UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL

ESTADO DE MÉXICO
Q.F.B

REPORTE PRÁCTICA DE LABORATORIO No. 06

‘’’Aislamiento de una proteína a partir del

suero sanguíneo’’

ASIGNATURA: BIOQUÍMICA

DOCENTE: CYNTHIA ELENA ENRÍQUEZ GARCÍA

CICLO ESCOLAR: 2019-B

QFB GRUPO 32
Octubre 03 de 2019.

EQUIPO 07:

Domínguez Oro Laura Citlalli

Hernández Oropeza Nedaviah

Saldivar Ahumada Alejandra

 ’’Aislamiento de una proteína a partir del suero sanguíneo’’
(PRÁCTICA 06)
OBJETIVO DE LA PRÁCTICA:
Identificar, mediante ensayos bioquímicos, algunos de los aminoácidos
que conforman a las proteínas.

INTRODUCCIÓN:
La sangre es un tejido conectivo líquido, que circula por capilares, venas y
arteria. Su color rojo característico es debido a la presencia del pigmento
hemoglobínico contenido en los glóbulos rojos.
Su función principal es la distribución e integración sistémica, cuya contención
en los vasos sanguíneos (espacio vascular) admite su distribución (circulación
sanguínea) hacia prácticamente todo el organismo.
La sangre suele tener un pH entre 7,33 y 7,44 (valores presentes en sangre
arterial). Sus variaciones más allá de esos valores son condiciones que deben
corregirse pronto (alcalosis, cuando el pH es demasiado básico, y acidosis,
cuando el pH es demasiado ácido).
Es un tipo de tejido conectivo especializado, con una fase sólida (elementos
formes), que incluye a los eritrocitos (o glóbulos rojos), los leucocitos (o
glóbulos blancos) y las plaquetas, y una fase líquida, representada por el
plasma sanguíneo. Estas fases son también llamadas partes sanguíneas, las
cuales se dividen en componente sérico (fase líquida) y componente
celular (fase sólida).
 PLASMA SANGUÍNEO:
Es la porción líquida de la sangre que forma parte del líquido extracelular. Es el
mayor componente de la sangre, representando un 55 % del volumen total. Es
salado y de color amarillento traslúcido. Además de transportar las células de
la sangre, lleva los nutrientes y las sustancias de desecho recogidas de las
células.
El plasma sanguíneo es esencialmente una solución acuosa que contiene, entre
otras cosas, una mezcla de muchas proteínas vitales. Entre estas proteínas
están:

 fibrinógeno (para la coagulación)

 globulinas (regulan el contenido del agua en la célula, forman
anticuerpos contra enfermedades infecciosas)
 albúminas (ejercen presión osmótica para distribuir el agua entre el
plasma y los líquidos del cuerpo)
 lipoproteínas (amortiguan los cambios de pH de la sangre y de las
células y hacen que la sangre sea más viscosa que el agua).
Otras proteínas plasmáticas importantes actúan como transportadores hasta
los tejidos de nutrientes esenciales como el cobre, el hierro, otros metales y
 diversas hormonas. Los componentes del plasma se forman en el hígado
(albúmina y fibrinógeno), las glándulas endocrinas (hormonas), y otros en el
intestino.

Cuando se coagula la sangre y se consumen los factores de la coagulación, la

fracción fluida que queda se denomina suero sanguíneo.
 GLOBULINAS:
Son un grupo de proteínas solubles en agua, solubles en disoluciones salinas,
que se encuentran en todos los animales y vegetales.
Entre las globulinas más importantes destacan las seroglobulinas (de la
sangre), las lactoglobulinas (de la leche), las ovoglobulinas (del huevo), la
legúmina, el fibrinógeno, las inmunoglobulinas (anticuerpo) y numerosas
proteínas de las semillas.
Se dividen en:

 Globulinas alfa 1
 Globulinas alfa 2
 Globulinas beta
 Globulinas gamma (de enorme peso molecular. Se encuentran en el
plasma realizando funciones defensivas)

 TIPOS DE SUERO O PLASMA:

Lipénico: tiene un aspecto turbio lechoso.
Ictérico: es amarillo, ya que tiene altos niveles de bilirrubina.
Hemolizado: cuando los hematíes se han roto, vertiendo al torrente
sanguíneo su contenido (K+ y hemoglobina). Son sueros de color rojizo y con
altos contenidos de K+.
La hemólisis puede ser provocada por diferentes causas como:
 Exceso de velocidad de succión de la muestra.
 Vaciado inadecuado de la jeringa.
 Proporción inadecuada de anticoagulante.
 Mordedura de víboras y crótalos.
 CONSIDERACIONES PARA LA PRÁCTICA:
 Solución isotónica: Un medio o solución isotónica es aquel en el cual la
concentración de soluto es igual fuera y dentro de una célula. En
hematología, se dice de las soluciones que tienen la misma
concentración de sales que los glóbulos rojos son isotónicas. Por tanto,
tienen la misma presión osmótica que la sangre y no producen la
deformación de los glóbulos rojos.
  Centrifugación: ayuda a aislar/purificar a la proteína, mediante la
separación de la sustancia por su diferencia en peso molecular.

