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“UNIANDES”
BIOQUÍMICA FARMACÉUTICA
TEMA:
AMBATO-ECUADOR
2016
CERTIFICADO DEL ASESOR
180336688-7
Asesora de Tesis
DECLARACIÓN DE LA AUTORÍA DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
Quien suscribe Marcia Aracelly Cortez Villarroel, hace constar que es la autora del
Proyecto de Investigación de Grado, titulado como: “ ELABORACIÓN DE UNA
FORMA FARMACÉUTICA A PARTIR DEL EXTRACTO DE HOJAS DE LA
PLANTA ZORRILLA QUE DISMINUYA NIVELES DE GLUCOSA EN SANGRE,
PLANTA NATIVA DEL CENTRO CULTURAL UNI-SHU DE LA COMUNA
CHUIGUILPE DE SANTO DOMINGO DE LOS TSÁCHILAS”, constituye una
elaboración personal realizada únicamente con la dirección de la Asesora del
Proyecto de Investigación.
C.C1600862187
DEDICATORIA
Marcia Cortez.
AGRADECIMIENTO
Marcia Cortez.
RESUMEN
Los resultados obtenidos indicaron que la planta en estudio tiene: alcaloides, taninos,
flavonoides, azucares reductores, saponinas lo que hace que tenga propiedades
anestésicas, antisépticas, antibacteriana y antidiabéticas.
.
ABSTRACT
This research was conducted with the purpose of carrying out a taxonomy
identification, a physical and chemical analysis and a phytochemical screen through
qualitative and physical-chemical methods in order to determine the active principles
present in the Zorrilla plant (Petiveria alliacea), to later prepare a natural syrup from
the extract of the plant´s leaves and run the correspondent quality control.
The findings show that the plant under study has: tannins, flavonoids, reducing
sugars and saponins which allow it to have antiseptic, antibacterial and antidiabetic
properties.
It contains reducing sugars which is the organic compound responsible of the natural
glucose lowering action and this proves the ancestral use of the plant as blood sugar
levels reducer.
The natural syrup made from the extract of the plant under study contains a natural
Stevia sweetener low in carbohydrates and sugar.
Since Stevia has significant effect in blood glucose levels, it is useful for people with
diabetes. The syrup improves the quality of life and will constitute a new natural
innovative product.
ÍNDICE GENERAL
DEDICATORIA
AGRADECIMIENTO
RESUMEN
ABSTRACT
ÍNDICE GENERAL
ÍNDICE DE CUADROS
ÍNDICEDE IMÁGENES
ÍNDICE DE TABLAS
ÍNDICE DE ANEXOS
ÍNDICE DE ABREVIATURAS
Pág.
INTRODUCCIÓN __________________________________________________ 1
CAPITULO I ____________________________________________________ 10
1.2.3. Fitomedicamentos__________________________________________ 14
1.3.3Glucólisis. _______________________________________________ 24
1.2.7.2Sustancias auxiliares:_____________________________________ 30
CAPITULO II ____________________________________________________ 35
investigación. ____________________________________________________ 37
2.2.1. Métodos, técnicas y procedimientos de análisis __________________ 37
2.2. Resultados_________________________________________________ 47
Bibliografía
Anexos
ÍNDICE DE CUADROS
Pág.
.............................................................................................................................. 53
Pág.
planta Zorrilla......................................................................................................... 50
planta Zorrilla......................................................................................................... 50
Pág.
Tabla 2 Resultado de evaluación sensorial: Atributo del color, aroma, sabor del
jarabe .................................................................................................................... 63
planta Zorrilla......................................................................................................... 64
Tabla 5 Control microbiológico del jarabe a base del extracto de las hojas de la
planta Zorrilla......................................................................................................... 65
ÍNDICE DE ANEXOS
Pág.
Anexo A
Anexo B
%: Porcentaje
mL: Mililitros
g: Gramos
cm: Centímetros
m: Metros
mg: Miligramos
Antecedentes de la investigación
1
Santander S, (2009) en su estudio “Influencia del tratamiento de (Petiveria alliacea)
en la expresión diferencial de genes en células tumorales, nos dice que el estudio del
perfil de expresión génica en las células eucariotas es una herramienta importante
en el entendimiento de las huellas moleculares generadas en respuesta a un
estímulo farmacológico. A partir de (Petiveria alliacea), una de las plantas
colombianas con actividad antitumoral, obtuvieron la fracción FAST 8 7:3, en la cual
encontraron diferentes compuestos, como el trisulfuro de dibencilo, uno de los
componentes antitumorales más potentes reportados para la planta. Esta fracción
también posee actividad cito tóxica sobre la línea de células tumorales K562 e induce
cambios en el perfil de expresión de genes, que podrían estar relacionados de
alguna forma con la actividad antitumoral tradicional reportada para esta planta. Esta
actividad puede ser ejercida, en parte, por la presencia del trisulfuro de dibencilo y
por la actividad de los otros componentes de la fracción. Utilizaron el ADNc-AFLP
como herramienta útil en la tamización del perfil de genes transcritos en las células
tumorales y, también, como herramienta útil para el descubrimiento de nuevos
fármacos antitumorales.
2
El tratamiento alternativo (I) a base de (Solución de Anamú 20%) mostró factibilidad
económica y terapéutica.
