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Manual de Prácticas de Laboratorio de Farmacognosia y Fitoquímica PDF
Manual de Prácticas de Laboratorio de Farmacognosia y Fitoquímica PDF
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA
DEPARTAMENTO DE FARMACIA
Objetivo general
PRESENTACIÓN
CONTENIDO
Pág.
PRACTICA RECONOCIMIENTO DE LA FLORA UNIVERSITARIA,
No. 1 TAXONOMÍA VEGETAL, PRESENTACIÓN DE UN
EJEMPLAR CON SU CLASIFICACIÓN -
PRACTICA RECONOCIMIENTO DE METABOLITOS SECUNDARIOS 19
No. 2
PRACTICA TÉCNICAS GENERALES DE AISLAMIENTO, SEPARACIÓN
No. 3 Y PURIFICACIÓN (CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y EN 5
COLUMNA)
PRACTICA RECONOCIMIENTO DE ADULTERACIONES Y/O
No. 4 FALSIFICACIONES (OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE 22
DROGAS PULVERIZADAS)
PRACTICA RECONOCIMIENTO CROMATOGRÁFICO DE PLANTAS
No. 5 MEDICINALES APROBADAS EN COLOMBIA 38
RECONOCIMIENTO POR CCF DEL AJENJO 38
RECONOCIMIENTO POR CCF DEL AJO 38
RECONOCIMIENTO POR CCF DE LA ALCACHOFA 39
RECONOCIMIENTO POR CCF DE LA ALBAHACA 40
RECONOCIMIENTO POR CCF DE LA HIERBABUENA 40
RECONOCIMIENTO POR CCF DEL HINOJO 41
RECONOCIMIENTO POR CCF DE LA MALVA 42
RECONOCIMIENTO POR CCF DE LA MANZANILLA 43
4
MATRICARIA
RECONOCIMIENTO PO R CCF DEL ROMERO 43
RECONOCIMIENTO POR CCF DE LA SABILA 44
RECONOCIMIENTO POR CCF DE FLORES DE SAUCO 45
RECONOCIMIENTO POR CCF DE HOJAS DE TORONJIL 45
RECONOCIMIENTO POR CCF DE VALERIANA 46
PRACTICA FENILPROPANOS (ACEITES ESENCIALES) 47
No. 6
PRACTICA TÉCNICAS GENERALES DE EXTRACCIÓN Y VALORACIÓN 52
No. 7 DE UNA DROGA: VALORACION DE ALCALOIDES DEL
TROPANO, VALORACION DE RUTINA, VALORACION DE
ANETOL
PRACTICA N° 2
RECONOCIMIENTO DE METABOLITOS SECUNDARIOS
OBJETIVO
Distinguir y clasificar los diferentes metabolitos secundarios presentes en el tejido
vegetal por medio de pruebas químicas de coloración y precipitación.
Consultar:
Domínguez, X. A., “Métodos de Investigación Fitoquímica”, Ed.Limusa,México,
1973.Capítulo 3.
MARCO TEÓRICO
Metabolitos Primarios:
Son los productos químicos necesarios para la vida, resultantes del metabolismo
vital de todo ser vivo, son: lo s carbohidratos, los lípidos, las proteínas y los ácidos
nucleicos.
Metabolitos Secundarios:
Otros compuestos llamados metabolitos secundarios son subproductos de rutas
metabólicas normales que ocurren en ciertas especies, siendo particulares dentro
de un grupo taxonómico, estado de vida o tejido presentando una distribución
restringida dentro del Reino Vegetal dando origen a la quimiotaxonomía. Su
ocurrencia depende de condiciones externas tales como ataques de patógenos,
predadores, cambios térmicos o l umínicos, deficiencias nutricionales o presencia
de otros organismos intra o interespecíficos. El metabolismo secundario es una
característica fundamental de la especialización, es decir que el compuesto
resultante, puede no ser importante para la célula pero sí para el organismo como
un todo. Los metabolitos secundarios pueden ser bioactivos, pero no jugar un
papel esencial en los procesos fisiológicos del organismo. Algunos metabolitos
secundarios son “residuos bioquímicos”, es decir, productos de activ idad
enzimática de substratos no apropiados o productos de destoxificación o desecho
de importancia para la supervivencia y la buena condición de los organismos. Con
pocas excepciones, los metabolitos secundarios pueden clasificados dentro de
cinco grupos, de acuerdo con su base biosintética: fenilpropanos, acetogeninas,
terpenoides, esteroides y alcaloides.
Reconocimientos de Metabolitos:
El reconocimiento de metabolitos secundarios se realiza por medio de pruebas
fitoquímicas preliminares, las cuales son una prueba química de caracterización
consistente en una reacción química que produce alteración rápida en la
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• Reconocimiento de Alcaloides:
Los alcaloides son sustancias básicas que contienen nitrógeno en un anillo
heterocíclico, son derivados de aminoácidos, presentan distribución taxonómica
limitada y se encuentran en plantas superiores como sales de un ácido org ánico.
CH3
N
Nicotina
Atendiendo a su solubilidad, propiedad empleada para extraerlos y purificarlos, la
base del alcaloide es soluble en solventes orgánicos y pueden formar sales
solubles en solventes polares cuando se encuentra en ácidos minerales diluidos.
• Reconocimiento de Flavonoides:
(+)-Catequina
O
OH
Los Flavonoides son compuestos polifenólicos con quince átomos de carbono,
cuya estructura consta de 2 anillos de benceno unidos por una cadena lineal de
tres carbonos. El esqueleto de los flavonoides se representa por el sistema C6 –
C3 – C6.
• Reconocimiento de Cardiotónicos:
Una aglicona cardiotónica, estructuralmente esta constituida por el sistema anular
esteroidal (ciclo pentano perhidrofenantreno) con los grupos metilos C–18 y C-19,
7
Digoxin OH
H3 C
O CH3
H O
CH3
3
OH
OH
O
Estas agliconas toman el nombre de cardenólidas por presentar acti vidad
estimulante sobre el músculo cardiaco, cuando están en forma de glicósidos.
• Reconocimiento de Saponinas:
Las saponinas son un grupo de glicósidos solubles en agua, que tienen la
propiedad de hemolizar la sangre y disminuir la tensión superficial d el agua,
formando espuma abundante. Las saponinas por hidrólisis se desdoblan en
carbohidratos y una aglicona llamada sapogenina.