 Ninhidrina: Da positivo con todos los aminoácidos alfa, cuyo pH sea

entre 4 y 8. Da una tinción violeta intenso.

PROCEDIMIENTO:

1.
Añadir 4mL
En tubo de
de suero no
ensaye.
hemolizado.

2.
Añadir 2mL
Lentamente y
de sulfato de
gota a gota.
amonio.
Repite pasos
de 2 a 5

3. Agitar
suavemente.
Tiempo: 10
minutos.

4. Centrifugar a
2500 rpm.
Tiempo: 15
minutos.
Turbio/amari
llento

5. Eliminar
sobrenadante.
Con pipeta
Pasteur.

6. Sobrenadante:
color claro.

7.
4mL sol.
Resuspender
isotónica
precipitado.
NaCl.

8. Prueba de
Ninhidrina.
3 gotas.

9. Guardad
solución.
Refrigerar.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
CONCLUSIÓN:

CUESTIONARIO:
1. ¿Cuáles son las principales funciones de la sangre?
Transporta las células necesarias para llevar a cabo las funciones vitales
(respirar, formar sustancias, defenderse de agresiones).
Transporta los principios nutritivos desde el aparato digestivo hasta las
células, donde se recogen también las sustancias de desecho para
eliminarlas gracias a los riñones, el hígado y otros órganos de excreción.
También es la encargada de regular el transporte de oxígeno y la
eliminación del anhídrido carbónico.
Tiene un papel importante en funciones como la coagulación, la inmunidad
y el control de la temperatura corporal.

2. ¿Por qué fue necesario aplicar la prueba de Ninhidrina al

producto obtenido?

Porque, como bien sabemos, la Ninhidrina es un gran agente reactivo que

nos permite identificar ciertos aminoácidos, específicamente aquellos alfa
A.A, dando una tinción violeta fuerte.
Por lo cual ésta reacciona con la Prolina contenida en la inmunoglobina
(glucoproteína del tipo gamma globulina).

3. ¿Qué diferencia existe entre el suero y el plasma sanguíneo?

El plasma sanguíneo es esencialmente una solución acuosa que contiene,
entre otras cosas, una mezcla de muchas proteínas vitales.
El suero sanguíneo es la fracción fluida que queda cuando se coagula la
sangre y se consumen los factores de la coagulación.
El plasma contiene fibrinógeno mientras que el suero sólo contiene fibrina.
Si a la sangre añadimos anticoagulante obtenemos plasma.

4. ¿Qué propiedad de las proteínas fue aplicada en el método de

extracción usado en la práctica?

5. Escriba una clasificación de las globulinas en la cual incluya su

función biológica.

SEROGLOBULINAS
 LOCALIZACIÓN:
ALFA 1 Y 2
Asociadas a Hb. Fijan y
controlan enzimas.
Proteínas sanguíneas
FUNCIONES
BETA GAMMA
Transporte de iones en Defensa inmunológica
la sangre. Transportan y anticuerpos.
al grupo hemo de la
hemoglobina.

EJERCICIOS DE INTEGRACIÓN:
1) Mencione tres técnicas analíticas empleadas para la separación de
proteínas.

2) Suponga que está purificando una proteína. Explique cómo

calcularía la cantidad de Sulfato de Amonio necesario para llevar a
cabo su precipitación.

REFERENCIAS:

CromLab. (s.f). NINHIDRINA. [En línea]. Recuperado el 01 de Octubre de 2019, de

http://www.cromlab.es/REAC_DER_AA_NINHYDRIN.htm

Fundació Banc de Sang. (2019) ¿Qué es la sangre? [En línea]. Recuperado el 01 de

Octubre de 2019, de: http://www.donasang.org/que-es-la-sang/es_index.html

Texas Heart Institute. (s.f). La sangre. [En línea]. Recuperado el 01 de Octubre de 2019,
de: https://www.texasheart.org/heart-health/heart-information-center/topics/la-
sangre/

Wikipedia. (Abril, 2019). Globulina. [En línea]. Recuperado el 01 de Octubre de 2019,

de: https://es.wikipedia.org/wiki/Globulina

Wikipedia. (Abril, 2019). Sangre. [En línea]. Recuperado el 01 de Octubre de 2019, de:
https://es.wikipedia.org/wiki/Sangre#Plasma_sangu%C3%ADneo

Wikipedia. (Abril, 2019). Isotónico. [En línea]. Recuperado el 01 de Octubre de 2019,

de: https://es.wikipedia.org/wiki/Isot%C3%B3nico