Las variables que se evaluaron fueron índice disuasión alimentaria (FDI), porcentaje
de mortalidad y CL50. Realizaron un análisis de varianza (ANOVA) y una prueba de
comparación de medias de LSD Fisher. El mayor efecto disuasivo alimentario
encontraron en el extracto metanólico de (Neem), seguido por el de (P. auritum) y el
menor efecto en el extracto de (P. alliacea). Los porcentajes de mortalidad para (A.
indica), (P. auritum)y(P. alliacea)fueron 38.88, 28.8, 21.22 %, respectivamente, en
condiciones de laboratorio, la misma tendencia se encontró en campo. La CL50
mostró que el extracto metanólico de (A. indica) fue el más tóxico (4.03 ppm), le
siguió en efectividad el de (P. auritum) (42.08 ppm). En campo, la CL50 de los
extractos metanólico de (A. indica, P. auritu y P. alliacea) fueron 9.61, 21.21 y 104.1
ppm, respectivamente. En el presente estudio encontraron que son marcadas las
diferencias que existen entre las variaciones de toxicidad por especie y el tipo de
extracto.
3
Antecedentes legales
4
7.-Garantizar la disponibilidad y acceso a medicamentos de calidad, seguros y
eficaces, regular su comercialización y promover la producción nacional y la
utilización de medicamentos genéricos que respondan a las necesidades
epidemiológicas de la población. En el acceso a medicamentos, los intereses de la
salud pública prevalecerán
Sobre los económicos y comerciales.
Es una hierba perenne de tallo recto, poco ramificado de 0,5 a 1 m de alto, con hojas
alternas de forma elíptica y de 6 a 19 cm de largo. Sus flores son pequeñas de color
blanco y el fruto es una baya cuneiforme que presenta cuatro ganchos doblados
hacia abajo (Ferrer, 2010).
La planta se ha utilizado desde los tiempos remotos con fines medicinales y ritos
mágicos religiosos. Actualmente, se utiliza como medicamento herbolario para
diferentes enfermedades y se comercializa por varias firmas como suplemento
nutricional o como inmunomodulador.
Esta planta ha motivado mucho interés en países fuera del área amazónica debido
principalmente a sus posibles efectos antitumorales (Ruffa 2010).
El presente trabajo de investigación, establecerá la relación que existe entre las
aplicaciones tradicionales la planta zorrilla y sus principios activos mediante ensayos
experimentales y clínicos en la planta y también la forma farmacéutica.
5
En lo referente al Planteamiento del problema la diabetes se está convirtiendo en
una epidemia mundial relacionada con el rápido aumento del sobrepeso, la obesidad
y la inactividad física. Se calcula que las muertes por diabetes aumentarán más de
un 50% en los próximos 10 años. En los países desarrollados la mayoría de los
diabéticos han superándola edad de jubilación, mientras que en los países en
desarrollo el grupo más afectado es el de 35 a 64 años (OMS, 2014).
6
El Objetivo de la investigación: Fitomedicamentos
7
La Justificación es importante el presente trabajo de investigación debido a que las
plantas medicinales han sido utilizadas desde hace mucho tiempo en el tratamiento
de varias enfermedades lo cual ha fomentado gran interés por el estudio de sus
principios activos como una alternativa para la elaboración de nuevas formas
farmacéuticas naturales.
Es por ello que debido a los beneficios que nos brinda la planta Zorrilla (Petiveria
alliacea), surge la idea de continuar con la investigación sobre la elaboración del
jarabe a partir de un extracto con posible actividad hipoglucemiante.
- A nivel teórico
Fortalecer los conocimientos de una forma farmacéutica a partir del extracto de hojas
de la planta zorrilla la misma que posee propiedades curativas para disminuir los
niveles de glucosa en sangre lo que servirá de sustento para crear nuevas hipótesis
para futuras investigaciones.
8
- A nivel científico
Comprobar los principios activos de la planta zorrilla mediante tamizaje fitoquímico
basado en reacciones de coloración y precipitación y su posterior elaboración de
una forma farmacéutica para la diabetes.
La Significancia práctica del presente trabajo es de gran importancia debido a que
servirá para futuras investigaciones y creación de nuevas formas farmacéuticas.
9
CAPITULO I
MARCO TEÓRICO
10
A lo largo de América Central, las mujeres utilizan anamú para aliviar los dolores de
parto y facilitar el parto, así como para inducir abortos. En Guatemala, la medicina
herbaria, la planta se llama apacín y una decocción de las hojas se toma
internamente para las dolencias digestivas y la digestión lenta, flatulencia, y la fiebre.
Una decocción de las hojas también se usa externamente como un analgésico para
el dolor muscular y de enfermedades de la piel.
Planta zorrilla.
Imagen 1 Planta Zorrilla (Petiveria
alliacea)
11
1.2.2. Descripción de la planta.
Planta perenne que crece hasta 1 m, de raíz profunda, crece en lugares húmedos
algo sombríos y en zonas ribereñas, en suelos arcillosos se dificulta el crecimiento de
la raíz; requiere alta humedad relativa. Es una planta inmunoestimulante no muy
común, crece silvestremente, se produce por semillas o estacas de las ramas no
leñosas. La recolección de hojas debe hacerse antes de la floración. La flor es blanca
y sale en racimos terminales. Es planta indeseable en potreros de climas cálidos. El
aceite esencial es repelente contra la polilla de la ropa. (Polanco, 2012)
12
e) Propiedades terapéuticas. Tiene muchas aplicaciones para la salud, muchos
estudios se han llevado a cabo in vitro o en modelo animal como ratones, por lo
que aún no se está clara su total eficacia. (Sariego, Marin, Ochoa, & Tamayo,
2013)
Contra el cáncer: La planta anamú fue investigada con este fin durante la década de
los 90’s y se comprobó que extractos de la planta tenían un efecto citotóxico para las
células cancerígenas llegando a matar algunas de ellas, esta planta puede ayudar a
inhibir el desarrollo de cáncer de mama y combatir activamente ciertos tipo de cáncer
como leucemia, cáncer cerebral. (Alarcón, 2011)
Para la diabetes: tiene efectos positivos sobre los niveles de glucosa en sangre,
contribuyendo a disminuir sus niveles, sin embargo, se debe emplear con precaución
para este fin, ya que su efecto no debe combinarse con el de fármacos para
disminuir los niveles de glucosa en sangre sin consultarlo con su médico
previamente. (Alarcón, 2011)
13
Es útil contra hongos: Uno de los usos tradicionales del anamú se debe a sus
propiedades antimicrobianas e incluso antimicóticas, se ha comprobado que
realmente puede ser útil en caso de infecciones por hongos y bacterias. (Alarcón,
2011)
1.2.3. Fitomedicamentos
14
1.2.3.1Control de calidad para las plantas de uso medicinal
El análisis y control de las drogas vegetales y derivados, especialmente productos
extractivos, constituye uno de los pasos imprescindibles que debe efectuarse
previamente a su utilización en un proceso de elaboración industrial o magistral de
medicamentos. (Dehesa, 2010)
1. Análisis de materia prima (droga cruda, material semi procesado y los extractos)
2. Producto terminado
Por lo tanto deben de ser definidas cada una de las sustancias a utilizar:
a) Droga cruda: Son las drogas vegetales o animales que han recibido sólo el
proceso de recolección y secado para estar en condiciones de ser
almacenadas.