CH3
H3C O
CH3
O
CH3
Diosgenina
HO
La sapogenina puede tener el sistema anular esteroidal o el de un triterpeno
pentacíclico. Los anillos E y F de la saponina estereoidal conforman el llamado
sistema espirostanal. El en lace glicosídico siempre se forma con el oxigeno del
carbono 3.
8
• Reconocimiento de Cumarinas:
Las cumarinas son un grupo muy amplio de principios activos fenólic os y tienen en
común la estructura química de 1 -benzopiran-2-ona. Se caracterizan porque
presentan fluorescencia bajo la luz ultravioleta a 365 nm.
O O
• Reconocimiento de Taninos:
COOH O OH
Ác. Gálico HO O
Leucoantocinidina
OH Flavan 3,4-diol
Ác. Elágico
HO OH
Leucopelargonidin
HO O OH OH
OH
OH
H3C
CH3
CH3
CH3
CH3
Ergosterol
HO
Los esteroides son compuestos cuya estructura presenta el sistema anular del
ciclopentano perhidrofenantreno, metilos en los carbonos 10 y 13 y un radical
lineal en el carbono 17.
• Reconocimiento de Quinonas:
Las quinonas son dicetonas cíclicas insaturadas que por reducción se convi erten
en polifenoles, siendo reversible esta reacción. Las quinonas derivan su nombre
del miembro más simple de la serie: la p -benzoquinona obtenida en 1838 por
Woskresensky, como producto de oxidación del ácido quínico.
O
Antraquinona
O
Las quinonas, por el sistema aromático que dan al reducirse se pueden clasificar
en Benzoquinonas, Naftoquinonas, Antraquinonas (las más numerosas) y
Fenantroquinonas (las menos numerosas).
• Reconocimiento de Antocianinas:
Las antocianinas son pigmentos fla vonoides que se comportan como indicadores
ácido – base debido al proceso:
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Pelargonidina O
O
OH
+ HO O HO O
HO O
HO- HO-
-
H+ OH H+ O
OH
OH OH
OH
pH > 11
pH 8.5
pH < 3 Anión cianina
Base cianina
Catión cianina
Procedimiento Experimental
1. Recolectar y preparar las muestras frescas
2. Reconocimiento de alcaloides
Desmenuzar finamente en un mortero, unos 10 g. de muestra fresca y colocarlos
en un erlenmeyer. Añadir un volumen suficiente de HCl al 5% para que toda la
muestra esté en contacto con la solución ácida. Calentar con agitación al baño
maría durante unos 5 minutos. Enfriar. Filtrar.
Colocar en 4 tubos de ensayo 2 ml de filtrado ácido frío. Añadir a cada uno 2 gotas
de los reactivos de Dragendorff, Mayer, Valser y Reineckato de amonio. Si se
observa turbidez o precipitados en por lo menos 3 tubos, se considera que la
muestra contiene alcaloides.
Nota: antes de realizar el ensayo con la muestra biológica, ensayar con un
estándar de quinina en solución ácida.
Ensayo directo:
Colocar 5 g de muestra fresca (ó 1 g de muestra seca y molida), en un sistema de
reflujo, agregar 25 ml de HCl 5%. Reflujar 5 minutos. Dejar enfriar y filtrar. Con el
filtrado acuoso proceder como se describe para el ensayo con una fracción
acuosa.
8. Reconocimiento de Antocianinas
En un erlenmeyer colocar unos 100 g. de muestra fresca finamente desmenuzada.
Añadir unos 200 ml de agua. Calentar a ebullición durante unos 5 minutos. Filtrar.
13
Ensayo
En un tubo de ensayo colocar 2 ml de f iltrado. Añadir 1 ml de NaOH diluido.
Observar el color formado.
En otro tubo de ensayo colocar otros 2 ml de filtrado. Añadir unas 6 gotas de un
ácido mineral diluido. Observar el color formado. -
Las antocianinas se reconocen por producir diferentes color es a diferentes pH.
9. Reconociemiento de Cumarinas.
En un tubo de ensayo grande colocar 1 g de material vegetal fresco y macerado y
agregar cantidad suficiente de etanol comercial que cubra el material vegetal.
Cubrir la boca del tubo de ensayo con un pa pel filtro blanco y sujetarlo con unas
pinzas para tubo de ensayo o con una banda elástica. Agregarle unas gotas de
NaOH diluido en el papel filtro que cubre la boca del tubo de ensayo. Calentar
hasta ebullición el tubo de ensayo por 5 minutos, enfriar y r etirar el papel filtro.
Observar bajo luz ultravioleta a 365 nm la aparición de una coloración fluorescente
que puede ser: verde, amarilla, roja en el papel filtro.
Nota: El papel filtro normalmente se observa azul fluorescente bajo la luz
ultravioleta de 365 nm.
Hojas de guardaparque.
Moras.
Uvas sin hollejo.
Plantas con quinonas: Ruibarbo (rizomas)
Práctica 3
TÉCNICAS GENERALES DE AISLAMIENTO, SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN
(CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y EN COLUMNA)
OBJETIVOS
• Seleccionar de una serie eluotrópica el eluente que mejor separe los
carotenoides presentes en diferentes muestras vegetales.
• Con el mejor eluente, fraccionar cromatográficamente el extracto de
carotenoides, hasta aislar compuestos puros y caracterizarlos por métodos
de coloración, cromatográficos y espectrales.
• Identificar los carotenoides presentes en el material vegetal asignado para
análisis.
MARCO TEÓRICO
CROMATOGRAFÍA
La cromatografía (chromo= color y graphie=escritura, escribir en colores) fue
inventada el 1903 por el botánico ruso Mikhail Tswe tt.
Ismailov y Scraiber utilizaron láminas de vidrio para colocar capas muy delgadas
de alúmina y luego aplicaron extractos vegetales, dando así la primera forma de
cromatografía de capa fina. Egon Stahl (1956) dió el nombre de cromatografía de
capa fina, estandarizó los procedimientos, equipos y adsorbentes dando un auge a
esta técnica simple, económica y eficiente.
TERMINOLOGÍA
• Fase Estacionaria (Adsorbente)
Es una de las dos fases que forman un sistema cromatográfico. Puede ser un
sólido, un gel o un lí quido. Si es un líquido, puede estar distribuido en un sólido, el
cual puede o no contribuir al proceso de separación. El líquido puede también
estar químicamente unido al sólido (Fase Ligada) o inmovilizado sobre él (Fase
Inmovilizada). Los adsorbentes má s utilizados son
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• Muestra
Mezcla consistente en cierto número de componentes, cuya separación se
pretende en el lecho cromatográfico al ser arrastrados o eluidos por la fase móvil.
