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Contenidos
Mecanismos de transporte a través de las membranas biológicas (transporte pasivo y
activo). Conceptos de ósmosis y tonicidad.
Fenómenos bioeléctricos: ecuación de Nernst, potencial electroquímico y equilibrio de
Gibbs-Donnan.
Potencial de membrana en reposo y potencial de acción
Cálculo de potenciales y flujos iónicos.
Objetivos
El alumno deberá ser capaz de:
Conocer y definir las características de los distintos tipos y subtipos de mecanismos de
transporte a través de las membranas biológicas.
Describir los mecanismos que subyacen la generación del potencial de membrana en
reposo y del potencial de acción
Diferenciar mediante la interpretación de experimentos simples los conceptos de osmo-
laridad y tonicidad.
Predecir el movimiento de un soluto a través de la membrana biológica, teniendo en
cuenta su carga eléctrica y la diferencia de concentración entre ambos lados.
Bibliografía
Fisiología Humana. Cingolani-Houssay. 2000 (7º edición)
Fisiología. Tresguerres. 2005 (3º edición)
Tratado de Fisiología Médica. Guyton- Hall. 2006 (11º edición) Elsevier España
Biología Celular y Molecular. Lodish-Darnell y col. 2006 (5º edición)
c) Supongamos ahora que la célula es sólo permeable al potasio y al sodio, pero diez veces
más al sodio:
- ¿Qué sucede con el potencial de membrana en reposo? Explique
- ¿Podría aproximar el valor del mismo?
- Indique lo que ocurre con los gradientes químico, eléctrico y electroquímico de estos iones
d) Explique qué significa que un ión esté en equilibrio electroquímico y explique la diferen-
cia de esta situación a la de estado estacionario.
e) Discuta el papel del ión cloruro en el potencial de membrana en reposo. Calcule el poten-
cial de equilibrio electroquímico de este ión.
d) Identifique las fases sucesivas que caracterizan a un potencial de acción típico uniendo
con flechas:
e) ¿Qué entiende por período refractario relativo y absoluto? Identifique qué fases del pun-
to d) corresponden a cada uno
Tiempo (mseg)
g) ¿Cómo se denomina la gráfica de este tipo de potencial de acción? ¿En las membranas de
qué tipo celular se desencadena?
h) ¿Existen otras gráficas que representen potenciales de acción? ¿En las membranas de qué
tipos celulares se desencadenan?
I II I II
K+ K+
Pr- Cl- K+ Pr-
K+ K+
-
Pr- Cl
K+
Cl- Pr- K+ Cl-
K+
Pr- Cl-
- + Pr-
Cl K
+ K+
K Cl-
Pr- K+
Pr- K+
Cl- K+
K+ K+
3- Teniendo en cuenta que el potencial de membrana en reposo para una célula muscular es
de –90 mV:
Parte Práctica
Para demostrar los conceptos recién analizados se realizará el siguiente experimento:
Con anterioridad, se obtuvo sangre con anticoagulante de una rata anestesiada. Por centrifu-
gación, se separó el plasma del paquete globular. Este último se resuspendió en solución
fisiológica y posteriormente se centrifugó y separó. Este procedimiento se realizó 2 veces
más. Se obtuvo entonces, un paquete de glóbulos rojos lavados.
PARTE A) En tres tubos de ensayo colocar 0,5 ml de estos glóbulos rojos. A uno de ellos
agregar 0,5 ml de solución de NaCl 0,9% (TUBO A); al segundo 0,5 ml de solución de
NaCl 0,6% (TUBO B) y al tercero el mismo volumen de solución de NaCl 1,2% (TUBO
C). A cada una de las suspensiones preparadas, determinar el valor de hematocrito mediante
centrifugación utilizando capilares heparinizados (microhematocrito):
TÉCNICA:
- Llenado
Al llenar los tubos capilares hay que tener en cuenta que el extremo opuesto al orificio de
llenado de estos permanezca seco. Para determinar el hematocrito se llenarán los tubos ca-
pilares hasta un 75 % aprox. de su capacidad.
- Cierre
Hay que cerrar el extremo seco de los tubos capilares con plastilina. Para ello, los tubos
capilares deben pincharse en la plastilina de manera vertical hasta que el borde de los tubos
capilares toque el fondo de la placa de plastilina. Incline ligeramente los tubos capilares
hacia un lado y sáquelos de la plastilina.
- Centrifugado
Colóquelos con el extremo cerrado hacia afuera en el rotor de hematocrito y ponga la tapa
del rotor. Centrifugue durante 10 minutos.
1) Defina hematocrito.
2) Indique a qué tubo pertenece cada microhematocrito realizado.
PARTE B) Se preparó una batería de tubos conteniendo cada uno 1 ml de las soluciones
indicadas en el siguiente cuadro y luego se les agregó dos gotas de glóbulos rojos. Luego de
analizar los resultados obtenidos y teniendo en cuenta la permeabilidad de la membrana a
los diferentes solutos utilizados, completar el cuadro, clasificando a cada una de las solu-
ciones según su osmolaridad y tonicidad y correlacione ambos conceptos con el efecto ob-
servado.
¿Qué ocurriría si luego del agregado de los glóbulos rojos se agrega 1 ml de NaCl 0.9 % al
Tubo 8?