b) Droga vegetal: puede llegar a ser un órgano o parte de un órgano de la planta:
raíces, rizomas, bulbos, tubérculos, tallos, corteza, leño, hojas, flores, frutos,
semillas. (Dehesa, 2010)
15
o almacenamiento defectuoso, o la alteración debida a la edad. La desecación
excesiva hace a las hojas muy frágiles y causa rotura de las mismas en el
transporte (Miranda, 2009)
Para asegurar la calidad de la materia prima natural, son importantes los siguientes
parámetros:
16
e) Descripciones microscópicas Se emplea para confirmar la identidad de la
planta. La descripción incluye características de los diferentes tipos de tejidos,
estomas y tricomas o fibras.
17
1.2.4 Diabetes.
Nuestra maquinaria biológica está compuesta por millones de células que dependen
del aporte nutritivo contenido en los alimentos. (Carrasco, 2012)
1.2.4.1. Síntomas
- Hiperglucemia
- Cetosis
- Poliuria
- Glucosuria
- Polidipsia
- Polifagia.
Por tanto, este déficit de insulina que caracteriza a la diabetes debe suplirse
mediante la inyección de insulina, de manera que emite lo máximo posible la
producción de una persona sin diabetes.
18
La Diabetes es una enfermedad crónica que incapacita al organismo a utilizar los
alimentos adecuadamente. Al ingerir los alimentos estos se descomponen
convirtiéndose en una forma de azúcar denominada glucosa, que es el combustible
que utilizan las células para proveer al organismo de la energía necesaria. Este
proceso de transformar los alimentos en energía se llama metabolismo. Para
metabolizar la glucosa adecuadamente, el organismo necesita una sustancia llamada
insulina. La insulina es una hormona producida en el páncreas (que es una glándula
localizada debajo del estómago), y cuya función es regular el uso de la glucosa en el
organismo y por lo tanto es esencial en el proceso metabólico.
La insulina trabaja permitiéndole a la glucosa alojarse en las células para que éstas
la utilicen como combustible, manteniendo a su vez los niveles de glucosa en la
sangre dentro de lo normal (70 a 110 mg/dL). Se la denominó insulina por el latín
insula "isla", ya que se produce en los islotes de Langerhans. En el organismo
normal, la insulina mantiene la glucosa sanguínea a un nivel satisfactorio
(normoglucemia), previene su aumento o lo corrige, e influye en la producción y el
consumo de glucosa. Cuando las concentraciones de azúcar en la sangre son bajas,
el páncreas libera glucagón, que actúa contrariamente a la insulina, estimulando la
degradación de glucógeno y la liberación de glucosa del hígado.
19
Aunque aún no hay una cura para la Diabetes, ésta puede ser controlada. La meta
principal en el tratamiento es mantener los niveles de azúcar en la sangre (glucemia)
lo más cerca del rango normal como sea posible (70 a 110 mg/dL) durante la mayor
cantidad de tiempo. Existen tres tipos de diabetes (diabetes tipo 1, diabetes tipo 2, y
diabetes gestacional) y el tratamiento depender del tipo de diabetes.
Las personas con Diabetes (tipo 1 y tipo 2) pueden trabajar y estudiar, y lo hacen
bien. La disciplina necesaria para mantener un buen control de la Diabetes,
generalmente hace de los diabéticos mejores trabajadores y estudiantes. Las
personas con Diabetes, requieren comer en horas establecidas, sin embargo pueden
realizar incluso, actividades que requieren grandes esfuerzos físicos.
1.3.3.2Clasificación de la diabetes.
Ésta puede desarrollarla desde el recién nacido hasta una persona entre los 25 y 30
años de edad, o tal vez mayor, algunos de ellos son:
20
- Uno o varios virus, como la gripe o infección estomacal, o hasta enfermedades
más graves como el que causa la hepatitis.
- Factores ambientales, como la contaminación del aire.
- Caracterizada por una destrucción de las células beta pancreáticas,
deficiencia absoluta de insulina, tendencia a la ceto acidosis y necesidad de
tratamiento con insulina para vivir (insulinodependientes).
2.- Diabetes idiopática: Con igual comportamiento metabólico, pero sin asociación
con marcadores de autoinmunidad ni de HLA.
Puede pasar inadvertida y sin diagnosticar durante años. En tales casos, los
afectados no son conscientes del daño a largo plazo causado por su enfermedad.
(Guariguata & Nolam, 2013)
4.-Otros tipos específicos de diabetes.
