LABORATORIO DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA III

PRÁCTICA No. 4
DETERMINACION DE LA DISTRIBUCION DE TIEMPOS DE RESIDENCIA (DTR) EN
REACTORES
INTRODUCCIÓN
Esta práctica se aplica un pulso de trazador y se mide la respuesta de salida en los
reactores en flujo continuo. Los alumnos aprenden una técnica usada en la industria y
además ven la diferencia entre los reactores ideales y no ideales. La DTR se utiliza para
encontrar el patrón de mezclado en un reactor continuo e indica los tiempos de
residencia de un compuesto a través de un recipiente. En base a las curvas de DTR se
pueden determinar si el flujo es de tipo pistón o de mezcla completa y si en el recipiente
se encuentran zonas muertas o un mezclado deficiente. En la DTR influye el estado de
agregación del material circulante, su tendencia a agruparse y la velocidad a la que el
compuesto es mezclado en el recipiente. La DTR se puede calcular a través de una
función de respuesta a un impulso recibido, que experimentalmente es la introducción de
una cantidad conocida de un trazador al sistema. Y se considera como el área bajo la
curva de la grafica de concentración conocida de un trazador contra el tiempo. Esta curva
puede ser integrada como una curva de distribución normal recordando que el área bajo
la curva (A) es siempre la unidad. Es conocida como curva “E” y es la que ha de tenerse
en consideración para el flujo no ideal.

A  Edt  1
0

El impulso recibido puede ser un escalón en dónde hay un aumento que se mantiene
constante de la concentración del trazador (C) y también del pulso en donde una
cantidad determinada de trazador se introduce una sola vez de manera instantánea.En
este caso el área bajo la curva se define como
 
C
A  Cdt  1 , la cual dividida entre el área bajo la curva queda como
0
A  Q dt  1 ,
0

donde Q es igual al área bajo la curva de una gráfica de concentración contra tiempo. Se


puede expresar como Q   Cdt es decir el área bajo la curva es igual a la concentración
0

del trazador detectado durante un espacio diferencial de tiempo. Esto se muestra

gráficamente en la siguiente figura.

C
Inyección del
Trazador
Figura 1: Perfil del
Señal de salida
del trazador (C) pulso del trazador
introducido y la
concentración
detectada a la salida

0
t
0 t

OBJETIVO
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Encontrar la distribución de los tiempos de residencia (DTR) en un reactor continuo y

determinar el patrón de flujo en el prototipo que se utilizara durante una fermentación
continua para la práctica siguiente.

MATERIALES
2 Celdas de Acrílico (Profesor) 1 Horadador
1 Espectrofotómetro 1 Microespátula
1 Gradilla 1 Bomba Peristáltica (profesor)
2 Tubos de Ensaye (chicos) 1 Parrilla Eléctrica
2
1 Probeta de 50 mL 1 Soporte Universal
2 Vaso de precipitados de 1000 mL 2 Tubo de Vidrio
1 Canastilla para Autoclave y Válvula Papel Seda
1 Micropipeta de 100-1000L Puntas para Micropipeta (profesor)
1 Micropipeta de 10-100L Parafilm
1 Piceta con agua destilada Mangueras de látex
1 Piceta con alcohol 2 Pipetas pasteur
1 Vortex REACTIVOS
1 Matraz aforado de 25 mL Azul de Metileno
1 Palangana Agar-Agar
1 Matraz Kitazato de 1 L NaCl
1 Matraz Erlenmeyer de 2 L ALUMNOS
2 Tapones de Hule 2 Jeringas de 5 mL
1 Agitador Magnético 4 Cinturones de plástico
1 Cristalizador Tijeras
2 Nuez de sujeción Franela
2 Pinzas de Tres dedos Maskintape y Plumón con tinta Indeleble

PREPARACIÓN DE SOLUCIONES (traer cálculos de la soluciones)

(UN ALUMNO DE CADA EQUIPO SE PRESENTARA AL LABORATORIO PREVIO A LA PRACTICA )

1. Preparar 25mL de Azul de Metileno (5 mg/mL)

2. Preparar 1000 mL de Solución de Cloruro de sodio al 0.81% estéril (solución isotónica)
3. Inmovilización de Células: Mezclar el contenido de un matraz semilla de hongo (que el
profesor proporcionará) con 100 mL de solución isotónica estéril en el matraz de 250
mL. En un vaso de precipitados de 1000 mL poner a ebullición 250 mL de agua
destilada y disolver poco a poco 7.5 g de Agar, sin que se forme espuma. Dejar enfriar
hasta 50ºC en un baño a temperatura controlada y llevar el inoculo a esta misma
temperatura. Mezclar suavemente ambos en el vaso de precipitados, sin producir
burbujas. Por otro lado mantener agua destilada a 15ºC en un cristalizador que es
colocado en baño de hielo en una palangana. Llenar una pipeta Pasteur despuntada
con la mezcla y verter gotas en el recipiente con el agua fría, formando perlas de
tamaño y forma regulares, agitando el agua para evitar que las perlas se peguen.
Eliminar las perlas que floten en la superficie y recuperar las perlas por decantación o
por filtración. Lavar dos o tres veces con solución salina estéril y mantenerlas en esta
solución. Esta cantidad de biomasa inmovilizada es suficiente para los reactores
empacado fluidizado y de mezcla completa para esta práctica y la siguiente.

