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LABORATORIO DE METROLOGÍA

PRÁCTICA #4: CALIBRACION DE MICROPIPETAS

Laura Cristina Carvajal Benítez

Alexandra Valencia Zarama
Alexandra Bustamante Pizo
Brigeth Cerón Fernández

FUP, Ingeniería industrial, lauracristinacarvajal@hotmail.es

FUP, Ingeniería industrial, alexa_valencia@hotmail.com
FUP, Ingeniería industrial, alexandra_037@hotmail.com
FUP, Ingeniería industrial, brigethc_92@hotmail.com

Resumen: En la práctica de laboratorio se realizaron técnicas de medición para la toma de datos y calibración de la micro-
pipeta para cumplir con el procedimiento de calibración establecidos por las normas ISO-DIS-8655-6:2001, ISO-4787-1984,
con el fin de garantizar el óptimo funcionamiento del equipo.

Palabras clave: Micro-pipeta, incertidumbre, magnitud, calibración, medición, volumen, verificación

Abstract: In the following report, a measurement procedure was performed for data collection and calibration of the
micropipettes to comply with the calibration procedure for fixed and variable micropipettes established by ISO-DIS-8655
standards; 6: 2001, ISO-4787-1984, in order to guarantee the optimal functioning of the equipment.

Keywords: Micro pipettes, uncertainty, magnitude, calibration, measurement, volume, check.

 Analizar cada uno de los datos de medición

I. INTRODUCCIÓN obtenidos en el procedimiento.
En una producción se hace necesario una serie de  Verificar si la micro-pipeta es óptima para cumplir
materiales e insumos para su respectiva realización, en lo las funciones dentro del laboratorio.
cual se es indispensable realizar una calibración y
planeación que muestre lo que realmente se necesita. III. MARCO TEÓRICO

La calibración es el proceso de comparar los valores Micro-pipeta: Es un instrumento de laboratorio empleado

obtenidos por un instrumento de medición con la medida
correspondiente de un patrón de referencia (o estándar)
garantizando la veracidad de los datos. Por ellos se aplica la
calibración a las micro-pipetas fijas y variables con el fin de
obtener datos ciertos para la utilización de diferentes
procesos en el laboratorio de metrología
II. OBJETIVOS
General:
Cumplir el procedimiento de calibración para micro-pipetas
fijas y variables establecidos por las normas ISO-DIS-8655-
6:2001, ISO-4757-1984, y ejecutando los estándares de
calidad establecidos por el laboratorio, con el fin de
garantizar el óptimo funcionamiento del equipo.
Específicos:
para succionar y transferir pequeños volúmenes de líquidos
y permitir su manejo en las distintas técnicas analíticas.
Los volúmenes captables por estos instrumentos varían
según el modelo: los más habituales, denominados p20,
p200 y p1000, admiten un máximo de 20; 200 y 1000 μl,
respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear
distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello,
se emplean puntas desechables, de plástico, que
habitualmente son estériles. Existen varios tipos de puntas:
por ejemplo, las amarillas para pipetear volúmenes
pequeños (por ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear
volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl)

Balanza: Es un instrumento que sirve para medir la masa de
los objetos.
Es una palanca de primer grado de brazos iguales que,
mediante el establecimiento de una situación de equilibrio
entre los pesos de dos cuerpos, permite comparar masas.
Para realizar las mediciones se utilizan patrones de masa
cuyo grado de exactitud depende de la precisión del
instrumento. Al igual que en una romana, pero a diferencia
de una báscula o un dinamómetro, los resultados de las
mediciones no varían con la magnitud de la gravedad. El
rango de medida y precisión de una balanza puede variar
desde varios kilogramos (con precisión de gramos), en
balanzas industriales y comerciales; hasta unos gramos (con
precisión de miligramos) en balanzas de laboratorio.
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En otro beaker de 50 ml se agrega agua destilada y se
coloca el termómetro dentro de éste. Por último se pone la
punta de la micro-pipeta.
2. Registro de datos
Se registran los datos, condiciones ambientales, fecha de
recepción y calibración, método utilizado y el nombre de la
persona que realiza la calibración. También se registran los
datos de la micro-pipeta y posterior se establece el volumen
máximo de la micro-pipeta.
3. Graduación de la micro-pipeta
Se elige el volumen a tomar, se toma la micro-pipeta por la
parte superior, de tal manera que el dedo pulgar pueda
presionar el botón pulsador y expulsor.

Incertidumbre: Es una expresión que manifiesta el grado de 4. Ejecución de la prueba

desconocimiento acerca de una condición futura, pudiendo Se presiona con el pulgar el pulsador hasta el primer tope,
implicar una previsibilidad imperfecta de los hechos, es luego se sumerge verticalmente en el líquido, a
decir, un evento en el que no se conoce la probabilidad de continuación se deja de presionar el pulsador aspirando así
que ocurra determina situación el volumen requerido. Se repiten 5 veces las medidas según
Calibración: Es el proceso de comparar los valores el patrón a analizar.
obtenidos por un instrumento de medición con la medida
correspondiente de un patrón de referencia (o estándar).
Para la realización de la calibración se tienen en cuenta las
Según la Oficina Internacional de Pesas y Medidas, la
siguientes fórmulas:
calibración es "una operación que, bajo condiciones
específicas, establece en una primera etapa una relación ̅ (Media)
𝒙
entre los valores y las incertidumbres de medida provistas 𝒙𝟏 + 𝒙𝟐 + 𝒙𝟑 + 𝒙𝟒 + ⋯ + 𝒙𝒏
̅
𝒙=
por estándares e indicaciones correspondientes con las 𝑵
incertidumbres de medida asociadas y, en un segundo paso,
usa esta información para establecer una relación para
obtener un resultado de la medida a partir de una
indicación Fórmula de la desviación estándar