Incluyen pacientes con defectos genéticos en la función de la célula beta como las
formas llamadas MODY (maturityonsetiabetes of the young); otros con defectos
21
genéticos de la acción de la insulina; otros con patologías pancreáticas
(pancreatectomía, pancreatitis aguda, pancreatitis crónica, neoplasia del páncreas,
hemocromatosis); endocrinopatías (Cushing, acromegalia, glucagonoma,
feocromocitoma). También algunos fármacos o tóxicos pueden producir diabetes
secundaria (corticoide, ácido nicotínico, L-asparagina, interferón alfa, pentamidina);
agentes infecciosos (rubeola congénita, coxsachie B, citomegalovirus, parotiditis) y
por último, algunas otras enfermedades como los Síndromes de Down, Kleinefelter,
Turner, enfermedad de Stiffman y Lipoatrofias. En estos casos se habla de diabetes
secundaria, mientras los tipo 1 y 2 son primarios. (Carrasco, 2012)
22
Entrada de la glucosa a las células.
Para que la glucosa pueda ser utilizada por las células, primero debe atravesar la
membrana plasmática y entrar en el citosol. Mientras que la absorción de glucosa en
tracto GI (y en los túbulos renales) se realiza por transporte activo, el movimiento de
glucosa desde la sangre a la mayoría de las células del organismo se produce por
difusión facilitada. La insulina aumenta la velocidad de difusión facilitada de glucosa
en la mayoría de las células excepto en las neuronas y los hepatocitos.
La fosforilación retiene glucosa en las células de forma que pueda salir. Los
hepatocitos, las células de los túbulos renales y las células epiteliales intestinales
tienen la enzima necesaria (fosfatasa) para separar el grupo fosfato, lo cual permite a
la glucosa salir de la célula hacia la circulación sanguínea.
Catabolismo de la glucosa
23
Sin embargo, la glucólisis es el paso previo al ciclo de Krebs y a la cadena de
transporte electrónico, procesos que requieren oxígeno y que proporcionan hasta 34
o 36 molécula de ATP por molécula de glucosa. Estas reacciones de síntesis de ATP
constituyen la respiración celular aeróbica.
1.3.3Glucólisis.
24
1.3.3.2 Insulina.
1.3.3.3 Tratamiento.
Las hiperglucemias sintomáticas graves se tienen que tratar adecuadamente con el
objeto de controlar una serie de alteraciones en diferentes vías metabólicas:
25
1.3.3.4 Metabolitos con propiedades hipoglucemiantes
La capacidad de cierta planta para disminuir los niveles de glucosa, las señalan
como candidata para el desarrollo de un fitofármaco a utilizar en el tratamiento de
diabetes mellitus.
Alcaloides
Flavonoides
Taninos
Saponinas
Glucósidos.
Cenizas totales. Se basa en calcinar hasta que quedan blancas. El residuo que
queda corresponde a las cenizas derivadas del tejido vegetal (cenizas fisiológicas) y
a las de la materia extraña (cenizas no fisológicas) (Dehesa, 2010)
27
b) Maceración: Es una extracción que se realiza a una temperatura ambiente de
15º y20ºC. El líquido para la solución puede ser agua o alcohol, los tiempos
concretos de maceración dependen del tipo de droga a extraer. (Enriquez, Prieto,
& Ruiz, 2010)
c) Principios activos: son sustancias que se encuentran en las distintas partes u
órganos de las plantas y que alterando o modificando el funcionamiento de
órganos y sistemas del cuerpo humano y animal la investigación científica ha
permitido descubrir una variada gama de principios activos, de los cuales los más
importantes en salud, son los aceites esenciales, los alcaloides, glucósidos o
heterósidos, mucílagos y gomas, y los taninos. Existen en las plantas otros
principios activos relevantes denominados nutrientes esenciales, como las
vitaminas, minerales, aminoácidos, carbohidratos y fibras, azúcares diversos,
ácidos orgánicos, lípidos y los antibióticos. (Enriquez, Prieto, & Ruiz, 2010)
28
f) Ensayo de espuma (saponinas): Permite reconocer en un extracto la
presencia de saponinas, tanto del tipo esteroidal como triterpénica.
g) Ensayo de cloruro férrico: Permite reconocer la presencia de compuestos
fenólicos y/o taninos en un extracto vegetal. Si el extracto de la planta se realiza
con alcohol, el ensayo determina tanto fenoles como taninos.
h) Ensayo de Fehling (azúcares reductores): Consiente reconocer en un
extracto la presencia de azúcares reductores.
i) Ensayo de mucilagos: Permite reconocer en los extractos de vegetales la
presencia de esta estructura tipo polisacárido, que forma un coloide hidrófilo de
alto índice de masa que aumenta la densidad del agua donde se extrae.
29
1.2.7. Jarabe
30
b) Preservantes Antimicrobianos. Para evitar el desarrollo de
microorganismos, se incorporan a la formulación agentes antimicrobianos. Los
más empleados son los ésteres del ácido para hidroxibenzoico (parabenos), el
ácido benzoico y su sal sódica. Se añaden en concentraciones bajas (<0.5%)
Además pueden incluirse estabilizantes, antioxidantes, buffers, colorantes
entre otras sustancias auxiliares de acuerdo a las características del principio
activo y el resto de los componentes de la formulación.
c) Control de calidad en jarabes Entre los principales ensayos de calidad que
le realizan a los jarabes se encuentran: Características organolépticas (olor,
color, sabor y transparencia), Uniformidad de masa, Densidad, Punto de
ebullición, Índice de refracción, Viscosidad, Control microbiológico,
Cuantificación del ingrediente activo.
d) Envasado y almacenamiento El envasado de los jarabes debe hacerse en
frio y en recipientes cuya capacidad permita dejar pequeñas cámaras de aire.