PRÁCTICA No. 4 DETERMINACION DE LA DISTRIBUCION DE TIEMPOS DE RESIDENCIA (DTR) EN

REACTORES
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PROCEDIMIENTO
Montar previamente el equipo de acuerdo al siguiente sistema, cuidando de revisar
conexiones y el transporte de fluido.

Inyección

Celda

Biomasa
Bomba Inmovilizada
Peristáltica

Cada equipo trabajará con un reactor continuo con el cual llevará acabo la fermentación,
utilizando un gasto de 6 y otros con 10 mL por minuto con agitación continua y
verificando este flujo con una probeta y cronometro.

Para los reactores se utilizará biomasa inmovilizada y otros con biomasa libre (sin
inoculo). Llenar el sistema con agua. Poner en funcionamiento el biorreactor cuidando
que agua a la salida este limpia para poder ajustar el espectrofotómetro a cero y a
longitud de onda de 640nm. En la alimentación se inyectarán, de manera cuidadosa, 5
mL de la solución de colorante azul de metileno, lo mas rápido posible sin causar
turbulencias y sin introducir burbujas de aire, sellar el sitio de la inyección. Se muestreará
la salida a partir de este momento, colocando a la salida una celda para
espectrofotómetro. El tiempo de muestreo será en lapsos de 1 minuto y hasta 2.5 horas o
hasta que se forme la curva mostrada en la figura 1.

Por otro lado se efectuará una curva patrón de azul de metileno efectuando las diluciones
necesarias de manera que el tubo siguiente sea una dilución a la mitad que la anterior,
determinando la concentración y la absorbancia de estas muestras a través del
espectrofotómetro. Esta determinación se hará por duplicado.

Tubo Azul Metileno H2Od [mg/m

(µL) L]
1 1000 1000
2 1000 1000
3 1000 1000
* * *
* * *
* * *
11 1000 1000
Eliminar

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PREREPORTE

Cada equipo entregará al profesor los resultados de las absorbancias del Ensayo al
finalizar la práctica.

Efectuar la regresión lineal de la curva estándar para obtener los coeficientes para la
interpolación de la absorbancia obtenida con las muestran que salen del reactor.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
a) Reportar el volumen útil, el volumen nominal y el volumen muerto del sistema de
reactores montado
b) Calcular el flujo TRH experimental y el Teórico a través de la ecuación siguiente

Volumen del Reactor(mL)

TRH    h
Gasto de Alimentancion(mL/h)
c) Graficar la concentración vs tiempo para cada TRH (absorbancia y contenido de
colorante)
d) Calcular el área bajo la curva, tiempo promedio ( t ) y varianza
e) Las curvas Ct y C
f) Porciento de recuperación de colorante respecto a la concentración de colorante
administrado
g) En ANEXOS: Mostrar en forma adecuada y entendible todos los cálculos efectuados
para las secciones a) a la f).

CUESTIONARIO
1. ¿Qué es la distribución de tiempos de residencia?
2. ¿Qué técnicas se utilizan para determinarla?
3. ¿Qué información se obtiene de la distribución?
4. ¿Para que se utiliza la DTR?
5. ¿Qué es la tasa de dilución?
6. ¿Qué entendemos por flujo pistón y flujo mezclado?
7. ¿Qué significado tiene el tiempo promedio ( t )?
8. Que es el flujo no ideal
9. ¿Cómo es una curva de DTR para reactores que tienen zonas muertas?
10.¿Cómo intervienen estos valores en ecuaciones de reacción cinética?
11.¿Qué otras formas de evaluar la DTR experimentalmente existen?
BIBLIOGRAFÍA
1) Aiba S., Humphrey A. E. y Millis N. F. (1973) Biochemical Engineering, Second Edition.
Academic Press Inc. London.
2) Segel C. (1976) Enzyme Kinetics. Edition, John Wile & Sons. NY, USA.
3) Wang D. I., Cooney C. L., Demain A. L., Dunnill P., Humphrey A. E. and Lilly M. D.
(1979) Fermentation and Enzyme Technology. John Wiley & Sons. NY. USA.
4) Levenspiel O. (2009) Ingeniería de las Reacciones Químicas, tercera edición. Limusa.
México. Pg 93, 109 y capitulo 11.

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