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• Componentes de la Muestra
Los constituyentes químicamente puros de la muestra. Pueden no ser retenidos
por la fase estacionaria (es decir, no retardados), retenidos parcialmente (es decir,
eluidos a tiempos diferentes) o retenidos permanentemente.
CLASIFICACIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA
Técnicas especiales
§ Cromatografía con Fase Invertida
§ Cromatografía con Fase Normal
§ Análisis Isocrático
§ Elusión con Gradiente
§ Cromatografía Bidimensional
Recolector
de fracciones
Marca de
fin
Marca de
inicio Muestra Eluente
El factor de retardo (Rf) es un valor relativo par a cada sustancia y depende de las
condiciones cromatográficas con que se haya trabajado (fase móvil, fase
estacionaria, eluente y el tiempo de saturación). Se define como el cociente entre
la distancia recorrida por el centro de la mancha y la distancia re corrida
simultáneamente por la fase móvil como se ilustra en la figura 3.
c
Distancia
recorrida por b Destancia recorrida
la fase móvil por cada muestra
(X) a
Rf para la mancha 1 = a / X
Rf para la mancha 2 = b / X
Rf para la mancha 3 = c / X
CAROTENOIDES
Los tetraterpenoides más conocidos son los pigmentos liposolubles amarillos -rojos
denominados carotenoides, los cuales se encuentran ampliamente distribuidos en
el reino vegetal y en diversos tipos de tejidos. Se conocen al go más de 400
carotenoides. A los pigmentos hidrocarbonados se les denomina CAROTENOS, y
a los oxigenados XANTOFILAS. Se conocen también tetraterpenos incoloros
como el fitoeno y el fitoflueno, pero han sido menos estudiados que los
carotenoides. La única diferencia estructural entre los tetraterpenoides coloreados
e incoloros es el mayor número de enlaces dobles conjugados en los primeros.
Los tetraterpenoides, a diferencia de otras clases de terpenoides, no poseen
sistemas anulares complejos y son acíclic os, mono- o biciclicos. Los miembros
acíclicos contienen básicamente el siguiente esqueleto:
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
• Erlenmeyer 250 ml
• Sílica gel para columna • Tubos de ensayo limpios
• 1 columna de cromatografía • Lápiz de grafito
• n-hexano puro (ó éter de petróleo) • Tanque para cromatografía
• Acetato de etilo puro • Baño María
• Metanol ó etanol para extraer • Rotaevaporador
(destilado) • Mortero con pistilo
• Algodón o gasa • Licuadora
• Papel filtro • Espectrofotómetro UV -Visible
• Sulfato de sodio anhidro 15g. • Etanol puro 50mL.
• Capilares
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
OBJETIVOS
• Seleccionar de una serie eluotrópica , el eluente que mejor separe los
carotenoides presentes en diferentes muestras vegetales.
• Con el mejor eluente, fraccionar cromatográficamente el extracto de
carotenoides, hasta aislar compuestos puros y caracterizarlos por métodos
de coloración, cromatográficos y espectrales.
• Conocer otros sist emas cromatográficos para la separación de
carotenoides.
a. Deshidratación
En un erlenmeyer seco se colocan unos 30 g. de tejido fresco triturado finamente
en un mortero. Se añade un volumen suficiente de etanol al 95% para que recubra
la muestra. Se cal ienta a ebullición sobre un baño maría durante 5 minutos. Se
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filtra en caliente con un algodón, procurando que la masa semisólida quede libre
del solvente.
b. Extracción
A la masa semisólida se adiciona un volumen suficiente de diclorometano
(también pued e usarse cloroformo) en una campana de extracción y se remueve
con una varilla de vidrio para que el solvente extraiga los carotenoides .
Debe tenerse precaución con el manejo de estos solventes pues son bastante
volátiles y algunos son muy tóxicos.
El extracto se filtra. El residuo sólido se puede reextraer varias veces con el fin de
obtener el mayor rendimiento posible. Los extractos filtrados se juntan, se
trasvasan a un embudo de separación y se añade si es necesario un volumen de
solución de NaCl satur ada. La fase orgánica se recupera, se seca con sulfato de
sodio anhidro y se filtra. El filtrado con los carotenoides se concentra hasta un
volumen aproximado de 5 ml, mediante aplicación de calor suave (40 -50 °C) y
vacío. El extracto concentrado de carotenoides se tapa y se guarda para
protegerlo de la luz, la humedad, el calor y el aire.
• n-Hexano
• n-Hexano/Acetato de Etilo 4:1
• n-Hexano/Acetato de Etilo 2:1
• n-Hexano/Acetato de Etilo 1:2
• n-Hexano/Acetato de Etilo 1:4
• Acetato de etilo
• A simple vista
• Luz UV 254 nm
• Luz UV 366 nm
• Vapores de yodo
1
Sistema 1: Benceno/Eter de petróleo 9:1, Sistema 2: Diclorometano/Acetato de etilo 4:1
26
INFORME
Bibliografía
1. Robinson T., "The Organic Constituents of Higher Plants", 5th. ed., Cordus
Press, North Amherst MA U.S.A., 1983. Pp. 162 -5.
2. Harborne J.B., "Phytochemical Methods", Chapman & Hall, 1973, 119 -128 pp.
3. Stahl E., “Thin layer Chromatog raphy, 1969.
1.Merck Co. Inc., Reactivos de coloración para cromatografía en capa fina y en
papel.
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Práctica 4
RECONOCIMIENTO DE ADULTERACIONES Y/O FALSIFICACIONES
(OBSERVACIÓN DE DROGAS PULVERIZADAS)
ENSAYOS PRELIMINARES:
1. ANOTAR EL COLOR.
2. ANOTAR EL OLOR.
3. ANOTAR EL SABOR:
a) Ensayo de taninos:
Se agregan gotas de FeCl 3 muy diluido, se producen coloraciones que van
desde el azul oscuro hasta el negro pasando por el verde oscuro.
También se puede realizar la prueba de la gelatina; en la que precipitan los
taninos al agregar una solución de gelatina al 1% que contenga 10% de cloruro
sódico.
