestos orgánicos
volátiles, varios de los cuales son cancerígenos. (7)

Uno de los principales efectos de estar expuesto a las fotocopiadoras es la presencia

de micronúcleos que puede determinarse haciendo la medición de micronúcleos de las
células del epitelio bucal, también se puede ver el daño cromosómico para lo cual se
debe ver atreves del ensayo de micronúcleos implica establecer un índice de daño al
DNA que implica medir la frecuencia de micronúcleos, fragmentos de ADN presentes
en los linfocitos como indicador del daño cromosómico en la población expuesta. (6)
 II. JUSTIFICACION

Este trabajo experimental es para demostrar la presencia de micro núcleos en las

personas que trabajan en las fotocopiadoras estas son equipos utilizados mayormente
en empresas, negocios, en la etapa estudiantil y oficinas de todo el mundo, no solo
porque es posible imprimir grandes cantidades de documentos, sino porque también es
una herramienta que facilita el trabajo realizado en las diferentes áreas de las
empresas. Ya que estos equipos emiten una constante radiación las cuales son un
factor de alerta para adquirir cualquier tipo de patología que pueden causar
enfermedades respiratorias, daños en la mucosa oral, enfermedades cardiavasculares,
según estudios realizados el toner emite partículas que penetran en los órganos que se
encuentra en la parte superior del organismo más que de las fotocopiadora, Según
OPS Y OMS la mortalidad va incrementar en un 50% hasta el 2020 de todos los
canceres el toner es un componente que podría ser cancirigeno según la agencia de
invetigacion del cáncer internacional a clasificado el toner un grupo 2B por lo que
contiene carbono negro, monooxido de carbono, oxido de nitrogeno, y una gama de
compuestos organicos volatiles en forma polvo por lo que puede llegar a las vías
respiratorias y que puede ser el agente que cause los micro núcleos Sin embargo el
uso frecuente de esta produce sigilosamente diversas patologías en el individuo como
(dolores de cabeza, náuseas, insomnio, pérdida de reflejo.). Lo cual es aconsejable
recomendar los métodos de cuidado y seguridad para la prevención de distintas
patologías que podrían afectar la salud a largo plazo. (5,7,3)

III. OBJETIVOS

 OBJETIVOS GENERAL

- Determinar los factores que implican riesgos contra la salud de personas

expuestas a fotocopiadoras.

 OBJETIVO ESPECIFICO

- Determinar qué factores tóxicos además del OZONO afectan al organismo.

- Cuantificar micro núcleos en los pacientes que trabajan en contacto con el toner.

- Determinar el género más expuesto en el ámbito de este trabajo.

- Diseñar un protocolo para la prevención y autocuidado de las personas expuestas.

 IV. MARCO TEORICO
IV.1. Micro núcleos

Son cuerpos citoplasmáticos de naturaleza nuclear pueden generar ruptura en el ADN

que causa inestabilidad genética estas sufren replicación defectuosa y asincrónica, lo
cual provoca daños por la exposición a agentes genotoxicas que es la causa más
probable para el desarrollo de anomalías y enfermedades degenerativas. Existen
factores capaces de influir o modificar el número micronúcleos presentes en la célula
como la edad, genero, vitaminas, tratamientos médicos, exposición a agentes físicas y
químicas. (Zalacain 2005)

IV.2. Formación de Micronúcleos

Los micronúcleos se forman en la etapa de metafase y anafase de la división celular

Mitosis, este proceso se debe a la ruptura cromáticas esto a causas de sustancias
genotoxicas y radiaciones generando un desequilibrio en la genética, desprendiéndose
del núcleo y generando otro núcleo (primario) son visualizados en el microscopio
óptico. (Zalacain, Patiño A. 2005) (1) (2)

IV.3. Fotocopiadoras

Las fotocopias se han convertido en una actividad cotidiana, en algunos casos, son
riesgos que puede entrañar el uso de las fotocopiadoras. Las fotocopiadoras, o
copiadoras en general, son en la actualidad utilizadas frecuentemente tanto por
particulares como por trabajadores y también por trabajadores en el ámbito profesional,
comercial e industrial. (1)

Los riesgos a los que nos podemos enfrentar al hacer fotocopias son el atrapamientos
por o entre objetos, los contactos eléctricos, contactos térmicos que pueden provocar
quemaduras, exposición a radiaciones como las ultravioleta y la exposición a
sustancias nocivas o tóxicas como el tóner, ozono y otros productos agresivos. (1)

El contenido de la tinta se compone de muchos productos químicos, los principales ya

que la composición varía según la marca.