Tratándose de jarabes medicinales, estos deben ser dispuestos en frascos
oscuros, con capacidades que oscilan entre 60 y 150mL prefiriéndose
aquellos frascos con cuello de reborde. (Burger., 1979)
1.3.1. Fitoquímica
La palabra “fitoquímica” viene de prefijo griego Phyto que significa PLANTA y
Química, significa entonces “COMPUESTOS QUÍMICOS DE LAS PLANTAS”. Es la
ciencia responsable del estudio de los componentes químicos de los vegetales;
estudia cada grupo de la planta, desde su estructura química molecular, hasta las
propiedades biológicas de los vegetales como los principios activos, los olores,
pigmentación, entre otros, estos compuestos no cumplen una función elemental o
principal para su actividad vital, pero por el contrario puede prevenir enfermedades
letales como el cáncer en los humanos y al mismo tiempo la planta los utiliza como
31
sustancias para su protección y para comunicarse con otra especies vegetales y
animales. (Torres , 2010).
Análisis critico
1.3.2. Farmacognosia
Significa literalmente, conocimiento (gnosis) de los medicamentos o drogas
(pharmakon). (Rosales , 2011)
32
1.3.3. Tecnología Farmacéutica
Es un área de las ciencias farmacéuticas que estudia la elaboración de las formas
farmacéuticas (medicamentos), Tanto el proceso como la formulación (composición).
(Bernad , 2012)
Tecnología farmacéutica es la parte de las Ciencias Farmacéuticas que se encarga
del estudio de las operaciones tecnológicas y de los componentes implicados en la
fabricación de los medicamentos. (Vera , 2013)
Análisis critico
1.3.4. Fitofarmacia.
Proviene de dos vocablos - Fito = Reino Plantae o Vegetal y Farmacia = Ciencia
que enseña a conocer los cuerpo naturales y sus asociaciones; y el modo de
elaborarlos y combinarlos; los cuales están destinados para prevenir, diagnosticar,
tratar, aliviar y curar las enfermedades; y para conservar una buena salud. Por lo
Tanto, Es aquella disciplina científica que emplea las plantas medicinales, recursos
naturales vegetales, productos naturales botánicos y afines; para usos en la salud.
(Yanza , 2013 )
Análisis critico
33
1.4. Conclusiones parciales del Capítulo I
34
CAPITULO II
Limites políticos
35
2.1.2. Tipos de investigación por su diseño y por su alcance
Tipo de diseño de la investigación
Por su diseño
36
2.1.6. Métodos y técnicas del nivel empírico del conocimiento
Observación científica: se observó cual es el habitad natural de las plantas, sus
usos, composición físico-química y aplicación en una forma farmacéutica.
- Mechero
- Erlenmeyer
- Frascos ámbar
- Embudos de separación
- Papel filtro
- Tubos de ensayo
- Probetas
- Balones de aforo
- Varillas de vidrio
- Pipetas
- Vasos de precipitación
- Gradillas
37
- Placas porta y cubre objetos
- Gillette
- Gotero
- Pinza
b. Equipos
- Microscopio
- Sorbona
- Estufa
- Autoclave
- Balanza analítica
- Desecador
- Horno mufla
- Baño María
c. Reactivo
- Agua destilada
- Solución de peróxido de hidrógeno concentrado
- Ácido nítrico o solución de nitrato de amonio al 10 % m/v
- Cloruro de metileno
- NaSO4 anhidro
- Agua peptonada
- Hipoclorito de sodio a 10 ppm,
- Acetona al 99,5%
- Cloruro de sodio
- Éter dietílico
- Alcohol 96%
- Reactivo de Sudan
- Reactivo de Mayer
- Reactivo de Wagner
38
- Reactivo de Liberman
- Reactivo de Kedde
- Reactivo de Fehling A
- Reactivo de Fehling B
- Tricloruro férrico al 5%
- Ácido clorhídrico al 1%
- Ácido clorhídrico concentrado
- Anhídrido acético
- Ácido sulfúrico concentrado
- Alcohol amílico
- Hidróxido de sodio al 5 %
- Cinta de magnesio metálica
- Agar PCA
- Agar Maconkey
- Carboximetil celulosa
- Ácido cítrico al 5%
d. Muestra
Muestra vegetal
Cálculos:
Dónde:
H= Porcentaje de Humedad
40
M1= masa de la pesa filtro con la muestra desecada (g).
Cálculos
41
- Almacenar las drogas secas en fundas de papel estériles, que se introducen
luego en recipientes herméticos para protegerlos de la luz.
Tamizaje fitoquímico
Marcha fitoquímica.
Extracción ácida:
Si la alícuota del extracto esta disuelta en un solvente orgánico este debe evaporarse
en baño de agua.
Se Agito y se filtró.
Resultados
(+): Opalescencia
Si la alícuota del extracto esta disuelta en un orgánico este debe evaporarse en baño
de agua.
Con la solución acuosa acida de realiza el ensayo añadiendo 3 gotas del reactivo de
dragendorff.
Resultados:
(+): Opalescencia
43
(++) Turbidez definida
(+++) Precipitado
c).Ensayo de Shinoda:
Resultados:
Positivo: Cuando el alcohol amílico se colorea (amarillo, naranja o rojo) intensos
d).Ensayo de Liberman-Buchard
Por la pared del tubo de ensayo se deja resbalar 2-3 gotas de ácido sulfúrico
concentrado sin agitar.
44
Resultados:
Resultados:
45
Resultados:
La prueba es positiva, cuando aparece una coloración o precipitado de color rojo (++)
y (+++) respectivamente.