Ausencia de taninos: pimienta, j engibre, cuasia, estrofanto.
Presencia de taninos: borraja. salvia, ratania, canela, quina, clavo y ruibarbo.
b) Ensayo de antraquinonas:
Mediante la agitación del extracto acuoso con HCl diluido, y calentamiento para
producir la hidrólisis, las antraqui nonas liberadas se extraen con tolueno y dan
un color rosa-rojo cuando la solución se agita con amoniaco diluido.
Positivo para: áloes. ruibarbo, cáscara sagrada, sen.
OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA
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1. OBSERVACION DE ALMIDON
Montar placa en agua, observar y dibujar cualquier gránulo que se observe y
ensayar si se trata de almidón o no mediante adición de agua de yodo.
OBSERVACIÓN DE LIGNINA
Humedecer el polvo con una solución alcohólica de floroglucina (1% en etanol del
90%) y dejarlo hasta que casi se seque. Añadir HCl concentrado, poner
cubreobjetos y observar. Adviértase la presencia o ausencia de vasos lignific ados,
fibras, parénquima, esclereidas, pelos. Si los vasos o fibras no se tiñen de rojizo,
sospechar presencia de jengibre o ruibarbo.
De los ensayos preliminares y de los tres montajes anteriores se obtendrá una
considerable información. El examen puede c ontinuarse mediante la aplicación de
otros ensayos microquímicos:
Cloro yoduro de cinc (Reactivo de Schultze); ensayo para paredes de celulosa.
Por lo general es conveniente desengrasar los polvos grasos, decolorar los
fuertemente coloreados y preparar una fibra bruta cuando contienen mucho
almidón.
La aplicación de los conocimientos de anatomía de los órganos vegetales en que
se presentan las drogas hará posible el reconocimiento. Esto deberá ampliarse
con la utilización de referencias o tablas de caracter es diagnósticos de drogas en
polvo.
La identidad de un polvo no ha de considerarse como establecida hasta que haya
sido comparada con uno de reconocida autenticidad.
TABLAS RECOMENDADAS:
• Wallis y Mirimanoff.
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DROGA CARACTERÍSTICAS
Aloé Presencia: Montado en lactofenol, muestra fragmentos
amarillentos o cristales aciculares. Parcialmente soluble en
agua y completamente soluble en alcohol al 60%. Confirmar
con ensayos químicos.
Ausencia: T ejido vegetal, almidón, Oxalato de Calcio.
• manzanilla romana
Presencia de oxalato de Calcio y almidón, ausencia de pelos epidérmicos.
a) Detección de vasos lignificados con floroglucina y HCl si los hay.
• cuasia
• regaliz
• jalapa
si no los hay
• ruibarbo
• cardamomo
• canela
• cáscara sagrada
• quina
• podofilo
• cerezo
• quilaya
• ratania
• jalapa
BIBLIOGRAFIA:
Observaciones:
Bibliografía
Práctica 4b
CONTROL DE CALIDAD DE PLANTAS MEDICINALES
ANALISIS MACRO Y MICROSCÓPICO DE MATERIAL VEGETAL
OBJETIVO
• Identificar los diferentes marcadores taxonómicos descritos en las
farmacopeas para el control de calidad de un material vegetal como materia
prima para productos fitoterapéuticos utilizando agentes químicos de
tinción.
• Identificar una muestra problema de material vegetal en polvo mediante sus
características organolépticas, macro y microscópicas.
MARCO TEÓRICO
El material vegetal es clasificado de acuerdo a sus características sensoriales,
macroscópicas y microscópicas. Un examen para determinar estas características
es en primer paso establecer la identidad y el grado de pureza del material, para
después llevarse a cabo posteriores análisis. Siempre que sea posible, patrones
del material o muestras d e calidad farmacopeica debe de estar disponible como
referencia.
Una inspección visual provee una simple y rápida medida para identificar el
material, pureza y, posiblemente, calidad. Si una muestra es encontrada ser
significativamente diferente, en términ os de color, consistencia, olor o textura, de
las especificaciones, se considera una NO conformidad de los requerimientos. Sin
embargo, los juicios deben ser cautelosos con relación al olor y la textura, debido
a las diferencias que existen entre personas o por la misma persona a diferentes
tiempos. Siendo entonces esta una habilidad sensorial que se afina con la
experiencia.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
12. Detección de estomas: Los estomas son unas aberturas que regulan la entrada y
salida de gases. Estas aberturas están rodeadas por células especializadas
llamadas oclusivas que al cambiar de tamaño y forma, modifican el diámetro de la
abertura estomátic a y de este modo regulan el intercambio gaseoso.
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2 - Anisocíticos (desiguales): Los est omas están rodeados por tres células, de las
cuáles una es marcadamente más pequeña que las otras.
3 - Diacíticos (Atravesando): Los estomas están incrustados entre dos células vecinas.
4 - Paracíticos (Paralelos): Los estomas tienen paralelamente a ello s una o más células
vecinas.
BIBLIOGRAFÍA
1. British Pharmacopoeia, 2003.
2. USP 27, NF 22. 2003.
3. Quality control methods for medicinal plant materials, WHO Geneva, 1998
Manual de Laboratorio de Far macognosia y Fitoquímica 20 08, http://farmacia .udea.edu.co/~ff 50
Práctica 5
RECONOCIMIENTO CROMATOGRÁFICO DE PLANTAS MEDICINALES
APROBADAS EN COLOMBIA
Introducción
La droga la constituyen las hojas y flores. Las hojas contienen 0.3% de principios
amargos (Absinthina y anabsinthina), mientras que las flores cont ienen un 0.15%.
Extracción
1 g. de droga pulverizada se extrae durante 10 minutos con 10 ml de Metanol a 60°C
sobre un baño de agua. La mezcla se filtra y el filtrado se evapora hasta un volumen
aprox. de 2 ml
Rf SUSTANCIA COLOR
0.3-0.4 Absinthina amarillo ocre
Introducción
El bulbo o diente contiene cisteína, cistina, sulfóxido de metionina, cicloaliína, aliína (=
Sulfóxido de S -alilcisteína), y deoxialiína (=S -alil-cisteína), junto con otros aminoácidos
azufrados y sulfóxidos de cisteína.
Extracción
25 g. de dientes frescos finamente desmenuzados se extraen en frío (con ayuda de
hielo seco) con 2 porciones de 100 ml de metanol al 80%. Se purifica por cromatografía
en columna, controlando las fracciones con Reactivo de Ninhidrina.