- Agua.- La tinta de los cartuchos podría ser de hasta 95% de agua pura des
ionizada.
- Ciclohexanona.- Esta sustancia ayuda a los polímeros a añadirse a la tinta. Es
una de las sustancias más útiles, es un disolvente orgánico que también se
encuentra en los pacientes de diálisis renal y corazón, porque es utilizado en los
equipos para bombear la sangre.
- Butil Urea.- Si has tenido una impresora de inyección tinta habrás observado
que al imprimir las hojas tomaban una textura algo rugosa, el agua presente en
 los cartuchos de tinta es la culpable ya que las fibras de celulosa del papel se
hinchan con el agua y al evaporarse queda esa textura. Butil Urea es también
responsable de este fenómeno.
- Directo Azul 199 Dye.- Esta sustancia está hecha de azufre y ftalocianina de
cobre. Este tipo de tinte, también conocido como tinte “directo”, puede dar color
a las fibras celulósicas naturales, tales como algodón, papel e incluso cáñamo
sin el uso de fijadores.
- Reactivo Rojo 23 Dye.- Esto no es realmente rojo, sino magenta.
- Tartrazina (E-102).- Este colorante amarillo también lo podemos encontrar en
los alimentos, pero en altas concentraciones puede provocar ataques de asma,
dermatitis de contacto y urticaria. La mayoría de las golosinas amarillas
contienen este aditivo. ()
- Ácido etilendiaminatetraacético (EDTA).- Esta sustancia se encuentra en la
tira adhesiva que protege la boquilla de impresión del cartucho, esta parte
contiene muchos contaminantes metálicos conocidos como EDTA. Es una
molécula hidra-dirigida que coordina los enlaces covalentes y los atrapa con el
fin de evitar el taponamiento de los cabezales de impresión.
- Dioles acetilénicos etoxilados.- Es un surfactante que modifica la tensión
superficial del agua y el tinte. Una tensión demasiado pequeña podría causar
que la tinta se salga del cartucho y una demasiado fuerte ocasionar problemas
de impresión. (4)

Algunas personas piensan que los cartuchos de tóner están llenos de tinta liquida, igual
que los cartuchos de inyección de tinta, la verdad es que no es así, estos cartuchos de
tóner por dentro tienen un polvo negro compuesto por varias sustancias que cada una
hace una función para obtener las paginas tal y como las recibimos en el papel.(4)

El polvo se pega en la página de un método muy diferente a como lo hace la tinta de

los cartuchos de inyección de tinta. A continuación hablaremos de los componentes
que tiene el polvo de tóner y cuál es su función en el proceso de impresión.

El primer ingrediente del polvo de tóner es un polímero o plástico que se adhiere a la

página cuando se funde con el fusor.
El material que se usa para el polímero puede variar según el fabricante, por ejemplo
HP usa copolimero estireno acrilato, en cambio otros fabricantes pueden utilizar resina
de poliéster u otros materiales. La baja cantidad de polímeros puede ser un problemas
en los tóner que no se desempeñan bien en comparación con los demás. (4)

El polímero corresponde al 60% del material que está fabricado el polvo de tóner.
Otro ingrediente importante es el óxido de hierro ya que el rodillo de la impresora esta
cargado magnéticamente, el óxido de hierro es lo que atrae el polvo de tóner hacia los
rodillos antes de ser transferido a las paginas.

Este elemento constituye el 40% de la materia que compone el polvo de tóner. El

colorante se lo da el pigmento, este da al toner un color que lo caracteriza de
los demás  las impresoras láser están compuestas por tres cuatro colores, negro,
magenta, cían y amarillo.

