Miguel Peña (73840)

Felipe Roa (73803)

DESARROLLO DE UNA BEBIDA EN POLVO CON ADICIÓN DE CBD

MICROENCAPSULADO ENFOCADO A PERSONAS CON EPILEPSIA

Miguel Alejandro Peña Devia

73840

Felipe Roa Riaño

73803

Seminario de investigación

2019

Bogotá D.C
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

JUSTIFICACION

La presente investigación se enfocara en estudiar los componentes que poseen el

extracto de té verde y el extracto de cannabis para su uso en alimentos funcionales y
como es de aporte para la salud, ya que muchos de estos componentes son usados
medicinal y farmacéuticamente para prevención y tratamiento de algunas enfermedades
como lo son antiinflamatorio, analgésico, relajante muscular y antioxidanteFuente
especificada no válida., bien sabiendo que no es la panacea y que se debe controlar
medicamente, por otra parte está él te verde con su contenido de poli fenoles y
antioxidantes que promueven la eliminación de radicales libres en el cuerpo
humanoFuente especificada no válida.

Otro de los factores involucrados es el aumento del consumo de alimentos que

contribuyan a la salud y prevención de enfermedades , “Un incremento de 12% han
registrado las ventas de productos saludables en Colombia en el último año, según los
datos del Estudio Mundo Saludable de Nielsen de 2018, en el que, además, se
determina que este grupo de productos representa 7% de la industria
de alimentos y bebidas.” Fuente especificada no válida., de acuerdo con los datos
arrojados por la revista dinero los consumidores están migrando a tener hábitos de vida
saludable y el consumidor está más informado sobre productos y componentes usados
en los alimentos y bebidas procesadas.

Por otra parte está el tema del posconflicto en Colombia y la iniciativa de los
cultivadores en el cauca de legalizar el cultivo de cannabis medicinal como ruta para el
posconflicto en Colombia, ya que en la región del cauca se siembra casi el 50 % del
cannabis que se produce en el país y fomentar la creación de cooperativas para la
generación de empleos y esto contribuya al crecimiento económico que colabore con la
pazFuente especificada no válida.

Ni En la actualidad se ha evidenciado que las bebidas han cogido una revolución en

todo tipo de bebidas tanto alicoradas, como frutales etc., pero la idea es que se den
bebidas funcionales o con mezclas de extractos que nos aporten algo benéfico para la
salud, es el caso del té verde (camellia sinensis) y el cannabis (cannabis sativa), que
ambos tienen propiedades importantes y benéficas para los seres humanos. De los
cuales se conocerán a continuación.
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

CANNABIS (CANNABIS SATIVA).

El cáñamo o cannabis sativa es actualmente y ha sido objeto de multitud de

publicaciones científicas que abordan su estudio desde muy diferentes perspectivas.
Concretamente, el enfoque etnobotánico propone un modelo multidisciplinar para
estudiar la difusión cultural del cáñamo por la acción del genero humano y su relación
histórica, los usos médicos, recreacionales y rituales del cáñamo en este ámbito han
sido estudiados anteriormente por algunos investigadores; sin embargo, hasta el
momento no se ha publicado ningún trabajo sobre los restantes usos etnobotánicos de la
planta. (7)

La planta de cannabis es conocida desde hace milenios, estableciéndose su origen en

Asia central. Su utilización ha pasado desde el aprovechamiento de sus fibras para la
confección de tejidos y cuerdas a la utilización como aditivo alimentario, haciendo uso
de su aceite y los cañamones como nutriente. También ha sido utilizado con el fin de
sanar diversas enfermedades por sus propiedades psicoactivas con fines religiosos y/o
lúdicos. (8)

La descripción más temprana del cultivo de cáñamo que se conoce en la literatura árabe
está contenida en la agricultura nabatea, aunque la descripción mas extensa y detallada
sobre el mismo se debe a lbn al Awwam. Por lo que se refiere a los aspectos técnicos
concernientes a dicho cultivo, las fuentes geopónicas árabes hablan del tipo de tierra
mas conveniente, manera y tiempo de la siembra, labores que requiere, riego, vientos
que favorecen y perjudican su crecimiento. (7)

La agricultura nabatea indica que ha de cultivarse en una tierra profunda y muy

húmeda, pues en cualquier circunstancia gusta del agua y de la humedad. Y el único
cuidado necesario es regarlo un dia si y otro dia no, o bien todos los días, en cuyo caso
hay que reducir la cantidad de agua. El periodo mas adecuado para su siembra se
extiende desde el 20 de febrero hasta el 24 de marzo.

Las plantas del genero y especia cannabis sativa (marihuana), son las únicas en este
mundo con la capacidad de producir compuestos cannabinoides conocidos como THC,
CBD y CBN entre otros. Recientemente, investigadores alrededor del mundo se
esfuerzan por dilucidar la utilidad terapéutica de dichos compuestos, encontrado entre
los resultados preliminares una prometedora actividad anticancerígena, antipsicótica,
protector ante stress oxidativo, antiinflamatoria, antiepiléptica y antiespasmódica; por
nombrar unas cuantas. (9)
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

Algo importante como el THC es una molecula altamente lipofilica, en otras palabras
no se disuelven bien en agua, es decir, al ingresar a nuestro sistema sustancias
hidrofilicas (solubles en agua), como la nicotina y la cafeína, estas se disuelven con
relativa rapidez y facilidad en nuestro torente sanguíneo, produciendo los efectos
correspondientes. En el caso del THC se habla de un perfil de acciacción
completamente diferente.al momento de entrar a nuestro organismo este compuesto
tiende a encontrar dificultades, incluso puede transferirse entre tejidos de mala forma,
buscando constantemente disolverse en sustancias similares a ella, es decir, en partes de
nuestro cuerpo donde se encuentran altos niveles de grasa (tejido adiposo), para luego
ser liberado lentamente. Debido a este perfil de acción tan peculiar, la vida media o
permanencia media del THC es mucho mayor que otras sustancias. (9)