Rf SUSTANCIA COLOR
0.5 Alicina Naranja
0.7 Aliína Azul-violeta
Introducción
Rf SIJSTANCIA COLOR
0.7 Cinarina Azul fluorescente
0.6 Luteolina-7-0-gluc. Amarillo
0.45 Acido clorogénico Azul fluorescente
0.4 Rutina Amarillo
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Introducción
La droga la constituyen las hojas, las cuales contienen 0.1 -0.45% de aceite esencial. El
aceite esencial contiene principalmente metilchavicol 55% y linalool.
Extracción
b) Con Diclorometano
Rf SUSTANCIA COLOR
0.3 Linalool Azul intenso
0.9 Metilchavicol Rojo violeta
Introducción
La droga la constituyen las hojas y ramas jóvenes, las cuales contienen 1.2% de aceite
esencial. El aceite contiene principalmente L -Carvona 42 -67%, mentol, ac etato de
dihidrocarveol, alcohol dihidrocuminílico, pineno, limoneno y felandreno.
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Extracción
Rf SUSTANCIA COLOR
0.25 Alcohol dihidrocumínico Azul intenso
0.46 Carvona Rojo-Violeta
0.7 Acetato de dehidrocarveol Azul intenso
Extracción
Introducción
La flor contiene la malvina, un pigmento que le confiere el color característico.
Extracción
1 g. de droga pulverizada se extrae por agitación durante 15 minutos con 6 ml de
Metanol:Acido Clorhídrico (9 partes de metanol, 1 parte de ácido al 25%). Se utilizan 25
µl del filtrado para la cromatografía.
Rf SUSTANCIA COLOR
0.4 Malvina (=Malvidin -3,5-di- Violáceo
glucósido
Introducción
La droga la constituyen las flores, las cuales contienen 0.5 -1.5% de aceite esencial. El
aceite esencial a su vez contiene chamazuleno 0 -15%, bisabolol 10 -25%, bisabolol
óxidos A y B (ambos 10 -25%), poliínas 1 -40%, farneseno 15%.
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Extracción
Rf SUSTANCIA COLOR
0.2 Oxidos A y B de bisabolol Amarillo/Verde
0.25 Alcohol terpenoide Violeta
0.35 Bisabolol Violeta
0.5-0.6 Poliínas Pardo
0.95 Azuleno Rojo violeta
0.99 Farneseno Azul-Violeta
Extracción
a) Destilación por arrastre con vapor de agua
Rf SUSTANCIA COLOR
0.25 Borneol Azul oscuro
0.45 Cineol Azul intenso
0.7 Acetato de bornil o Azul intenso
0.99 Alfa- y beta-pineno Violeta
Introducción
Extracción
0.5 g. de droga pulverizada se extraen con 5 ml de Metanol, calentando durante 5
minutos sobre un baño de agua. El filtrado se aplica directamente sobre la placa
cromatográfica.
Introducción
La droga la constituyen las flores, las cuales contienen glicósidos de quercetina 1.5 -3%
como hiperósido, isoquercitrina y rutina.
Extracción
1 g. de droga pulverizada se extrae con 10 ml de metanol durante 5 minutos sobre un
baño de agua a aproximadamente 60 °C. El filtrado se utiliza para la cromatografía.
Rf SUSTANCIA COLOR
0.4 Rutina Amarillo
0.7 Isoquercitrina Amarillo
Extracción
Introducción
La droga la constituyen las raíces o rizomas que contienen los valepotriatos como:
valtrato, isovaltrato, IVDH_Valtrato, didrovaltrato y acevaltrato, cuya concentración
cambia de una variedad a otra. Además contiene 0.25% de aceite esencial en los
rizomas frescos, el cual contiene valerenal, valeranona y ácido valerénico.
Extracción
0.2 g. de droga pulverizada se extraen con 5 ml de diclorometano durante 5 minutos a
unos 60 0C con agitación ocasional. El residuo de la filtración se lava con otros 2 ml de
diclorometano. Los extractos combinados se evaporan a sequedad, y el residuo d e
disuelve en 0.2 ml de acetato de etilo. Se aplican en la cromatoplaca 10 microlitros de
esta solución.
Rf SUSTANCIA COLOR
0.73 Valtrato/Isovaltrato Azul
0.65 Didrovaltrato Pardo
0.55 Acevaltrato Azul
0.4 IVDH-Valtrato Azul
<0.4 Valtrahidrinas Azul
Origen Productos de degradación
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Práctica 6
ACEITES ES ENCIALES
INTRODUCCIÓN
El característico olor, aroma, de ciertas plantas es debido al aceite esencial o volátil allí
presente y usado desde la antigüedad como fuente natural de fragancias y perfumes.
Actualmente los aceites esenciales son usado en la perfu mería, en la industria
alimenticia o como fuente de materias primas. Algunos con propiedades adicionales son
usados como carminativos, aromatizantes, anestésicos locales y últimamente otros con
propiedades antieméticas e insecticidas.
Los aceites esencial es o esencias vegetales son mezclas de un numero variables de
sustancias olorosas. En un aceite esencial pueden encontrarse hidrocarburos alicíclicos
y aromáticos , así como sus derivados oxigenados, alcoholes, aldehídos, cetonas,
ésteres, sustancias azuf radas y nitrogenadas. Los componentes mas frecuentes se
derivan del ácido mevalónico; se les cataloga como monoterpenos de 10 unidades de
carbono y sesquiterpenoides con 15 unidades de carbono.
Todos los aceites esenciales oficinales se extraen por destila ción, con excepción del de
limón y el de cade. La destilación de las esencias por medio de agua o vapor se ha
practicado durante mucho tiempo, pero las modernas plantas industriales poseen
muchas ventajas sobre las antiguas destilerías, en las que con frec uencia se producía
la carbonización y descomposición de la esencia. En la moderna destilería de aceites
esenciales, la materia prima esta contenida en cestos o bandejas perforados. El
destilador contiene agua en el fondo, la cual se calienta mediante ser pentines por los
que circula vapor, o también haciendo pasar a su través vapor de agua a presión.