Estos entre otros factores son los que componen el polvo de tóner, otro que es
diminuto pero importante es la cera de arena, este da al tóner lo que es la textura y
consistencia del mismo. Esto puede variar dependiendo cual sea el fabricante.(3)

Todos estos ingredientes son mezclados juntos en un lote, puede ser que
las partículas sean desigual, ha ido mejorando con el tiempo el proceso que ayuda a
que en pequeñas cantidades siga con la misma composición el polvo de tóner, con
nuevos procesos químicos se pueden producir cantidades pequeñas con mas eficiencia
y calidad. (4)

Se recomienda pedir el tóner de mejor calidad antes de rellenar un cartucho de tóner,

esto ya sabe cual es la composición y se puede saber que la mínima variación de
reflejara en las paginas que imprimimos. También un buen lugar donde hacer pruebas
para medir la calidad, es esencial. (5)

IV.4. Micro núcleos en la cavidad bucal

Se puede realizar en células del epitelio bucal y otras células exfoliadas provenientes
de la rápida división del tejido epitelial; para el caso de la cavidad bucal su utilidad se
basa en estudios citogenéticos resaltando que son mínimamente invasivos al tratarse
de células exfoliadas de distintas partes de la cavidad oral y nos permite monitorear el
daño genético de las poblaciones humanas. Este método se usa desde 1980 para
demostrar los efectos resultantes de exposiciones ambientales y ocupacionales, estilos
de vida, deficiencias alimenticias y otras alteraciones. Las células de la cavidad bucal
son la primera barrera en la ruta de inhalación o ingestión y son capaces de
metabolizar cancerígenos a productos reactivo. Aproximadamente el 90% del cáncer
en humanos se produce a partir de células epiteliales, las cuales además, representan
un blanco preferido para los primeros eventos genotóxicos inducidos por agentes
cancerígenos que entran al cuerpo por inhalación o ingestión. (Amoros 2001)
El epitelio oral está compuesto por 4 estratos de poblaciones celulares estructurales,
progenitoras y de maduración, incluyendo la lámina propia o tejido conectivo, las
células basales o lámina basal, capa o estrato espinoso y una capa superficial de
queratina. Una serie de estructuras parecidas a dedos, conocidas como "rete pegs"
proyectados desde el tejido conectivo hacia la capa epidérmica produciendo un efecto
ondulante de las células de la capa basal. En el epitelio oral se produce una constante
renovación de células, en el cual las células que se desprenden son reemplazadas por
nueva células resultantes de la mitosis que se produce en la capa basal. (2)

Es en la capa basal donde se encuentran las células madre capaces de expresar

alteraciones genéticas durante la división celular tales como micronúcleos. Las células
hijas, que pueden o no incluir micronúcleos, se diferencian en la capa espinosa y la
queratinizada para luego exfoliar en la cavidad bucal. Algunas de estas células pueden
degenerar en células con cromatina condensada, núcleos fragmentados, núcleos
pignóticos o pueden perder por completo su material nuclear. Estos biomarcadores de
daño genético y muerte celular se pueden observar tanto en linfocitos como en células
de la cavidad bucal proporcionando mayor información sobre el daño del genoma.
(Amoros 2001)

El estudio de los micronúcleos en las células exfoliadas de la mucosa oral tiene su

ventaja no es invasiva por lo tanto permite reconoce cualquier tipo de agente
genotoxicos inhalado o ingerido durante las últimas tres semanas además de ser un
epitelio no estratificado se identifica en el laboratorio rápidamente facilitando la
observación estructural de la celula. (Torres-Bugarín y Ramos-Ibarra2013). (3)

Para la identificación se consideró los criterios planteados por "The International

Collaborative Project on Micronucleus Frequency in Human Populations" (HUMN
PROJECT), con un diámetro entre 1/16 a 1/3 del núcleo, forma redonda u ovalada, no
refractarios y que se puedan distinguir fácilmente de otros artefactos, que presenta la
misma intensidad de tinción que el núcleo, que se presente en el mismo plano focal
que el núcleo, que las células no estén solapadas y que la membrana celular y el
citoplasma se encuentren íntegros (Tolbert 1991; Torrez-Bugarín, et al 2013; Fenech,
et al 2003). (3)

Para su identificación, básicamente se usan los criterios establecidos por Tolbert en

