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REMOCIÓN DE LOS COLIFORMES DEL EFLUENTE DE UN

REACTOR ANAEROBIO DE MANTO DE LODOS Y FLUJO
ASCENDENTE CON EL GENERADOR DE OZONO

Asignatura: Tratamiento de Aguas Residuales

Facultad de Ingeniería Ambiental

Universidad Nacional de Ingeniería

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Resumen

El presente trabajo de investigación buscó realizar el estudio de una nueva alternativa de tratamiento secundario
para aguas residuales domésticas. Las muestras fueron tomadas en el efluente del Reactor Anaerobio de Manto de
Lodos y Flujo Ascendente. Este es un sistema de tratamiento primario el cual se complementó eficientemente con
el tratamiento secundario propuesto, siendo así una alternativa a las lagunas de estabilización de CITRAR-UNI.

De las muestras evaluadas en el laboratorio de la FIA, se obtuvieron en promedio porcentajes de eficiencia

superiores al 99% en remoción de coliformes por el método del Número Más Probable. Comparado con otros
tratamientos secundarios como lagunas, o sistemas de esponjas, que se encuentran en CITRAR-UNI como
tratamiento secundario o investigaciones realizadas anteriormente

Entre sus principales ventajas del ozono es que no deja residuos en la sustancia a desinfectar, ya que, al ser muy
reactivo, rápidamente se descompone en oxígeno. No obstante, la desventaja del ozono es que, dada su
inestabilidad, es muy difícil almacenarlo, por lo que se tiene que producir justo en el lugar donde se aplica lo cual
resulta un método costoso.

Palabras Clave: Ozono, Coliformes, Método del Numero Mas Probable, Reactor Anaerobio, Lagunas de
Estabilización, Sistema de Esponjas.

Abstract
This research work sought to conduct the investigation of a secondary treatment choice for domestic wastewater.
The samples were taken from the outflow of the Upflow Anaerobic Sludge Blanket. This is a primary treatment system
which was efficiently complemented with the proposed secondary treatment, thus being an alternative to the
stabilization ponds of CITRAR-UNI.

Of the samples evaluated in the laboratory of the FIA, on average, percentages higher than 99% were obtained in
the elimination of coliforms by the Most Probable Number method. Compared with other secondary treatments such
as ponds, or sponge systems, which are in CITRAR-UNI as a secondary treatment or previous research.

Among its main advantages of ozone is that it leaves no residue in the substance to be disinfected, since being very
reactive, it quickly decomposes into oxygen. However, the disadvantage of ozone is that, due to its instability, it is
very difficult to store it, so it must be produced right where it is applied, which makes it an expensive method.

Keywords: Ozone, Coliforms, Most Probable Number Method, UASB, Stabilization Ponds, Sponge System.