Algunas esencias como las de cayeput, alcaravea, trementina y de leño sándalo
australiano, son rectificadas. Esta consiste, generalmente en una segunda desti lación
en corriente de vapor, que libera la esencia de resinas y otras impurezas. La luz y el
oxigeno atmosférico parecen ejercer un efecto adverso sobre la mayoría de los aceites
esenciales, por lo que deben de seguirse estrictamente las directrices ofici ales respecto
del almacenamiento.
Las esencias utilizadas en perfumería, se pueden extraer por arrastre con vapor, como
se describió anteriormente. Pero algunos requieren de otro tipo de tratamiento, como
son el enflorado, digestión en grasas calientes, mé todos neumáticos o por medio de
disolventes.
El rendimiento de esencia obtenido de una planta varía de unas cuantas milésimas por
ciento del peso vegetal hasta 1 -3%. La composición del aceite puede cambiar con la
época de la recolección, el lugar geográfic o o pequeños cambios genéticos. En
gimnospermas y angiospermas es donde aparecen las principales especies que
contienen aceites esenciales, distribuyéndose entre unas 60 familias. Son
particularmente ricas en esencias las pináceas, lauráceas, mirtáceas, l abiáceas,
umbelíferas, rutáceas, y compuestas.
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OBJETIVO
Separar los aceites esenciales de: Comino, clavos de olor. corteza de canela, anís,
eucalipto, etc. y tratar de caracterizar sus const ituyentes, después de aislarlos por
cromatografía de columna y/o capa fina.
PROCEDIMIENTO
El mas antiguo y sencillo método para obtener aceites esenciales es la destilación por
arrastre con vapor, a partir de material vegetal, lo más fresco posible. Usand o matraces
de 1 a 6 litros, en el laboratorio se pueden destilar por arrastre con vapor continuo 100 a
500 g. de planta fresca, con buena recuperación de la esencia.
3
1
5 6 5 6
4 7 4 7
3 8 3 8
2 9 2 9
1 11
10 1 10
Fig. 1. Equipo para extraer aceites esenciales por arrastre con vapor
En el matraz 1 co locar suficiente agua (mas o menos 1 litro por cada Kg de material
vegetal) y unos núcleos de ebullición; si se cuenta con un equipo generador de vapor,
como una olla a presión la cual a través del conducto de la válvula se puede conducir el
vapor hacia el compartimento donde se encuentra el material vegetal. En el
compartimento 2 se ubica la muestra picada en pequeños trozos.
OBJETIVO
Separar los aceites esenciales con solventes no polares y caracterizar sus
componentes por métodos espectrofo tométricos.
PROCEDIMIENTO
Se extraen 30 g. de muestra seca y molida en un dispositivo Sohxlet con un volumen
suficiente de éter de petróleo. Las fases etéreas se juntan, se filtran, se secan con
Na 2SO 4 anhidro, se filtran de nuevo y se evaporan a sequedad con calentamiento
suave. El residuo de evaporación debe tener el olor característico de la muestra antes
de extraerla. Este es el aceite esencial crudo (AEC) el cual se pesa para calcular su
rendimiento.
Manual de Laboratorio de Far macognosia y Fitoquímica 20 08, http://farmacia .udea.edu.co/~ff 62
EXTRACCIÓN.
Se extraen 30 g. de muestra seca y molida en un dispositivo Sohxlet con un volumen
suficiente de éter de petróleo. Las fases etéreas se juntan, se filtran, se secan con
Na 2SO 4 anhidro, se filtran de nuevo y se evaporan a seq uedad con calentamiento
suave. El residuo de evaporación debe tener el olor característico de la muestra antes
de extraerla. Este es el aceite esencial crudo (AEC) el cual se pesa para calcular su
rendimiento.
a) Diclorometano
b) Tolueno: acetato de etilo 93:7
Para revelar cada una de las cromatoplacas se utilizan los siguientes revelad ores:
b) Análisis Espectral.
Al componente puro se le determinan los espectros infrarrojo, ultravioleta, etc.
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PRACTICA 7.
TECNICAS GENERALES DE EXTRACCIÓN Y VALORACION DE U NA DROGA
El término alcaloide (de álcali), fue propuesto por el farmacéutico W. Meissner en 1819,
se aplicó a los compuestos de origen vegetal con propiedades alcalinas, este carácter
básico es debido a la presenci a de nitrógeno amínico en su estructura.
No existe una definición exacta para el termino alcaloide s, pero se pueden considerar
como compuestos orgánicos de origen natural ( vegetal: familias Lauraceae,
Ranunculaceae, Magnoliaceae, Annonaceae, Menispermacea e, Papaveraceae,
Fumariaceae, Rutaceae, Apocynaceaae, Loganiaceae, Solanaceae , Rubiaceae;
animal: ranas de la familia Mantellidae quienes presentan alcaloides tóxicos en piel ;
bacteriano: la Pseudomona aeruginosa produce la Piocianina , hongos: el Psilocybe
produce Psilocyna y Psilocybina, etc.), nitrogenados, derivados generalmente de
aminoácidos, mas o menos básico, de distribución restringida, con propiedades
farmacológicas importantes a dosis bajas (gran variedad de actividad sobre SNC y
SNA) y que presentan gran diversidad estructural .
N N N
N N N
N N N
N
O
N
espermidina
diterpénico esteroidal
Para su estudio, algunos autores dividen los alcaloides en cuatro clases (figura 2):
1. Alcaloides Verdaderos : los cuales cumple n estrictamente con las características
de la definición de alcaloide: tienen siempre un nitrógeno heterocíclico, son de
carácter básico y existen en la naturaleza normalmente en estado de sal,
biológicamente son formados a partir de aminoácidos.