Resultados:
Resultados:
46
i). Ensayo de Fehling
Resultados:
Resultados:
2.2. Resultados
47
Cuadro 1 Características macro morfológica de las hojas de la planta Zorrilla
Ensayo Resultado
Hojas Simples con filotaxia alterna
Forma del contorno Elíptica a Oblanceolada,
Ápice Apiculado
Textura Membranosa
Base Redondeada , peciolada
Margen o borde Ondulado , de 7 a 9 cm de largo,
2 a 6 cm de ancho
Inflorescencias Racimos delgados, 10–35 mm.
Flores Subsésiles o en cortos pedicelos
Sépalos Blanco-verduzcos
Condición Fresca
Fuente: Laboratorio Físico- químico UNIANDES.
Elaborado por: Cortez ,2016.
Cuadro 2 Características organolépticas de la planta Zorrilla.
Ensayo Resultado
Color Verde intenso
Olor Fuerte olor aliáceo.
Sabor Amargo
Fuente: Laboratorio Físico- químico UNIANDES.
Elaborado por: Cortez ,2015.
48
a). Características microscópicas
Tipo de venación de la hoja de, materia fresca. (1): vena primaria; (2): venación
cerrada; (3): venas secundarias; (4): venación reticulada.
En el corte transversal del mesófilo, se observa que la epidermis es una estratificada,
en ambas caras, aunque las células de la epidermis adaxial son más altas que las de
la epidermis abaxial y presentan irregularidad en su estructura (Imagen 3 y 4).
49
Imagen 3 Estructura microscópica del Corte transversal del mesófilo de la
hoja de la planta Zorrilla
Corte transversal del mesófilo de la hoja de. (1): Epidermis adaxial; (2): parénquima
lagunoso; (3): parénquima en empalizada; (4): tricomonas; Aumento: 40X.
50
Corte Transversal de la hoja de. Estructura de la hoja (1): células de epidermis
adaxial; (2): células irregulares del mesófilo en empalizada. (3): Azul de metileno.
Aumento: 40X
Reino: Plantae
Subreino: Tracheobionta
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Subclase: Caryophyllidae
Orden: Caryophyllales
Familia: Phytolaccaceae
Género: Petiveria
Especie: Alliacea
Fuente: Herbario Nacional del Ecuador
51
Tabla 1 Determinación de los parámetros físico-químicos de la planta Zorrilla
Los resultados expresados en la Tabla 1 nos indican que los valores obtenidos en
porcentaje de humedad y cenizas, son adecuados dentro de las USP # 28, por lo
que en porcentaje de humedad nos indica que las condiciones de almacenamiento
son idóneas para evitar crecimiento bacteriano y degradación de metabolitos de la
planta, además en el porcentaje de cenizas totales nos indica una buena recolección
de la muestra.
52
Cuadro 4 Análisis Fitoquímico (Extracto Etéreo) de las hojas de la planta Zorrilla
53
Cuadro 6 Análisis Fitoquímico (Extracto Acuoso) de las hojas de la planta Zorrilla
54
2.4. Conclusiones parciales del Capítulo II
55
CAPITULO III
3.1. Tema
3.2. Introducción
El Anamú es una planta originaria de la selva amazónica, pero que también crece en
áreas de América Central, el Caribe y África. Esta planta puede tener un olor similar
al ajo en sus raíces por lo que algunas personas le llaman hierba de ajo, tiene
efectos positivos sobre los niveles de glucosa en sangre, contribuyendo a disminuir
sus niveles, sin embargo, se debe emplear con precaución para este fin, ya que su
efecto no debe combinarse con el de fármacos para disminuir los niveles de glucosa
en sangre sin consultarlo con su médico previamente, la diabetes es una enfermedad
crónica que aparece cuando el páncreas no produce insulina suficiente o cuando el
organismo no utiliza eficazmente la insulina que produce.
3.3. Objetivos
Objetivo General
Objetivos específicos
57
3.4.2. Lugar de desarrollo y aplicación de la propuesta.
3.4.4.1.2. Procedimiento
Una vez obtenida el extracto de la planta Zorrilla (Petiveria alliacea), previamente
dosificada, procedemos a elaborar el jarabe de la siguiente manera:
58
3.4.4.1.3. Control de calidad del jarabe
b).Densidad
Expresión de resultados:
c).pH
59
3.4.4.1.4. Análisis microbiológico
b).Mohos y levaduras
60
- Pipetear 1.0 mL de cada dilución por duplicado, y colocarlo en placas de petri
estériles debidamente identificadas con el número de muestra, fecha y
dilución.
- Adicionar, prontamente, a cada una de las placas 15 – 20 mL de agar papa
dextrosa acidificado con ácido tartárico al 10%, que ha sido previamente
fundido y llevado a 450C.
- Mezclar la muestra con el agar rotando las placas suavemente en forma de
ocho.
- Invertir las placas e incubar a 25ºC durante 7 días.
- Contar las colonias que han crecido en cada placa y expresar el resultado
como Unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/mL).
61
3.4.5. Resultados
Determinación de color, aroma y sabor del jarabe, como se muestra en las tabla 2.
62
Tabla 2 Resultado de evaluación sensorial: Atributo del color, aroma, sabor del jarabe
Con estos resultados del análisis sensorial (color, aroma y sabor), se concluyó que la
muestra 2 se considera aceptable en comparación de la muestra 1 , debido a que la
muestra 2 contiene Carboximetil celulosa, lo que se considera como un agente
espesante para esto ayudar a llegar a un punto de jarabe con ayuda de las hojas de
Stevia, debido a que este jarabe se lo utilizará como hipoglucemiante natural por sus
componentes y principalmente por el extracto de la planta ya que contiene principios
activos, los mismos que tienen actividad hipoglucemiante, como se observa en la
tabla 8.
