Prevención en la diseminación de patógenos

en Acuicultura de Agua Dulce

Christopher M. Good, DVM PhD

Director of Aquatic Veterinary Research
The Conservation Fund’s Freshwater Institute, Shepherdstown, WV,
USA 1
 Temas
1. Fundamentos de Bioseguridad
2. Reducción del Stress, incluyendo aspectos de
calidad del agua

2
Los Tres Principios de la Bioseguridad
1. Reduce el riesgo de la introducción de patógenos a
la instalación
2. Reduce el riesgo de la dispersión de patógenos por
la instalación
3. Reduce condiciones dentro de la instalación que
aumentar la propensidad a infección y
enfermedad
(i.e. reduce estrés)
estrés)

3
 Antecedentes:
Patógenos oportunistas v/s obligatorios

Obligatorios::
Obligatorios

Necesitan un huésped para multiplicarse

Oportunistas::
Oportunistas

No requieren un huésped animal para reproducirse

Se nutren de material orgánico

Se encuentran en el suelo y el agua

Puede ser parte de la flora normal del pez (ej. En la piel
o flora gastro intestinal)

4
 Antecedentes:
Oportunistas v/s obligatorios

Ejemplos:

Obligatorios

Virus ((IPNV
IPNV,, IHNV,
IHNV, VHS,
VHS, etc.)

Algunas bacterias:

Aeromonas salmonicida (furunculosis)
furunculosis)

Renibacterium salmoninarum (BKD)BKD)

Algunos protozoos:

Ichthyophthirius (‘
(‘Ich
Ich’)
Ich ’)

Myxobolus cerebralis (whirling disease)
disease)
5
 Antecedentes:
Oportunistas v/s obligatorios

Ejemplos:

Oportunistas

Algunas bacterias:

Aeromonas hydrophila (motile aeromonad septicemia)

Flavobacteria spp
spp.. (BGD
BGD,, columnaris
columnaris,, coldwater disease
disease))

Algunos protozoos:

Ichthyobodo (costia)
costia)

Chilodonella

Trichodina

Hongos

Saprolegnia spp..
spp
6
 BIOSEGURIDAD
I. Prácticas para reducir el riesgo de
Introducir Patógenos

7
Introducción de Patógenos

Posibles fuentes:

Agua

Ovas

Alimento

Animales

Personas

Vehículos

Peces
introducidos
8
Prevención de introducción de patógenos vía:
Agua

Usaragua de pozo en lo
posible

Evita a los patógenos
obligatorios, pero habrá
presencia de oportunistas

Captar el agua antes que se
contamine

Estanques de acumulación
pueden albergar peces y
atraer aves
9
Prevención de introducción de patógenos vía:
Agua

Desinfectar agua que no sea libre de patógenos
Microfiltración mecánica seguida de radiación Ultravioleta

10
Prevención de introducción de patógenos vía:
Ovas

Use ovas certificadas

Libres de Enfermedades

Desinfección externa en la
recepción

11
Prevención de introducción de patógenos vía:
Alimento

Alimento vivo

Altoriesgo – cultivado Libre de enfermedades,
nunca usarlo directamente desde el medio

Usar dietas comerciales secas de fabricanets
especializados ya que los patógenos pueden
sobrevivir a algunos procesos de fabricación.
fabricación.

12
Prevenir la introducción de patógenos vía:
Animales

Instalaciones cerradas
Prevenir la entrada de mamíferos y aves 13
Prevención de introducción de patógenos vía:
Personas

14
Prevención de introducción de patógenos vía:
Personas

15
Prevención de introducción de patógenos vía:
Personas

Restringir el acceso a un mínimo de personas

Visitas (sólo si es necesario):

Grupos pequeños, más manejables

Uso de delantales y botas desinfectables
desinfectables,, jabón
desinfectante para manos

Instruir a los visitantes a no tocar o apoyarse en las
instalaciones de cultivo

Cambiar pediluvios y desinfectar pisos después de
cada visita

Mantener un Libro de Visitas 16
Prevención de introducción de patógenos vía:
Personas

17
Prevención de introducción de patógenos vía:
Personas

18
 Prevención de introducción de patógenos
vía:
Vehículos

Estacionamiento de visitas en áreas alejadas

Evitar que camiones de transporte de peces
ingresen a las instalaciones

Transferir los peces en carros propios

Si los camiones deben entrar, deben ser
desinfectados antes de entrar

Desinfección por spray (por ej. Amonios
Cuaternarios)
19
Prevención de introducción de patógenos vía:
Vehículos

20
Prevención de introducción de patógenos vía:
otros peces
Area de Cuarentena

Edificio, área o sala separada, con sistemas de
cultivo independientes

El período de cuarentena incluye la incubación y
desarrollo de los patógenos relevantes

El agua debe estar en el rango superior óptimo
para los peces de manera de acelerar el
crecimiento de posibles patógenos
21
 BIOSEGURIDAD
II. Prácticas para reducir la
diseminación de patógenos

22
Prevenir la diseminación vía:
Control de Vectores

23
 Prevenir la diseminación vía:
Ciclos “All
“All--in, all-
all-out
out””

Particularmente
importante en sistemas
de re-
re-uso parcial o
total

Poblaciones dentro de
un sistema deben tener
inmunidades
“comparables””
“comparables

24
Prevenir la diseminación vía:
Equipamiento exclusivo

25
Prevenir la diseminación vía
Manejo cuidadoso

Vs.

