Práctica de laboratorio No. 3.

“Extracción de ADN en fresas”

Objetivos
 Extraer el material genético (ADN) de células de fresa

 Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades

quίmico-fίsicas del ADN

Material, equipo y reactivos

1. Fresas limpias
2. Agua destilada
3. Sal de mesa
4. Detergente líquido para cocina. Verificar en la etiqueta que contenga
EDTA
5. Alcohol al 70 o 90% frío. El grupo debe traer una bolsa de hielo.
6. 2 piezas de papel filtro (puede utilizar el de café)
7. Tubos de ensayo
8. Vidrio de reloj
9. Removedor de café o palillo grande de los que de usan en manualidades
10. Bolsa mediana con cierre de seguridad (Ziploc)
11. Papel toalla (mayordomo).

TODO LO RESALTADO LO DEBE TRAER EL ESTUDIANTE

Preparación de la solución amortiguadora (buffer)

1. Mida 6 mL del detergente en una probeta de 10 mL. Vierta en un beaker

de 100 mL.
2. Mida 44 mL de agua destilada. Vierta en el “beaker” de 100 mL que ya
contiene el detergente. Evite la formación de burbujas.
3. Finalmente, añada 5g de sal de mesa y el ablandador de carne. Mezcle
bien.

Procedimiento 1. Extracción de ADN en fresa

1. Eche 5 o 6 fresas, dentro de una bolsa plástica con cierre de seguridad

(ziploc). Cierre la bolsa.
2. Macere el contenido hasta obtener una consistencia bien blanda. Si
desea mejores resultados puede licuar el banano o la fresa antes de
echarlo en la bolsa.
3. Añada los 50 mL de la solución amortiguadora. Cierre bien. Evite la
formación de burbujas.
4. Con cuidado, coloque la bolsa en posición horizontal sobre papel toalla.
Asegúrese que el macerado esté cubierto con la solución amortiguadora.
Espere 5 minutos.
5. Coloque el papel filtro sobre el vaso plástico y filtre el macerado. Luego,
descarte el papel filtro con el sobrante.
6. Utilice una regla para marcar dos tubos de ensayo a una distancia de 1” y
de 2” desde abajo hacia arriba.
 7. Añada a un tubo de ensayo un volumen del filtrado hasta que llegue a la
marca de 1”.
8. Añada al mismo tubo de ensayo un volumen de alcohol etílico 70%-90%
frío hasta llegar a la marca de 2”.
9. Sin mezclar, coloque el tubo de ensayo en una gradilla o en un vaso
plástico. Espere por 5 minutos.
10. Remueva el sobrenadante (ADN) formado en la capa superior utilizando
el palillo o removedor de café. Colóquelo en un vidrio de reloj.

Práctica de laboratorio No. 4. Extracción de ADN de la saliva

1. Ponga aproximadamente una onza (25 – 30 ml) de agua clara en la boca

y una pizca de sal de mesa. ¡No la trague! Enjuáguese la boca con
fuerza moviendo el agua de una mejilla a otra unos 30 segundos.

IMPORTANTE: Es conveniente enjuagarse la boca dos veces antes de hacer

el experimento para eliminar los posibles restos de comida que puedan
interferir en el resultado. Con el movimiento del agua en la boca se desprenden
algunas células de las mejillas. Escupa el agua en un vaso de agua limpio.

2. Añada al vaso entre media y una cucharada (2,5 ml) pequeña de la

solución Buffer. Mueva la solución con una cucharilla despacio para que
no se forme espuma y deje actuar por 5 minutos. Así se descompondrán
los varios cientos de células de las mejillas existentes y se liberará el
ADN del núcleo.

3. Añada a un tubo de ensayo un volumen de la solución hasta que llegue

a la marca de 1”.

4. Añada al mismo tubo de ensayo un volumen de alcohol etílico 70%-90%

frío hasta llegar a la marca de 2°C”.

5. Sin mezclar, coloque el tubo de ensayo en una gradilla o en un vaso

plástico. Espere por 5 minutos.

6. Observe el sobrenadante.

ACTIVIDAD PREVIA

1. Interpretar los resultados e investigue aspectos relevantes ADN y

tecnologías de identificación
2. Cuál es la función del detergente
3. Cuál es la función de la sal
4. Cuál es la función del alcohol etílico
5. Por qué debe de estar frío.