Luego de ensayos clínicos, se conoce hoy en día el potencial del THC dentro del
tratamiento de ciertas enfermedades crónicas, lamentablemente, debido a su capacidad
psicotrópica esta molécula aún es regulada por las autoridades, que dentro de su
ignorancia, impiden y ralentizan los avances terapéuticos que se pueden generar.
afortunadamente para nosotros, el segundo cannabinoide más abundante es el
Cannabidiol (CBD), con propiedades muy interesantes, entre las cuales se encuentran
su capacidad por atenuar y neutralizar los efectos no deseados producidos por el THC
como la descoordinación, cansancio, fobias, etc. (9)

MARIHUANA MEDICINAL Y SU MECANISMO DE ACCIÓN.

es necesario entender que nuestros organismos tienen la capacidad de enlazar selectiva

y exclusivamente los compuestos activos del cannabis. Éstos son reconocidos por
proteínas especiales en la superficie de nuestras células, conocidos como receptores, ya
que encargan de captar o recibir estas sustancias. Todos y cada uno de los
medicamentos y fármacos actúan bajo este mismo mecanismo, se unen a células
especializadas, produciendo así el efecto farmacológico. Entre los receptores
cannabinoides que conocemos actualmente se cuenta con CB1 y CB2. Esto es lo que
compone lo que hoy se conoce como Sistema Endocannabinoide. A modo de ejemplo,
los medicamentos imitan la acción de compuestos endógenos (compuestos que nuestro
cuerpo produce naturalmente) para así ejercer una acción con una potencia determinada,
según sea el objetivo terapéutico que se busque. (9).

La nicotina imita la acción de la acetilcolina

La cocaína imita la acción de la dopamina

La morfina imita la acción de la encefalina

Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

En la actualidad, se están llevando a cabo múltiples debates a nivel internacional sobre

las evidencias científicas frente a las restricciones legales acerca de los usos de los
cannabinoides, riesgos, dosis, vías de administración y comparación con otras
estrategias terapéuticas. Algunas investigaciones que se han llevado a cabo en el siglo
XXI, han demostrado ser efectivas para el tratamiento de los siguientes padecimientos:

Acné, dermatitis, psoriasis y seborrea.

Alzheimer; el Tetrahidrocannabinol (THC) posee un efecto superior a los de otros

medicamentos y considerado superior inhibidor de la agregación AB que es el principal
marcador patológico de esta enfermedad. Los cannabinoides poseen un efecto
neuroprotector. (10)

Cáncer; r: la activación de los receptores CB1 y CB2 aumentan apoptosis, inhiben el

crecimiento de células cancerosas y la migración celular, por ejemplo, en cáncer de
pulmón y de próstata. Además, provocan la muerte de células cancerígenas de la
leucemia y los linfomas. El Delta-9-tetra hidrocannabidiol protege el cerebro de las
enfermedades neurodegenerativas a través del receptor CB1.(10)

Diabetes; el CBD puede actuar para reducir los daños en la retina causados por la
diabetes así como el dolor que no es aliviado por la morfina y otros opiáceos. (10)

¿Qué son los cannabinoides?

Estos son una clase de moléculas que actúan sobre los receptores de cannabinoides en el
cerebro, nuestro propio cuerpo puede producir ciertos tipos de cannabinoides conocidos
como endocannabinoides. La marihuana se deriva de la planta de cannabis sativa, que
contiene más de 100 compuestos farmacológicamente activos, diferentes conocidos
como cannabinoides. Y los más conocidos son el THC y CBD.

Los tratamientos a base de cannabis son de gran interés para las personas que sufren de
epilepsia. Esto se debe a un mayor acceso a productos de cannabis medicinal en estados
seleccionados y a la creciente aprobación de la FDA de Epidolex para el tratamiento de
las convulsiones asociadas con dos formas raras y graves de este enfermedad la
epilepsia; el síndrome de Lennox-Gastaut y el síndrome de Dravet, en personas de dos a
los en adelante hasta personas de 80 años. (Epidolex) es un medicamento derivado de la
planta de cannabis en los EE.UU, que está compuesto en un 98% de CBD. (1)

El CBD es uno de los fitocannabinoides que se encuentran en la planta de cannabis, este

tiene importantes beneficios a nivel medico según múltiples fuentes científicas y
médicas. Desde el 2013, el servicio de los institutos Nacionales de la salud (PubMed)
ha incluido en su índice más de 1.100 estudios sobe el CBD. Además, el cannabidiol no
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

produce un efecto psicoactivo, sino que, en realidad puede contrarrestar la

psicoactividad del THC. (2)

EPILEPSIA.

La epilepsia afecta a alrededor de 65 millones de personas en el mundo, con una

incidencia de 20-70 casos nuevos por 10.000 individuos por año. En la actualidad,
existen múltiples tratamientos antiepilépticos, pero ninguno de ellos es curativo. El 30%
de los pacientes son resistentes a los tratamientos antiepilépticos convencionales y
presenta cuadros graves con mal pronóstico. En la actualidad, se observa una creciente
presión por parte de los pacientes, familiares y de la sociedad en general para buscar
alternativas terapéuticas no tradicionales para este tipo de cuadros, sumados a la
información fácilmente accesible y al rol preponderante de las redes sociales y de los
medios de comunicación. (3)

En este contexto, los cannabinoides se posicionan como una opción terapéutica a

considerar en estos pacientes; ello obliga a analizar, desde una perspectiva científica, la
evidencia disponible sobre efectividad y seguridad de la utilización terapéutica del
cannabis o de sus derivados en el tratamiento de la epilepsia. (3)