26
 Prevenir la diseminación vía
Manejo cuidadoso

Desarrollar, mantener, y periódicamente re-
re-evaluar
Procedimiento a de limpieza y desinfección.

Inspeccionar y limpiar las partes de los sistemas
frecuentemente

Limpiar los pisos frecuentemente, pero

Considerar el piso como fuente de contaminación

Considerar a cada estanque como una unidad
separada, minimizar el potencial de contaminación
cruzada

Desinfectar entre distintos lotes de producción 27
Prevenir la diseminación vía
Manejo cuidadoso

28
Prevenir la diseminación vía
Manejo cuidadoso

29
 Prevenir la diseminación vía
Manejo cuidadoso

Muchos factores puede afectar el proceso de
desinfección:

Tipo de desinfectante

Concentración

Temperatura, pH

Tiempo de contacto

Presencia de materia orgánica

Número de organismos

Tipo y fase de crecimiento del organismo 30
 Ejemplo: Virkon Aqua
(potassium peroxymonosulfate
peroxymonosulfate))

Aprobado por la EPA para su uso en acuicultura

Su fórmula contiene surfactantes y ácidos
orgánicos

Amplio espectro – virtualmente todo tipo de
patógenos

Rápida acción

Trabaja bien a bajas Tº

Relativamente seguro para trabajadores

Se descompone en sales orgánicas inocuas
31
 BIOSEGURIDAD
III. Prácticas para reducir la
susceptibilidad a infecciones y
enfermedades

32
Prevenir la infección y enfermedad vía:
Extracción de mortalidad

Importante estrategia para reducir la
transmisión de enfermedades

Incluir a peces muertos y enfermos

Actúan como reservorio de patógenos

Al menos una vez al día

33
 Prevenir la infección y enfermedad vía:
Reducción del Stress
Tipos de stress:

Químico Respuesta al

Dieta inadecuada, mala calidad de Stress:
agua

Depende de la

Biológico magnitud y

patógenos, agresiones, sobredensidad
duración

Físico

Luz, ruidos, temperatura
Los estresores

Manejo son a menudo

Transporte, tratamientos, acumulativos
manipulación
34
 Prevención de Infección y Enfermedad
vía
Reducción de Estrés
Los Cinco Pasos de la Adaptación/respuesta al
stress

“Lucha o huye”

Elevación de glucosa en la sangre, problemas de
osmoregulación,, supresión inmune
osmoregulación
1. Resistencia

El pez usa reservas energéticas para adaptarse al estresor
2. Agotamiento

Gran severidad o duración del estresor

Se agotan las reservas de energía

Ya no es posible ni Respuesta ni Adaptación
35
 Prevención de Infección y Enfermedad
vía
Reducción de Estrés
Los Cinco Pasos de la Respuesta/Adptación
Respuesta/Adptación al stress

4. Enfermedad

Ya no es posible mantener la fisiología normal

Disponible para patógenos obligatorios u oportunistas

5. Mortalidad

36
Prevención de Infección y Enfermedad
vía
Reducción de Estrés

Fisiología del Estrés

Estímulo estresores resultan en altos niveles
de cortisol en la sangre

Cortisol elevado lleva a inmunosupresión:

Baja la actividad bactericida sanguínea

Lisozimas
Lisozimas,, act.
act. del complemento

Disminuye fagocitosis

Baja el recuento de células blancas

Se reduce la producción de anticuerpos (from
37
Wedemeyer,, 1996)
Wedemeyer
 Prevenir infección y enfermedad vía
Reducción del Stress

Reducirruido y
vibración:

Aislar
entre:

bombas y
tuberías

Motores y piso

Estanques y
piso 38
 Prevenir infección y enfermedad vía
Reducción del Stress

Correcto diseño de las instalaciones

Mantener los estanques separados de los
sistemas de tratamiento

Reducir la actividad alrededor de los
estanques

39
Courtesy Jim Michaels
 Prevenir infección y enfermedad vía:
Monitoreo de Calidad de Agua

Mala calidad de agua puede predisponer a
enfermedades:

DO

CO2

Amoniaco

Nitrito

Alcalinidad

pH

Monitorear calidad del agua semanal o
mensualmente 40
 Oxígeno Disuelto

Introducido al agua desde el aire (turbulencia),
fotosíntesis y aireación

Expresado como mg/L o % de saturación

Se necesita conocer la presión atm., Tº del agua y
salinidad para convertir entre una y otra unidad

41
 Oxígeno Disuelto

El O2 es pobremente soluble en agua

Raramente excede los 10-
10-12 mg/L en H2O

Para salmónidos en descanso:

5-20 L H2O/kg peso cuerpo/hora - tasa de irrigación

40
40--60/minutos – tasa de ventilación

Costo de energía: al menos 10% del O2 consumido

Tasa de difusión a través de las branquias:

Área de superficie branquial

Distancia de difusión

Presión parcial de O2 a través de las branquias

42
 Oxígeno Disuelto

Tasas de consumo de O.D.:

Aprox. 100 mg O2/kg peso cuerpo/hora (descanso)

Tan alto como 800 mg O2/kg peso cuerpo/hora
(natación activa)

43
 Oxígeno Disuelto

Consumo de O2 en el estanque:

MO2 = Q · ([O2]in – [O2]out)

La tasa de consumo de OD depende de:

Velocidad de natación

Agua, Tº,
Tº, pH, CO2

Masa corporal

Tasa de crecimiento

Tasa de alimentación

Niveles de stress
44
 Oxígeno Disuelto

Se requiere 85-
85-100% de saturación de O2 para
mantener tasas de crecimiento máximas en
salmónidos

Niveles mayores (140-
(140-150%) causan stress
oxidativo,, alta susceptibilidad a enfermarse, y
oxidativo
aumento de mortalidad

45
 Rendimiento

46
 Sobresaturación

Ocurre cuando la presión de los gases disueltos excede la
presión atmosférica

La sangre se equilibra con el exceso de presión en el agua

Enfermedad de la burbuja

Las burbujas bloquean vasos sanguíneos, llevando a
necrosis de tejido

Medir y tratar el agua de entrada para prevenir
sobresaturación

Salmón del Pacífico: <104-
<104-105%

Salmón del Atlántico: <102%
47
 CO2 Disuelto

Salmónidos producen ~1.4 g CO2 por gramo of O2

consumido

La mayor parte del CO2 difunde a través de las
branquias como gas, y reacciona con el agua:

H2O + CO2 ↔ H2CO3 ↔ H+ + HCO3- ↔ 2H+ + CO3-2

pH dependiente

Relación exponencial inversa entre la concentración
de CO2 y pH
48
 CO2 Disuelto

70
Alkalinidad
100 mg/L
60
50
40
CO2
(mg/L) 30
20
10
0
6.5 7.0 7.5 8.0 8.5

pH 49
 CO2 Disuelto

La exposición a largo plazo a CO2 elevado

Capacidad disminuida de la unión de oxígeno a la
hemaglobina (efecto Bohr
Bohr))

Aumento de la ventilación, presión arterial elevada

Tasa reducido de crecimiento

FCR más elevado

Nefrocalcinosis

Además, aumento de solubilidad de metales tóxicos a
niveles más bajo de pH en el agua

50
 CO2 Disuelto

Crecimiento significantemente reducido de salmónidos
a ≥30 mg CO2 / L

Toxicidad de CO2 afectado también por otros factores:

Etapa de vida

Bajos niveles de oxigeno disuelto

Temperatura baja

Límite máximo < 20 mg CO2 / L

Sugiere una revisión reciente 10 mg CO2 / L max

51
 Amoniaco • Nitrito • Nitrato

NH3 + H+ + OH- ↔ NH4+ + OH-

Amoniaco: producto final del catabolismo de

proteína

Unionizado: NH3 (lo más tóxico)
Unionizado:

Ionizado: NH4

Subordinado de pH y temperatura (Tabla 2.5 p. 55)

Excreta por las branquias

Tasa de excreción de nitrógeno aumenta con la tasa de
alimentación 52
 Amoniaco • Nitrito • Nitrato

BIOFILTRACIÓN

Amoniaco (NH3) O2 , HCO3-

Nitrito (NO2) O2 , HCO3-

H+ , CO2

H+ , CO2 Nitrato (NO3) 53

 Amoniaco • Nitrito • Nitrato

Toxicidad de Amoniaco:

Efectos directos en el sistema nervioso central

Daños a branquias

Interrupción osmoregulatoria

Los salmónidos excretan, por lo general, 25-
25-35g
de amoniaco por kg consumido de alimento

Recomendaciones de niveles seguros: 0.012-
0.012-
0.03 mg/L

54
 Amoniaco • Nitrito • Nitrato

Se produces picos de con el desequilibrio de bacteria /
biofiltración incompleta de amoniaco

Iones nitritos consumidos por las branquias adhieren a
la hemoglobina para producir metahemoglobina

