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Importancia Sintomas
Nomenclatura
CARACTERISTICAS GENERALES
Los virus son “entes submicroscopicos” de gran
simplicidad, cuyas características principales son:
– Pequeños, de 20 a 300 nm de diámetro (Isometricos)
– Poseen un sólo tipo de ácido nucléico (RNA o DNA)
– Están desprovistos de una estrutura celular
– Son metabólicamente inertes y carecen de maquinaría
para generar energía o sintetizar moléculas
– No realizan división celular (Replicación)
– Se comportan como estructuras inertes fuera de las
células vivas
– Son parasitos intracelulares obligados que utilizan el
metabolismo y reproducción del hospedante
– No puede ser cultivados en medios libres de células
vivas
Tamaño relativo de los virus, bacterias y células humanas
Scherichia coli
(1000 x 3000 nm)
Globulo rojo
Globulo Rojo
(10,000 nm diámetro)
Ribosoma
Bactariano
(25 nm)
“Todo lo relacionado con la vida microscópica nos turba terriblemente. ¿Cómo pueden ser
tan importantes unas cosas tan pequeñas?” I. Asimov
Comparación del tamaño del genoma de una
bacteria, virus y viroide.
Teoria: Genes
La otra teoría propone que los virus son el equivalente a
vagabundos genes vagabundos. Explica que algunos fragmentos de
ácido nucleico hayan sido transferidos en forma fortuita a
Eukaryotes una célula de otra especie diferente a la que pertenecen
Archaea Bacteria
dichos fragmentos, los cuales en lugar de haber sido
degradados (como ocurre generalmente), por causas
desconocidas pudieron sobrevivir y multiplicarse.
ARN
Bunyaviridae (TSWV)
Menbrana lipoproteico
S = codifica la proteína del nucleocápside
ARN
L = replicación viral y la síntesis de ARNm
tripartito
M = codifica las glucoproteinas, las cuales protegen la superficie del virus y le sirven en el reconocimiento con su hospedante
Proteína: Cubre al ácido nucleico, vienen en
paquetes o subunidades, cuyo peso
molecular es de 17.5 a 60,000 daltons.
AGCU ARN
Base nitrogenada
AGCT ADN
1. Partículas alargadas
en forma de bastones ssRNA (+)
b. Flexuosos
dsDNA (RT)
a. Sin membrana
ssDNA
dsRNA
2. Particulas Isometricas
ssRNA (+)
ssRNA (-)
b. Con membrana
ssRNA (-)
dsDNA (RT)
a. Sin membrana
3. Particulas Basiliformes
b. Con membrana
Partícula Alargada rígida: sin membrana
Hebra de Ácido nucleico
Subunidades de proteína
Partícula Alargada flexuosa: sin membrana
Hebra de Ácido nucleico
Subunidades de proteína
Partícula Isodiametrica: sin membrana
Partícula Isodiametrica: con membrana
ARN viral
GN Proteína viral
GC Proteína viral
Diagrama de TSWV
Estructura del VIH
Partícula Bacilar: sin membrana
Flexuosos
10-13 nm x 480-2000 nm
Rígidos
- Potexvirus (PVX, CasMV, PayMV )
12-20 nm x 130-300 nm - Potyvirus (PVY, BCMV, BYMV, SMV, PTV, PRSV )
- Carlavirus
- Tobamovirus (TMV, MMV) - Closterovirus (CTV, PYVV )
- Tobravirus (TRMV) - Capillovirus
- Furovirus (PMTV)
- Hordeovirus (BSMV)
Partículas Isométricas
- Maravirus
- Tombosvirus
Esféricos/poliédricos: 17 - 60 nm - Luteovirus
- Toposvirus
a. Con ARN - Orizavirus
- Comovirus
- Nepovirus
- Ilarvirus
- Bromovirus
- Alfamovirus
- Begomovirus (Geminivirus)
- Mastrevirus
b. Con ADN
- Caulimovirus
Partículas Basififormes
- Badnavirus
-Rhabdoviridae
- Bunyaviridae (Tosposvirus)
Baciliformes: 75 nm x 380 nm
Bi- o trigeminados
Nomenclatura
Nomenclatura
La mayoría de los virus fitopatógenos son reconocidos por los síntomas que
causan en la planta. Sus nombres están expresados en el idioma ingles y está
compuesto por:
Según la tabla anterior se han identificado desde el 2005 al 2009 382 nuevas
especies de virus y se ha avanzado en su clasificación en las categorías
taxonómicas hasta orden. El ICTV (http://www.ictvonline.org/virusTaxonomy.asp?version=2009)
hasta el año 2009 sólo ha logrado agrupar 22 familias en 6 ordenes, faltando
clasificar 65 familias.