Los principales cannabinoides presentes en el cannabis sativa son el

tetrahidrocannabinol (THC) y el cannabidiol (CBD), pero el THC es el responsable de
tener cambios cognitivos por lo que es un compuesto psicoactivo mas abundantes en
esta planta. Por lo cual el THC no es utilizado farmacológicamente y es muy limitante
en este medio. Mientras el CBD posee baja afinidad por los receptores CB1 y CB2,
actúa contrarrestando algunos efectos psicoactivos del THC, este cannabidol presenta
efecto anti convulsionante, antiinflamatorio y antitumorigenico. Debido a la ausencia de
propiedades psicoactivas, la baja tasa en la que se desarrolla tolerancia, su buen perfil
de seguridad en humanos, así como su eficacia en los estudios preclínicos y algunos
resultados alentadores en las fases clínicas, sugieren que podría ser un fármaco seguro y
eficaz para el tratamiento de la epilepsia. (3)

La planta Cannabis sativa contiene alrededor de 400 compuestos, de los cuales

aproximadamente 80 son compuestos de terpeno-fenólicos activos denominados
colectivamente como cannabinoides. Los cannabinoides ejercen sus efectos
farmacológicos mediante la activación de los receptores específicos de membrana: CB1
y CB2. Ambos pertenecen a la súper familia PROGRAMA ETS – ANMAT
Cannabinoides y Epilepsia Página 9 de 39 de receptores acoplados a la proteína G,
caracterizados por la presencia de siete dominios transmembrana. Los receptores CB1
se encuentran distribuidos principalmente en el sistema nervioso central: corteza,
ganglios de la base, ciertas partes del hipocampo y capa molecular del cerebelo. En
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

virtud de estas localizaciones, los endocannabinoides participan en circuitos

relacionados con la coordinación y el control del movimiento, funciones cognitivas
superiores, en la respuesta al estrés y al dolor, en la regulación del sueño y en los
mecanismos de recompensa. También intervendrían en la regulación de la temperatura
corporal, el vómito, las náuseas y el hambre. Los receptores CB2 se encuentran
distribuidos en: microglía, bazo, amígdalas y distintas células del sistema inmune, entre
ellas macrófagos y linfocitos. Este tipo de receptores se vinculan principalmente con los
efectos inmunomoduladores de los cannabinoides. (3)

El CBD representa hasta el 40% de los fitocannabinoides encontrados en la planta de

cannabis. Debido a la ausencia de propiedades psicoactivas y la baja tasa en la que se
desarrolla tolerancia, el CBD se considera que tiene un amplio potencial terapéutico
para el tratamiento de la epilepsia en comparación con el THC. El CBD presenta efecto
anticonvulsivante, antiinflamatorio y antitumorigénico. El CBD puro parece ser un
excelente candidato entre los fitocannabinoides, a ser evaluado en pacientes con
epilepsia resistente al tratamiento. Su buen perfil de seguridad en humanos, así como su
eficacia en los estudios preclínicos, sugieren que podría ser un fármaco seguro y eficaz
para el tratamiento de la epilepsia. Las experiencias humanas reportadas en pacientes
con síndrome de Dravet y síndrome de LennoxGastaut fueron realizadas con productos
que contienen principalmente CBD, a menudo con proporciones CBD/THC de hasta
20:1 Sin embargo, la seguridad y la PROGRAMA ETS – ANMAT Cannabinoides y
Epilepsia Página 11 de 39 eficacia de CBD en pacientes con epilepsia aún no han sido
determinadas en forma definitiva. (3)

Según los datos extraídos del Centers for Disease Control and Prevention (CDC), en
Estados Unidos, la epilepsia afecta a 2,9 millones de personas, y una de cada 26
personas desarrollará epilepsia a lo largo de su vida. De acuerdo con la Organización
Mundial de la Salud (OMS), la proporción estimada de la población general activa con
epilepsia (es decir, ataques continuos o necesidad de tratamiento) oscila entre 4 y 10 por
1000 personas. Sin embargo, algunos estudios realizados en países de ingresos bajos y
medianos sugieren una proporción mucho mayor, entre 7 y 14 por 1000 personas.
Según estimaciones, se diagnostican anualmente unos 2,4 millones de casos de
epilepsia. En los países de altos ingresos, los nuevos casos registrados cada año en la
población general oscilan entre 30 y 50 por 100.000 personas. En los países de ingresos
bajos y medianos esa cifra puede ser hasta dos veces más alta. La mayoría de los
nuevos casos diagnosticados de epilepsia ocurren con mayor frecuencia en niños y
ancianos y en el 70% de los casos los pacientes responden al tratamiento. Las personas
que presentan epilepsia tienen 2 a 4 veces mayor riesgo de morir que la población
general, debido a la propia enfermedad de base que genera la epilepsia y a la ocurrencia
de las crisis.
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

Según estudios la epilepsia es más tratada en niños y adolescentes que ven una mejoría
pasado unos meses y que son tratados con fármacos antiepilépticos y otros métodos de
tratamiento. Se pudo clasificar os pacientes en seis grupos según la etiología de las
crisis; este estudio se hizo en Israel en cuatro centros de epilepsia pediátrica y cada una
trata a miles de pacientes con epilepsia, incluidos muchos con enfermedad intratable.
Todos los pacientes que recibieron o fueron tratados con CBD fueron seguidos por cada
una de las clínicas durante 12 meses antes de recibir CECO. (4)

1) Adquirido

2) Encefalotapia epiléptica temprana con una etiología genética conocida

3) Encefalotapia epiléptica sin una etiología genética conocida

4) Malformaciones cerebrales congénitas

5) Encefalotapia isquémica hipoxica

6) Otro (etiología no definida)

La preparación del aceite se realizó por dos métodos. En el primer método, el material
vegetal de cannabis se extrajo en etanol absoluto PhEur, seguido de evaporación y
descarboxilación. El concentrado se diluyo en aceite de canola PhEur a la concentración
requerida del 20% de CBD, se agregaron conservantes y antioxidantes para asegurar la
estabilidad de los ingredientes activos. El análisis de concentración y calidad de
ingredientes se realizó cuatro veces por cromatografía liquida de alta resolución
(HPLC). (4).

