MEDIOS DE CULTIVO

Agar MacConkey (AMC)

Clasificación: selectivo y diferencial

Componentes:

-Peptona: nutriente

-Proteasa peptona: nutriente

-Rojo Neutro: indicador de PH

-Lactosa: carbohidrato

-Cloruro de Sodio: amortiguador

-Sales Biliares: inhibidor G+

-Cristal Violeta: inhibidor G+

-Agar: solidificante
Eosina Azul de Metileno (EMB)

Clasificacion: diferencial

Componentes

-Peptona: nutriente

-Lactosa: carbohidrato

-Sacarosa: carbohidrato

-Fosfato disodico: amortiguador

-Eosina: indicador

-Azul de Metileno: indicador

Xilosa Lisina Desoxicolato (XLD)

Clasificación: selectivo

Componentes

-Xilosa: carbohidrato

-Lisina: carbohidrato

-Lactosa: carbohidrato

-Sucrosa: carbohidrato

-NaCl: amortiguador

-Extracto de Levadura: extracto

-Rojo Fenol: indicador

-Desoxicolato de Na: amortiguador

-Tiosulfato de Na: inhibidor

Agar Hektoen (HK)

Clasificación: selectivo

Componentes

-Sales Biliares: inhibidor G+

-NaCl: amortiguador

-Tiosulfato de Na: fuente de azufre y

amortiguador

-Citrato Férrico de Amonio: indicador de

H₂S

-Azul de Bromotimol: indicador

Salmonella – Shigella (SS)

Clasificación: selectivo

Componentes

-Extracto de Buey: extracto

-Peptona: nutriente

-Lactosa: carbohidrato

-Sales Biliares: inhibidor G+

-Citrato de Na: inhibidor G+

-Tiosulfato de Na: amortiguador

-Citrato Férrico: indicador de H₂S

-Verde Brillante: inhibidor G+

-Rojo Neutro: indicador

Agar Tripticasa Soya (TSA)

Clasificación: nutritivo

Componentes

-Tripticasa: nutriente

-Peptona: nutriente

-NaCl: amortiguador
Tiosulfato, Citrato, Sales Biliares y Sacarosa (TCBS)

Clasificación: altamente selectivo

Componentes

-Sales Biliares: inhibidor

-Extracto de Levadura: extracto

-Proteasa Peptona: nutriente

-Citrato de Na: amortiguador

-Tiosulfato de Na: amortiguador

-Bilis de Buey y Colato: inhibidor de G+

-Sacarosa: carbohidrato
-Citrato Férrico: indicador de H₂S
-Azul de Timol: indicador
-Azul de Bromotimol: indicador
Agar Mueller – Hinton (MH)

Clasificación: nutritivo, se utiliza

universalmente para la realización del
antibiograma, PH: 7.4, grosor: 4mm

Componentes

-Infusión de Carne de Res: nutriente

-Peptona: nutriente

-Almidón: carbohidrato

M- H con 5% de sng achocolatada: Neisseria spp y Haemophylus spp

M-H con 5% de sng de carnero: Streptococcus pneumoniae

Cationes Bivalentes: Ca 20-25 mg/dl Mg 10-12.5 mg/dl timina escasa

Lowenstein – Jesen (L-J)

Clasificación: aislamiento especial, para

micobacterias

Componentes

-Huevo Coagulado: enriquecimiento

-Sales

-Glicerol

-Harina de Papa

-Verde de Malaquita: inhibidor de flora

acompañante

Disgonicas: superficie lisa, brillantes, bordes enteros

Eugonicas: superficie rugosa, amarillo cremoso, bordes irregulares,

semejantes a migas de pan.

Escala de MacFarland

Clasificación: se utiliza para llevar el inoculo hasta la

concentración patrón.

Componentes

-Cloruro de Bario: 0.048 M

-Acido Sulfúrico: 0.036 N

 Bioquímicas

TSI: agar tres azucares y hierro

Fundamento: sirve para saber si la bacteria fermenta

algunos o los 3 carbohidratos (gluc, lac, sacarosa)

Informaciones: Indicador: Rojo Fenol

-fermentación de los azucares

-producción de H₂S

-producción de gas

K/K: ausencia de fermentación de los carbohidratos

Ej.: Pseudomonas

A/A: fermentación de los 3 azucares, glucosa , lactosa y

sacarosa

Ej.: E. coli, Klebsiella, Enterobacter

K/A: solo fermenta uno de los azucares, glucosa,

ausencia de fermentación de lactosa y sacarosa.

Ej.: especies de Shigella

 K/A H₂S: fermentación de la glucosa, ausencia de
fermentación de lactosa y sacarosa, con producción de
ac. Sulfidrico.

Ej.: Salmonella y Proteus

Citrato

Fundamento:

Determina la capacidad de un m.o. para usar citrato de sodio como única

fuente de carbono para la producción de energía.