La especie viral:
Para identificar una especie en los seres vivos se emplea la nomenclatura binominal de
Linneo (genero y especie). En los virus el nombre de la especie está formado por su
nombre vernacular (ejemplo: Potato Y virus).
Género:
En los virus el genero esta formado por muchas especies de virus que comparten muchas
características en común como: forma de la partícula viral, Tamaño, tipo de ácido
nucleído, peso molecular de la capside, forma de Transmisión, etc. El nombre del género
se deriva del nombre del virus tipo (virus más conocido y estudiado del grupo de
especies). Por ejemplo el género POTYVIRUS, agrupa aproximadamente 143 especies y
su nombre deriva del virus tipo: Potato Y Virus. Del nombre del hospedante (Potato) sea
tomado las letras POT, del síntoma se ha tomado la letra Y, finalmente se le adiciona la
palabra VIRUS; quedando de esta manera conformada la palabra POTYVIRUS.
Especie tipo: POTATO Y VIRUS Genero: POTYVIRUS
Familia:
En la mayoría de los casos en nombre de la Familia se forma al reemplazar la
terminación US del genero por la terminación IDAE. Por ejemplo la familia Potyviridae;
ésta familia agrupa a 170 especies, agrupados en 6 géneros, faltando agrupar tres especie
en un género.
El virus mas antiguamente estudiado es el TMV; sin embrago, tomaron varios
años en definir el nombre de la familia. El TMV es el virus tipo, por tanto el
genero al cual pertenece es TOBAMOVIRUS. En este caso el nombre de la
familia no se forma agregando la terminación IDEA al genero (Tobamoviridae),
la Familia al cual pertenece el TMV es a los VIRGAVIRIDAE que agrupa a 6
géneros con 43 especies.
Badnavirus
Se han descrito alrededor de 18 especies,
entre las que destacan las especies de
Banana streak virus (BSV) y Cocoa
Swollen Shoot (CSSV); ambas especies
tienen forma bacilar y son transmitidos
por insectos del orden Hemiptera, dsDNA (RT) Capside
Familia Pseudococcidae.
Caulimoviridae Badnavirus Cocoa Swollen Shoot Virus (CSSV)
En cultivos de banano y
plátano produce estrías
cloróticas y necróticas en
hojas, manchas cloroticas en
el pseudotallo y manchas
necroticas en los dedos del
banano.
Caulimoviridae Banana streak virus (BSV)
Badnavirus Virus Rayado del Banano)
Begomovirus
Se han descrito alrededor de 196 especies,
entre las que destacan las especies de Bean
golden mosaic virus (BGMV) y Tomato
yellow leaf curl virus (TYLCV).
El vector de estos virus son las denominadas “mosca
blanca”, siendo el mas importante Bemisia tabaci que
se encuentra presente en zonas tropicales y
subtropicales.
Geminiviridae Tomato Yellow Leaf Curl (TYLCV)
Begomovirus
Virus amarillo de la hoja de cuchara del Tomate
Babuvirus
Nanoviridae Babuvirus Banana Bunchy Top Virus (BBTV)
Virus del Arrosetamiento de los cogollos del banano
Nanoviridae Babuvirus Banana Bunchy Top Virus (BBTV)
Virus del Arrosetamiento de los cogollos del banano
Variantes o “strains”
PVYO Necrosis en papa, mosaico en tabaco
PVYC Necrosis en tallos y hojas de papa,
mosaico en tabaco
La disminución del
rendimiento se debe
especialmente a la
reducción del tamaño
de los tubérculos.
Mosaicos y deformación de
las hojas, además de un
retorcimiento de las
hojas y deformación de
frutos.