Medición: Es un proceso básico de la ciencia que consiste

en comparar un patrón seleccionado con el objeto o
fenómeno cuya magnitud física se desea medir, para
averiguar cuántas veces el patrón está contenido en esa
magnitud
Desviación estándar de la media
IV. METODOLOGÍA

1. Preparación de equipos
Se enciende la balanza analítica, se verifica el nivel,
teniendo en cuenta la burbuja este mínimo e un 80%. Luego
se coloca un beaker de 50 ml dentro de la balanza y se tara. σ
Error:
√N
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Incertidumbre tipo A

Incertidumbre tipo B
𝛔
𝑼(𝑩) =
√𝟑  Agua destilada

Incertidumbre combinada
𝝁 = √𝑺𝟐 + 𝝁𝑩𝟐 + 𝝁𝑬𝟐

Incertidumbre expandida
𝝁𝑬 = 𝝁𝑪 ∗ 𝑲
K= 2 (95%)
Volumen  Termómetro
𝒎
𝒗=
𝒅

Los materiales utilizados en la práctica fueron:

 Balanza

Tabla 1. Datos ambientales

Temperatura 22 °C
Humedad 44%
Presión atmosférica 817.81 hPa

 Micro-pipeta

V. RESULTADOS
 Beaker de 50 ml (2)

Tabla 2. Volumen
Tabla 3. Volumen de agua destilada medido
VI. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Antes de la calibración se realizó una verificación de la
balanza, se hace una limpieza para evitar sustancias o
presencia de elementos que puedan alterar las mediciones.
Se utilizó el método en donde se pesó determinado
volumen de agua, en la tabla 2 observamos el volumen
experimental varía de acuerdo con el volumen reportado
por el instrumento, esto se debe a que la masa del agua es
afectada por el aire, temperatura y estado de la micro-
pipeta ya que las puntas no eran desechadas si no
reutilizadas en varias ocasiones y no se podía graduar en el
mínimo porcentaje requerido, sin embargo al mirar en la
tabla 1. La desviación y el error tanto sistemático (método
personal e instrumental) como casual (errores en la
medición), afectaron de manera mínima en la precisión y
exactitud del mismo.
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Para realizar la calibración, la micro-pipeta, puntas, agua
destilada y balanza deben estar a la misma temperatura. Al
mismo tiempo la temperatura ambiente debe estar entre
20°C y 25°C y no variar más de +/- 0,5°C mientras dure la
calibración. También es indispensable que no existan la
radiación solar directa o corrientes de aire para poder tener
un trabajo preciso y exacto.
Al calcular los valores del volumen experimental en cada
medición observamos que la desviación estándar aumenta
con la medida (ver tabla 1), se debe al error relativo de la
medida, ya que a mayor volumen mayor será el error.
En la tabla 2, se observan los datos obtenidos en el
laboratorio, estos eran similares entre sí, por lo tanto esto
quiere decir que la micropipeta y la balanza empleadas para
la medición de los datos es precisa. En pruebas de
verificación como repetibilidad que en metrología es el
grado de concordancia que se tiene a la hora de medir o
calibrar un equipo, conforme lo realizado en la práctica se
puede observar en la tabla que se presenta un mínimo error
para cada volumen, lo que se puede presentar debido a una
mala manipulación o el desgaste que puede presentar cada
patrón que se utilizó para la calibración de la micropipeta,
asimismo el error presentado se puede deber a la mala
utilización de la micropipeta e incluso de la balanza o a un
mal mantenimiento previo de las mismas.
VII. CONCLUSIONES
 En general, para nuestro laboratorio, el resultado
teórico no es igual al obtenido en los resultados
experimentales, se concluye que hay una cierta
diferencia o un índice de error mínimo, lo que se
puede deber a aspectos como, la antigüedad de los
equipos y materiales utilizados en esta, sin dejar de
lado el error humano que se puede presentar.
 Se encontró que la balanza no estaba en óptimas
condiciones ya que el display presentaba en su
interior residuos provenientes de insectos, por lo
cual se deduce que estos aspectos afectan la toma
de mediciones
 En los resultados obtenidos se evidencia que se
cometieron errores aleatorios como añadir gotas
de agua entre cada medición, la evaporación del
agua, los cuales afectan los valores a partir de la
segunda medición.
 Un aspecto importante para que el laboratorio
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arroje resultados más precisos es que las puntas
deben ser desechadas cada vez que se utilicen, pero
en este caso las puntas eran reutilizadas, por lo
anterior se recomienda utilizar una nueva cada vez
que la micropipeta sea utilizada.

 Se debe tener en cuenta las condiciones de

temperatura, humedad y presión atmosférica a la
hora del procedimiento de medición.

 Por último se recomienda que para aminorar el

error en la práctica realizada se realice un
mantenimiento preventivo y correcta calibración a
las micropipetas y a las balanzas.

 Se debe tener en cuenta para la medición que la

micropipeta esté en las condiciones óptimas para
su utilización en el proceso y arroje así resultados
más preciso.

VIII. BIBLIOGRAFÍA

 https://es.wikipedia.org/wiki/Calibre_(instrument
o)

 http://www.ditutor.com/estadistica/desviacion_e
standar.html

 http://ocw.uc3m.es/ingenieria-mecanica/diseno-
mecanico-1/material_clase/introduccion-a-la-
incertidumbre-de-medidas