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E + S ↔ ES ↔ E + P
Se pueden resumir en los siguientes puntos:
•Sustrato (contenido en el medio de cultivo)
•Enzima o vía metabólica (secretada o en el interior del
microorganismo)
•Producto
•Revelador y/o indicador (aunque algunas no los emplean)
Agar Almidón
Sustrato: Almidón (polímero de glucosa).
Enzima: Amilasa (exoenzima).
Producto: Glucosa.
Revelador: Lugol.
El lugol con el almidón forman un complejo color café-púrpura
que desaparece cuando el almidón ha sido degradado.
Degradación de la caseína
Gelatina Nutritiva
Sustrato: Gelatina (proteína).
Enzima: Gelatinasa (Proteasa,
exoenzima).
Producto: Aminoácidos.
Revelador: No requiere o puede
emplearse el carbón activado en
polvo.
Prueba negativa Prueba positiva
La oxidación de la glucosa
produce ácido pirúvico por una
vía de derivación (Shunt), ocurre
en condiciones aerobias y no
requiere de fosforilación inicial.
•Interpretación:
Tubo C 1 2 3 4 4A 5
Fermentación de Glucosa - - + + + + +
Producción de gas de la - - - + + + +
fermentación
Fermentación de Lactosa - - - - + + +
Producción de H2S - - - + - - +
Medio SIM
(Sulfhídrico Indol Movilidad)
Medio SIM (medio semisólido)
Sustratos: Tiosulfato o grupos –SH de la cisteína y triptófano.
Enzimas: Tiosulfato reductasa, cisteína desulfurilasa y tiptofanasa.
Producto: H2S e Indol.
Revelador: Sales de Fe2+ y p-Dimetilaminobenzaldehído (DMABA).
Caldo nitratos
Sustrato: Nitrato de sodio.
Enzima: Nitrato reductasa.
Producto: Nitritos.
Revelador: Reactivos de Griess.
•Nitrato reductasa (NAR).
•Nitrito reductasa (NIR).
- -
N03 → NO2 → NO → N2O → N2
•NO reductasa (NOR).
•N2O reductasa (N2OR).
Reducción de Nitratos
N
El nitrito reacciona NH2 N
con dos reactivos:
ácido sulfanílico y + HNO2 + H2 O +
dimetil-a-naftilamina Acido nitroso
(o a-naftilamina). La SO3H SO3H NH2
α-naftilamina
reacción de color Acido sulfanílico
(incoloro)
Acido sulfanílico diazotizado
(sal de diazonio) (incolora)
se debe a la
formación de un
N N
compuesto Acoplamiento
+ H2 O
diazonio, p-
sulfobenceno-azo- SO3H NH2
α-naftilamina. p-sulfobenceno-azo-α-naftilamina
(colorante rojo azo hidrosoluble)
Plasma de conejo
Sustrato: Factores de la coagulación.
Enzima: Coagulasa
(estafilocoagulasa).
Producto: Coagulo.
Revelador: No requiere.