Hoja de cocona
Potyviridae Potyvirus Papayo Ringspot Virus (PRSV)
Virus de la Mancha Anillada de la Papaya
Potyviridae
Potyvirus
Papayo Ringspot Virus (PRSV)
Alphaflexiviridae
Potexvirus
Especie tipo: Potato X Virus (PXV)
Potexvirus
Potato X Virus (PXV)
ARN
Marafivirus
Maize Rayado Fino Virus (MRFV)
Virus Rayado Fino del maíz (MRFV)
Vector: Thrips
Ophioviridae
Ophiovirus
Citrus psorosis virus (CPsV)
- Flores (variegación)
- Frutos (moteado, manchas)
Síntomas
- Enrrollamiento
- Encrespamiento
- Deformación
hojas - Ampolladuras (rugosidad)
- Enación
- Epinastia
- Acanaladura
Tallos - Stem pitting
- Descortezamiento
Mosaico
Moteado
Amarillamiento
Clorosis
Las flores
Los Frutos:
“Mancha anillada”
Cambios en el color de:
Los tubérculos:
Enrollamiento
Encrespamiento
Virus Fitotoxicidad
Rugosidad
Enación
Stem pitt:
Acanaladuras:
Descortezamiento
Sano Enfermo
Variación en la expresión de síntomas
La expresión de síntomas de un determinado virus en un hospedante especifico esta
influenciado por varios factores entre los que se pueden destacar:
Síntomas
Fuente de inóculo
Material de propagación: Semilla botánica, semilla
vegetativa (tubérculos, bulbos, yemas, rizomas)
Plantas huachas (plantas espontáneas o remanentes
de la campaña anterior)
Cultivo cercanos (siembras escalonadas)
Malezas
INFECCION
Infección, replicación y traducción de una partícula viral en una
célula vegetal
Infección por:
Carburumdum
Particular viral
Plasmodesmos
Núcleo
Insectos
Nematodos
Protozoarios
Núcleo
Plasmodesmos
Toda infección viral es sistémica
Floema
Plasmodesmo
Movimiento sistémico
Punto de infección
1. Variedad de la planta
2. Tipo de virus
3. Edad de la planta al momento de la
inoculación
4. Clima (principalmente la temperatura)
FORMAS DE TRANSMISIÓN DE
LOS VIRUS
TRANSMISIÓN DE VIRUS
SEMILLA SEXUAL
INSECTOS
MECÁNICA
HONGOS
POLEN
PSEUDOHONGOS (Protistas)
Olpidium
NO Synchitrium
ARTRÓPODOS Cúscuta
ARTRÓPODOS Polymyxa
Spongospora
De los aproximadamente 700 virus que infectan plantas; más del 75% son transmitidos por el insecto vectores,
predominantemente aquellos pertenecientes a los Hemipteros; que incluyen a loa áfidos, mosca blanca, salta
hojas, salta plantas y thrips. En aquellos cultivos en los que no se propaga por partes vegetativas la única forma
de transmisión y diseminación de los virus en la naturaleza es únicamente por los insectos vectores.
TRANSMISIÓN DE
VIRUS POR INSECTOS
VECTORES
Formas de transmisión de los
insectos vectores:
No Persistente
circulativo y no propagativo
Persistente circulativo y propagativo
Semi-Persistente
Proceso de alimentación de un insecto picador
chupador: Afidos
La probosis de los afidos está cubierta por una funda (labium) que
cuando se alimenta se encoge. El Labium tiene segmentos 4
segmentos por lo que actúa a manera de un telescopio.
El haz del estilete esta formado por dos maxilas las que están unidas a
todo lo largo y forman dos canales:
• Uno de alimentación
• Uno de salivación
Transmisión No Persistente
Transmisión Semipersistente
circulativo y no propagativo
Transmisión Persistente
circulativo y propagativo
Transmisión No Persistente
Afidos Características:
• Periodo de adquisición: adquieren el virus en la
Picada de prueba
Badnavirus
Potyviridae
Los especies de virus que causan los mayores problemas en ésta
familia son:
PRSV-p
Variantes
En PRSV se ha reportado dos strains o variantes, una de es PRSV-w que afecta a todas
las cucurbitaceas, pero no infecta al papayo. La variante PRSV-p, infecta a plantas de
papayo y cucurbitaceas
Potyvirus
Cucumovirus
Virus mosaico del pepinillo (CMV)
Cucumovirus
Commelina diffusa
CMV en Plátano
tomate
Pseudococcus rigolensis
Cocoa Yellow Shoot Virus - Cacao
Pseudococcus citri
Pseudococcus lengispinus
Dymicoccus sp. Pinneapple wilt virus - piña
• Periodo de adquisición: se
necesita de un periodo de
adquisición mayor que los virus
no persistentes (>60”).
• Periodo de Inoculación: es
inmediato, no hay periodo de
incubación, lo que excluye que
el virus alcance la hemolinfa.
Genero: Babuvirus
Banana Bunchy Top Virus (BBTV) en Plátanos y Bananos
Tenuivirus
vector T. orizicolus.
Transmisión de virus por escarabajos
Son importantes, después de los picadores-
chupadores. Los escarabajos transmisores pertenecen
a las familias.
Crisomellidos: Diabroticas
Coccinellidade: Mariquitas
Curculionidade: Gorgojos (con probosis)
Meloideae
• Estos insectos se alimentan masticando la lamina foliar y regurguitan lo que
comen (el material comido con anterioridad se pone en contacto con el nuevo
tejido masticado).
• Se pensó que la transmisión se producía por simple contacto.
• No transmiten virus que son transmitidos por áfidos o por contacto.
• Algunos virus son retenidos por periodos anormalmente largos (más de una
semana) sin que el insecto tenga acceso a una planta infectada.
• Periodo de adquisición: en ocasiones se vuelve virulífero con una sola mordida,
pero se vuelve más virulífero cuando se alimente periodos más largos (3 a 4
horas). Permanece virulífero por más de 1 semana.
