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Lima, Perú
2018
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIE RIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
ÍNDICE
I. RESUMEN ……………………………………………………………………3
II. INTRODUCCIÓN …………………………………………………………….3
III. OBJETIVOS ………………………………………………………………….4
IV. MARCO TEÓRICO ………………………………………………………….4
V. RESULTADOS ………………………………………………………………15
VI. DISCUSION DE RESULTADOS …………………………………………..16
VII. CONCLUSIONES: …………………………………………………………..16
VIII. RECOMENDACIONES: …………………………………………………….17
IX. CUESTIONARIO …………………………………………………………….17
X. FUENTES DE INFORMACIÓN …………………………………………….18
XI. ANEXOS ……………………………………………………………………...19
XII. APENDICE …………………………………………………………………...20
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Facultad de Ingeniería Ambiental
I. RESUMEN
El microscopio es un instrumento óptico que amplifica la imagen de un objeto
pequeño, siendo el instrumento más utilizado en los laboratorios donde se
estudian microorganismos. Un microscopio es un dispositivo encargado de hacer
visibles objetos muy pequeños. Un microscopio es un dispositivo encargado de
hacer visibles objetos muy pequeños. El microscopio compuesto consta de dos
lentes (o sistemas de lentes) llamados objetivo y ocular. El objetivo es un
sistema de focal pequeña que forma una imagen real e invertida del objeto
(situado cerca de su foco) próxima al foco del ocular. Éste se encarga de formar
una imagen virtual de la anterior ampliada y situada en un punto en el que el ojo
tenga fácil acomodación (a 25cm o más). Dada la reducida dimensión del objeto,
se hace imperioso el recolectar la mayor cantidad de luz del mismo, utilizando
sistemas de concentración de la energía luminosa sobre el objeto y diseñando
sistemas que aprovechen al máximo la luz procedente del objeto.
Gracias al microscopio se han descubierto bacterias y microorganismos, que a
simple vista no se hubieran detectado.
II. INTRODUCCIÓN
El estudio microscópico de los organismos proporciona datos fundamentales
para su identificación, como forma, tamaño, reacción a diferentes colorantes y
estructuras celulares; orienta al microbiólogo.
Cuando trata de aislar microorganismos y permite establecer características
como pureza, presencia de contaminantes, variedad o edad de una población
entre otras cosas. Por ello es tan importante saber utilizar este instrumento
y desde luego, cuidarlo adecuadamente. Para ello, en esta práctica se incluye la
descripción de los componentes de un microscopio compuesto y las funciones
de cada uno de ellos; asimismo. Se describen las características de las lentes
amplificadoras y las condiciones en las que se puede utilizar cada objetivo, así
como los pasos que se deben seguir para establecer una iluminación adecuada,
el enfoque correcto y la forma precisa de manejar el microscopio. Los
microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formación
de imágenes ópticas aumentadas a través de lentes convergentes, permiten
la observación de pequeños detalles de una muestra dada que a simple vista no
se percibirían.
En el presente laboratorio se utilizará el microscopio para observar las células de
las siguientes muestras:
Xenopsylla Cheopis (La pulga de la rata oriental)
Pulex Irritans (La pulga común)
Cebolla
Hilo
Trichoderma
Balantidium coli
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III. OBJETIVOS
Identificar las partes del microscopio y comprender sus
características y la visión con él.
Iluminar correctamente el microscopio óptico de campo claro,
enfocar adecuadamente el microscopio en todos sus
aumentos.
Manejar el microscopio correctamente.
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Microscopio moderno: produce una imagen aumentada e invertida.
Fundamentos:
Cuando se acerca un observador a un objeto, crece el ángulo visual y ese objeto
parece ser mayor. Sin embargo, por debajo de una determinada distancia (unos
25 cm) entre el ojo y el objeto, éste no se ve con claridad. Este límite se debe a
la capacidad máxima de deformación del cristalino. Si se sitúa entre le ojo y el
objeto un sistema óptico capaz de aumentar el ángulo visual, se podrá ver el
objeto con mayor amplitud y claridad.
Ese sistema óptico es el MICROSCOPIO. Produce una imagen aumentada de
un objeto no visible de forma que sea perceptible por el ojo humano. Se
consigue mediante el uso de lentes u otros sistemas.