1991 los cuales se describen a continuación (Thomas et al., 2008; Tolbert et al., 1991,
1992):
 Células Normales (CN): el núcleo esta uniformemente teñido, es redondo u oval,
se distinguen de las células basales porque son de mayor tamaño y el núcleo es
más pequeño en relación al citoplasma. No contienen ningún otro cuerpo o
estructura aparte del núcleo que contenga ADN, estas células son consideradas
 como células totalmente diferenciadas y no se observan divisiones celulares
(Thomas et al., 2009; Tolbert et al., 1991) (Figs. 2a y 2b).(3)
 Célula Micronucleada (CMN): se caracteriza por la presencia de un núcleo
principal y uno o más pequeñas estructuras nucleares denominadas MN. Un MN
tiene la forma redonda o almendrada y mide entre 1/3 y 1/16 del núcleo principal,
presenta la misma intensidad, textura y plano focal que el núcleo y es un
fragmento o un cromosoma completo que al momento de la mitosis no se integra
a uno de los núcleos de las células hijas (Thomas etal., 2009; Tolbert et al.,
1991) (Fig. 2c). (5)
 Célula binucleada (BN): son células que contienen dos núcleos principales,
usualmente los núcleos están muy próximos e incluso podrían hacer contacto,
ambos con morfología y tinción similar a un núcleo normal. No parecen implicar
una interacción directa con el ADN, sino que involucra la interferencia con los
hechos ocurridos a finales de la división celular. Se piensa que es un evento que
tiene lugar en dos etapas, en primer lugar ocurre la mitosis que dará origen a
dos núcleos pero el citoplasma no se divide; en consecuencia, se forma una
célula binucleada, misma que será eliminada si pertenece a un epitelio de
revestimiento, pero si este fenómeno ocurre en una célula del epitelio basal o
pertenece a otro tejido entonces ambos núcleos de la célula binucleada entraran
en mitosis al mismo tiempo, entonces cuando las membranas nucleares se
desintegren, simultáneamente los cromosomas de ambos núcleos quedaran
incluidos en el mismo huso y serán arrastrados juntos, así que en el momento de
que la mitosis esté completa, habrá dos células con doble material genético cada
una o bien, una célula tetrapaploide, si se repite el fenómeno de interrupción de
la citocinesis (Shi & & King, 2005; Thomas et al., 2009; Tolbert et al., 1991)
(Figs.2d). (4)
 Cariorrexis (CR): células que presentan un núcleo que se caracteriza por
agregación de la cromatina nuclear. Con respecto a las células de cromatina
condensada, ellas tienen un patrón moteado nuclear indicativo de la
fragmentación nuclear conducente a la eventual desintegración del núcleo. Estas
células tal vez están pasando por una fase avanzada de apoptosis pero esto aún
no ha sido comprobado (Thomas et al., 2009; Tolbert et al., 1991) (Fig. 2e).
 Cromatina Condensada (CC): estas células tienen núcleos intensamente
teñidos, con regiones condensadas o cromatina agregada exhibiendo un patrón
nuclear moteado o estriado, es evidente que la cromatina está agregada en
algunas regiones del núcleo; mientras que se pierde en otras áreas, así cuando
la condensación es extensa da la apariencia de un núcleo fragmentado. estas
células al igual que las células en carriorexis terminan con la fragmentación del
núcleo, lo que conlleva la desintegración eventual y algunas veces aparecen
como estructuras similares a los MN, pero estas no deben de ser
 contabilizadaos como MN ya que su origen aun no es determinado, tal vez están
en etapas tempranas de la apoptosis aunque dicha información aún no es
concluyente (Thomas et al., 2009; Tolbert et al., 1991) (Fig. 2f).
 Núcleo lobulado o prolongación nuclear, broken eggs (NL-BE): el núcleo
presenta una constricción en un extremo, sugestivos de un proceso de
eliminación de material nuclear por gemación. El lóbulo presenta las mismas
características morfológicas y de tensión que el núcleo, pero el tamaño es de 1/3
a 1/4 del núcleo; Tolbert et al. (1991) los definió como “Broken egg”, y Bhattathiri
et al. (1998) describe estos fenómenos como “Nuclear buds” reconociéndolas
como anormalidades nucleares. El origen y significado biológico de los BE en
células exfoliadas aun no es totalmente comprendido y existen muy pocas
publicaciones con cernientes a este tema. Algunos investigadores consideran a
los “nuclear buds” en linfocitos como indicadores de genotoxicidad, sin embargo,
en células exfoliadas no es claro ya que frecuentemente en diversos procesos
de salud y enfermedad aparecen con mayor frecuencia CMN en comparación a
las “nuclear buds”, por lo tanto; se puede asumir que las células con NL, no
están asociadas a eventos genotóxicos, clastogénicos o aneuploidogénicos,
pero tal vez sí a procesos degenerativos en la primera capa de células
epiteliales (estrato germinativo) (Narsesyan, 2005; Thomas et al., 2009; Tolbert
et al., 1991) (Figs. 2g y 2h).
 Núcleo picnótico (PN): estas células se caracterizan por tener un núcleo
pequeño, con alta densidad de material nuclear uniforme e intensamente teñido.
El diámetro del núcleo es aproximadamente de 1/3 del núcleo normal y se
piensa que estas células tal vez son una forma de muerte celular; sin embargo,
el mecanismo preciso sigue siendo desconocido. Hasta el momento, solo se
correlaciona con diferenciación y maduración de las células epiteliales (Thomas
et al., 2009; Tolbert et al., 1991) (Fig. 2i). (4)
 Cariolisis (CL): estas células están completamente vacías de ADN y por lo
tanto, no tienen núcleo. Es probable que representen una fase muy avanzada en
el proceso de muerte celular. La correlación positiva entre células picnóticas y en
cariolisis, sugiere que estas últimas, se derivan directamente a partir de células
con cromatina condensada o indirectamente a través de células picnóticas
(Thomas et al., 2009; Tolbert et al., 1991) (Fig. 2j). (5)
Fig. 2a. Células Normales, b núcleo normal, c. Célula micronúcleada (CMN); flecha micronúcleo (MN); d. Célula
binucleada (BN), e. Cariorrexis (CR); f. Cromatina condensada (CC); Microscopio Binocular Mca. Carl Zeiss Mod
Axiostar Plus.Fluorescencia IVFL Filtro de 450 a 490 Nanómetros, Objetivo Planacromático 100x/1.25 oil, cámara
Axiocam Icc 1, Imágenes capturadas a 400 y a 1000 aumentos reales.
Fig. 2. g-h. Núcleo lobulado típico (NL); Núcleo lobulado, i. Núcleo picnotico, flecha (PN); j. Cariolisis (CL). Microscopio
Binocular Mca. Carl Zeiss Mod Axiostar Plus. Fluorescencia IVFL Filtro de 450 a 490 Nanómetros, Objetivo Planacromático
100x/1.25 oil, cámara Axiocam Icc 1, Imágenes capturadas a 1000 aumentos reales.