En el segundo método, los aceites de cannabis se extrajeron de dos cepas de cannabis

ricas en CBD utilizando etanol como disolvente de extracción. La preparación al nivel
de extracto crudo, el CBD purificado y el nivel de solución final se analizaron tanto por
HPLC como por cromatografía de gases-espectrometría de masas. los análisis de CBD
y THC se realizaron en dos laboratorios independientes que suministran servicios para
los productores. Uno es un laboratorio universitario y el otro es un laboratorio aprobado
por la GMP. (4)

La dosis de CBD varió de 1 a 20 mg / kg / día, y se dividió en dos grupos, 1 a 10 mg /

kg / día y 10 a 20 mg / kg / día. La dosis final utilizada para cada paciente se definió de
acuerdo con la respuesta al ataque y los efectos secundarios. En algunos casos, los otros
medicamentos del paciente se redujeron si hubo una disminución en la frecuencia de las
convulsiones y se ajustaron de acuerdo con los efectos secundarios, además de los
ajustes de los niveles de los medicamentos durante el tratamiento con CECO. La
reducción de las convulsiones se calificó según cuatro niveles (0%, <25%, 25–50%,
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

50–75% y 75–100%) según lo informado por los padres y pacientes mayores. Se les
pidió a los padres que informaran la cantidad de convulsiones por período e hicimos los
cálculos porcentuales. Los efectos secundarios también fueron revisados. (4)

Se analizaron en 74 pacientes que cumplieron los criterios del estudio, la mitad de esos
pacientes (37) eran menores de 10 años, 65 pacientes de los 74 tenían problemas de
deterioro cognitivo; se clasificaron así, leve 16, moderado 14, y grave 34. Y solo 10 de
ellos con cognición normal. La dosis del CBD vario de 1 a 20 mg/ Kg/ día, 60
pacientes fueron tratados con menos de 10 mg/ Kg/ día de CBD con un porcentaje del
(81%) y 14 pacientes tratados con más de 10 mg/ Kg/ día de CBD con un porcentaje del
(19%). (4). (66/89%) pacientes que son la mayoría diagnosticaron alguna reducción de
frecuencia de las convulsiones, (13/18%) tuvieron una reducción del 75-100%,
(25/34%) tuvieron una reducción del 50-75%, (9/12%) tuvieron 25-50% de reducción y
(19/26%) tuvieron u menor del 25% de reducción. Y solo 5 pacientes se dieron a un
agravamiento de las convulsiones que condujo a la retirada del aceite de cannabis. (4)

Tabla resultados según etiología de la crisis recuperada de:

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1059131116000054

Tabla reducción de convulsiones según dosis recuperada de:

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1059131116000054

De 74 pacientes estudiados y evaluados por el consumo de CBD 5 pacientes se llevó a

la retirada del cannabis medicinal por efectos secundarios.

Los estudios realizados se han identificado que el uso del CBD en pacientes en su
mayoría menores de edad han dado resultados positivos, aunque aún falta mucha más
investigación sobre el caso pero en los últimos años en países como Australia, Israel,
estados unidos aseguran estar tratos con composiciones que contengan CBD, según los
estudios el tiempo medio de duración de una terapia es de 6 a 8 meses con una dosis
media de CBD de 4,3 mg/ Kg/ día, y muchos aseguran mostrar mejoría en el sueño en
bajar las convulsiones hasta de un 50% y un estado de ánimo más activo.(5), los
productos se percibieron como útiles para controlar las convulsiones en el 71% de los
niños y un 89 % en los adultos y casi todas las personas aseguran que bajaron su
consumo de medicamentos para tratar esta enfermedad. Además de las encuestas
basadas en la web, hay varios informes basados en revisiones de gráficos. En uno de
esos informes de los EE. UU., El uso de cannabis artesanal en 272 niños y adultos con
una variedad de tipos de convulsiones se asoció con al menos un 50% de reducción de
las convulsiones en el 55% de los casos, con un 10% de libertad para las crisis y no
hubo indicios de mejora se asocia preferentemente con un tipo de crisis o síndrome
especifico. (5).
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

OBJETIVOS

Objetivo General

Desarrollar una bebida en polvo con adición de CBD microencapsulado enfocado a

personas con epilepsia

Objetivos específicos

- Extraer y purificar el CBD (cannabidiol) a partir de cannabis sativa

- Realizar microencapsulación del CBD (Cannabidiol) a partir de un polímero
biodegradable utilizando liofilización, caracterizando las microesferas a partir de
microscopia electrónica y difracción de rayos láser.
- Formular la bebida en polvo con adición de CBD microencapsulado
- Realizar la compatibilidad y solubilidad del principio activo y polímero.

METODOLOGÍA DE EXTRACCION DE CANNABINOIDES

El proceso de extracción del cannabis tiene procesos diferentes dentro de estos pueden
ser varios, dentro de la literatura se han usado varias metodologías para el aislamiento
del CBD y THC u otros tipos de canabinoides, según la literatura se pueden usar varios
procesos de extracción, fluidos súper críticos, lixiviación solido-líquido o ultrasonido.

Etapa 1. Selección y cultivo de la planta de cannabis sativa

El Dinamed CBD plus, produce cosechas mas abundantes que su procesadora, con
cogollos con mayor cantidad de cannabinoides y también con mas aroma. La textura de
la resina de esta genética es diferente a lo que estamos acostumbrados, menos pegajosa,
porque su bajo contenido en THC (menos del 1%), estas al ser cultivadas se realizará la
clonación y duplicación de la planta. Por su alto contenido de CBD, produce un efecto
ansiolítico, relajante a nivel muscular y calmante. Por el contrario, sus bajísimos niveles
de THC, por debajo del 1%, garantiza que no existe la psicoactividad que normalmente
asociados al consumo de cannabis.
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

Ficha técnica recuperada de:

https://www.dinafem.org/es/dinamed-cbd-plus/

Etapa 2. Secado y molienda del material

El cogollo proveniente de las plantas se secará a 50 grados centígrados de 8 -12 horas

hasta alcanzar menos del 10 % de humedad. Se medirá a través del método de procesos
gravimétricos. El material vegetal obtenido se molerá hasta obtener un tamaño de
partícula entre 1-2 mm, luego de ello esta materia seca se empacará al vacío para
detener el deterioro y la oxidación de los componentes activos, según la literatura este
material seco tendrá más del 50 % de CBD y menos del 10 % de THC ( peso seco )

Etapa 3. Extracción primaria del material vegetal de cannabis seco y molido.

