Materia: Microbiología

Identificación de cocos Gram positivos del género Streptococcus y

Staphylococcus
1. Marco teórico
La tinción Gram se desarrolló por el doctor Chritian Gram en el año de 1884, esta técnica es la
cual permite agrupar las bacterias en Gram positivas y Gram negativas de acuerdo su capa de
péptidoglicano.
Gracias a la variedad de géneros de cocos Gram-positivos, catalasa negativos se realizó una
reorganización compleja de Estreptococos. En los géneros Streptococus, Enterococcus y
Lactococcus, no fueron aplicados, junto a otras cepas catalasas negativas para determinar su
relación con sus otros géneros.
Clasificación:
Las bacterias con su capa más gruesa de peptidoglicano y sin membrana externa son clasificadas
como Gram positivas, por su otra parte las bacterias con su capa de peptidoglicano más delgada y
con membrana externa son Gram negativas.
Dentro de la nueva edición del Manual de Bergey, los cocos Gram-positivos catalasa negativos de
origen humano se pueden clasificar en seis familias en el orden bacillales en la cual están los
“bacilos” en el filo “firmicutes”. El género Streptococcus, el cual contiene los patógenos humanos
más importantes se pude dividir operacionalmente en siete grupos.
La Tincion Gram es de importancia científica ya que con ella podemos identificar las propiedades
de la membrana de una bacteria.

2. Conclusiones y discusión
Se aprendió a realizar los medios de cultivo y pruebas de laboratorio aislando e identificar asi las
distintas especies de Streptococcus sp y Staphylococcus.
Se observó los distintos resultados de las muestras, con esto se pudo conocer mejor las propiedades
de cada una de las especies.
Se realizó Tincion Gram a cada una de las especies, así se pudo reconocer el procedimiento
adecuado para realizar esta prueba de laboratorio.
3. Preguntas:

1. Llena la información solicitada en el cuadro que se muestra a continuación.

MICROORGANISMO ENFERMEDAD QUE DONDE EN EL CUERPO

PUEDE CAUSAR HUMANO SE LO
CONSIDERA
MICROBIOTA NORMAL
Staphylococcus aureus  Infecciones cutáneas Se encuentra en narinas,

 Neumonía pliegues, axilas, vagina y

perineo.
 Endocarditis

 Osteomielitis

 Artritis séptica

Staphylococcus epidermis  Infecciones de cateter. Se encuentra en la piel de un

 Infección de implante de ser humano sano, cuando las
prótesis. defensas están bajas causan
 Infección de herida. enfermedades.

 Cistitis
 Septicemia
 Endocarditis
  Endoftalmitis

Staphylococcus saprophyticus  Infecciones tracto Este se encuentra en las

urinario y uretritis células epiteliales del tracto
urogenital

2. ¿A qué se conoce como Staphylococcus MRSA y cuál es su importancia

epidemiológica?
Staphylococcus aureus es un agente patógeno oportunista que con frecuencia se presente en el
cuerpo humano de forma asintomática. S. aureus resistente a meticilina (MRSA, por su sigla en
inglés) comprende a las cepas que han adquirido un gen que les otorga resistencia a meticilina y
esencialmente a todos los demás antibióticos betalactámicos. Estos organismos provocan el mismo
tipo de infecciones que otros S. aureus, las cepas asociadas a hospitales se han vuelto resistentes a
la mayoría de los antibióticos comunes y su tratamiento puede representar un desafío y este se
propaga por el contacto de piel con piel, una vez que entra a el cuerpo puede propagarse a los
huesos, articulación. (EMSRA, 2011)

3. ¿Cuál es el mecanismo de acción de la Novobiociona y por qué se lo usa para

diferenciar especies de Staphylococcus?
La novobiocina de sodio es un antibiótico antibacteriano que se emplea en infecciones donde otros
antibióticos son inefectivos o están contraindicados. Se presenta un estudio acelerado de
estabilidad y vida de estante por método de evaluación microbiológica, y la toxicología preclínica
de la novobiocina de sodio inyectable, se lo diferencia porque este se activa contra gérmenes Gram
positivos. (Velasco Rodríguez , García Rivero , Pulido, & Carmona, 1999)

4. ¿Cuál es la composición del agar Manitol salado? ¿Por qué se lo usa para diferenciar
especies de Staphylococcus aureus?