IV.5. Factores de variabilidad

Existe factores que influyen en la prescencia de micronúcleos entre ellos tenemos: (4)

Tabla 1. Resumen de factores modificadores del número de micronúcleos en

cultivos de células humanas.

Incrementan el - > edad

N° micronúcleos - genero (mujeres>varones)
- Presencia de homocisteina plasmática
- déficit de B12 y folato
- procesos fisiológicos
- drogas
- alcohol
- exposición prolongada a agentes tóxicos.
Reducen N° - agentes antioxidantes
micronúcleos - vitaminas E y C
- beta caroteno
- infusiones de giensen y te
Fuente: Zalacain M, Sierrasesumaga L, Patiño A. (2005) El ensayo de micronúcleos como medida de
inestabilidad genética inducida por agentes genotoxicos. Anales Sis San
Navarra vol.28 no.2 Pamplona may./ago. 2005

IV.6. Tinción Giemsa

Es la segunda coloración en uso, luego de la tinción de Wright, y en importancia de las

mezclas de Romanowsky. Es quizás la mejor modificación de este tipo de coloraciones
para descubrir parásitos en la sangre, como en el caso de malaria (Plasmodium spp.) y
tripanosomiasis (Trypanosoma cruzi). El colorante de Giemsa también da excelentes
resultados para la tinción rutinaria de frotes sanguíneos. Cuando se va a teñir con este
colorante, debe fijarse primero la muestra con metanol absoluto por un tiempo mínimo
de tres minutos (cuando la preparación no incluye metanol). El colorante en solución
nunca se utiliza de manera directa, por lo que se debe diluir con la solución
amortiguadora en una proporción de 1:10 ó 1:20 y el tiempo de coloración podrá ser de
10 ó 20 minutos, respectivamente. (4)