• Se presume que existen dos formas de transmisión:
1. Transmisión inicial por las piezas bucales contaminadas
2. Transmisión por un mecanismo circulativo desconocido (los escarabajos
no tienen saliva).
VIRUS TRANSMITIDOS POR ESCARABAJOS
Tomato spotted wilt virus (TSWV) en maní Tomato spotted wilt virus (TSWV) en tabaco
Transmisión por Acaros
Son arácnidos muy pequeños
picadores chupadores que se
alimentan del floema (tienen el
estilete similar a los áfidos).
ARN
- Epinastia
- Enanismo:
- Mosaico
- Franjeado
- Amarillamiento
2. Síntomas sistémicos:
- Manchas anulares
- Necrosis - Encarrujamiento
- Ampulladura
- Anormalidades de
crecimiento - Enrrollamiento
- Tumores
- Acanaladura, etc.
Ejemplo: de sintomas
presentado por PVX en plantas
indicadoras
Mancha Necrótica (Local) Mosaico y ampolladura (sistémico)
Ampolladura
Hoja inoculada
Anillo Necrótico
(Local)
Nicotiana vendaliana
SEROLOGIA
SEROLOGIA
SEROLOGIA
(Basado en la cubierta proteíca)
Subunidades de proteína
El anticuerpo se
pega a las
paredes del pozo
ELISA
Antigeno
(Jugo floematico) Incubar y luego eliminar la
muestra
Reconocimiento
ELISA
Sustrato enzimático
(Fosfato P-nitrofenil)
Fosfatasa alcalina
Conjugado
enzimatico
Reacción (+)
P-Nitrofenol+fostato
ELISA
INMUNODIFUSIÒN
VARIANTES DEL ELISA
MEDIANTE EL USO DE KITs
SEROLOGICOS
TECNICAS MOLECULARES
(Basado en el Acido nucleico)
Acido nucleíco
Subunidades de proteína
PCR
“Reacción en Cadena de la Polimerasa”
Componentes del PCR
ADN blanco (ADN del patógeno)
“Primer” o iniciadores (16-30
oligonucleotidos de longitud, 50% de
contenido de G-C).
ADN-polimerasa (Thermus aquaticus), Taq-
polimerasa
Mezclas de Desoxiribonucleotidos (dNTPS:
dATP, dTTP, dGTP,dCTP)
PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa
30 - 40 ciclos de 3 pasos
Paso 1: Desnaturalización
1 min. 94 °C
Paso 2: Alineamineto
45 seg. 54 °C
Paso 3: Extensión
2 min. 72 °C
Solo dNTP`s
AMPLIFICACION EXPONENCIAL
Gen deseado
3° ciclo
2° ciclo
1° ciclo 35 ciclos
ADN
1
2
2
2 Copias 2 35
4 Copias 8 Copias 16 Copias 2 = 34 billones de copias
M TSWV M
1700
1600
1016
516
APLICACIONES DEL PCR:
Se usa para detectar todo tipo de fitopatógenos (virus, viroides)
Detección de patógenos en semillas
Detección de toxinas
Residuos de pesticidas
VENTAJAS:
No existe necesidad de cultivar los organismos para su detección
La técnica es rápida y versátil (2-3 hora)
Detecta moléculas simples en mezclas complejas.
Es 80 a 100 veces mas sensible de RLFP.
DESVENTAJAS:
Para detectar virus y viroides existe un costo adicional para la
transcripción reversa del ARN a ADNc, antes de ser amplificado.
CONTROL
METODOS DE CONTROL
☛LEGESLATIVO (Cuarentenas)
☛ CULTURALES
☛ CONTROL DE VECTORES
☛ PROTECCION CRUZADA
☛ VARIEDADES RESISTENTES
CONTROL
LEGESLATIVO
EN EL PERU QUIEN EJERCE ESTE TIPO
DE CONTROL?
Consejo Directivo
Jefe Nacional
Cuarentena
OBJETIVO
☛ Uso de barreras
☛ Identificación y eliminación de los focos de infección
☛ Uso de barreras
Siembra de papayo con barreras de maíz que actúan como limpiadores de los estiletes de los vectores
Control de los insectos vectores
Uso de trampas amarillas para capturar a los insectos vectores
Insecticida Sistémico
Protección cruzada o “preinmunización”
Este método consiste en inocular una raza suave del CTV para
que ofrezca protección contra las razas severas. La protección se
realiza a nivel de plántulas en viveros protegidos con mallas
antiafidicas.
Proceso de inoculación:
Para iniciar estos trabajos se tiene que caracterizar las razas del
CTV existentes o presentes en el Perú. De estas razas se
elegirá la menos virulenta. El proceso de inoculación consiste
en:
1. Injertar porciones de la corteza joven de la planta que
contiene la raza suave hacia las plantas a proteger
contra las razas severas.