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N2 Aminoacidos
Aminoácidos Aminoácidos
modificados
Mevalonato Policetidos
- CO2
Alcaloides
Imperfectos
No
NH3 Aminas cíclicas Protoalcaloides
Cíclicas
Pseudoalcaloides
+ -
.. H X
+ -
R 3N R 3 NH X
Alcaloide base Alcaloide sal
1. Alcalinización
2. Extracción con solvente orgánico apolar
1. Alcalinización
2. Extracción solvente org. no polar
Solución acuosa
(alcaloides sales)
1. Alcalinización
2. Ext. con solvente organico medianamente apolar
1. alcalinización
2. extracción con solvente organico inmisible
evaporación
Alcaloides totales
CH 3
CH3 N
N CH3 COOMe
O
N OH
O C 6 H5
O
Ph
O O
Ph
O
OH
OH L-Hiosciamina : Atropina
Ester del acido trópico
con la tropina
ACITIVIDAD BIOLOGICA
La Atropina ( l(-)-hiosciamina) se encuentra en Atropa belladona , Datura stramonium y
la escopolamina ( l(-)hioscina) en Hyosciamus n iger, los isómeros l(-) de ambos
alcaloides son 100 veces mas potente s que los isómeros d (+). Se absorben bien en el
intestino y a través de la conjuntiva alcanzando el sistema nervioso central en un lapso
de tiempo entre 30 – 60 minutos, en donde provocan bloqueo competitivo reversible de
las acciones de los colinomim éticos (acetilcolina y análogos) en los receptores
muscarínicos (farmacología básica y clínica de B. G. Katzung 1999)
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
DIAGRAMA DE FLUJO
Agregar 15 ml H2O
Agregar 2 - 3 gotas Indicador Rojo de Metilo (pH: 4.2 - 6.3)
Nota:
Cálculos
Tener en cuenta que:
1. Asumir el punto final de la titulación como el punto d e equivalencia para tomar el
volumen de base utilizada en el proceso de neutralización.
2. Calcular el volumen de Volumen de H 2SO 4 0.02N neutralizado por el alcaloide base
3. El H 2SO 4 es un ácido diprótico, entonces por cada meq de ácido reaccionan 2
equivalentes de base NaOH.
4. Cada 1 ml. de ácido o de base 0.01 N es equivalente a 2.892 mg. del alcaloide
calculado como L - hiosciamina. PM = 289.2 g/n
En el punto de equivalencia:
% Alcaloides en la muestra
= 2 (5.0 ml - ((V NaOH x N NaOH )/ N H2SO4 )) x 2.892 mg/ml x 100
Peso de muestra (mg)
Datos:
N H2SO4 = 0.02
N NaOH = 0.01
V H2SO4 = 5.0 ml
V NaOH = ?
Introducción
La rutina es un glicósido flavonoide que se encuentra ampl iamente distribuido en
plantas y productos fitofarmacéuticos. Esta amplia distribución, junto con la facilidad en
su detección a nivel de laboratorio mediante la cromatografía en capa fina (CCF) y la
espectroscopia Ultravioleta (UV), la hacen un indicador adecuado para el
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 74
Procedimiento
• Preparar una solución estándar de rutina en metanol de concentración 100 ppm
• Tomar 1.2 ml de solución completar a 10 ml y determinar el espectro UV entre
200 y 400 nm.
• Seleccionar la longitud de onda de trabajo.
• Para obtener la curva de calibración, tomar alícuotas de la solución estándar y
llevar a 10 ml según la tabla siguiente. Leer absorbanc ias de cada solución a la
longitud de onda de trabajo. Realizar una curva de Absorbancia vs.
Concentración en ppm.
100 ppm.
0,9
0,8
Absorbancia a 360 nm
0,7
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 5 10 15 20 25
2. Extracción de la droga
• 1 g de droga seca y en polvo (pesar con balanza de precisión ± 1 diezmilésima
de gramo), se extrae con 10 ml de metanol, con agitación, calentamiento en
baño de agua a 60 °C, durante 10 minutos. Filtrar, lavar el filtrado dos veces con
10 ml de metanol (preferiblemente cali ente), evaporar a sequedad y pesar el
extracto obtenido.
Introducción
La rutina es un glicósido flavonoide que se encuentra ampliamente distribuido en
plantas y productos fitofarmacéuticos. Esta amplia distribución, junto con la facilidad en
su detección a nivel de laboratorio median te la cromatografía en capa fina (CCF) y la
espectroscopia Ultravioleta (UV), la hacen un indicador adecuado para el
reconocimiento y el control de calidad de productos fitofarmacéuticos terminados o sus
materias primas vegetales correspondientes. En este caso se propone un método de
cuantificación en un jarabe.
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 76
Procedimiento
• Preparar una solución estándar de rutina en metanol de concentración 100 ppm
• Tomar 1.2 ml de solución completar a 10 ml y determinar el espectro UV entre
200 y 400 nm.
• Seleccionar la longitud de onda de trabajo.
• Para obtener la curva de calibración, tomar alícuotas de la solución estándar y
llevar a 10 ml según la tabla siguiente. Leer absorbancias de cada solución a la
longitud de onda de trabajo. Realizar una curva de Absorbancia v s.
Concentración en ppm.
2. Extracción de la droga
• A partir de la información dada en la etiqueta por el fab ricante tomar un volumen
equivalente a 1 g de droga seca y en polvo (medir exactamente con material
volumétrico). Evaporar a sequedad con ayuda de vacío y calentando a 60°C. El
residuo se extrae con 10 ml de metanol, con agitación, calentamiento en baño
de agua a 60°C, durante 10 minutos. Filtrar, lavar el filtrado dos veces con 10 ml
de metanol (preferiblemente caliente), evaporar a sequedad y pesar el residuo
obtenido.
Introducción
El anetol es un fenilpropano que se encuentra distribuido en varia s plantas aromáticas.
Esta amplia distribución, junto con la facilidad en su detección a nivel de laboratorio
mediante la cromatografía en capa fina (CCF) y la espectroscopia Ultravioleta (UV), la
hacen un indicador adecuado para el reconocimiento y el con trol de calidad de
productos fitofarmacéuticos terminados o sus materias primas vegetales
correspondientes.
Procedimiento
• Preparar una solución estándar de anetol en metanol de concentración 100 ppm
• Tomar 1.2 ml de solución completar a 10 ml y determinar el espectro UV entre
200 y 400 nm.
• Seleccionar la longitud de onda de trabajo.
• Para obtener la curva de calibración, tomar alícuotas de la solución estándar y
llevar a 10 ml según la tabla siguiente. Leer absorbancias de cada solución a la
longitud de onda de trabajo. Las absorbancias deben estar en el rango de 0.3 a
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 78
2. Extracción de la droga
• 1 g de droga seca y en polvo (pesar con balanza de precisión ± 1 diezmilésima
de gramo), se extrae con 10 ml de diclorometano, con agitación, durante 15
minutos. Filtrar, lavar el filtrado dos veces con 10 ml de diclorometano, evaporar
a sequedad y pesar el extracto obtenido.