V. DISEÑO METODOLÓGICO

V.1. Tipo de estudio

Descriptivo, experimental.
V.2. Área de Estudio
El área de estudio es toda la ciudad de El Alto donde se encuentren las fotocopiadoras.
V.3. Universo y muestra
Nuestro universo será todas las fotocopiadoras que se encuentren en la Ceja, la
muestra serán 50 personas que trabajen en las diferentes puestos de fotocopias,
impresiones, anillados, etc.
V.4. Unidad de información
La información será directa, por las mismas personas que atienden en las tiendas.
V.5. Criterios de inclusión y exclusión
Las personas encuestadas serán personas mayores que se encuentren en el puesto,
serán excluidas las fotocopias que se encuentren cerradas, oh que estén atendidas por
personas secundarias, oh menores de edad en ese momento.
V.6. Aspectos Éticos
Se les dará la autonomía respetando la privacidad de los mismos otorgándoles un
consentimiento informado previamente firmado por los docentes y directores. (Anexo 1)
V.7. Métodos e Instrumentos
Se tomara una pequeña encuesta a todos los responsables de las fotocopias (Anexo 2)
además se le tomara una muestra bucal (hisopado) con material esterilizado para
proceder con la tinción.
 V.8. Procedimientos para la recolección del datos

Previo conocimiento del pasiente por medio de una encuenta

Paso 1

La bioseguridad del pasiente y de uno mismo

Paso 2

Tomar la muestra con un baja lenguas esterilizado

Paso 3

Realizar un raspado en la mucosa bucal

Paso 4

Extender la muestra en un porta objeto

Paso 5

Llevar al laboratorio para realizar la caracteristica Tincion GIEMSA

Paso 6

Fijar el frotis con alcohol metílico de 3-4 minutos.

Paso 7

Sumergirlo verticalmente en una solución de Giemsa con agua desionizada

Paso 8

Esperar durante 10-20 minutos.

Paso 9

Lavar el frotis con abundante agua, directamente del chorro.

Paso 10

Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol para
Paso 11 eliminar cualquier resto de colorante.

Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión

Paso 12
 V.9. Tiempo – Cronograma

CRONOGRAMA
Novie
Septiembre Octubre mbre Diembre

ACTIVIDADES 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Eleccion del tema
Desarrollo del tema
Eleccion de lugar de investigacion
Determinar la prueba de laboratorio
Pre-presentacion del proyecto
Elaboracion de encuesta
Recoleccion de datos estadisticos
Compra de materiales
Compra de reactivos
Llenado de encuesta por parte de los pacientes
Recoleccion de las muestras
Ingreso a laboratorio
Tincion giemsa
Observaciones
Presentacion de resultados
Presentacion del proyecto
Defensa del proyecto

V.10. Recursos: humanos, físicos, financieros

N° Recursos Humanos
6 Estudientes de la Carrera de Bioquimica
1 Docente de la carrera de Bioquimica

FISICOS Y FINANCIEROS
MATERIAL CANTIDAD PRECIO UNITARIO PRECIO TOTAL
Hojas bon 100   25
Bolígrafos 10 1 10
guates de latex 6 1,5 9
Gorritos 6    
Isopo 50 1 75
Barbijo 6 1 6
porta objeto 50 1,5 75
cubre objeto 50 1 50
Reactivos 3 50 150
Impresiones 50 0,5 25
Pasajes 20 1,5 30
VI. BIBLIOGRAFIA
1. M. Zalacain (2005) micro núcleos, navarra vol. 28
2. V. Amoros, A. Gallardo, R. Garcia, (2001) ASEFAPI Gabinete de Salud Laboral
de la FeS-UGT
3. Taborga X, Quispe A, Larrea M. Presencia de micronúcleos en células
exfoliadas de la mucosa oral en personas expuestas a agentes genotoxicos.
Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas. Rev.Cs.Farm. y
Bioq. v.4 n.2 La Paz nov. 2016
4. Zalacain M, Sierrasesumaga L, Patiño A. (2005) El ensayo de micronúcleos
como medida de inestabilidad genética inducida por agentes genotoxicos.
Anales Sis San Navarra vol.28 no.2 Pamplona may./ago. 2005
5. Ramos E. (2013) micronúcleos y anormalidades nucleares en mucosa bucal
para evaluar población en riesgo laboral por múgatenos. Rev. Salud Pública.
N°1V22
6 Polaco A. Historia de la fotocopiadora. Tecnología Obsoleta y Cultura 3 de julio
del 2015.
7 Zalacain M, Patiño A. (2005) El ensayo de micronucleos como medida de
estabilidad genética inducida por agentes genotoxicos. Scielo Version impresa
ISSN-1137-6627.