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1
 INTRODUCCIÓN
La preocupación por la contaminación ambiental crece
en importancia día a día en nuestro país. Una de estas
preocupaciones es el tratamiento de las aguas
residuales.
La presente investigación se busca demostrar la
efectividad del ozono en la remoción de coliformes
fecales, y también otros parámetros como el Ph, la
temperatura y la desodorizacion.
Para lo cual se tomó muestras de agua residual a la
salida del RAFA, está se encuentra instalado en el
Centro de Investigación en Tratamiento de Aguas
Residuales y Residuos peligrosos – CITRAR – UNI,
donde cuentan con una planta piloto que recoge
diariamente las aguas servidas de los desagües
pertenecientes a los asentamientos humanos El Ángel
y El Milagro, del distrito de independencia del
departamento de Lima
Debido al elevado crecimiento poblacional en nuestro
país, provoca que las plantas de tratamiento de agua
residual, que en su mayoría utilizan procesos aerobios,
se vean como subdimensionadas, lo cual genera la
necesidad de implementar nuevas plantas de
tratamiento; sin embargo, cada vez hay una escasez de
grandes áreas de terreno donde proyectarlas
El uso del reactor anaerobio de manto de lodos y flujo
ascendente (conocido como RAMLFA o UASB) en el
tratamiento de aguas residuales domésticas es poco
utilizado en nuestro país. Esta tecnología de
tratamiento primario se ha desarrollado e implementado
en muchas plantas de tratamiento de aguas residuales
domésticas en países como Japón, India y Brasil;
obteniendo buenos resultados. Sin embargo, es aún
necesario mejorar la calidad de los efluentes
anaerobios.
Si bien en CITRAR el uso de lagunas facultativas
funciona correctamente como sistema de tratamiento
secundario de los efluentes del RAFA, se ocupa áreas
enormes y en algunas localidades no se dispone de
terrenos para este sistema; por ello en el presente
estudio de investigación se evalúa la eficiencia de una
nueva alternativa de tratamiento secundario que
complementa el proceso anaerobio y que permite una
mayor remoción de coliformes. Este método de emplear
como agente inhibidor el oxígeno enriquecido (O3), que
es la forma más activa del oxígeno que es capaz de
destruir virus, bacterias, parásitos, priones, hongos,
mohos, esporas y muchos otros contaminantes por
oxidación en pocos segundos.
En las lagunas facultativas de CITRAR según estudio
de Macneill M. Balboa y Nilsson Fustamante Fuentes
presentó un porcentaje de remoción promedio de
coliformes fecales del 98.80%.(pag.127). [3].
En el caso del sistema DHS (sistema de esponjas
colgantes con flujo vertical y descendiente) según
estudio de Amancio Castro y Castillo Vidal presentó una
eficiencia de remoción promedio de coliformes fecales
de 92.78%. (pág. 193) [4].
Nuestro objetivo es conocer la eficiencia de remoción
de coliformes por medio del ozono, y compararla con
otros tipos de tratamientos secundarios que se
realizaron antes en CITRAR.
La eficiencia de tratamiento de la laguna y el sistema
DHS para remoción de coliformes fecales, durante el
estudio, asegura una calidad del efluente suficiente
para el uso en acuicultura, pues cumplen con las
directrices de calidad del agua residual tratada,
establecidas por la Organización Mundial de la Salud
(OMS), pero no cumplen con los límites máximos
permisibles establecidos por la Ley General de Aguas.
Sin embargo, la calidad del efluente de la laguna no
cumplió con los requerimientos para su uso en el riego
de áreas agrícolas y zonas recreativas establecidos por
la OMS y por la Ley General de Aguas.
METODOLOGÍA
Para determinar la eficiencia de remoción de coliformes
fecales mediante la ozonización y hacer una
comparación con la remoción en un reactor anaerobio
de manto de lodos y flujo ascendente conocido como
UASB.
Para los cuales se tuvo que realizar ensayos de
laboratorio por una semana.
1.2 MATERIALES Y EQUIPOS
 Autoclave regulable
 Incubadora
 Baño termostatado
 Pipetas
 Recipientes para pipetas de acero inoxidable
 Tubos Durham
 Calentador eléctrico
 Balanza de precisión
 Tubos de ensayo con tapón rosca
 Gradillas
 Piceta
 Canastilla
 PH – metro
 Agitador magnético
 Equipo generador de Ozono
 Frasco de vidrio
 Otros materiales de uso habitual en laboratorio.
1.3. REACTIVOS Y SOLUCIONES
 Medio A – 1.
 Solución de cloruro sódico.
Para la determinación de la remoción de los coliformes
fecales por medio de ozono y hacer la comparación con
2
el método del NMP por tubos múltiples, se tuvo que
realizar los siguientes procedimientos.
1.4. PROCEDIMIENTO
1.4.1. MÉTODO DEL NMP
El método se basa en aislar el grupo coliforme fecal,
seleccionando los microorganismos por incubación del
inóculo a una temperatura de 44,5°C, utilizando la
técnica de tubos múltiples.
 Tómese una muestra del efluente de agua
residual a la salida del RAFA, en un frasco con
tapón de rosca de 100ml.
IMAGEN N 1°: Reactor UASB donde se tomó la muestra.
 Agítese bien el frasco de la muestra, y retírese
1 ml utilizando una pipeta esterilizada de 1 ml.
Transfiérase a un tubo de ensayo con tapón
rosca esterilizado que contenga 9 ml de
solución de ClNa.
 Agítese bien esta dilución a 1: 10 de la muestra
y, utilizando una sola pipeta de 1 ml acabada
de esterilizar, transfiérase 1 ml a cada uno de
cinco tubos de ensayo con tapón rosca
esterilizados, que contendrán cada uno un tubo
de Durham invertido y 10 ml de medio A-1
etiquétese cada tubo con un código para la
muestra, la fecha y 1: 1 0.
IMAGEN N 2°: Tubos de ensayo c/u. contiene un tubo
Durham invertido y 10 ml del medio A- 1.
 Pónganse los cinco tubos de ensayo a una
incubadora por 3 horas.
 Una vez retirada los tubos de la incubadora
llevarlos al baño termostatizado de tal forma
que el nivel del agua del baño sea superior al
nivel del medio en el tubo, dejarlo por 24 horas.
 Al cabo de 24 horas, examínese cada tubo de
ensayo para observar la producción de gas.
(Las bacterias coliformes fecales producen gas
a partir de la lactosa contenida en el medio A-
1, y parte de este gas queda encerrado en el
tubo de Durham invertido.) Cuéntese el número
de tubos positivos (es decir, aquellos en los que
ha habido producción de gas) y determínese el
NMP.
1.4.1. TRATAMIENTO CON OZONO
El equipo generador de ozono es un aparato eléctrico
al que se le ha adecuado una estructura de soporte, y
accesorios y el recipiente en donde se producirá la
inyección de aire ozonizado (reactor).
El ozono aire es inyectado al reactor produciendo
burbujas pequeñas a fin de facilitar el contacto con la
muestra y darle eficiencia al proceso, para lo cual
también se puso un agitador magnético donde se
pondrá el reactor (frasco de vidrio), el reactor contendrá
1 litro de muestra de desagüe de la salida del RAFA,
donde se inyectará ozono por un tiempo de 2 horas
IMAGEN N°3: Equipo generador de ozono ionizando
la muestra.
Luego de ionizada la muestra por el tiempo
mencionado, le lleva a laboratorio para realizar el
análisis microbiológico para determinar la remoción de
los coliformes fecales mediante el método NMP por
tubos múltiples descrita anteriormente.
3
 RESULTADOS
De acuerdo a la metodología mencionada se procedió
a realizar las pruebas en el laboratorio de tesis de la
Facultad de Ingeniería Ambiental.
Se obtuvieron los siguientes resultados:
Primera prueba
Luego de realizar el conteo se determinó el Numero
Mas Probable de acuerdo a la tabla del Anexo 1, dando
como resultado:
Agua a la salida del RAFA: 5x107 coliformes fecales por
100 ml de la muestra.
Agua luego del tratamiento: 7.5x104 coliformes fecales
por 100 ml de la muestra.

