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Se desarrolla de manera adecuada en bilis, por lo que se utilizan medios inclinados con
agar bilis esculina. Esta prueba consiste en determinar la capacidad que tiene Listeria
monocytogenes de hidrolizar la esculina a esculetina y la glucosa en presencia de sales
biliares. La esculetina generada reacciona con los iones de hierro que contiene el cloruro
férrico en el medio y genera una coloración negra, siendo esta positiva.
Crece con facilidad en medios enriquecidos con sangre de cordero, tras 18 a 24 horas
de incubación en aerobiosis.
Las colonias son pequeñas, blanco grisáceas y presentan hemólisis que excede
escasamente el borde de la colonia; puede ser confundida con Streptococcus agalactiae