La extracción primaria de los componentes principales del cannabis se llevara a cabo a

través de fluidos súper críticos utilizando como solventes el CO2 donde la muestra seca
se colocara dentro de un recipiente de extracción presurizado donde se usar variable de
presión hasta 60 MPa, el equipo usa un corriente en contra flujo de disolvente que en
este caso es el etanol donde una bomba proporcionara este solvente una cantidad de 50
g/min, estos dos solventes fluyen a través del intercambiador eléctrico que se llevaran
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

en estado supercrítico en el disolvente extractor, donde se tomaran variables de presión

de 6 a 13 MPa y un temperatura de 35 grados centígrados y cada recipiente y separador
ciclónico permite la extracción permite la descarga periódica del material extraído.

La cuantificación de los componentes de la planta de cannabis se realizara a partir de

una técnica analítica llamada alpha-CAT o cromatografía de capa delgada donde se
obtendrá una muestra de 100 mg de extracto de cannabis serán pasadas con un placa de
recubrimiento en gel de sílice (TLC F254) de 5x10 cm, se usara una desacarboxilacion
se realizara con un calentador a 150 °C durante 40 segundos. (Galand N, 2013)

Etapa 4. Eliminación de clorofila del extracto.

La eliminación de la clorofila se realizara a través de la filtración del extracto partir de

un filtro prensa para aumentar los rendimientos del cannabis con carbón activado esto
retiene la mayor cantidad de ceras y terpenos dejando pasar componentes como los son
los cannabinoides.

Etapa 5. Concentración y purificación del extracto de cannabis

Para este se realizara en cromatografía centrifuga de partición ya que este método

disminuye costes a nivel investigativo y es fácil de escalar ya que no usa silicio como
en el HPLC , donde este método utiliza poco tiempo aproximadamente media hora para
realizar corrida solo que no hay mucha evidencia en la utilización de estos
componentes. (marketplace, 2018)

DESARROLLO Y EVALUACION DE MICROESFERAS BIODEGRADABLES DE

CANNABINOIDES.
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

En este método el disolvente más utilizado en la técnica de microencapsulación por

evaporación de solvente basada en la conformación de emulsiones liquido/aire es el
DICLOROMETANO, ya que es bastante volátil, y por presentar muy bunas propiedades
como disolvente de muchos polímeros, incluida la poli-e-caprolactona. (1)

METODO DE MICROENCAPSULACIÓN (PREPARACION DE LA EMULSION):

 Se debe preparar una solución acuosa de alcohol polivinílico, al 0,5% y a su vez
tener en agitación magnética por 8 horas. Este sería la fase acuosa de la emulsión.
 Pesar 500 mg del polímero (poli-e-caprolactoan,
 Disolver la cantidad de cannabinoide a encapsular en 5mL de diclorometano
agitando en vórtex, y cuando esté bien disuelto añadir la PCL agitando de nuevo en
vórtex hasta su completa disolución. Ésta constituye la fase orgánica de la emulsión.
 Añadir la fase orgánica sobre 250 ml de fase acuosa.
 Agitar 6 minutos a 3000 rpm en homogeneizador de alta velocidad para formar la
emulsión.
 Evaporar el solvente orgánico agitando con un agitador de turbina durante 3 horas a
200 rpm.
 Tomar una muestra para verificar al microscopio óptico que se han formado las
microesferas y verificar su estado de agregación.
 Filtrar las microesferas con filtro Millipore® PTFE 5,0 m y lavar la torta con 50
mL de agua destilada por triplicado.
 Recolectar la torta, re suspender en agua destilada las micropartículas y liofilizarlas
 Calcular el rendimiento del proceso.

A partir de esta metodología se evaluó la influencia de dos variables:

1) Efecto de la velocidad de agitación en el tamaño de las microesferas.

Se evaluará el efecto de la velocidad de agitación en el homogenizador, para ello se debió

formar o elaborar microesferas placebo con una única velocidad de 3000 rpm, ó 5000 rpm,
luego se determinara la distribución del tamaño de los dos tipos de micropartículas
mediante difracción de rayos laser utilizando el equipo SRA 150 Particicle Size Analyzer
(Leeds & Northrup instruments, Irlanda). (1)

2) Elaboración de microesferas con distinta carga en principio activo.

Con el objetivo de lograr más contenido de principio activo, se estudiará la posibilidad de

micro encapsular distintas cantidades de fármaco. De los cuales se desarrollaron distintos
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

lotes de microesferas utilizando microencapsulación por emulsión liquido/aire, variando

únicamente la relación inicial principio activo: polímero. (1)
Durante el proceso de elaboración de las microesferas, como control de rutina, se tomará
una muestra de líquido y se colocara en un portaobjetos con el fin de verificar al
microscopio óptico que se han formado micropartículas. De esta manera también se puede
evaluar su forma, su tamaño y su estado de agregación. (1)
2.1) Elaboración de macropartículas de cannabidiol.
Las proporciones teóricas principio activo: polímero serán las siguientes
 5:150
 10:150
 15:150
 30:150
 50:150

CARACTERIZACIÓN DE LAS MICROPARTICULAS

1) Tamaño, forma y estado de agregación.
 Microscopio electrónico

Se analizarán todas las características de la materia prima y de todas las formulaciones de

macropartículas mediante microscopia electrónica de barrido (Microscopio Jeol- JSM-
6400, Tokyo, Japón).
Para ello, es necesario preparar las muestras de la siguiente manera: en primer lugar, se
deposita una pequeña cantidad de microesferas liofilizadas sobre cinta adhesiva de grafito
en un soporte de aluminio. Posteriormente, se introducen las muestras en un evaporador de
grafito, durante media hora. Finalmente se someten a un proceso de recubrimiento con oro
durante 4 minutos. Una vez preparadas las muestras, se introducen en el microscopio
electrónico de barrido. (1)