Esta ampliación de la imagen se puede conseguir de dos formas:
Ondas luminosas: microscopio Óptico
Haz de electrones (é): microscopio Electrónico
Términos que describen las características ópticas del microscopio
Aumento: Es la magnificación total que sufre la imagen del objeto debido al
efecto de los lentes oculares y objetivos. Se obtiene multiplicando el número de
veces que aumenta el lente ocular por el número de veces que aumenta el lente
objetivo. Si el objetivo aumenta la imagen de un objeto 40 veces, ésta al pasar
por la lente ocular será nuevamente aumentada.
Si el ocular aumenta 10 veces, la magnificación total en este caso será:
(10X) x(40X) = 400X.
Este resultado permite saber cuántas veces más grande estamos viendo la
imagen de un objeto.
Contraste: diferencia en la absorción de luz entre el objeto estudiado y el medio
que lo rodea. Puede aumentarse mediante procedimientos de tinción.
Poder de resolución: capacidad de mostrar distintos y separados dos puntos
muy cercanos. Determina la máxima amplificación útil del microscopio. Depende
de la longitud de onda (L) y de la apertura numérica (AN): cuanto menor es L y/o
mayor la AN, mayor es la resolución. La resolución máxima de un microscopio
óptico es de 200 nm. La distancia límite en la cual dos puntos pueden ser
todavía distinguibles se denomina Límite de Resolución.
d = (0,5 x L) / AN
Apertura numérica: capacidad de la lente para juntar los rayos de luz
proyectados hacia ella. Determina la eficacia del condensador y del objetivo. La
AN depende del índice de refracción del medio que hay entre la muestra y la
lente (IR), y del seno de la mitad del ángulo del cono de luz que penetra en la
lente (sen α).
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AN = IR x senα
Si se rellena el espacio existente entre la muestra y el objetivo no con aire, sino
con una sustancia de mayor IR (ejemplo, aceite), se consigue que la mayor parte
de los rayos perdidos por los fenómenos ópticos ocasionados en el condensador
y en el portaobjetos, se refracten y penetren en el objetivo, con lo que se
incrementa la resolución del microscopio.
Profundidad de campo: espesor de la preparación enfocada en cualquier
momento. Será mayor cuanto menor sea el aumento.
Área del campo: es el diámetro de la parte de la preparación que se está
viendo. Será mayor cuando menor sea el aumento.
Distancia de trabajo: Es la distancia que existe entre el objeto en observación y
el lente objetivo. Esta distancia variará según el aumento de la lente objetivo con
la cual se trabaje. Es inversamente proporcional al grado de aumento; es decir,
cuanto mayor sea el aumento del lente objetivo menor será la distancia de
trabajo. Cuando se trabaje con un lente de inmersión la distancia de trabajo será
mínima. En estos casos es necesario usar aceite de inmersión entre el lente
objetivo y la preparación debido a que el índice de refracción para este tipo de
lente es la del aceite y no la del aire. Esto permite obtener una imagen de gran
tamaño y al mismo tiempo de gran nitidez.
SISTEMA MECÁNICO:
Dentro del sistema mecánico se incluyen todos los elementos estructurales
que dan estabilidad al microscopio y mantienen los elementos ópticos
correctamente alineados.
Base o pie: Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del
microscopio y sobre la cual se montan el resto de elementos. Acostumbra
a ser la parte más pesante para proporcionar suficiente equilibrio y
estabilidad al microscopio. Es habitual que incluya algunos topes de
goma para evitar que el microscopio se deslice sobre la superficie donde
se encuentra.
Brazo: El brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza
intermedia del microscopio que conecta todas sus partes. Principalmente
conecta la superficie donde se coloca la muestra con el ocular por donde
ésta se puede observar. Tanto las lentes del objetivo como del ocular se
encuentran también conectadas al brazo del telescopio.
Platina: Esta es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere
observar. Su posición vertical con respecto a las lentes del objetivo se
puede regular mediante dos tornillos para generar una imagen enfocada.
La platina tiene un agujero en el centro a través del cual se ilumina la
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muestra. Generalmente hay dos pinzas unidas a la platina que permiten
mantener la muestra en posición fija.
Pinzas: Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una
vez esta se ha colocado sobre la platina.