63
Tabla 3 Características organolépticas del jarabe a partir del extracto de hojas de
planta Zorrilla
Parámetro Resultado
Color Verde claro
Olor Suave
Sabor Dulce (Naranja).
64
3.4.5.2. . Resultados del Análisis microbiológico
Tabla 5 Control microbiológico del jarabe a base del extracto de las hojas de la planta
Zorrilla
- Hojas volantes
- Etiqueta del jarabe
65
3.6 Beneficios que ofrece la propuesta
66
3.8. Conclusión parcial del Capítulo III
Se elaboró un jarabe natural a partir del extracto de las hojas de la planta Zorrilla,
con efectos hipoglucemiantes para disminuir los niveles de glucosa (azúcar) en
sangre mejorando así la calidad de vida de los pacientes con diabetes.
Se fabricó un jarabe natural a base del extracto de las hojas de la planta Zorrilla la
misma que mejorará la calidad de vida de las personas con altos niveles de glucosa
en sangre mediante la elaboración del jarabe debido a que este contienes efectos
hipoglucemiantes lo que hace que disminuya la glucosa en sangre ayudando así a
las personas a tener una mejor calidad de vida.
67
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Conclusiones
68
Recomendaciones
Seguir con el estudio de esta planta porque contiene otros compuestos que le
otorgan propiedades farmacológicas.
Realizar estudios de toxicidad de la planta.
Valorar el conocimiento ancestral de la planta Zorrilla, ya que facilita mucho su
estudio, y posterior utilización como fitomedicamento.
Realizar la valoración de la forma farmacéutica en animales de
experimentación.
69
Bibliografía
CASTRO, C., Villa, N., Ramirez, S., & Mosso, C. (Lunes 8 de Julio de
2013). Uso medicinal de plantas antidiabéticas en el legado etnobotánico
oaxaqueño. Recuperado el Miercoles 18 de Noviembre de 2015, de Uso
medicinal de plantas antidiabéticas en el legado etnobotánico oaxaqueño:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-
47962014000100012
“UNIANDES”
BIOQUÍMICA FARMACÉUTICA
TEMA:
AMBATO-ECUADOR
2015
1.- ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN
Abad J. Cabezas D. (2014), en su trabajo realizado “El estudió de la actividad
antioxidante y antimicrobiana del aceite esencial de las hojas de (Peper pubinervulum
C.DC) proveniente de Macas Ecuador”, manifiesta que la actividad antioxidante del
aceite esencial de las hojas de (Piper pubinervulum) proveniente de Macas,
Ecuador. Utilizó los métodos de inhibición del radical libre DPPH y ABTS se
obtuvo un IC50 igual a 20,399 µg / y 0,416 µg / mL respectivamente, que al
compararlos con los IC50 del aceite de (Thymus vulgaris) con 0,414 µg / mL y
0,231 µg / mL, demuestra una actividad antioxidante menor del aceite en estudio.
Además realizaron el método de foto quimioluminiscencia con una capacidad
antioxidante de 1,8 μmol Trolox / g.
También se determinó la actividad antimicrobiana por el método de difusión en
agar con discos. Entre las bacterias ensayadas,(Escherichia coli) ATCC 8739 y
(Staphylococcus Aureus sub sp. Aureus)ATCC 6538P fueron las más susceptibles
al presentar una MIC de 6,08 y 3,09 mg / mL respectivamente y entre las
levaduras ensayadas, (Candida albicans) ATCC 10231 fue la más susceptible al
presentar una MIC de 0,3909 mg / mL.
Mediante el método de TLC – DPPH y autobiográfico determinó que las sustancias
que poseen actividad antioxidante y antimicrobiana que al compararlos con la
investigación de Coronel y Piedra (2014) de la que se adoptó la metodología de
las placas TLC, concluyeron que los compuestos son: Elemicin, nerolidol, gamma-
assaron, assarone e, dimethoxy 5 vinyl 1,2 benzodioxide 4-6, bisabolol,
geranyllinalool, Isoeugenolmetil éter, Beta-Caryophyllene, alpha-Humulene, (+)-
beta-Selinene y Bicyclogermacrene.
ANTECEDENTES LEGALES
Es una hierba perenne de tallo recto, poco ramificado de 0,5 a 1 m de alto, con
hojas alternas de forma elíptica y de 6 a 19 cm de largo. Sus flores son pequeñas
de color blanco y el fruto es una baya cuneiforme que presenta cuatro ganchos
doblados hacia abajo (Ferrer 2010).
La planta se ha utilizado desde los tiempos remotos con fines medicinales y ritos
mágicos religiosos. Actualmente, se utiliza como medicamento herbolario para
diferentes enfermedades y se comercializa por varias firmas como suplemento
nutricional o como inmunomodulador.
Esta planta ha motivado mucho interés en países fuera del área amazónica debido
principalmente a sus posibles efectos antitumorales (Ruffa 2010).
El presente trabajo de investigación, establecerá la relación que existe entre las
aplicaciones tradicionales la planta zorrilla y sus principios activos mediante
ensayos experimentales y clínicos en la planta y también la forma farmacéutica.
2.-SITUACIÓN PROBLÈMICA
3.-PROBLEMA CIENTÍFICO
¿Cómo ayuda los principios activos de planta zorrilla, a bajar los niveles de
glucosa en sangre?
4.-OBJETIVO DE LA INVESTIGACIÓN Y CAMPO DE ACCIÓN
4.1.-OBJETIVO DE LA INVESTIGACIÓN
- Fitomedicamentos
4.2.-CAMPO DE ACCIÓN
- Farmacognosia
- Tecnología Farmacéutica
- Fitofarmacia
5.-OBJETIVOS
5.1.-Objetivo General
- Elaborar una forma farmacéutica a partir del extracto de las hojas de la
planta zorrilla, que disminuya niveles de glucosa en sangre.