 Difracción de rayos laser

Se determinará la distribución de tamaños en volumen de las diferentes formulaciones de

micropartículas mediante difracción de rayos láser utilizando el equipo Micro trac® SRA
150 Particle Size Analyzer (Leeds & Northrup Instruments, Irlanda), que permite la
medición de partículas con tamaños comprendidos entre 0,69 y 704 μm. Para ello se
preparó una suspensión de cada formulación de microesferas en agua des ionizada,
agitándose en el ultrasonidos para facilitar la dispersión de las mismas. A continuación, se
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

añadieron unas gotas de la suspensión recién preparada en la celda del equipo, semillena
con agua des ionizada, y se introdujo la celda en el equipo para proceder a su análisis. (1)
2) Contenido de principio activo en las microesferas y eficacia de encapsulación.

El contenido en principio activo o capacidad de encapsulación hace referencia a la cantidad

de sustancia activa encapsulada por masa de microesferas. Se expresa como mg p.a./100
mg de microesferas. La eficacia de encapsulación (EE) se calcula a partir de la relación
entre el principio activo que realmente ha sido encapsulado y aquel en disposición de ser
encapsulado. (1)
Para la cuantificación del CBD se utilizarán los métodos analíticos por HPLC previamente
descritos. Se rompieron las microesferas con diclorometano, y se realizaron diluciones con
la fase móvil. A continuación, las muestras fueron filtradas por filtros de PTFE de 0,45µm
y se analizaron por HPLC, utilizando las condiciones descritas anteriormente. Además,
también se cuantificó por HPLC el fármaco presente en el sobrenadante obtenido tras la
filtración de las microesferas. Cada lote fue analizado por duplicado. (1).

3) Compatibilidad y solubilidad principio activo: polímero.

Con este método se investigará la compatibilidad principio activo: polímero, la solubilidad

del CBD en el polímero, el estado físico del fármaco en las micropartículas.
Los barridos de DSC se llevarán a cabo en un calorímetro diferencial de barrido DSC 820
(Mettler – Toledo) con un intracooler Huber TC100, utilizando nitrógeno como gas de
purga. El equipo fue calibrado con indio. Las muestras (3‐5 mg) se colocaron sobre
cápsulas de aluminio de 40μL con pin (ME‐27331, Mettler Toledo) y fueron sometidas a un
ciclo de calentamiento de 0 a 100ºC a una velocidad de 10ºC/min bajo una atmósfera inerte
de nitrógeno (flujo de 70 mL/min), utilizando una cápsula de aluminio vacía como
referencia.
Se realizarán estudios sobre el fármaco en estado puro, el polímero puro, mezclas físicas
CBD:PCL, microesferas placebo y microesferas conteniendo CBD, Debido a la
imposibilidad de pesar cantidades exactas de poli‐ε‐caprolactona materia prima (se presenta
en forma de pellets de ≈9 mg), las mezclas físicas CBD:PCL se prepararon utilizando
microesferas de PCL placebo. (1)

4) Ensayos de cesión in vitro.

La liberación del principio activo a partir de las microesferas está gobernada por una serie
de factores que son dependientes del polímero, del principio activo y de la propia micro
esfera. Entre los dependientes del polímero, se puede citar su estructura química, su
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

hidrofobia, su viscosidad, su peso molecular y su estado cristalino. (1), Entre los

parámetros relacionados con el principio activo, destaca la solubilidad del mismo en el
polímero y en el medio de cesión, y su peso molecular. Por último, factores dependientes de
la propia micro partícula son, por ejemplo, el tipo de estructura interna, la porosidad y el
contenido teórico de principio activo con respecto al polímero. De estos factores va a
depender fundamentalmente la velocidad de bioerosión de la micro partícula y la capacidad
de difusión del principio activo a través de la estructura polimérica. (1)
Se utilizarán medios de cesión para realizar estos ensayos que simulan los fluidos del
organismo; son medios acuosos de pH 7.2 – 7.4 obtenidos a partir de soluciones
amortiguadoras fosfato. Como el CBD es una molécula lipídica su coeficiente de
solubilidad en medio acuoso es muy bajo, el CBD 1.2 µg/Ml, en solución acuosa de NaCl
0.9% dificulta el mantenimiento de las condiciones sin k durante el ensayo de cesión; lo
cual puede dar lugar a falsos resultados aparentándose una velocidad de cesión constante
del principio activo desde las microesferas, cuando, en realidad, lo que ocurre es que se ha
alcanzado el coeficiente de solubilidad (CS) en el medio de cesión. (1)
Se realizará un estudio preliminar para determinar las condiciones óptimas para llevar a
cabo los ensayos de cesión a partir de las micropartículas cargadas de CBD. En este estudio
preliminar se modificarán las variables (b) y (c). Como consecuencia de dicho estudio se
fijaron las siguientes condiciones experimentales para los ensayos de cesión in vitro. (1)
 Medio de cesión: Solución reguladora fosfato (PBS) pH 7,4 que se preparó
a partir de dos soluciones madre: ‐Solución de fosfato mono potásico 1/15 Molar
(por litro 9.073 g de KH2PO4) ‐Solución de fosfato di sódico di hidrato 1/15 Molar
(por litro 11,87 g de Na2HPO4∙2H2O). A la que se añadió Tween® al 0,1%
peso/volumen para aumentar el Cs del cannabinoide en el tampón. El medio de
disolución se atempera a 37±0,2ºC. (1)
 Volumen de medio: 15mL para las formulaciones 5/150, 10/150 y 15/150,
y ‐30mL para las formulaciones 30/150 y 50/150.