Agua a la salida del RAFA Tercera prueba

Dilución Formación de Gas
10-6 Si Si No No No Agua a la salida del RAFA
10-7 No Si Si No No Dilución Formación de Gas
10-8 No No No No No 10-6 Si No No No No
Tabla N° 1: Conteo del efluente del RAFA 10-7 Si Si No No No
10-8 No No No No No
pH: 7.39 Tabla N° 5: Conteo del efluente del RAFA
T°: 25.4°C
pH: 7.43
Agua luego del tratamiento T°: 24.6°C
Dilución Formación de Gas
10-2 Si No Si No Si Agua luego del tratamiento
10-3 No Si Si No Si Dilución Formación de Gas
10-4 No No No No No 10-2 Si No No Si No
Tabla N° 2: Conteo luego del tratamiento 10-3 No Si Si No Si
10-4 No No No No No
pH: 8.46 Tabla N° 6: Conteo luego del tratamiento
T°: 26.8°C
pH: 8.37
Luego de realizar el conteo se determino el Numero T°: 27.6°C
Mas Probable de acuerdo a la tabla del Anexo 1, dando
como resultado: Luego de realizar el conteo se determinó el Numero
Mas Probable de acuerdo a la tabla del Anexo 1, dando
Agua a la salida del RAFA: 7x107 coliformes fecales por como resultado:
100 ml de la muestra.
Agua a la salida del RAFA: 5x107 coliformes fecales por
4
Agua luego del tratamiento: 1.6x10 coliformes fecales 100 ml de la muestra.
por 100 ml de la muestra.
Agua luego del tratamiento: 1.1x104 coliformes fecales
Segunda prueba por 100 ml de la muestra.

Agua a la salida del RAFA Se nota que el valor de coliformes fecales luego del
Dilución Formación de Gas tratamiento se reduce en gran número luego del
10-6 Si No No Si No tratamiento en cada una de las pruebas, además, de la
10-7 No No No Si No elevación del pH.
10-8 No No No No No
Tabla N° 3: Conteo del efluente del RAFA Para cada una de las tres pruebas se tuvo un
rendimiento de:
pH: 7.26
T°: 25.4°C Dia N° Eficiencia (%)
1 99.977
Agua luego del tratamiento 2 99.850
Dilución Formación de Gas 3 99.978
10-2 Si Si Si Si Si Tabla N° 7: Eficiencia de las pruebas
10-3 No Si Si Si No
10-4 No No No No No Comparando con los valores que se obtienen en la
Tabla N° 4: Conteo luego del tratamiento laguna [3] el ozono presenta mayor remoción de
coliformes.
pH: 8.34
T°: 29.5°C

