BIOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN- PRÁCTICA #4 EUGENIA ALANIZ FIERRO 121280
‘‘CONCENTRACIÓN ESPERMÁTICA
Introducción para determinar la concentración de
espermatozoides. La ventaja de las Para determinar cuántos nuevas cámaras sobre la cámara de espermatozoides hay en una Neubauer® es que éstas utilizan las eyaculación es necesario hacer un muestras sin diluir, aumentando la seminograma. Esta prueba diagnóstica precisión del procedimiento y la de la fertilidad masculina permite reproducibilidad de los resultados. valorar si existe una concentración de espermatozoides suficiente para lograr Objetivo: un embarazo natural, además de otros Comparar la cámara de Makler con la de parámetros seminales. Neubauer La cantidad de espermatozoides que Material: hay en el semen del varón es importante a la hora de conseguir una gestación ya Muestra seminal que son muchos los que mueren Pipetas desechables durante el camino hasta el óvulo. La Guantes vagina, el paso por el cuello del útero y Cubre bocas la llegada hasta las trompas de Falopio Lentes protectores son una yincana biológica en la que Microscopio muchos espermatozoides no llegan al Portaobjetos y cubre objetos destino, por lo que es importante Cámara Neubauer comenzar la carrera con una buena Cámara de Makler concentración espermática. Fijador IBC-one La concentración de espermatozoides Método: es uno de los parámetros más Concentración de importantes en la evaluación de la espermatozoides: Sólo se cuentan fertilidad masculina. Tradicionalmente, los espermatozoides completos. Lo el recuento de espermatozoides se normal es que la concentración de realiza utilizando la cámara de espermatozoides sea mayor o igual a Neubauer® que se ha convertido en el 15 millones por ml. Cuando la patrón de oro y el método recomendado concentración de espermatozoides por la Organización Mundial de la Salud es menor, hablamos de (OMS)1,2. Sin embargo se han diseñado oligozoospermia. otras cámaras como la Makler® (Sefi Medical Instruments, Haifa, Israel), a) Motilidad o movilidad Microcell® (Concepción Technologies, espermática: Se estudian Natick, MA, EE.UU.) y Horwell® los patrones de movimiento (Horwell Ltd, Londres, Reino Unido), de los espermatozoides, LICENCIATURA EN BIOLOGÍA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ BIOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN- PRÁCTICA #4 EUGENIA ALANIZ FIERRO 121280
clasificándolos en 3 tipos: Makler es 0,01 μl, 1/10 de la cámara
progresivos (que se mueven Neubauer hacia delante), no Cámara de Neubauer: La cámara progresivos (que se mueven Neubauer® tiene una profundidad de en varias direcciones, pero 0,1 mm. Consiste en 25 cuadrados no hacia delante, en círculos grandes y 16 pequeños; cada cuadrado o no se mueven del sitio) o grande tiene 1 x 1 mm. Se realizó un inmóviles (que no presentan cálculo visual preliminar de la movimiento). concentración de esperma por medio de b) Vitalidad: Cuando en el observación microscópica de la muestra examen se detectan muchos sin diluir antes de preparar la cámara. espermatozoides inmóviles, se realiza una prueba de Fórmula: tinción para detectar cuantos ( )= (espermatozoides contados) * espermatozoides están en 10,000/ 5 (factor de dilución) realidad muertos en el 1. Cámara de Neubauer: la momento de la eyaculación. muestra de semen debe diluirse c) Morfología: Se estudia la a 1:5 (factor de dilución) forma de la cabeza del 2. Colocar la cámara con el cubre espermatozoide, que debe objeto y agarrar una gota de ser ovalada, y que presente semen. un cuello y una cola. Se 3. Contar cinco recuadros de los considera que más de un 4% más pequeños que se muestran de los espermatozoides en la cámara. deben presentar una forma 4. El total del número de normal. espermatozoides contados, d) Número de sustituirlo en la fórmula espermatozoides por -Fórmula 2- eyaculación: se calcula el ( )= total de espermas / 5*10ª la 6 (2) número total de espermatozoides en el eyaculado. Cámara de Makler: La cuadrícula de la cámara de recuento Makler mide 1 x 1 Resultados: mm, y tiene una profundidad de sólo De acuerdo con la hoja proporcionada 0,01 mm, y está subdividida en 100 por el docente, en la cual se manejan cuadros de 0,1 x 0,1 mm, cada uno, por los parámetros establecidos por la lo que el volumen total en una cámara Organización Mundial de Salud (OMS); LICENCIATURA EN BIOLOGÍA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ BIOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN- PRÁCTICA #4 EUGENIA ALANIZ FIERRO 121280
tomando nuevamente en cuenta los
siguientes valores. (Tabla.1)
Se obtuvieron los siguientes resultados:
La dilución a utilizar fue de 1:5 con un volumen de la muestra de 1.25 ml, por lo cual el diluyente 0b.8. y el fijador IBC-one.
Por lo cual para determinar la
concentración se realizaron las siguientes fórmulas; de acuerdo a la OMS.-
OMS= 543x10,000/ 5 x el factor de
dilución (5)= 217,200 Concentración= 543/5 *10⁴ x 5= 5,430,000
Fig.1 Cámara de Neubauer
Fig.2. Cuadrícula de la cámara de Neubauer, leve marcación.
Discusión: espermatozoides. La variabilidad en la
determinación de la concentración de El uso de la cámara de Makler para esperma entre las diferentes cámaras determinar la concentración de es inevitable y las diferencias se han espermatozoides sólo requiere una atribuido a la dilución de las muestras única alícuota de la muestra original, es de semen, las cámaras utilizadas para más fácil de realizar que con la cámara contar los espermatozoides, las de Neubauer y el cálculo se aproxima a propiedades de la muestra de semen, la concentración real de LICENCIATURA EN BIOLOGÍA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ BIOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN- PRÁCTICA #4 EUGENIA ALANIZ FIERRO 121280
tales como viscosidad, y las diferencias Bibliografía:
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