La selección de volumen de medio de cesión depende de dos factores:

 el volumen de medio ha de ser lo suficientemente elevado como para que la

concentración del principio activo permanezca alejada de su Cs
 si el volumen de medio es muy alto puede ocurrir que la disolución esté demasiado
diluida y la concentración esté por debajo del límite de cuantificación del método
analítico.

También se estudiara la cinética de cesión in vitro a partir de cada una de las formulaciones
elaboradas, siguiendo el protocolo que se describe a continuación.
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

Se colocaron 15 mg de macropartículas de cada una de las formulaciones en tubos de vidrio

previamente recubiertos con Sigmacote, para evitar la adherencia de los cannabinoides al
vidrio, y se adicionaron 15 ó 30 mL de medio de cesión (PBS pH 7.4‐Tween® 80 0,1%).
Los tubos se introdujeron en el baño de agitación a 37ºC con agitación de vaivén 100 rpm y
un recorrido de 2 cm, y a los diferentes tiempos de muestreo (3h, 1, 2, 3, 5, 7 10, 13, 16 y
20 días) se retiraron 14 mL (formulaciones 5/150, 10/150 y 15/150) ó 28 mL
(formulaciones 30/150 y 50/150) de medio de cesión con una aguja acoplada a una jeringa
con el fin de no retirar las macropartículas, reponiendo el volumen extraído con medio
nuevo atemperado. Las muestras extraídas fueron filtradas y el contenido de cannabinoide
fue cuantificado por HPLC. Estos ensayos se realizaron por triplicado. (1).

 Finalmente, tras los ensayos de cesión, las macropartículas remanentes fueron

liofilizadas y observadas por microscopía electrónica para evaluar el grado de
degradación de la poli‐ε‐caprolactona. Asimismo estas macropartículas fueron
analizadas por HPLC para cuantificar el porcentaje de fármaco remanente en las
mismas tras los ensayos de cesión. (1

DESARROLLO DE LA BEBIDA

Se desarrollara una bebida en polvo con características de hidratación en agua, su

relación en la hidratación será de 30 g de base seca para 300 ml de agua, donde la
formulación será la siguiente:

CANTIDAD CANTIDAD CANTIDAD PARA

PRODUCTO
PARA 30 g PARA 30 g 30 g
Estevia 0,05 0,05 0,05
Acido citrico 3 3 3
Acido malico 1 1 1
Fosfato tricalcico 0,15 0,15 0,15
Citrato de sodio 0,4 0,4 0,4
CBD (microencapsulado) 0,03 0,06 0,1
Maltodextrina 25,37 25,34 25,3

En la formulación anterior se evaluaran tres concentraciones diferentes de CBD (micro

encapsulado), donde se han realizado estudios que a estas concentraciones de CBD se
han generado modelos invivo anticomvulsionante en roedores estimuladas
químicamente y causo una reducción significativa de dos veces el porcentaje de los
animales que mueren por convulsiones (al, 2010)
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

CARACTERISTICAS FÍSICO-QUIMICAS DE LA BEBIDA

Se realizarán los siguientes análisis a la bebida en base seca y en la bebida

reconstituida.

GRANULOMETRIA

Se realizara el tamizado por mallas esperando las siguientes granulometrías ≥ 60%

mayor de 40 µm; ≤ 50% mayor de 125 µm; ≤ 10% mayor de 250 µm.

HUMEDAD

Se realizara por el método gravimétrico, esperando no tener porcentajes de humedad

mayores al 7 %.

PH

Se realizara pruebas de phmetria a través de un potenciómetro esperando obtener pH

entre 2 – 5

CANTIDAD DE SOLIDOS SOLUBLES

Se medirán en la bebida hidratada por el método de refractometria, se espera obtener

grados brix no mayores a 5.

TURBIDEZ

Se medirá la turbidez de la bebida a partir del método analítico llamada

espectrofotometría de luz visible a una longitud de onda 380nm y 780nm.

NORMATIVIDAD

Ley 1787 del 6 de julio del 2016: esta ley tiene como objetivo crear un marco
regulatorio que permita el acceso seguro e informado al uso médico y científico del
cannabis y sus derivados en el territorio nacional colombiano.

Decreto 613 de 2017: este decreto tiene como objetivo reglamentar la evaluación,
seguimiento y control de las actividades de importación, exportación, cultivo,
producción, fabricación, adquisición, a cualquier título, almacenamiento, transporte,
comercialización, distribución, uso de las semillas para siembra de la planta del
cannabis y de sus derivados para fines médicos y científicos, así como los productos
que los contengan en el marco de la ley 1787de 2016.
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

Decreto 2467 del 2015: tiene como objetivo reglamentar el cultivo de plantas de
cannabis, la autorización de la posesión de semillas para siembra de cannabis, el control
de las áreas de cultivo, así como los procesos de producción y fabricación, exportación,
importación, uso de estas y sus derivados, destinados a fines estrictamente médicos y
científicos.

Resolución 577 del 2017: esta resolución tiene como objetivo establecer las
disposiciones específicamente aplicables a la evaluación y seguimiento a las licencias
de uso de semillas para siembra, de cultivo de plantas de cannabis psicoactivo y de
cultivo de plantas de cannabis no psicoactivo, indicadas en el articulo 2.8.11.2.1.2 del
decreto 780 de 2016.

Resolución 578 del 2017: esta resolución tiene como objetivo establecer el manual de
tarifas para el pago de los servicios de evaluación y seguimiento que deben cancelar las
personas naturales y jurídicas solicitantes de licencias de uso de semillas para siembra,
de cultivo de plantas de cannabis psicoactivo y de cultivo de plantas de cannabis no
psicoactivo, indicadas en el capitulo 2 del titulo 11 de la parte 8 del libro 2 del decreto
780 de 2016.

Resolución 579 del 2017: esta resolución tiene como objetivo establecer el criterio de
definición de los pequeños y medianos cultivadores, productores y comercializadores
nacionales de cannabis medicinal, el mecanismo de verificación del mismo y la perdida
de tal calidad, para efectos de lo dispuesto por el capitulo 10 del titulo 11 de la parte 8
del libro 2 del decreto 780 de 2016.