Práctica 8
MARCHA FITOQUÍMICA
OBJETIVO
Efectuar el estudio químico sistemático de las plantas con el fin de detectar varias
clases de sustancias vegetales presentes en ellas como son los alcaloides, los
flavonoides, las quinonas, las sapon inas, los taninos, los compuestos fenólicos, los
triterpenoides, los esteroides, los cardiotónicos y las leucoantocianidinas , las que con
mayor frecuencia se ha comprobado están relacionadas con actividades biológicas
específicas, o se utilizan como materi as primas para el desarrollo de productos
farmacéuticos comerciales .
Resultado Asignación
Negativo -
Dudoso +/-
Positivo +
Francamente positivo ++
No determinado ND
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 81
FRACCIÓN A (AA, CF, TA, FL, TE, QU, CA, AL, LE)
H2O
HCl diluido
Ensayar FL, LE, CF, AA, TA
Ensayar CA, TE Ensayar AL (en FASE CHCl 3 (FRACCIÓN D) FASE ACUOSA (FRACCIÓN E)
medio ácido)
CONVENCIONES
AA = AMINOACIDOS
TA = TANINOS
FL = FLAVONOIDES
QU = QUINONAS
CA = CARDIOTONICOS
AL = ALCALOIDES
LE = LEUCOANTOCIANINAS
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 83
1 ml
40 ml
Ensayar FRACCIÓN A
AA Llevar a RESIDUAL
sequedad *
RESIDUO FILTRADO
Redisolver en 20 ml de agua
caliente y filtrar
DESECHAR
FILTRADO ACUOSO
RESIDUO
10 ml (caliente)
10 ml
Llevar a sequedad
RESIDUO FILTRADO
DESECHAR
Ensayar TE, CA, QU, FL.
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 85
Lavar c on 10 ml de H 2O
FASE ACUOSA
FASE orgánica
FILTRADO (FRACCIÓN C)
RESIDUO
5 ml Resto
DESECHAR
Llevar a sequedad
Ensayar CA y TE.
FILTRADO RESIDUO
DESECHAR
Repartir en tres porciones iguales Redisolver D2 en 1 ml de CHCl 3 y ensayar TE.
de 5 ml c/u: D1, D2 y D3. L levar a
sequedad.
FIN
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 87
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 88
Para fines de comparación realizar la prueba con 0.5 ml de una solución patrón de
morina.
Ensayo: Tomar 1.0 ml de solución acuosa en un tubo de ensayo limpio. Añadir 0.5 ml
de HCl concentrado. Mezclar. Calentar durante 10 minutos a 100 0C y enfriar. Pasar a
un tubo de ensayo de 10 x 75 mm. Añadir 0.4 ml de alcohol amílico y agi tar. Dejar
separar las fases. La prueba se considera positiva si aparece coloración en la fase
amílica que vaya desde el carmesí oscuro al rosado débil.
Ensayo: Tomar 1.0 ml de solución acuosa neutra en un tubo de ensayo limpio. Aña dir
1.0 ml de solución de gelatina -sal. La formación de un precipitado se considera prueba
positiva. Centrifugar si es ne cesario para observar el precipitado.
Retirar 2 ml de la fase orgánica y agitarla en otro tubo con 1.0 ml de solución de NaOH
al 5% en NH 4OH al 2%. La prueba se considera positiva cuando aparecen coloraciones
que van del rosado al rojo intenso en la ca pa alcalina.
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 90
Precaución: La formación del color violáceo no dura sino algunos pocos segundos.
Precaución 1: Todos los ensayos deben hacerse siempre con la muestra disuelta o
redisuelta en HCl 5% acuoso.
Ensayos: Tomar 0.5 ml de solución acuosa ácida en 4 tubos de ensayo limpios. Añadir
a cada tubo 1 gota de los reactivos de Dragendorff, Mayer, Valser y Reineckato de
amonio. Se considera prueba positiva cuando aparecen preci pitados en por lo menos 3
tubos.
Para fines de comparación realizar el ensayo con 0.5 ml de una solución p atrón de
sulfato de quinina.
Ensayo: Colocar 1 gota de solución, en una tirilla de papel filtro. Secar. Añadir 1 gota
de reactivo de ninhidrina (Solución al 0.002% en alcohol). Calentar sobre una plancha
de calentamiento a 105 0C. El desarrollo de coloraciones violeta, azul o rosada se
considera prueba positiva.
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 91
BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA
TITULO
El titulo debe describir en forma somera el alcance del expe rimento realizado
procurando q ue no sea excesivamente largo y detallado como tampoco que sea
muy corto y demasiado general.
DATOS
En esta parte del informe deben incluirse todas las medicio nes y observaciones
realizadas en el laboratorio y que permiten hacer un análisis e interpretación de
los fenómenos observados. Por ejemplo, los dibujos de las cromatoplacas
obtenidas en un análisis por cromatografía en capa fina con sus manchas y
colores correspondientes ; los valores de absorbancia o transmitancia de un
pigmento carotenoide al analizarlo por espectroscopia ultravioleta, los espectros
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 93
ANALISIS DE RESULTADO S
En este ítem se incluirá la forma como se interpretaron los resultados obtenidos
por comparación con datos obtenidos con patrones o reportados en la literatura
científica, citando como una nota al pié la referencia bibliográfica
correspondiente.
“ANALISIS DE RESULTADOS
″.... De acuerdo con este análisis la sustancia mas pro bable es el B —caroteno,
ya que se necesitaría determinarle por lo menos el correspondiente espectro de
masas para confirmar este hecho....”
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
“De acuerdo con los sistemas utilizados en la práctica el mejor sistema eluente
para separar por cromatografía en capa fina los caroteno ides de la zanahoria
(Daucus caraota ) es la mezcla diclorometano/éter de petróleo 50:50...”.
Las conclusiones no deben incluir eventos tales como cortes de energía, falta
de recursos, daño de aparatos, excusas mé dicas, etc.
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA 2008 94
BIBLIOGRAFIA
Este ítem debe relacionar en el orden alfabético (por apelli dos del primer autor)
solamente aquellos documentos, libros, revistas, folletos, comunicaciones
personales, etc. que sean inherentes al informe, es decir los que efectivamente
fueron consultados por el es tudiante para la elaboración del informe.
Para libros:
Ejemplo:
Para revistas:
Garg V.K., Nes W.R.; “Codisterol and other ∆5-Sterols in the see ds of Cucurbita
maxima “ PHYTOCHEMISTRY 23 (12), 2925 —2929 (1974).
Por ejemplo:
Evaluación:
Bibliografía