Su composicion es: 5.0 g/L enzima digestiva de caseína; 5.0 g/L enzima digestiva de tejido animal;
1.0 g/L extracto de carne de vaca; 10.0 g/L D-manitol; 75.0 g/L NaCl; 0.025 g/L rojo de fenol;
15.0 g/L agar; pH 7.4 ± 0.2 at 25 °C

Agar Manitol salado es un medio de cultivo que se utiliza normalmente en microbiología. Permite
el crecimiento de bacterias Gram-positivas mientras inhibe el crecimiento de Gram-negativas.
Este medio es importante en el laboratorio clínico debido a que es capaz de distinguir los
microorganismos patogénicos en un corto periodo de tiempo. Contiene una alta concentración
(~7.5%-10%) de sal (NaCl), haciéndolo selectivo para Staphylococcus (y 'Micrococcaceae)
debido su alta concentración de NaCl es inhibitorio para la mayoría de las bacterias Gram
negativas. Además contiene manitol otro inhibidor de bacterias Gram negativas y un indicador
de pH indicador de fermentación ; rojo de fenol. (INSTRUCCIONES DE USO , 2013)
 5. Llena la información solicitada en el cuadro que se muestra a continuación:

MICRORGA ENFERMEDAD QUE PUEDE CAUSAR LOCALIZACIÓN

NISMO EN EL CUERPO
HUMANO
STREPTOCO endocarditis y de abscesos dentales Cavidad bucal
CCUS
VIRIDANS
STREPTOCO la caries dental Cavidad bucal
CCUS
MUTANS
STREPTOCO Infección neonatal, aparato digestivo,
CCUS urinario y genital
AGALACTIAE
ENTEROCOC Puede causar endocarditis, infecciones tracto
CUS de vejiga, próstata, epidídimo; las infecciones de gastrointestinal
FAECALIS sistema nervioso son menos comunes

6. ¿Cómo funciona el agar bilis esculina para identificar Enterococcus sp.?

La Agar Bilis Esculina se usa preferentemente para diferenciar

entre Enterococcus y Streptococcus. Los miembros del género Enterococcus son capaces de
crecer en presencia de un 4% de bilis (oxgall) e hidrolizar la esculina para
formar glucosa y esculetina. La Esculetina se combina con iones de hierro formando finalmente
un complejo de color negro.

En algunos casos, ciertas bacterias son capaces de hidrolizar la esculina. Una placa que contenga
esculina aparecerá fluorescente bajo luz ultravioleta. Algunas bacterias pueden hidrolizarlo,
produciendo colonias oscuras bajo luz ultravioleta, al contrario que las claras.
Cuando se descubren nuevas técnicas en la identificación de enterococos, normalmente se
comparan con el uso de la bilis esculina. (Neogen Latinoamérica, s.f.)

7. ¿Cuál es la composición del agar sangre cordero? ¿Por qué se lo usa para la prueba
de CAMP?
Su composición es: Peptona de caseína (10 g); Peptona de carne (5 g); Extracto de levadura (3 g);
Extracto de corazón (3 g); Cloruro sódico (5 g); Almidón de maíz (1 g); Agar bacteriológico (15
g); Sangre de cordero (50 ml) Fórmula (en g/l) pH: 7.2 ± 0.2.
Esta prueba se realiza para la identificación presuntiva se detecta una proteína extracelular estable.

4. Bibliografía

 EMSRA. (2011). Staphylococcus aureus resistente a la meticilina.

 (2013). INSTRUCCIONES DE USO.
 Neogen Latinoamérica. (s.f.).
 Velasco Rodríguez, D., García Rivero, C., Pulido, C., & Carmona, C. (1999).
SINTEFARMA.
 Rodríguez Cavallini, E. (2005). Bacteriología general: principios y prácticas de
laboratorio. Editorial de la Universidad de Costa Rica.
 Winn, W. C., & Koneman, E. W. (2008). Koneman diagnostico microbiológico: texto y
atlas en color. Editorial Médica Panamericana.