Reducción de la capacidad de transportar oxígeno de la
sangre

“Enfermedad de sangre café”

Si la metahemaglobina no excede el 50% del total de
hemoglobina, normalmente sobreviven los peces

Reducción enzimática reducción devuelva hemoglobina
normal dentro de 24-
24-48 horas en agua libre de nitrito
55
 Amoniaco • Nitrito • Nitrato

Toxicidad de Nitrito, influenciado por el bicarbonato,
potasio, sodio, calcio y lo más importante cloruro

LC50 nitrito: 0.24–
0.24–12.20 mg/L dependiendo dela
concentración de cloruro

Células de cloruro en las branquias no distinguen el cloruro
del nitrito

La toxicidad puede también influenciarse por la
temperatura, OD

Límite recomendado: <1 mg/L

<0.1 mg/L en agua blanda

56
 Amoniaco • Nitrito • Nitrato

Toxicidad muy baja

Mortandad ocurre cuando niveles excede 1000
mg/L

Causa fallas osmoregulatorias no específicas

Máx. 1.0 mg/L aún se recomienda debido a los
efectos de nitrato en el desarrollo del émbrio

57
 Temperatura

Animales Ectotérmicos

Aumento de T = metabolismo aumentado

Afecta directamente los procesos fisiológicos de los
peces:

Velocidad de respiración

Eficiencia y asimilación del alimento

Crecimiento

Comportamiento

Reproducción

Patógenos distintos prosperan a temperaturas distintas
58
 Temperatura

Manipulación de la temperatura del agua es muy

importante durante las primeras etapas de vida del
salmón Atlántico:

Incubación de ovas a >8ºC
>8ºC pueden inducir deformidades
en el cráneo y vertebra en alevines

Aumento de temperatura asociado con el aumento de
deformidades vertebrales al 60g de tamaño

12ºC – 2%

14ºC – 13%

16ºC – 15%

18ºC – 22% Baeverfjord et al.
59
 pH

pH es una medida de la intensidad de la condición

ácidas o básica del agua

pH of 7 es neutral

6.5 – 8.5 rango recomendado

4.8 > pH > 9.2 puede dañar o matar salmónidos

Los peces producen mucosidad excesiva para
proteger contra niveles de pH sub-
sub-óptimas

pH también tiene una influencia significante en las
toxicidades de por ejemplo amoniaco, sulfuro de
hidrógeno, y metales pesados
60
 Densidad

La biomasa máxima de un flujo dado se determina

por:

Tasa metabólica de peces por ejemplo: consumo de oxígeno

Calidad de agua i.e. Oxígeno disuelto, tratamiento o dilución
de residuos

Aumento de densidad, en general

Consumo reducido de alimento

FCR reducido

Crecimiento reducido

Condición reducida de cuerpo y aleta

Aumento de riesgo de brotes clínicos de enfermedades
61
 Manejo de RAS:
Velocidad Óptimo de Nado

Velocidad óptimo de nado en tanque circulares
= (0.5 a 2.0) x (Longitud del pez)/segundo

Se reducen las velocidades en la región del centro

del tanque en forma de una “dona”:

Permite que los peces seleccionan una variedad de
velocidades de nado
 Manejo de RAS:
Velocidad Óptimo de Nado

Ventajas de una velocidad ideal de nado:

Tasas aumentadas de crecimiento y de la
síntesis de proteínas

Textura mejorada de carne

Metabolismo Optimizado

Desventajas de un aumento de velocidad de

nado

Tasa aumentada de consumo de oxígeno
63
Velocidad de Corriente y Consumo de O2

Consumo de oxígeno de peces depende de:

Tamaño del pez (P, g)

Temperatura del Agua (T, ºC)

Velocidad del corriente (C, cm/s)
−0.27 0.010⋅C
M = 1.92 ⋅ P ⋅T 0.63
⋅10

M (mg O2 por kg de pez por min)

Forsberg (1994). Aquaculture International 2, 180-
180-
196.
64
Velocidad de Corriente y Consumo de O2

Consumo de oxígeno en términos de tasa de alimento:

M a lim ento = 100 ⋅ M /(% BP / día) ⋅1440 / 1000000

Malimento (kg O2 por kg alimento)

Suponiendo (15ºC):
100 g peces alimentados
2% BP/día
1000 g peces
alimentados 1.1% BP/día
65
 Bioseguridad – Consideraciones
Finales
CONSECUENCIAS ECONÓMICOS

Perdidas directas por mortandad

Diagnósticos

Respuesta = desvío de dirección y obreros,
subutilización de una instalación de producción

Calidad reducida de sobrevivientes

Inhabilidad de reponer inventario

Mercado restringido por inventario saludable debido
a daños a reputación y mercados perdidos

Demanda por restricción de movimientos

Demanda por clausura de instalación

66