5.2.-Objetivos Específicos
- Identificar taxonómicamente la planta zorrilla.
- Determinar cualitativamente los principios activos que posee la planta
zorrilla.
- Comprobar la acción de la forma farmacéutica elaborada a base del
extracto de las hojas de la planta zorrilla sea efectiva para la diabetes.
6.-IDEA A DEFENDER
La forma farmacéutica a base del extracto de las hojas de la planta zorrilla es
efectiva para disminuir los niveles de glucosa en sangre.
7.-VARIABLES DE LA INVESTIGACIÒN
7.1.-Variable Dependiente
- Niveles de glucosa en sangre.
7.2.-Variable Independiente
- Forma farmacéutica.
8.-METODOLOGÌA A EMPLEAR
a) Modalidad
- Cualitativa: porque se determinará las características botánicas,
organolépticas, micro morfológico e histológico y sus principios activos.
- Cuantitativa: se realizará los análisis físicos, químicos y microbiológicos y se
comprobará la eficacia de la forma farmacéutica.
POBLACIÓN Y MUESTRA
- Para la extracción de los principios activos las plantas se recolectan en el
Centro Cultural UNI-SHU de la Comuna Chiguilpe de Santo Domingo de los
Tsáchilas.
9.-NOVEDAD CIENTÌFICA
10.-APORTE TEÓRICO
Para la presente investigación integrara los conceptos:
- A NIVEL TEÓRICO
Fortalecer los conocimientos de una forma farmacéutica a partir del extracto de
hojas de la planta zorrilla la misma que posee propiedades curativas para
disminuir los niveles de glucosa en sangre lo que servirá de sustento para crear
nuevas hipótesis para futuras investigaciones.
- A NIVEL CIENTÍFICO
Comprobar los principios activos de la planta zorrilla mediante tamizaje fitoquímico
basado en reacciones de coloración y precipitación y su posterior elaboración de
una forma farmacéutica para la diabetes.
11.-ESQUEMA DE CONTENIDOS
- Fitomedicamento
-Farmacognosia
- Principios activos
-Tecnología Farmacéutica
- Densidad
- pH
-Forma farmacéutica
- DIABETES.
- Causas.
- Sintomas.
- Prevencion.
- PLANTA ZORRILLA.
- Origen y distribucion.
- Caracteristicas botanicas.
- Caracteristicas organolépticas.
- Composición quimica.
- Propiedades terapeuticas.
- Analisis estructural.
- CONTROL DE CALIDAD DE LA PLANTA
- Contenido de humedad.
- Cenizas.
- EXTRACTO VEGETAL
- Metodos de extraccion.
Maceración.
- Obtencion del extracto.
- Principios activos.
- TAMIZAJE FITOQUÍMICO DEL EXTRACTO DE LA PLANTA
- Ensayo de Drangendorff, Mayer o Wagner (Alcaloides).
- Ensayo de Shinoda (Flavonoides).
- Ensayo de Liberman-Buchard (Triterpenos y/o Esteroides).
- Ensayo de Borntrager (Quinonas).
- Ensayo de Baljet (Cumarinas).
- Ensayo de espuma (Saponinas).
- Ensayo de Cloruro Férrico.
- Ensayo de Fehling (Azúcares reductores).
- Ensayo de Mucilagos.
- FORMA FARMACÉUTICA
- Elaboración de la forma farmacéutica.
- ANALISIS MICROBIOLÓGICO
12.-SIGNIFICANCIA PRÀCTICA
El presente trabajo es de gran importancia debido a que servirá para futuras
investigaciones y creación de nuevas formas farmacéuticas.
13.-BIBLIOGRAFÍA
- ABAD J. Cabezas D.2014. Estudió de la actividad antioxidante y
antimicrobiana del aceite esencial de las hojas de (Peper pubinervulum
C.DC) proveniente de Macas Ecuador. Disponible
en:http://www.dspace.ups.edu.ec/bitstream/123456789/6631/1/UPS-
QT04523.pdf.
- CASTRO C, VILLA N, RAMÍREZ S, MOSSO CL, 2014 Uso medicinal de
plantas antidiabéticas en el legado etnobotánica oaxaqueño. Disponible
en:http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-
47962014000100012
- DELGADO B. 2011.Propiedades entomotóxicas de los extractos vegetales
de azadirachta indica,( Piper auritum y Petiveria alliacea) para el control de
(Spodoptera exigua)Disponible
en:http://www.google.com.ec/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1
&cad=rja&uact=8&ved=0CBsQFjAAahUKEwiCruHZ34rIAhXFth4KHaQkB9U
&url=http%3A%2F%2Fportal.chapingo.mx%2Frevistas%2Fphpscript%2Fdo
wnload.php%3Ffile%3Dcompleto%26id%3DMjA3Ng%3D%3D&usg=AFQjC
NHOpPxaSYYEfp9v4K6ym6FsvKRLjw&bvm=bv.103073922,d.dmo.
- FERRER J. 2010.Principales referencias entomológicas sobre el anamú,
Revista CENIC Ciencias Biológicas, Vol. 38, No. 1, Ciudad de La Habana,
Cuba.
- OMS, 2014 Diabetes Disponible
en:http://www.who.int/features/factfiles/diabetes/facts/es/index8.html.
RECOLECCIÒN DE LA MUESTRA
Centro cultural UNI.- SHU Muestra de la planta
Recolección de datos
IDENTIFICACIÓNTAXONÓMICA DE LA PLANTA
Herbario Nacional del Ecuador Secado de la muestra
Anexo B 3Tamizaje fitoquímico de la planta Zorrilla
Control microbiologico