Resolución 2891 del 2017: esta resolución tiene como objetivo establecer el manual
tarifario para el pago de los costos de evaluación y de seguimiento y control que deben
cancelar las personas naturales y jurídicas solicitantes de licencia de fabricación de
derivados de cannabis para uso medicinal y científico.

Resolución 2892 del 2017: la licencia de fabricación de derivados de cannabis es la

autorización que otorga el Ministerio de Salud y protección social a personas naturales
y jurídicas para ejecutar actividades relacionadas con la transformación del cannabis
psicoactivo en aceites, resinas y demás extractos a destinarse para fines médicos y
científicos.

Resolución 5109 de 2005: esta resolución tiene como objetivo establecer el reglamento
técnico a través del cual se señalan los requisitos que deben cumplir los rótulos o
etiquetas de los envases o empaques de alimentos para consumo humano envasados o
empacados, así como los de las materias primas para alimentos, con el fin de
proporcionar al consumidor una información sobre el producto lo suficientemente clara
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

y comprensible que no induzca a engaño o confusión y que permita efectuar una

elección informada.

NTC 5767: mezclas en polvo para preparar refrescos o bebidas instantáneas, son
productos en polvo, constituido por azucares o mezclas de azucares y edulcorantes
acidulantes, saborizantes, colorantes, con o sin adición de enturbiantes, otros
ingredientes y/o aditivos permitidos en la legislación nacional vigente o por el Codex
alimentarius, que, por reconstitución en agua, leche o ambos permite la obtención de un
refresco o bebida.

BIBLIOGRAFIA

Valenzuela, A. (2004). El consumo de te y la salud: características y propiedades

benéficas de esta bebida milenaria. Scielo, Vol31 n°(2).

Palacio, E. Ribero, E y Restrepo, J. (2012). Toxicidad hepática por te verde (camellia

sinensis). Scielo. (46-52).

Hernández, T. Rodriguez, E y Sánchez, F. (2004). El te verde ¿una buena elección para

la prevención de enfermedades cardiovasculares? Scielo. Vol54 n°(4).

(2016). Los mitos y verdades de las contraindicaciones del té verde. Recuperado de

https://sweetea.cl/blogs/news/los-mitos-y-verdades-de-las-contraindicaciones-del-te-
verde

(2013). Consumo excesivo de te verde puede provocar alteraciones y fallas hepáticas.

Recuperado de http://bvcenadim.digemid.minsa.gob.pe/noticias/105-consumo-
excesivo-de-te-verde-puede-provocar-alteraciones-y-fallas-hepaticas

(2011). Propiedades beneficiosas del té verde. (Investigación y ciencia). Recuperado de

https://www.investigacionyciencia.es/blogs/medicina-y-biologia/27/posts/propiedades-
beneficiosas-del-t-verde-10323

Lozano Cámara, Indalecio (2017), “Cultivo y usos etnobotánicos del cañamo (Cannabis
Sativa L.) En la ciencia árabe (siglos VIII-XVII)”, Asclepio 69 (2): p197

Garcia, C; Sanchez, J; (2006). Una revisión histórica sobre los usos del cannabis y su
regulación. Salud y drogas. 6(1). 47-70

Sativida
Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

Rodriguez, R. (2012). Los productos de cannabis sativo: situación actual y perspectivas

en medicina. Vol.35 n°(3). 247-256.

Huizenga N, Stella N. (2018). Epilepsy Foundation. Actas del taller de terapia de

cannabinoides en epilepsia 2017 de la fundación para la epilepsia. Recuperado de:
https://www.epilepsy.com/learn/seizure-and-epilepsy-news/epilepsy-behavior-
journal/select-journal-abstracts/proceedings

Friedman D, Devinsky O. (2015). The new England Journal of Medicine. Cannabinoids

in the treatment of Epilepsy. Recuperado de:
https://www.nejm.org/doi/pdf/10.1056/NEJMra1407304?articleTools=true

(2017). Anmat. Informe ultrarrápido de evaluación de tecnología sanitaria.

Cannabinoides y epilepsia. Recuperado de
http://www.anmat.gov.ar/ets/Cannabinoides_y_epilepsia.pdf

Tzadok M, Bruria B. (2016). CBD- enriched medical cannabis for intractable pediatric
epilepsy: the current israelí experience. Vol (35). Pag (41-44).

Perruca E. (2017). Journal of Epilepsy Research. Cannabinoids in the treatment of

Epilepsy: Hard Evidence at last?. Pag (61-66)-

Galand N, E. D. (27-28 de septiembre de 2013). Fundación canna . Obtenido de

https://www.fundacion-canna.es/comparative-study-for-quantification-thc

marketplace, c. (14 de octubre de 2018). australian cannabis. Obtenido de

https://australiacannabis.com.au/the-cbd-extraction-and-purification-process/

Ley N° 1787. El congreso de Colombia, 6 de julio de 2016.

Decreto N° 613. Ministerio de salud y protección social, presidente de la republica de

Colombia, 10 de abril de 2017.

Decreto N° 2467. Ministerio de salud y protección social, presidente de la republica de

Colombia, 22 de diciembre de 2015.

Resolución N° 0577. Ministerio de justicia y del derecho, 8 de agosto de 2017

Resolución N° 0578. Ministerio de justicia y del derecho, 8 de agosto de 2017

Resolución N° 579. Ministerio de justicia y del derecho, los ministros de justicia y del
derecho, agricultura y desarrollo rural, y salud y protección social, 8 de agosto de 2017

Resolución N° 5109. Ministerio de la protección social, 29 de diciembre de 2005

Miguel Peña (73840)
Felipe Roa (73803)

Resolución N° 2891. Ministerio de salud y protección social, 11 de agosto de 2017

Resolución N° 2892. Ministerio de salud y protección social, 11 de agosto de 2017