Indicador: Azul de Bromotimol

PH: 6.9

Ej.: Ej.:

-E coli -Klebsiella

-Shigella -Proteus

-Salmonella thypi -Salmonella

-Pseudomonas

Negativo Positivo
Urea

Fundamento:

Determina si la bacteria desdobla la urea atreves de la enzima ureasa

Indicador: Rojo Fenol PH: 6.8

Ej.: E.:

-E. coli -Klebsiella

-Salmonella -Proteus

-Shigella

Negativo Positivo

Rojo de Metilo y Voges - Proskauer

Fundamento RM:

Sirve para la identificación de especies de bac que producen ac fuerte a

partir de glucosa, ac láctico, acético y fórmico

Indicador: Rojo de Metilo PH: 4.4

Ej.:

-Pseudomonas -E. coli

-Proteus m. -Klebsiella

-Salmonella

Negativo Positivo

Fundamento de V-P: Pba indirecta para detectar la presencia o síntesis de

acetoina, a partir de un caldo glucosado.
Indol y Movilidad:

Fundamento de Indol:

Para observar si la bacteria degrada el triptófano a través de la enzima

triptofanasa produciendo indol, ac piruvico y amonio.

Rvo: Rvo de Erlich (P-dimetilaminobenzaldehido) o Kovac PH: 7.4 – 7.8

Ej.: Ej.:

-Pseudomonas -E. coli

-Salmonella -Klebsiella

-Proteus m. -Proteus v.

Negativo Positivo

Fundamento de Movilidad: para saber si la bac es o no móvil (Listeria

monocytogenes y Yersinia enterocolitica dan + entre 22 – 25°C).

Se observa la diferencia en la opacidad del

medio, si solo se limita a la estría es negativo

Negativo Positivo
  Escherichia coli

AMC HK XLD

EMB SS

---Bioquimica E. coli---

-A/A -Neg -Ptv -Neg -indol: Ptv

-Gas + -movilidad: Neg

-H₂S -
Klebsiella

AMC HK XLD

EMB SS

---Bioquímica de Klebsiella---

-A/A -Ptv -Ptv -Ptv -indol: Ptv

-Gas + -movilidad: Neg

- H₂S -
Salmonella

AMC HK XLD

EMB SS

---Bioquímica de Salmonella---

-K/A -Neg -Ptv -Ptv -indol: Neg

-Gas + -movilidad: Ptv

- H₂S +
Shigella

AMC HK XLD

EMB SS

---Bioquímica de Shigella---

-K/A -Neg -Ptv -Neg -indol: Ptv

-Gas - -movilidad: Neg

Pseudomonas

AMC HK XLD

EMB SS

---Bioquímica Pseudomonas---

-K/K -Neg -Neg -Ptv -indol:

-Gas - -movilidad:

-H₂S -
Proteus

AMC HK XLD

EMB SS

---Bioquímicas de Proteus---

P. mirabilis P. vulgaris

-K/A -Ptv -Neg -Ptv -indol: Neg -K/A -Ptv -Ptv -Ptv -indol: Ptv

-Gas+ -mov: Ptv -Gas+ -mov: Ptv

-H₂S+ -H₂S+
Antibiograma

Determinar in vitro a que antibiótico es susceptible o resistente una bac

aislada del pte.

Pba: Difusión en Agar

Técnica: Kirby-Bauer

Almacenamiento de atb: en refrigeración a 8°C o

en freezer a 14°C

Atb G+ Atb G-

-Penicilina -Amikacina

-Eritromicina -Gentamicina

-Vancomicina -Ampicilina

Vibrio cholerae

Determinar por medio de cultivo la presencia de V. cholerae o1, bac

causante del cólera.

Pbas:

Oxidasa: Ptv

Hilo mucoso: Ptv

V. vulnificus 85% col. Verdes y 15% amarillas

Colonias Amarilla Colonias Verdes

-V. cholerae -V. damsela

-V. fluviales -V. mimicus

-V. furnisii -V. parahaemolyticus

Hemocultivo

Sirve para detectar bacterias que se están reproduciendo en sangre lo que

provoca septicemia.

Caldos:

-Thiol

-CTS

-Infusión Cerebro Corazón

volúmenes:

neonatos: 1ml

1mes - 2años: 2 - 3 ml

Mayores de 2 años: 3 - 5 ml

Adolescentes y adultos: 5 - 10 ml

Signos Visibles:

Turbidez : Coagulo:

-Bacteroides spp -Staphylococcus aureus

Coloracion Verdosa: Mota de Algodón:

-Pseudomona aeruginosa -Staphylococcus spp

-Streptococcus spp

Hemolisis Form.Gas Form. Pelicula

-Streptococcus spp -Bacilos G- aerobio -Pseudomonas spp

-Staphylococcus spp -Anaerobios -levaduras