Tornillo macrométrico: Este tornillo permite ajustar la posición vertical
de la muestra respecto el objetivo de forma rápida. Se utiliza para obtener
un primer enfoque que es ajustado posteriormente mediante el tornillo
micrométrico
Tornillo micrométrico: El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir
un enfoque más preciso de la muestra. Mediante este tornillo se ajusta de
forma lenta y con gran precisión el desplazamiento vertical de la platina.
Revólver: El revólver es una pieza giratoria donde se montan los
objetivos. Cada objetivo tiene proporciona un aumento distinto, el revólver
permite seleccionar el más adecuado a cada aplicación. Habitualmente el
revólver permite escoger entre tres o cuatro objetivos distintos.
Tubo: El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio que
conecta el ocular con los objetivos. Es un elemento esencial para
mantener una correcta alineación entre los elementos ópticos.
SISTEMA OPTICO:
Comprende los lentes oculares, los lentes objetivos y los dispositivos de
iluminación.
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ajustar la distancia interpupilar. En general los mas utilizados son los de
10X (producen un aumento de 10 veces ).
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7 Una vez enfocada la imagen girar el tornillo hasta que sea nítida. Nunca se
debe usar el tornillo micrométrico para grandes desplazamientos, para ello
está el tornillo macrométrico.
8 Cuando los tornillos macro y micrométrico se encuentren incorporados en un
solo dispositivo, el ajuste fino se hace solo después de haber realizado el
avance rápido de acercamiento a la preparación.
9 Antes de pasar al siguiente aumento verificar que la imagen a observar se
encuentre en el centro del campo, hacer girar el revolver cambiando el lente
objetivo hasta llegar al "tope" y accionar solamente el tornillo micrométrico
hasta obtener la nueva imagen.
10 Para observar una muestra con el objetivo de inmersión, se coloca una gota
de aceite de cedro encima de la lámina de la preparación antes de girar el
revolver. Esto permite que la imagen se vea con nitidez para realizar la
observación ya que este tipo de lentes requiere que el índice de refracción
sea similar al del vidrio.
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11 Terminada la observación, girar el revólver para colocar el objetivo de menor
aumento en la primera posición de trabajo.
MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES
3 Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas
muy suavemente con un papel lente.
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abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en
exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
6 No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico,
micrométrico, platina, revólver y condensador).
1. Microscópica
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notablemente mayor que el otro, de tal manera que se observan como
bastoncitos de diferente ancho y longitud.
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d) Bacilos miceliares. Entre las bacterias, existen algunas capaces de
desarrollar en un comienzo un micelio rudimentario, el que luego se
fragmenta, ejemplo: Streptomyces sp., etc.
2. Macroscópica
La morfología bacteriana macroscópica, se basa en las características de
crecimiento de las colonias en un medio de cultivo determinado.
d) En gelatina
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V. RESULTADOS
GRUPO 3
ocular 10x
ocular 10x
Filamentos rojos entrecruzados.
Pared de la oscura.
objetivos 10x 43x
20 filamentos.
Color rojo rosado.
aumentos 100x 430x
figura 6: hilo
ocular 10x
Reino protista
Color plomo claro
objetivos 10x 43x
Parásito(protozoo)
Anaerobio
Trichomonas hominis aumentos 100x 430x
ocular 10x
Coloración verdosa
Forma fina y alargada
Filamentos cilíndricos
objetivos 10x 43x
Alga Mougeotia
aumentos 100x 430x
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VI. DISCUSION DE RESULTADOS
VII. CONCLUSIONES
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VIII. RECOMENDACIONES
IX. CUESTIONARIO
1) Establezca la diferencia entre poder de resolución y abertura
numérica
La apertura numérica es un factor que determina el poder de resolución
La abertura numérica determina la luminosidad y el poder de resolución del
microscopio, también determina el rendimiento de una lente.
Por eso cuanto mayor sea la abertura numérica A y menor la longitud de onda λ,
mejor será el poder de resolución del microscopio.
Resulta evidente que el poder de resolución de un microscopio está restringido
por los valores limitados de la apertura numérica AN y la longitud de onda de la
luz visible.
2) completar la siguiente tabla:
ELEMENTO FUNCIÓN
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Apertura Numérica).
X. FUENTES DE INFORMACIÓN
8. microscopweb/MONOWEB/capitulo3_4.htm
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XI. ANEXOS
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XII. APENDICE
Diagrama de flujo
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