4
Si bien la eficiencia es bastante alta, lo principal a tener
en cuenta es llegar al LMP establecido para una PTAR
en caso la disposición final del efluente sea en un
cuerpo natural de agua (valor mencionado en el Anexo
2 - Decreto Supremo Nº 003-2010-MINAM).
En las 3 pruebas no se puedo reducir el número de
coliformes fecales hasta el LMP establecido, lo que
sugiere cambiar los parámetros de la prueba. Como
guía se puede obtener
CONCLUSIONES
Una dosis de 3 mg/hr de ozono y un tiempo de contacto
de 1 hora son efectivos en la remoción de coliformes,
ya que en cuanto a eficiencia es bastante alta,
alcanzando remociones mayores al 99%. Comparando
con los valores de las 2 tesis antes mencionadas el
ozono presenta mayor remoción.
El Numero Mas Probable, de acuerdo a las pruebas,
para el efluente del reactor anaerobio es en promedio
es de 5.67x107 coliformes fecales por 100 ml de
muestra.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFÍCAS
[1] Rachl M. Ayres y D. Duncan Mara, Manual de
técnicas parasitológicas y bacteriológicas de
laboratorio, 1997.
[2] Orta de Vrlásquez Ma. Teresa. Uso de ozono en el
tratamiento de aguas residuales para la remoción de
Vibrio cholerae, 2006.
[3] Macneill M. alboa Guerra y Nilsson Fustamante
Fuentes. Evaluación del comportamiento hidráulico de
la laguna terciaria de la planta de tratamiento de aguas
residuales de la uni-unitrar, mediante el uso de
trazadores radiactivos, 2003.
[4] Amacio Castro, Diana Lucia y Castillo Vidal, Harold
Steven, Estudio del sistema downflow Hanging Sponge
(DHS) tipo bloques primásticos en el tratamiento del
efluente d un reactor anaerobio de manto de lodos y
flujo ascendente, 2012
[5]Izquierdo Tito, López Heardy, Reducción de
coliformes totales en aguas residuales municipales de
la laguna de oxidación de Covicorti a través de la
inyección de ozono, 2006.

El Numero Mas Probable, de acuerdo a las pruebas,

para la muestra luego del tratamiento con ozono en
promedio es de 3.4x104 coliformes fecales por 100 ml
de muestra.

El número de coliformes luego del tratamiento no

alcanzo el Limite Máximo Permisible para efluentes de
una PTAR, establecido por el Decreto Supremo N° 003-
2010-MINAM, para alcanzar el LMP se deberá realizar
pruebas ya sea a mayor concentración de ozono o
mayor tiempo, tal que se llegue al valor establecido.

En caso se tenga como opción el tratamiento con

ozono, se tendrá que realizar pruebas para determinar
el tiempo de contacto y dosis optima para el tipo de
agua a tratar, tal como se realizó en la tesis: Reducción
de coliformes totales en aguas residuales municipales
de la laguna de oxidación de Covicorti a través de la
inyección de ozono, cuadro N°3.8 (pág. 40) [5].

Luego del tratamiento se produce un aumento del pH

en el agua.

AGRADECIMIENTOS

Agradecimiento al Laboratorio del agua de la Facultad

de Ingeniería Ambiental de la UNI por haber facilitado
sus instalaciones para poder realizar las pruebas, en
especial a la Señora Margarita (ayudante del laboratorio
de microbiología) por los materiales y la ayuda ofrecida
en el proceso.

5
 ANEXOS:

1) ANLISIS DE AGUAS RESIDUALES PARA SU USO EN AGRICULTURA

Tabla N° 8: Cuadro para determinación del NMP

2) DECRETO SUPREMO N° 003-2010-MINAM

Tabla N° 9: LMP para efluentes de PTAR

3) VALORES DE COLIFORMES EN LA LAGUNA TERCIARIA DEL CITRAR-UNI

Tabla N°10: Coliforme totales y fecales en el afluente y efluente de la laguna [3]

4) VALORES DE COLIFORMES EN LA LAGUNA TERCIARIA DEL CITRAR-UNI

Tabla N°11: Reducción de Coliforme totales a 9.20 ppm de O3